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大豆根际高效自生固氮菌分离鉴定与特性研究 被引量:8
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作者 王超群 刘帅 +3 位作者 王晓璐 陈慧文 吴勇军 王志刚 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期850-854,共5页
采用无氮培养基,从大豆根际土壤中分离获得4株具有固氮能力的菌株:LS01、LS04、LS05和LS06。根据菌落的形态特征及16S r DNA序列比对分析,结果表明:LS01属于Microbacterium sp.,LS04属于Streptomyces sp.,LS05属于Micromonospora sp.,L... 采用无氮培养基,从大豆根际土壤中分离获得4株具有固氮能力的菌株:LS01、LS04、LS05和LS06。根据菌落的形态特征及16S r DNA序列比对分析,结果表明:LS01属于Microbacterium sp.,LS04属于Streptomyces sp.,LS05属于Micromonospora sp.,LS06属于Sarocladium sp.,在无氮液体培养基中培养64 h生物量均达到最大且能够分泌吲哚乙酸(IAA)。利用乙炔还原法对4种菌的固氮酶活性进行测定,固氮酶活测定结果表明4种菌均具有较高的固氮酶活性。因此,Microbacterium sp.LS01,Streptomyces sp.LS04,Micromonospora sp.LS05和Sarocladium sp.LS06具有一定的固氮能力并能分泌IAA,在制备大豆生物菌肥方面具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 大豆 自生固氮菌 固氮酶活性 乙炔还原法 吲哚乙酸
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相思根瘤菌培养基优化及其固氮酶活性研究 被引量:5
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作者 尚军红 康丽华 +2 位作者 罗玉萍 江业根 马海宾 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第1期72-74,共3页
研究了 2株相思根瘤菌在 4种培养基中的生长情况 ,并在此基础上应用正交实验L9(34 )对相思根瘤菌进行优化培养基研究 ,筛选出相思根瘤菌优化培养基配方。结果表明 :MZ菌株与YM2菌株在各自优化培养基的菌体数量高达 8.2× 10 9个 mL... 研究了 2株相思根瘤菌在 4种培养基中的生长情况 ,并在此基础上应用正交实验L9(34 )对相思根瘤菌进行优化培养基研究 ,筛选出相思根瘤菌优化培养基配方。结果表明 :MZ菌株与YM2菌株在各自优化培养基的菌体数量高达 8.2× 10 9个 mL与 6 .3× 10 9个 mL ,分别为原有培养基的 3.6 4倍与 1.14倍 ;另外用乙炔还原法测得它们的最高固氮酶活性分别为 0 .96 3μg .mL- 1 .d- 1 与 0 .2 80 μg .mL- 1 .d- 1 。 展开更多
关键词 相思根瘤菌(MZ、YM2) 培养基优化 正交实验 固氮酶活性 乙炔还原法
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甘肃地区道地药材根际固氮微生物分离鉴定 被引量:6
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作者 杜文静 刘锦霞 +4 位作者 李晶 李娜 丁品 武建荣 张建军 《土壤与作物》 2017年第1期67-72,共6页
为调研甘肃中药材种植区的固氮微生物资源,从党参、黄芪和当归3种药材种植地的根际土壤中分离具有固氮酶活性的微生物,单菌株纯化并进行分子生物学鉴定,最后通过乙炔还原法检测各菌株的固氮酶活性。结果表明:这3种作物的根际土壤中固氮... 为调研甘肃中药材种植区的固氮微生物资源,从党参、黄芪和当归3种药材种植地的根际土壤中分离具有固氮酶活性的微生物,单菌株纯化并进行分子生物学鉴定,最后通过乙炔还原法检测各菌株的固氮酶活性。结果表明:这3种作物的根际土壤中固氮微生物资源丰富,共分离得到28株具有固氮酶活性的菌株,经鉴定主要为根瘤菌属、芽孢菌属、单孢菌属、无色杆菌属和粘着箭菌属等,固氮酶活性为53.5 C_2H_2nmol·(h·ml)-1~295.3 C_2H_2nmol·(h·ml)^(-1),无色杆菌属的固氮酶活性较高。此研究为下一步筛选适合中药材生长的微生物固氮菌肥的菌种提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 中药 固氮根际微生物 固氮酶活 乙炔还原法
