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miR-199b-5p对阿霉素诱导足细胞凋亡的影响及机制
1
作者 吴静漪 《山东医药》 CAS 2023年第7期25-29,共5页
目的 探讨miR-199b-5p对阿霉素诱导足细胞凋亡的影响及机制。方法 体外培养小鼠足细胞,用阿霉素构建足细胞凋亡模型。将足细胞随机分成对照组、阿霉素组、阿霉素+miR-199b-5p mimic组、阿霉素+NC mimic组、阿霉素+miR-199b-5p inhibito... 目的 探讨miR-199b-5p对阿霉素诱导足细胞凋亡的影响及机制。方法 体外培养小鼠足细胞,用阿霉素构建足细胞凋亡模型。将足细胞随机分成对照组、阿霉素组、阿霉素+miR-199b-5p mimic组、阿霉素+NC mimic组、阿霉素+miR-199b-5p inhibitor组、阿霉素+NC inhibitor组、阿霉素+miR-199b-5p mimic+Ad-脂肪细胞质膜相关蛋白(APMAP)组、阿霉素+miR-199b-5p mimic+Ad-NC组、阿霉素+miR-199b-5p inhibitor+Ad-APMAP RNAi组和阿霉素+miR-199b-5p inhibitor+Ad-NC RNAi组,分别给予miR-199b-5p mimic/inhibitor、过表达/敲低APMAP腺病毒转染,使miR-199b-5p过表达/沉默表达以及APMAP过表达/沉默表达。用实时荧光定量PCR检测细胞内miR-199b-5p及足细胞标志蛋白(Podocin)、凋亡相关基因(Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3)、APMAP mRNA表达,用Western blotting法检测细胞内Podocin、Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、APMAP及NF-κB信号通路相关蛋白(NIK、TRAF3)表达。用生物信息学分析miR-199b-5p的特异性下游靶基因;将细胞随机分为NC mimic+WT-APMAP组、miR-199b-5p+WT-APMAP组、NC mimic+MUT-APMAP组、miR-199b-5p+MUT-APMAP组,用双荧光素酶报告基因实验验证miR-199b-5p的直接靶基因。结果 与对照组比较,阿霉素组miR-199b-5p、Bax、Cleaved caspase-3、NIK相对表达量高(P均<0.05),Podocin、Bcl-2、APMAP、TRAF3相对表达量低(P均<0.05)。与阿霉素+NC mimic组比较,阿霉素+miR-199b-5p mimic组Podocin、Bcl-2、APMAP、TRAF3相对表达量低,Bax、Cleaved caspase-3、NIK相对表达量高(P均<0.05)。与阿霉素+NC inhibitor组比较,阿霉素+miR-199b-5p inhibitor组Podocin、Bcl-2、APMAP、TRAF3相对表达量高,Bax、Cleaved caspase-3、NIK相对表达量低(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实,与NC mimic+MUT-APMAP组比较,miR-199b-5p+WT-APMAP组APMAP荧光素酶活性低(P<0.05)。与阿霉素+miR-199b-5p mimic+Ad-NC组比较,阿霉素+miR-199b-5p mimic+Ad-APMAP组TRAF3相对表达量高,NIK相对表达量低(P均<0.05)。与� 展开更多
关键词 慢性肾脏病 足细胞凋亡 微小RNA-199b-5p 阿霉素 脂肪细胞质膜相关蛋白
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脂肪膜细胞相关蛋白对3T3-L1脂肪细胞糖代谢及细胞分化的影响 被引量：1
2
作者 王玮 王振苗 +2 位作者 黄兴全 姜兰叶 李秀芬 《河北医药》 CAS 2019年第16期2452-2454,2458,共4页
