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酸感受离子通道亚基1a敲减后的细胞抗酸性研究 被引量：3
1
作者 靳庆娥 马晓芸 +1 位作者 翁谢川 郑建全 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2006年第5期424-427,共4页
目的:通过酸感受离子通道(ASIC)1 a表达抑制的细胞模型,探讨在酸性条件下ASIC1 a对细胞生长增殖的影响。方法:以大鼠神经胶质瘤(C6)为模型细胞,利用RNA i技术建立ASIC1 a表达抑制的细胞模型。通过绘制细胞生长曲线、集落形成试验、MTT... 目的:通过酸感受离子通道(ASIC)1 a表达抑制的细胞模型,探讨在酸性条件下ASIC1 a对细胞生长增殖的影响。方法:以大鼠神经胶质瘤(C6)为模型细胞,利用RNA i技术建立ASIC1 a表达抑制的细胞模型。通过绘制细胞生长曲线、集落形成试验、MTT试验和乳酸脱氢酶(LDH)释放试验来观察不同pH条件下,ASIC1 a表达抑制细胞和阴性对照细胞生长增殖能力的变化。结果:RNA i技术可明显抑制C6细胞ASIC1 a蛋白的表达。在正常pH条件下,ASIC1 a表达缺失对C6细胞的生长增殖没有显著影响。但在不同酸性条件下,ASIC1 a表达抑制细胞与阴性对照细胞相比对酸的耐受性明显提高,表现为细胞损伤减轻,存活数目明显增多。结论:C6细胞中有ASIC1 a,ASIC1b,ASIC2 a,ASIC2b和ASIC3亚基的表达。抑制ASIC1 a的表达不影响正常pH条件下细胞的生长增殖,但能明显提高细胞对酸的耐受性,提示ASIC1 a可能是潜在的抗酸靶分子。 展开更多
关键词 酸感受离子通道 RNAI 酸耐受 C6 pH值
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重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠关节软骨酸敏感离子通道的影响及其保护作用 被引量：5
2
作者 袁凤来 陈飞虎 +5 位作者 李霞 黄学应 吴繁荣 张腾跃 吕元庆 李俊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期893-897,共5页
目的观察重组人内抑素(rh-End)对佐剂性关节炎大鼠关节软骨酸敏感离子通道(ASICs)表达的影响,探讨其对关节软骨的作用。方法将大鼠随机分成正常组、AA模型组、rh-End 1.25、2.5、5.0mg·kg-1组和阿司匹林50mg·kg-1阳性对照组... 目的观察重组人内抑素(rh-End)对佐剂性关节炎大鼠关节软骨酸敏感离子通道(ASICs)表达的影响,探讨其对关节软骨的作用。方法将大鼠随机分成正常组、AA模型组、rh-End 1.25、2.5、5.0mg·kg-1组和阿司匹林50mg·kg-1阳性对照组。弗氏完全佐剂(CFA)致佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)后d10,大鼠出现继发性炎症,此时皮下注射重组人内抑素,连续7d,对照组灌胃给阿司匹林;正常组与模型组给予等容量的无菌注射用水。光学显微镜观察关节病理变化,半定量RT-PCR方法检测rh-End对AA大鼠关节软骨ASICs和蛋白聚糖体mRNA的影响,Western blot方法检测rh-End对AA大鼠关节软骨ASICs蛋白的影响,免疫组织化学技术测定rh-End对AA大鼠关节软骨中的Ⅱ型胶原蛋白合成的影响。结果rh-End各剂量组能明显抑制AA大鼠关节软骨组织中的ASICs表达,并升高关节软骨基质成分Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖体mRNA表达量。结论重组人内抑素通过抑制ASICs的表达进而保护AA大鼠关节软骨。 展开更多
关键词 重组人内抑素 佐剂性关节炎 关节软骨 酸敏感离子通道
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酸敏感离子通道在PC12细胞中的表达
3
作者 孙雪 王芬 +3 位作者 胡丽芳 李君 杨亚萍 刘春风 《中国临床神经科学》 2011年第3期225-229,共5页
目的:检测酸敏感离子通道(ASICs)在PC12细胞中的表达情况。方法:采用RT-PCR、Westernblot以及单细胞膜片钳记录方法检测ASICs在培养的PC12细胞中的表达情况。结果:PC12细胞中有ASICs蛋白的表达,且ASICs的6个亚基:ASIC1a,ASIC1b,ASIC2a,A... 目的:检测酸敏感离子通道(ASICs)在PC12细胞中的表达情况。方法:采用RT-PCR、Westernblot以及单细胞膜片钳记录方法检测ASICs在培养的PC12细胞中的表达情况。结果:PC12细胞中有ASICs蛋白的表达,且ASICs的6个亚基:ASIC1a,ASIC1b,ASIC2a,ASIC2b,ASIC3,ASIC4均有表达,给予酸诱导能产生电流。结论:PC12细胞上存在ASICs电流,且能被ASICs阻断剂阿米洛利所阻断,这为研究ASICs在神经退行性疾病中的作用提供了较为理想的细胞模型。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道 PC12细胞 阿米洛利 酸中毒