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毛细管顶空气相色谱法高灵敏监测花生大豆根瘤生物固氮能力 被引量:1
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作者 梁美娟 赵秀兰 +7 位作者 古皓华 岳晓凤 唐晓倩 李慧 张文 李友国 张奇 李培武 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期201-207,共7页
建立了测定花生和大豆根瘤菌生物固氮能力的毛细管顶空气相色谱法,利用固氮酶还原乙炔气体为乙烯的经典方法,实现了高浓度乙炔中痕量乙烯的高灵敏分析。利用顶空进样方式,分离柱采用HP-PLOT Q毛细管色谱柱,程序升温,采用氢离子化检测器... 建立了测定花生和大豆根瘤菌生物固氮能力的毛细管顶空气相色谱法,利用固氮酶还原乙炔气体为乙烯的经典方法,实现了高浓度乙炔中痕量乙烯的高灵敏分析。利用顶空进样方式,分离柱采用HP-PLOT Q毛细管色谱柱,程序升温,采用氢离子化检测器,对乙烯标准气体进行了定量分析。乙烯检测范围宽为0.125~30000μmol/mol,相关系数为0.9996,检测限(LOD)为0.0341μmol/mol,检出限优于已有报道。该方法检测精密度好,5次检测的相对标准偏差为2.32%。乙烯样品的回收率为95.8%~110%,相对标准偏差为1.54%~3.47%。同时,对乙烯和实际样品进行检测时,与GDX-502填充柱的传统气相色谱法的测定结果一致,表明所建立的乙烯顶空气相色谱法具有较高的可靠性。此外,该方法分析时间缩短至3 min,利用自动进样方式,检测通量大,适用于花生和大豆根瘤菌中固氮能力的快速准确测定,能满足花生和大豆生物固氮研究中乙炔还原法测定乙烯的需求。 展开更多
关键词 顶空气相色谱 毛细管色谱柱 乙炔还原法 乙烯 花生 大豆
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几株弗兰克氏菌的固氮活性 被引量:4
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作者 张维 张利平 +1 位作者 杨润蕾 吕志堂 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第1期21-24,共4页
对14株不同宿主来源的Frankia纯培养菌株进行了形态观察和固氮活性测定.结果表明,14株供试菌株都具有分枝菌丝、泡囊或孢囊等形态特征,其中大花胡颓子分离菌49121有特殊的串珠状菌丝链结构;所测菌株全部具有固氮活性,其中菌株49136固氮... 对14株不同宿主来源的Frankia纯培养菌株进行了形态观察和固氮活性测定.结果表明,14株供试菌株都具有分枝菌丝、泡囊或孢囊等形态特征,其中大花胡颓子分离菌49121有特殊的串珠状菌丝链结构;所测菌株全部具有固氮活性,其中菌株49136固氮活性最高,乙炔还原活性达到78.5μmol/(mg.h);另外,菌株的固氮活性与泡囊数量有一定的正相关性. 展开更多
关键词 弗兰克氏菌 形态特征 固氮活性 乙炔还原法
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牛蒡根内生固氮菌分离、鉴定及培养条件优化的研究 被引量:4
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作者 孙科 耿凤英 +1 位作者 于秋菊 冯希勇 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第11期133-137,共5页
通过改良阿斯贝(Ashby)无氮培养基和乙炔还原法从牛蒡根内分离筛选出固氮能力较强的菌株,通过形态观察及分子生物学技术对其进行鉴定,并通过响应面法对其培养条件进行优化。结果表明,筛选出一株固氮能力较强的菌株NF-112,初步鉴定为肺... 通过改良阿斯贝(Ashby)无氮培养基和乙炔还原法从牛蒡根内分离筛选出固氮能力较强的菌株,通过形态观察及分子生物学技术对其进行鉴定,并通过响应面法对其培养条件进行优化。结果表明,筛选出一株固氮能力较强的菌株NF-112,初步鉴定为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae),其最优培养条件为初始pH值5.3、培养温度28℃、葡萄糖添加量26 g/L。在此最优培养条件下,OD600 nm值为1.76。该研究为药用植物牛蒡专用生物有机肥制备奠定理论和技术基础。 展开更多
关键词 牛蒡 固氮菌 乙炔还原法 响应面法 培养条件
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土壤菌肥固氮活性的测定 被引量:2
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作者 李如华 叶水英 于建国 《现代仪器使用与维修》 1999年第1期34-36,共3页