目的观察APMAP对脂肪细胞糖代谢和细胞分化的影响,并分析其对于糖代谢的作用机制。方法通过慢病毒干预3T3-L1脂肪细胞APMAP表达,观察对3H-葡萄糖的摄取并进行油红O染色定量分析脂肪细胞分化程度,检测培养上清中甘油和游离脂肪酸(NEFA)... 目的观察APMAP对脂肪细胞糖代谢和细胞分化的影响,并分析其对于糖代谢的作用机制。方法通过慢病毒干预3T3-L1脂肪细胞APMAP表达,观察对3H-葡萄糖的摄取并进行油红O染色定量分析脂肪细胞分化程度,检测培养上清中甘油和游离脂肪酸(NEFA)浓度以及细胞内三酰甘油(TG)的含量。脂肪细胞分化相关基因,过氧化物体增殖剂活化受体γ(PPARγ)和CAAT/增强子结合蛋白A(C/EBPα)mRNA的表达通过实时定量PCR检测。结果APMAP过表达组和沉默组葡萄糖摄取率分别为正常对照的176.8%和67.4%,同时过表达组油红O染色OD值明显高于沉默组和对照组(P<0.01)。APMAP过表达组明显促进脂肪细胞分化及PPARγ和C/EBPαmRNA表达。结论APMAP表达量直接影响葡萄糖摄入量,过表达的APMAP能促进细胞内脂质的积聚,促进细胞分化,对于脂肪细胞糖代谢有着重要调控作用。 展开更多
关键词 脂肪膜细胞相关蛋白 糖代谢 细胞分化 脂肪细胞
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过表达APMAP减轻阿霉素肾病肾小球足细胞损伤
3
作者 吴静漪 范文静 严冬华 《基础医学与临床》 2023年第12期1814-1821,共8页
目的探讨脂肪细胞膜相关蛋白质(APMAP)过表达对阿霉素(ADR)肾病肾小球足细胞损伤的影响。方法采用尾静脉注射ADR构建阿霉素肾病大鼠模型,免疫组化观察肾组织中APMAP、NF-κB p65蛋白表达情况。构建APMAP基因过表达的鼠源肾小球足细胞MP... 目的探讨脂肪细胞膜相关蛋白质(APMAP)过表达对阿霉素(ADR)肾病肾小球足细胞损伤的影响。方法采用尾静脉注射ADR构建阿霉素肾病大鼠模型,免疫组化观察肾组织中APMAP、NF-κB p65蛋白表达情况。构建APMAP基因过表达的鼠源肾小球足细胞MPC-5细胞株,并以0.5μmol/L ADR体外诱导构建足细胞损伤模型,再联合NF-κB信号通路激活剂CU-T12-9进行处理。CCK-8检测细胞增殖活性;ELISA检测乳酸脱氢酶(LDH)活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测NF-κB p65、p-NF-κB p65、TNF-α等蛋白表达。结果APMAP在阿霉素肾病大鼠肾组织中低表达,而NF-κB p65高表达(P<0.05)。APMAP过表达可提高ADR暴露下MPC-5细胞增殖活性,降低LDH活性及细胞凋亡率,下调NF-κB p65、p-NF-κB p65、TNF-α等蛋白表达(P<0.05);联合CU-T12-9处理可显著抑制APMAP过表达对ADR暴露下MPC-5细胞损伤的改善作用。结论过表达APMAP可抑制ADR诱导的肾小球足细胞损伤,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关。 展开更多
关键词 阿霉素肾病 肾小球足细胞 脂肪细胞膜相关蛋白质(APMAP) NF-ΚB信号通路
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脂肪细胞膜相关蛋白的研究进展 被引量：7
4
作者 黄婧婧 马宇航 王育璠 《上海交通大学学报（医学版）》 CSCD 北大核心 2017年第11期1547-1550,共4页
脂肪细胞膜相关蛋白(APMAP)是一种新型整合膜蛋白,在人体内多种组织器官中表达,能够促进前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化,从而维持脂肪细胞的正常生理代谢功能,并在脂肪细胞分化的过程中发挥着重要作用。目前,研究表明APMAP与人体内炎症... 脂肪细胞膜相关蛋白(APMAP)是一种新型整合膜蛋白,在人体内多种组织器官中表达,能够促进前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化,从而维持脂肪细胞的正常生理代谢功能,并在脂肪细胞分化的过程中发挥着重要作用。目前,研究表明APMAP与人体内炎症反应的发生发展密切相关,与妊娠期糖尿病等多种疾病有关。该文对APMAP的结构和功能进行总结,综述近年来关于APMAP的研究进展。 展开更多
关键词 脂肪细胞膜相关蛋白 脂肪细胞分化 结构 功能
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