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酸敏感离子通道在癫痫发病中作用的研究进展
4
作者 曹倩 陈康 +1 位作者 卢祖能 肖哲曼 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期339-343,共5页
酸敏感离子通道是非电压依赖性氢离子门控性阳离子通道，目前共发现4个基因编码的6种亚基。该通道对细胞外氢离子敏感，当pH值降低时开放。近年来，越来越多证据表明酸敏感离子通道涉及许多与组织酸化有关的生理和病理过程，包括突触传... 酸敏感离子通道是非电压依赖性氢离子门控性阳离子通道，目前共发现4个基因编码的6种亚基。该通道对细胞外氢离子敏感，当pH值降低时开放。近年来，越来越多证据表明酸敏感离子通道涉及许多与组织酸化有关的生理和病理过程，包括突触传递、炎症、缺血、疼痛和痫性发作等。因此，该离子通道是潜在的疾病干预靶点。本文围绕酸敏感离子通道的结构、分布，及其与癫痫之间关系的研究进展综述如下。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道 癫痫 结构 分布
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APETx2对感染后肠易激综合征小鼠内脏敏感性的作用及机制 被引量：1
5
作者 肖红云 李欢 +3 位作者 闫波 潘颖 田平平 袁丽萍 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第6期953-958,共6页
目的探讨酸敏感离子通道3特异性拮抗剂(APETx2)对感染后肠易激综合征(PI-IBS)小鼠内脏敏感性的调控作用及其机制。方法采用旋毛虫感染NIH小鼠建立PI-IBS模型。通过测量首次排黑便的时间和6 h内收集的粪便颗粒数评估胃肠道运输功能;腹壁... 目的探讨酸敏感离子通道3特异性拮抗剂(APETx2)对感染后肠易激综合征(PI-IBS)小鼠内脏敏感性的调控作用及其机制。方法采用旋毛虫感染NIH小鼠建立PI-IBS模型。通过测量首次排黑便的时间和6 h内收集的粪便颗粒数评估胃肠道运输功能;腹壁回撤反射(AWR)评分评估小鼠内脏敏感性;免疫组织化学法检测结肠组织中降钙素基因相关肽(CGRP)蛋白表达;通过实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、CGRP mRNA表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测脑组织中酸敏感离子通道3(ASIC3)、CGRP、瞬时受体电位香草素1(TRPV1)蛋白表达。结果与对照组比较,PI-IBS组首次排黑便时间显著降低,6 h内的粪便颗粒数,AWR评分均显著升高,结肠组织中CGRP蛋白表达显著升高,BDNF、CGRP mRNA显著升高,脑组织中CGRP、ASIC3、TRPV1的蛋白表达显著升高;与PI-IBS组比较,APETx2组首次排黑便时间显著延长,6 h内的粪便颗粒数,AWR评分均显著降低,结肠组织中CGRP蛋白表达显著降低,BDNF、CGRP mRNA表达显著降低,脑组织中CGRP、ASIC3、TRPV1的蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论APETx2可通过下调BDNF、CGRP、ASIC3、TRPV1的表达,减轻PI-IBS小鼠的内脏敏感性并调节胃肠道运动。APETx2可能为治疗IBS提供一个新的治疗选择。 展开更多
关键词 感染后肠易激综合征 APETx2 酸敏感离子通道3 降钙素基因相关肽 脑源性神经营养因子 瞬时受体电位香草素1
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芍药苷下调PC12细胞酸敏感离子通道1a的表达拮抗酸诱导的钙内流 被引量：5
6
作者 曹碧茵 孙雪 +2 位作者 杨亚萍 孔岩 刘春风 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期139-140,共2页
酸敏感离子通道（acid sensing ion channels,ASICs）是一类能被细胞外H＋激活的阳离子通道,其中的ASIC1a亚基能介导钙的内流,参与了脑缺血缺氧。
关键词 芍药苷 酸敏感离子通道1a 钙内流 阿米洛利 酸中毒 PC12细胞
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APETx2及粪菌移植对母婴分离诱导肠易激综合征大鼠内脏敏感性的影响及机制 被引量：3
7
作者 李欢 闫波 +1 位作者 王金坤 袁丽萍 《天津医药》 CAS 北大核心 2021年第12期1265-1270,共6页