研究生物固氮活性,国际公认的方法是乙炔还原法。采用气相色谱测定还原产物,以确定复合菌肥料的固氮活性。
关键词 复合菌肥 乙炔还原法 气相色谱 固氮活性 土壤
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用^(15)N示踪标记法测定人工诱发黄瓜根瘤固氮酶活性
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作者 李星洪 田德祥 +2 位作者 禹仲举 王永民 陈德元 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期432-437,共6页
报道了用15N示踪标记法对人工诱发黄瓜根瘤固氮酶活性的测定结果。将长有人工诱发根瘤的黄瓜根系暴露在15N2的气体中,部分根系浸在无氮培养液内,标记48h后,质谱分析测定结瘤黄瓜根系中15N的丰度为0.431原子%15... 报道了用15N示踪标记法对人工诱发黄瓜根瘤固氮酶活性的测定结果。将长有人工诱发根瘤的黄瓜根系暴露在15N2的气体中,部分根系浸在无氮培养液内,标记48h后,质谱分析测定结瘤黄瓜根系中15N的丰度为0.431原子%15N,对照样品为0.369原子%15N,对15N示踪标记结果进行了统计学t检验,t=3.15>t0.01=2.819,表明黄瓜根系通过根瘤内细菌固氮作用所提供的氮与对照相比达99.9%极显著性水平,同时用乙炔还原法测定黄瓜离体根瘤的乙炔还原率每克鲜重为(0.299±0.076)μmol/hC2H4。 展开更多
关键词 示踪标记 黄瓜 固氮活性 根瘤 氮15
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养虾池水层生物固氮作用的原位测定
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作者 齐振雄 张曼平 +2 位作者 李德尚 赵丽英 董双林 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期374-377,共4页
侧重应用乙炔还原法进行养殖池水层生物固氮作用原位测定的具体操作步骤 ,并提出了应用医用注射器作为原位培养容器和对培养后生成的气体体积进行了校正的改进措施。列出了应用该改进方法测得的、不同对虾养殖池水层生物固氮作用速率为 ... 侧重应用乙炔还原法进行养殖池水层生物固氮作用原位测定的具体操作步骤 ,并提出了应用医用注射器作为原位培养容器和对培养后生成的气体体积进行了校正的改进措施。列出了应用该改进方法测得的、不同对虾养殖池水层生物固氮作用速率为 0 .89~ 3.90 μg (L·h) ,最后还讨论了影响测定结果的主要因素 ,包括注射器的透光度和容积大小。 展开更多
关键词 生物固氮作用 乙炔还原法 养虾池 水层
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3种水稻土中7株固氮蓝细菌的分离与特征 被引量:1
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作者 靳海洋 王慧 +5 位作者 张燕辉 胡天龙 林志斌 刘本娟 蔺兴武 谢祖彬 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期3655-3666,共12页
【背景】蓝细菌是水生和陆地生态系统中生物固氮的主要贡献者。【目的】增加对稻田土壤固氮蓝细菌的了解,获得用于进一步研究的可培养固氮蓝细菌菌株。【方法】选择3种具有不同固氮能力的水稻土,采用BG11-N培养基分离培养固氮蓝细菌菌株... 【背景】蓝细菌是水生和陆地生态系统中生物固氮的主要贡献者。【目的】增加对稻田土壤固氮蓝细菌的了解,获得用于进一步研究的可培养固氮蓝细菌菌株。【方法】选择3种具有不同固氮能力的水稻土,采用BG11-N培养基分离培养固氮蓝细菌菌株,对新分离菌株进行形态特征观察,通过基因组DNA的nifH基因扩增明确其固氮潜力,进一步采用乙炔还原法和15N2示踪法定量测定其固氮能力,通过基因组DNA的16SrRNA基因序列比对进行鉴定。【结果】在光照培养条件下,采用BG11-N培养基共分离纯化得到自养菌株7株,细胞呈圆形或椭圆形、单列、无分枝、丝状和念珠状,在固体培养基上形成团垫状菌落。新分离菌株在BG11-N培养基中生长状况良好,以基因组DNA为模板可扩增出nifH基因,乙炔还原法和15N2示踪法测定结果显示具有较高固氮能力,同时具有铁载体生成能力。结合16S rRNA基因序列比对和形态特征,7株菌被初步鉴定隶属于念珠藻科(Nostocaceae)。【结论】从水稻土中分离到在稻田生物固氮中发挥重要作用的蓝细菌(念珠藻科)菌株,可培养固氮蓝细菌菌株固氮能力较高,兼具铁载体生成能力,可作为进一步深入研究的微生物资源,具有潜在的研究应用价值。 展开更多
关键词 生物固氮 蓝细菌 念珠藻 乙炔还原法 15N2示踪法
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