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葛根芩连汤激活PPARγ上调脂联素和GLUT4表达改善脂肪胰岛素抵抗 被引量：42
1
作者 罗新新 朱水兰 +2 位作者 李冰涛 史秀明 涂珺 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第23期4641-4648,共8页
该实验研究复方葛根芩连汤体内外改善脂肪胰岛素抵抗(IR)的药效及相关分子机制。采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,葛根芩连汤给药干预3个月,检测糖尿病大鼠空腹血糖、胰岛素和糖化血清蛋白,计算胰岛素抵抗指数。... 该实验研究复方葛根芩连汤体内外改善脂肪胰岛素抵抗(IR)的药效及相关分子机制。采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,葛根芩连汤给药干预3个月,检测糖尿病大鼠空腹血糖、胰岛素和糖化血清蛋白,计算胰岛素抵抗指数。提取大鼠脂肪组织总RNA,q PCR检测糖尿病大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂联素(ADPN)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)、乙酰辅酶A羧化酶α基因(ACACA)和乙酰辅酶A羧化酶β(ACACB)基因mRNA表达水平。1μmol·L^(-1)地塞米松诱导建立稳定IR-3T3-L1脂肪细胞模型,CCK-8法检测葛根芩连汤含药血清对细胞活力的影响,采用5%,10%,15%葛根芩连汤含药血清干预24 h检测细胞培养液葡萄糖含量、游离脂肪酸(NEFA)含量和外泌脂联素含量,测定细胞内甘油三酯(TG)含量。荧光定量q PCR和Western blot分别检测IR-3T3-L1细胞PPARγ,ADPN和GLUT4 mRNA和蛋白质表达水平。结果显示葛根芩连汤给药3个月可明显降低糖尿病大鼠的空腹血糖、胰岛素和糖化血清蛋白(P<0.01),下调胰岛素抵抗指数(P<0.05),具有较好的降糖效果。葛根芩连汤可显著升高糖尿病大鼠脂肪组织PPARγ,ADPN,GLUT4,GLUT2,ACACA和ACACB基因mRNA表达水平。5%,10%,15%葛根芩连汤含药血清均可显著性上调IR-3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗量(P<0.01);降低IR-3T3-L1细胞TG含量(P<0.01);一定程度下调NEFA含量但并不显著。此外,葛根芩连汤含药血清剂量依赖上调外泌ADPN,15%含药血清上调ADPN非常显著(P<0.01);各剂量含药血清显著上GLUT4表达(P<0.01)。该研究显示葛根芩连汤激活PPARγ上调ADPN和GLUT4调节糖代谢改善脂肪IR。 展开更多
关键词 葛根芩连汤 脂肪胰岛素抵抗 3T3-L1脂肪细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 脂联素 葡萄糖转运蛋白4
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葛根调控PPARs信号通路改善脂肪细胞胰岛素抵抗的体外研究 被引量：4
2
作者 朱水兰 许文华 +1 位作者 李冰涛 涂珺 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期287-295,共9页
目的通过体外研究探讨葛根改善脂肪细胞胰岛素抵抗的关键分子机制。方法优化建立胰岛素抵抗(IR)-3T3-L1细胞模型,以5%、10%和15%葛根含药血清干预24 h后,采用ELISA法检测脂肪细胞上清液中脂联素(ADPN)含量;油红O染色法观察脂肪细胞的形... 目的通过体外研究探讨葛根改善脂肪细胞胰岛素抵抗的关键分子机制。方法优化建立胰岛素抵抗(IR)-3T3-L1细胞模型,以5%、10%和15%葛根含药血清干预24 h后,采用ELISA法检测脂肪细胞上清液中脂联素(ADPN)含量;油红O染色法观察脂肪细胞的形态变化。分子对接预测葛根化学成分与过氧化物酶体增殖物激活受体家族(PPARs)的结合活性。采用Western Blot法检测脂肪细胞PPARγ/α蛋白及其磷酸化表达水平,并采用试剂盒检测其PPARγ/α活性;以PPARγ/α特异拮抗剂GW9662/GW6471分别干预后,采用qPCR法检测PPARγ/α及其调控基因的转录水平。结果与IR模型组比较,5%、10%和15%葛根含药血清组细胞外泌ADPN含量显著增加(P<0.05,P<0.01),小脂肪细胞数量增多,胞内脂滴变小。分子对接显示葛根中多个活性成分与PPARγ和PPARα有较强结合活性,而与PPARδ结合相对较弱。与IR模型组比较,5%、10%和15%葛根含药血清能显著上调PPARγ和PPARα蛋白表达(P<0.001),下调p-PPARγ(Ser112)蛋白表达(P<0.001),而p-PPARα(Ser12)蛋白条带检测不到,提示非磷酸化活性状态PPARγ和PPARα表达上调,与检测到的PPARγ/α活性显著增强(P<0.001)相吻合。GW9662/GW6471分别拮抗后,与非拮抗对照组比较,10%葛根含药血清组细胞PPARγ及其靶基因ADPN、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达均显著下调(P<0.001);PPARα及其靶基因中链脂酰辅酶A脱氢酶(MCAD)、长链脂酰辅酶A脱氢酶(LCAD)、酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)mRNA表达均显著下调(P<0.05,P<0.001)。此外,与IR模型组比较,10%葛根含药血清组细胞的胰岛素受体(InsR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、PPARδ和诱导细胞死亡的DFF45样效应因子B(CIDEB)mRNA表达显著上调(P<0.01,P<0.001)。结论葛根可能通过激活PPARγ/α表达及活性功能,协调调控脂肪细胞糖脂代谢,改善其IR。 展开更多
关键词 葛根 脂肪胰岛素抵抗 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 过氧化物酶体增殖物激活受体Α 糖脂代谢 3T3-L1细胞
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