目的探讨粪菌移植对母婴分离诱导的肠易激综合征(IBS)大鼠内脏敏感性的影响并观察酸敏感离子通道3(ASIC3)抑制剂APETx2对其作用及可能机制。方法取SD孕鼠10只,待其生产后取仔鼠,采用母婴分离法构建IBS模型,收集建模成功的大鼠粪便制成... 目的探讨粪菌移植对母婴分离诱导的肠易激综合征(IBS)大鼠内脏敏感性的影响并观察酸敏感离子通道3(ASIC3)抑制剂APETx2对其作用及可能机制。方法取SD孕鼠10只,待其生产后取仔鼠,采用母婴分离法构建IBS模型,收集建模成功的大鼠粪便制成粪菌液。18只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照(Con)组、母婴分离(NMS)组、NMS+APETx2处理组,每组6只。NMS组、NMS+APETx2组均予以含有抗生素的鸡尾酒(ABX-water)连续灌胃5 d,构建伪无菌鼠模型,之后给予NMS大鼠粪菌液(1.6 mL/kg)灌胃;Con组给予等体积生理盐水灌胃,每天1次,连续灌胃5 d。灌胃结束后,NMS+APETx2组给予100μg/kg APETx2连续腹腔注射7 d,每天1次。采用墨汁推进实验测定肠道推进率,结直肠扩张刺激后评估内脏敏感性。免疫组化染色法检测结肠组织中ASIC3、c-kit蛋白表达。分离3组大鼠结肠cajal间质细胞(ICC),显微镜观察细胞形态学和数量变化。结果与Con组比较,NMS组肠道推进率减慢,腹部回撤反射(AWR)评分升高,内脏敏感性增加,结肠组织ASIC3、c-kit表达上调,ICC形态改变。与NMS组相比,NMS+APETx2组肠道推进率加快,AWR评分下降,内脏敏感性降低,结肠组织ASIC3、c-kit表达下调,ICC形态趋于正常,数量明显减少。结论 IBS粪菌移植可以诱导内脏高敏感发生和降低肠道传输速率,APETx2可改善其内脏敏感性和肠道传输速率,其机制可能与APETx2下调ASIC3表达、抑制与ICC相关的c-kit信号有关。 展开更多
关键词 肠易激综合征 酸敏感离子通道 酸敏感离子通道阻滞剂 APETx2 母婴分离 内脏敏感性
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酸敏感离子通道1a介导的激活蛋白-1在肝细胞肝癌中的表达及其与临床特征的关系 被引量：4
8
作者 金成 朱茂群 +4 位作者 顾元龙 袁凤来 钱毅 高森 何友钊 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期376-380,共5页
目的分析酸敏感离子通道1a（ASIC1a）及其介导的激活蛋白-1（AP-1）在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达，以及与患者临床特征的关系。方法在转录组水平，肝癌细胞中使用表达谱芯片和生物信息学分析ASICla干扰前后下游信号通路变化。进一... 目的分析酸敏感离子通道1a（ASIC1a）及其介导的激活蛋白-1（AP-1）在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达，以及与患者临床特征的关系。方法在转录组水平，肝癌细胞中使用表达谱芯片和生物信息学分析ASICla干扰前后下游信号通路变化。进一步借助无锡市第三人民医院2010年1月至2014年12月收治的HCC患者临床病理资料，选取63例HCC组织，42例无瘤癌旁组织。应用免疫组化染色检测ASIC1a、c—Jun、c—Fos在组织中的表达。使用非参数Spearman秩相关分析三者之间的关系。结果基因芯片和生物信息分析筛选出AP-1（由c—Jun与c—Fos组成）。蛋白印迹（Weatern blot）检测ASIC1a干扰后，干扰组c-Jun和c-Fos蛋白表达水平明显低于对照组。在HCC组织中，ASIC1a、c-Jun与c—Fos阳性率高于癌旁组织，68．3％比19．0％，55．6％比11．9％，47．6％比11．7％，差异有统计学意义（P〈0．05）。相关分析显示，ASIC1a的表达与c—Jun、c-Fos的表达呈正相关（r=0．404、0．309，P〈0．05）。ASIC1a、c—Jun和c—Fos的表达与年龄、肿瘤直径大小、性别无关（P〉0．05），与肿瘤的临床分期、AFP值以及淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论ASIC1a可能通过下游基因AP-1影响肝细胞肝癌的发生及发展。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 酸敏感离子通道1α 激活蛋白-1 相关性
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ASIC1a对大鼠关节软骨细胞基质代谢及MAPK信号通路表达的影响 被引量：3
9
作者 张礼菊 胡伟 +4 位作者 唐杰 吴繁荣 葛金芳 陈飞虎 吴建贤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1165-1170,共6页
目的研究ASIC1a(acid-sensing ion channel 1a)对大鼠关节软骨细胞基质代谢及MAPK信号通路表达的影响。方法 SD大鼠关节软骨细胞分离、培养与鉴定,建立软骨细胞ASIC1a表达沉默模型。将软骨细胞分为正常组(pH7.4)、pH 6.0酸化组、以及ASI... 目的研究ASIC1a(acid-sensing ion channel 1a)对大鼠关节软骨细胞基质代谢及MAPK信号通路表达的影响。方法 SD大鼠关节软骨细胞分离、培养与鉴定,建立软骨细胞ASIC1a表达沉默模型。将软骨细胞分为正常组(pH7.4)、pH 6.0酸化组、以及ASIC1a特异性阻滞剂PcTx-1、表达沉默组和非特异性阻滞剂Amiloride处理的酸化组,对二甲基亚甲蓝分光法检测大鼠关节软骨细胞培养上清中GAG的含量,氯胺T法检测Hyp的含量,ELISA法检测MMP-2、TIMP-2的含量,Western blot法检测酸化及阻断ASIC1a后ERK1/2、p38 MAPK磷酸化蛋白的表达。结果激活ASIC1a明显抑制大鼠关节软骨细胞GAG、Hyp和TIMP-2代谢水平(P<0.01),对MMP-2的代谢水平降低抑制作用较弱(P<0.01),且ASIC1a能引起ERK1/2、p38 MAPK磷酸化水平升高,阻断ASIC1a后,磷酸化水平升高受到明显抑制(P<0.01)。结论 ASIC1a参与了酸诱导的大鼠关节软骨细胞基质代谢的失衡,其机制可能与激活ERK1/2和p38MAPK磷酸化有关。 展开更多
关键词 关节软骨细胞 基质代谢 丝裂原激活蛋白激酶 羟脯氨酸 糖胺聚糖
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酸敏感离子通道1a阻断剂对大鼠全脑缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量：2
10
作者 程慧娴 徐苗苗 +4 位作者 高玮 惠康丽 金孝岠 段满林 徐建国 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1016-1019,共4页
目的探讨酸敏感离子通道（ASIC）1a的阻断剂对大鼠全脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法成年雄性SD大鼠72只，体重250～300g，随机均分为四组：假手术组（S组）、全脑缺血-再灌注组（IR组）、溶剂组（V组）和ASIC1a特异性阻断剂组（P组... 目的探讨酸敏感离子通道（ASIC）1a的阻断剂对大鼠全脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法成年雄性SD大鼠72只，体重250～300g，随机均分为四组：假手术组（S组）、全脑缺血-再灌注组（IR组）、溶剂组（V组）和ASIC1a特异性阻断剂组（P组）。IR组、V组和P组参照四血管阻断法建立大鼠脑缺血-再灌注模型，缺血15rain后恢复灌注。V组和P组分别于再灌注即刻侧脑室注射6肛l双蒸水和狼蛛毒素（PcTX1）6μl（500ng／ml）。再灌注6h后处死大鼠取海马组织。每组取其中12只分别采用Western blotting法测定海马钙／钙调蛋白依赖型蛋白激酶II磷酸化水平（P-CaMKⅡ）和RT-PCR法检测脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体酪氨酸激酶B（TrKB）mRNA的水平。其余6只于再灌注24h后，采用HE染色法观察海马神经元形态学变化。结果与S组比较，其他三组海马P-CaMKⅡ、BDNF mRNA和TrKB mRNA的表达明显上调（P〈0.05）；与IR组比较，P组P-CaMKⅡ表达明显下调、BDNFmRNA及TrKB mRNA的表达明显上调（P〈0.05）。IR组和V组海马CA1区锥体细胞稀疏；P组海马CA1区组织破坏和细胞损伤程度减轻，细胞层次基本恢复。结论ASIC1a的阻断剂减轻大鼠全脑缺血一再灌注损伤，其机制可能与P-CaMKⅡ表达下调、BDNF及TrKB mRNA的表达上调有关。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道1a 缺血-再灌注损伤 脑
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APETx2对应激性胃黏膜损伤大鼠脊髓背根神经节酸敏感离子通道3表达的影响 被引量：2
11
作者 徐少群 屠伟峰 +4 位作者 郄文斌 温君琳 周红艳 蒋群 赵高峰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第7期1088-1091,共4页
目的:观察酸敏感离子通道3(ASIC3)特异性拮抗剂APETx2对应激性胃黏膜损伤大鼠脊髓背根神经节(DRG)神经元上ASIC3表达的影响。方法:24只雄性Wistar大鼠随机等分为对照组(NC组)、应激模型组(WIRS组)及APETx2处理组(AT组,腹腔内注射APETx2... 目的:观察酸敏感离子通道3(ASIC3)特异性拮抗剂APETx2对应激性胃黏膜损伤大鼠脊髓背根神经节(DRG)神经元上ASIC3表达的影响。方法:24只雄性Wistar大鼠随机等分为对照组(NC组)、应激模型组(WIRS组)及APETx2处理组(AT组,腹腔内注射APETx2 25μg/kg)。采用浸水束缚应激(WIRS)法复制应激性胃黏膜损伤模型,于应激6 h后留取标本测定胃液p H值;HE染色观察胃组织病理学改变;免疫组化和实时定量PCR法测定DRG神经元上ASIC3蛋白及m RNA表达。结果:与NC组比较,WIRS组胃p H值明显降低(P<0.05),胃黏膜损伤程度严重,DRG神经元上ASIC3表达明显上调(P<0.05);与WIRS组比较,AT组胃液p H值明显升高(P<0.05),胃黏膜损伤程度减轻,DRG神经元上ASIC3表达明显减少(P<0.05)。结论 :浸水束缚应激所致胃黏膜损伤大鼠DRG神经元上ASIC3被激活,与胃液p H下降、胃黏膜损伤严重程度密切相关,APETx2可特异性拮抗ASIC3表达,对应激性胃黏膜损伤可能起保护作用。 展开更多
关键词 胃黏膜 APETx2 浸水束缚应激 大鼠 脊髓背根神经节 酸敏感离子通道3
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酸感受性离子通道生物学特性及其调控 被引量：1
12
作者 翁谢川 郑建全 +1 位作者 彭双清 李锦 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期13-17,共5页
酸感受离子通道(ASICs)为H+-门控的阳离子通道,是一类新的配体门控性离子通道,属于钠通道超家族的新成员.作为近来研究的热点,ASICs具有许多重要的生物学功能,并很有可能成为抗癫痫、镇痛、提高学习记忆能力和保护神经元缺血损伤作用药... 酸感受离子通道(ASICs)为H+-门控的阳离子通道,是一类新的配体门控性离子通道,属于钠通道超家族的新成员.作为近来研究的热点,ASICs具有许多重要的生物学功能,并很有可能成为抗癫痫、镇痛、提高学习记忆能力和保护神经元缺血损伤作用药理学新靶点.近来,ASICs各个亚基已被克隆,它们在生物体内分布、表达、功能和相关调节因素的研究正受到广泛重视. 展开更多
关键词 酸感受离子通道(ASICs) 钠通道 生物学特性 功能 调控
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舒芬太尼预先给药对浸水束缚应激大鼠胃组织ASIC3表达的影响 被引量：1
13
作者 徐少群 屠伟峰 +1 位作者 温君琳 赵高峰 《中国临床研究》 CAS 2016年第8期1009-1012,共4页
目的观察舒芬太尼与APETx2预先给药对浸水束缚应激(WIRS)大鼠胃组织酸敏感离子通道3(ASIC3)表达及胃黏膜损伤的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠随机等分为对照组(C组)、应激组(W组)、舒芬太尼预先给药组(S组,腹腔内注射舒芬太尼25μg/kg)... 目的观察舒芬太尼与APETx2预先给药对浸水束缚应激(WIRS)大鼠胃组织酸敏感离子通道3(ASIC3)表达及胃黏膜损伤的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠随机等分为对照组(C组)、应激组(W组)、舒芬太尼预先给药组(S组,腹腔内注射舒芬太尼25μg/kg)及ASIC3特异性拮抗剂APETx2预先给药组(A组,腹腔内注射APETx2 25μg/kg)。采用WIRS法复制应激性胃黏膜损伤模型,于应激6 h后留取标本测定溃疡指数(UI);黄嘌呤氧化酶法测定胃组织超氧化物歧化酶(SOD)活力与硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量;免疫组化和免疫印迹法测定胃组织ASIC3蛋白表达。结果与C组比较,W组、S组及A组的UI值显著升高(P均<0.01),SOD值显著下降(P均<0.01),MDA值显著升高(P均<0.01),胃组织ASIC3蛋白表达显著上调(P均<0.01)。与W组比较,S组及A组的UI值显著下降(P均<0.01),SOD值显著升高(P均<0.01),MDA值显著下降(P均<0.01);A组的ASIC3蛋白表达显著下调(P<0.01),S组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 APETx2调控胃组织ASIC3蛋白表达,逆转氧自由基代谢失衡起胃黏膜保护作用;舒芬太尼同样通过逆转氧自由基代谢失衡起胃黏膜保护作用,但其作用机制并非通过调控ASIC3完成。 展开更多
关键词 舒芬太尼 浸水束缚应激 胃组织 特异性拮抗剂 酸敏感离子通道3 溃疡指数 超氧化物歧化酶 丙二醛
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酸性条件下神经生长因子对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a表达的影响 被引量：1
14
作者 唐杰 胡伟 +4 位作者 吴繁荣 葛金芳 潘春晓 高文凡 陈飞虎 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第10期1081-1086,共6页
目的:pH 6.0培养条件下观察神经生长因子(NGF)对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a(ASIC1a)基因和蛋白表达的调控作用及其机制。方法:体外提取培养原代大鼠膝关节软骨细胞,酸性环境下观察细胞NGF高亲和力受体TrkA的表达情况;不同浓度NG... 目的:pH 6.0培养条件下观察神经生长因子(NGF)对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a(ASIC1a)基因和蛋白表达的调控作用及其机制。方法:体外提取培养原代大鼠膝关节软骨细胞,酸性环境下观察细胞NGF高亲和力受体TrkA的表达情况;不同浓度NGF刺激观察ASIC1a的表达变化;10 ng/m L NGF刺激不同时间胞外信号调节激酶(ERK1/2)及c-fos磷酸化的时效关系,阻断ERK1/2(PD98059 30μmol/L)后观察cfos磷酸化水平和ASIC1a的表达;RT-PCR检测ASIC1a基因的表达,Western Blot检测Trk-A、ASIC1a、ERK1/2、p-c-fos蛋白的表达。结果:在酸性环境下NGF的高亲和力受体Trk-A表达比正常环境可高出3倍,ASIC1a的表达随着NGF的浓度升高而升高,10 ng/m L时趋于稳定;NGF刺激后,ERK1/2及c-fos活化增强,4 h达到最大水平;阻断了ERK1/2之后,p-c-fos和ASIC1a蛋白表达下降,差异具有显著性(P<0.01)。结论:在酸性环境下,NGF促进了大鼠关节软骨细胞ASIC1a表达的上调,并且ERK1/2信号通路的活化可能参与了这一过程。 展开更多
关键词 关节软骨细胞 酸敏感离子通道 神经生长因子 酸性环境 胞外信号调节激酶
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大鼠酸感受离子通道亚基2a表达质粒的构建及生物学特性考察 被引量：1
15
作者 戴薇薇 刘晓燕 +3 位作者 马晓芸 张树卓 张景海 郑建全 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期153-157,共5页
目的构建大鼠酸感受离子通道亚基2a(acid-sensingion channel subunit 2a,ASIC2a)的表达质粒并研究其组成的同聚体离子通道的生物学特性。方法使用分子生物学技术构建大鼠ASIC2a亚基表达质粒;通过体外转录技术,使编码ASIC2a亚基的cRNA... 目的构建大鼠酸感受离子通道亚基2a(acid-sensingion channel subunit 2a,ASIC2a)的表达质粒并研究其组成的同聚体离子通道的生物学特性。方法使用分子生物学技术构建大鼠ASIC2a亚基表达质粒;通过体外转录技术,使编码ASIC2a亚基的cRNA在爪蟾卵母细胞内表达并在膜表面形成同聚体离子通道;使用双电极电压钳技术研究ASIC2a的生物学特性。结果在注射ASIC2a亚基cRNA的爪蟾卵母细胞上,降低胞外液pH值可诱导出内向电流。H+诱发的ASIC2a内向电流具有稳态失活成分可被氨氯吡咪可逆性阻断,其pH50为5.12。提高胞外Ca2+浓度可降低H+诱发的电流幅度,其IC50为11.98 mmol.L-1。当细胞外液中无Na+时,H+基本上不能诱发出内向电流;当同时去除细胞外液中Na+和K+时,H+可诱发出外向电流。结论成功构建ASIC2a表达质粒;ASIC2a除了对Na+通透外,对K+也有一定的通透性,胞外Ca2+抑制ASIC2a孔道的开放。 展开更多
关键词 酸感受离子通道亚基2a 爪蟾卵母细胞 PH值 钙离子
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ASIC1a参与小鼠小脑普肯耶细胞发育的机制研究
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作者 尹皓 符辉 +1 位作者 肖哲曼 卢祖能 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期973-978,共6页
目的探讨ASIC1a参与小脑普肯耶细胞发育的机制。方法取C57BL／6初生小鼠，通过体外培养得到小脑普肯耶细胞。将原代小脑普肯耶细胞分为实验组和对照组，分别在细胞发育早期阶段及晚期阶段处理，其中实验组用shRNA-ASIC1a序列重组质粒慢... 目的探讨ASIC1a参与小脑普肯耶细胞发育的机制。方法取C57BL／6初生小鼠，通过体外培养得到小脑普肯耶细胞。将原代小脑普肯耶细胞分为实验组和对照组，分别在细胞发育早期阶段及晚期阶段处理，其中实验组用shRNA-ASIC1a序列重组质粒慢病毒感染以下调ASIC1a表达。对照组用shRNA-对照序列重组质粒慢病毒感染。采用免疫荧光染色观察早期阶段和晚期阶段实验组、对照组小脑普肯耶细胞的形态学结构并计数树突分支：采用Westem blotting检测小脑普肯耶细胞中钙结合蛋白D-28K、胶质纤维酸性蛋白、Zic、小清蛋白以及N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）的表达；采用RT—PCR检测小脑普肯耶细胞中内质网应激相关因子CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、蛋白激酶样内质网激酶（PERK）的表达。结果免疫荧光染色检测发现：在早期阶段和晚期阶段，实验组、对照组小脑普肯耶细胞形态学差异明显，对照组小脑普肯耶细胞的树突生长发育较实验组好；实验组小脑普肯耶细胞的二、三级树突分支数目较对照组明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。Western blotting检测发现：在早期阶段，只有普肯野细胞特异性蛋白钙结合蛋白D-28K表达在实验组中较对照组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。在早期阶段和晚期阶段，ASIC1a表达下调后，实验组NMDAR表达较对照组明显上调，差异均有统计学意义（P〈0．05）。RT—PCR检测结果发现：在早期阶段和晚期阶段，实验组内质网应激相关因子CHOP、PERK表达均较对照组明显升高，差异均有统计学意R（P〈0．05）。结论ASIC1a在小脑普肯耶细胞发育机制中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 普肯耶细胞 酸敏感离子通道1a 内质网应激 N-甲基-D-天冬氨酸受体
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囊泡膜谷氨酸转运体与ASIC3或TRPV1在大鼠结状神经节内的共存研究(英文)
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作者 李志红 蒋兴旺 +1 位作者 葛顺楠 李金莲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期621-625,共5页
为了探讨囊泡膜谷氨酸转运体(VGluTS)与酸敏感离子通道亚基3(ASIC3)或瞬时感受器电位香草酸亚型1(TRPV1)样阳性产物在大鼠迷走神经结状神经节(nodoseganglia,NG)内的分布和共存,本研究采用免疫荧光组织化学双重标记技术,在激光共聚焦显... 为了探讨囊泡膜谷氨酸转运体(VGluTS)与酸敏感离子通道亚基3(ASIC3)或瞬时感受器电位香草酸亚型1(TRPV1)样阳性产物在大鼠迷走神经结状神经节(nodoseganglia,NG)内的分布和共存,本研究采用免疫荧光组织化学双重标记技术,在激光共聚焦显微镜下观察了大鼠NG内VGluT1或VGluT2分别与ASIC3或TRPV1的共存情况。结果显示:(1)在NG内,VGluT2、ASIC3和TRPV1主要见于中、小型神经元的胞浆内,大型神经元少见,而VGluT1阳性神经元数量较少,主要见于大型或中型神经元;(2)部分VGluT2阳性神经元同时显示ASIC3或TRPVl免疫活性,其中VGluT2/ASIC3双标神经元分别占VGluT2阳性神经元的43.06%,占ASIC3阳性神经元的58.74%;而VGluT2/TRPVl双标神经元分别占VGluT2或TRPVl阳性神经元的5617%和51.12%;(3)VGluTI与ASIC3或TRPV1双标神经元的数量很少,不到1%。以上结果提示,VGluT2主要存在于NG内中、小型神经元,这些神经元通常被认为是内脏伤害性信息的初级感受神经元,因而VGluT2分别与ASIC3或TRPVl的共存表明它们可能与内脏伤害性信息的产生和传递密切相关。 展开更多
关键词 囊泡膜谷氨酸转运体 酸敏感离子通道亚基3 瞬时感受器电位香草酸亚型1 免疫荧光组织化学 结状神经节大鼠
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酸敏感离子通道1a在酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其机制研究 被引量：7
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作者 张晨晨 唐杰 +3 位作者 胡伟 葛金芳 林梅英 陈飞虎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1092-1098,共7页
目的研究酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion chan-nel 1a)在体外培养的酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其可能机制。方法Ⅱ型胶原酶消化法分离大鼠关节软骨细胞,鉴定后传代培养,观察在不同pH条件下诱导的细胞自噬情况以确定胞外... 目的研究酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion chan-nel 1a)在体外培养的酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其可能机制。方法Ⅱ型胶原酶消化法分离大鼠关节软骨细胞,鉴定后传代培养,观察在不同pH条件下诱导的细胞自噬情况以确定胞外酸化条件;将软骨细胞分为pH7.4环境下培养的正常组、pH 6.0的酸化组、以及经ASIC1a非特异性阻断剂Amiloride和特异性阻断剂PcTX1处理的酸化组,RT-PCR法检测细胞自噬基因Beclin-1 mRNA的表达,Western blot法检测自噬蛋白LC3及ERK1/2、p38MAPK磷酸化蛋白的表达,透射电子显微镜法(TEM)观察自噬小体数量的变化;通过使用ERK1/2、p38MAPK磷酸化抑制剂(PD98059、SB203580),采用RT-PCR和Western blot法观察ERK1/2及p38MAPK对酸诱导的软骨细胞自噬的影响。结果 pH 5.5和pH 6.0胞外酸化刺激均能明显升高软骨细胞自噬水平(P<0.01);与pH 7.4组比较,酸化组软骨细胞Beclin-1 mRNA及LC3、磷酸化的ERK1/2和p38MAPK蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),且自噬小体数量增多,ASIC1a阻断剂组自噬水平及ERK1/2、p38磷酸化蛋白表达水平较酸化组明显降低(P<0.01),且自噬体数量减少;与pH 6.0组相比,ERK1/2磷酸化抑制剂处理后,Beclin-1 mR-NA和LC3蛋白的表达均下调(P<0.05,P<0.01),而p38磷酸化抑制剂组自噬水平则无明显变化。结论胞外酸化环境下能诱发软骨细胞自噬,阻断ASIC1a能明显减弱酸化诱导的软骨细胞自噬,其机制可能与抑制ERK1/2磷酸化有关。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道1a 胞外酸化 自噬 关节软骨细胞 LC3 ERK1 2
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瘙痒相关离子通道研究进展 被引量：4
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作者 夏天一 李丽 陈宏翔 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期114-119,共6页
瘙痒是一种引起抓挠欲望或反射的不愉快、刺激性感觉,可由机械、温度、电、内/外源性化学刺激引起。瘙痒的形成需要致痒剂、瘙痒相关受体和离子通道的参与,但以瞬时受体电位(transient receptor potential, TRP)通道为代表的众多瘙痒离... 瘙痒是一种引起抓挠欲望或反射的不愉快、刺激性感觉,可由机械、温度、电、内/外源性化学刺激引起。瘙痒的形成需要致痒剂、瘙痒相关受体和离子通道的参与,但以瞬时受体电位(transient receptor potential, TRP)通道为代表的众多瘙痒离子通道的作用机制目前仍不清楚。因此,研究瘙痒,尤其是慢性瘙痒产生的机制,并将其应用于临床从而找到有效抑制瘙痒的方法,近年来备受关注。该文就目前已知的参与瘙痒信号产生和传递的各型离子通道及其作用机制进行总结,以期为瘙痒治疗提供新的思路和治疗靶点。 展开更多
关键词 瘙痒 离子通道 瞬时受体电位通道 酸敏感离子通道 力响应离子通道部件蛋白-2
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深刺加电针对兔膝骨关节炎软骨的影响 被引量：6
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作者 付妮妮 李学智 +4 位作者 刘菲 席小芳 任毅 杨晓光 张愉 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2016年第1期38-45,共8页
目的观察深刺加电针对兔膝骨关节炎软骨组织的影响。方法新西兰兔40只随机分为正常组(A组)10只、造模组30只,后者以Hulth-Telhag法复制兔左膝骨关节炎模型,X线评价造模情况。造模成功后随机分为模型组(B组,n=10)、深刺加电针组(C组,n=10... 目的观察深刺加电针对兔膝骨关节炎软骨组织的影响。方法新西兰兔40只随机分为正常组(A组)10只、造模组30只,后者以Hulth-Telhag法复制兔左膝骨关节炎模型,X线评价造模情况。造模成功后随机分为模型组(B组,n=10)、深刺加电针组(C组,n=10)和普通电针组(D组,n=10),造模后第6周开始对C组和D组进行治疗,共4周。治疗结束后检测关节液p H值,透射电镜下观察软骨细胞组织结构和病理学改变,检测软骨细胞凋亡指数,Western blotting检测软骨组织中酸离子敏感通道1(ASIC1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的磷酸化水平和p53蛋白表达,免疫组织化学法检测软骨组织中ASIC1分布。结果关节液中p H值从高到低依次为A组=C组>D组>B组(P<0.01);A组、C组、D组膝关节软骨组织形态较B组完整,C组凋亡率低于B组和D组(P<0.01),与A组无显著性差异(P>0.05);软骨组织中ASIC1和p53表达由低到高均为A组=C组<D组<B组(P<0.01);p38MAPK表达由低到高均为A组<C组<D组<B组(P<0.01)。结论深刺加电针可以降低软骨细胞中ASIC1蛋白表达和p38MAPK磷酸化水平,抑制凋亡因子p53表达,减少软骨细胞凋亡,减轻软骨细胞损伤。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 电针 深刺 凋亡 酸离子敏感通道1 P38丝裂原活化蛋白激酶 P53 兔
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