脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞促进兔腱-骨愈合 被引量：4

1

作者 张骏 杨继滨 +5 位作者 金瑛 邹刚 汤井沣 葛振 杨启帆 刘毅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第13期2061-2067,共7页

背景:脱细胞羊膜支架是一种天然支架,具有良好的生物相容性,已经广泛应用于组织工程的相关领域。Scleraxis能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带细胞分化,进而促进腱-骨愈合。目的:探讨脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间... 背景:脱细胞羊膜支架是一种天然支架,具有良好的生物相容性,已经广泛应用于组织工程的相关领域。Scleraxis能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带细胞分化,进而促进腱-骨愈合。目的:探讨脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞能否促进兔腱-骨愈合。方法:①体外分离培养人羊膜间充质干细胞,经过传代培养后观察细胞的形态;②体外构建Scleraxis慢病毒然后以最适感染复数转染第3代人羊膜间充质干细胞,q-PCR检测其转染效率;③用酶消化法制备脱细胞羊膜支架,然后体外将转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞接种到脱细胞羊膜支架上面,鬼笔环肽染色观察细胞在支架上的生长情况;④将脱细胞羊膜支架复合转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞包裹新西兰大白兔跟腱,然后移植到骨隧道内,观察其对腱-骨愈合的影响。结果与结论:①第3代人羊膜间充质干细胞呈贴壁生长,细胞生长状态良好;②Scleraxis慢病毒转染后96 h表达稳定的绿色荧光,Slclerxis的m RNA表达水平明显提高,说明转染成功;③脱细胞羊膜支架的上皮细胞基本消失,证明脱细胞比较彻底,同时其基底层完整保留,细胞外基质成分仍然存在;④通过鬼笔环肽染色发现细胞在脱细胞羊膜支架上生长良好,增殖未受到影响;⑤体内实验结果提示:人脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞具有促进腱-骨愈合的作用。 展开更多

关键词 羊膜间充质干细胞 脱细胞羊膜 脱细胞羊膜支架 腱-骨愈合 SCLERAXIS 组织工程

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天然生物材料促进创面修复的研究进展 被引量：1

2

作者 高仪轩 王凌峰 +5 位作者 巴特 邹晓防 曹胜军 李俊亮 李芳 周彪 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期481-486,共6页

急慢性创面严重威胁患者的生命健康和生活质量,因此创面修复是近年来国内外学者研究的热点问题。随着材料学与组织工程的发展,越来越多由天然成分制备的生物材料被用于创面修复的基础研究和临床治疗,此类材料可作为创面组织再生的模板,... 急慢性创面严重威胁患者的生命健康和生活质量,因此创面修复是近年来国内外学者研究的热点问题。随着材料学与组织工程的发展,越来越多由天然成分制备的生物材料被用于创面修复的基础研究和临床治疗,此类材料可作为创面组织再生的模板,诱导自体细胞黏附、迁移,促进细胞外基质沉积,具有广阔的临床应用前景。该文对创面修复领域中目前研究热门的天然生物材料的特点及其应用进展作一综述,旨在为新型创面敷料及组织工程皮肤研发提供思路。 展开更多

关键词 生物相容性材料 纤维素 壳聚糖 丝素蛋白 创面修复 脱细胞真皮基质 脱细胞羊膜

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人脱细胞羊膜移植物用于兔膀胱切除修复的研究 被引量：5

3

作者 王振显 庞国勋 +2 位作者 宋永周 陈康宁 蔡文清 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第12期1913-1915,共3页

目的:探讨人脱细胞羊膜(HAM)移植物用于兔膀胱重建的效果。方法:用物理和酶消化方法制备人脱细胞羊膜,将12只兔行半个膀胱切除后用人脱细胞羊膜移植物进行修补,另外6只兔行半个膀胱切除后单纯缝合作为对照。分别于术后2、4、8周测定膀... 目的:探讨人脱细胞羊膜(HAM)移植物用于兔膀胱重建的效果。方法:用物理和酶消化方法制备人脱细胞羊膜,将12只兔行半个膀胱切除后用人脱细胞羊膜移植物进行修补,另外6只兔行半个膀胱切除后单纯缝合作为对照。分别于术后2、4、8周测定膀胱容量并取膀胱进行组织学观察。结果:应用人脱细胞羊膜行兔膀胱重建术后,实验组与对照组2、4、8周膀胱最大容量(Volmax)比较差异有显著性(P<0.05)。与术前相比,实验组和对照组膀胱容量均缩小,差异有显著性(P<0.05和P<0.01)。组织学观察,2周时人脱细胞羊膜即已吸收降解,膀胱移行细胞和平滑肌细胞开始形成,炎性反应明显;4、8周后膀胱的三层结构明显,炎性反应轻微,接近正常兔膀胱。而对照组仅2周时有轻微炎性反应,4、8周炎性反应消失。膀胱三层结构均正常。实验组大多数重建膀胱均有结石形成(8/11),对照组仅1例结石形成(1/6)。结论:人脱细胞羊膜作为膀胱移植物进行膀胱修补吸收降解迅速,移行细胞和膀胱平滑肌细胞可在移植物支架上再生,可以用做组织工程膀胱的支架材料进一步研究。 展开更多

关键词 膀胱 移植 脱细胞羊膜 生物医学工程

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脱细胞羊膜与小肠黏膜下层对大鼠皮肤缺损修复中血管形成的作用 被引量：1

4

作者 霍艳丽 马洁华 +4 位作者 李志鹏 孙琳 王志祥 张力 张辉 《河北北方学院学报（医学版）》 2010年第4期23-26,共4页

目的:观察脱细胞羊膜(HAM)与小肠黏膜下层(SIS)促进大鼠皮肤缺损修复过程中血管形成的作用。方法:SD大鼠24只,在两侧背部各做1个直径为1.8cm圆形全层皮肤缺损。创面随机分为A组、B组和C组。A组HAM覆盖,B组SIS覆盖,C组纱布覆盖。在2周时... 目的:观察脱细胞羊膜(HAM)与小肠黏膜下层(SIS)促进大鼠皮肤缺损修复过程中血管形成的作用。方法:SD大鼠24只,在两侧背部各做1个直径为1.8cm圆形全层皮肤缺损。创面随机分为A组、B组和C组。A组HAM覆盖,B组SIS覆盖,C组纱布覆盖。在2周时处死动物取材,HE染色观察皮肤缺损修复情况。免疫组织化学染色检测VEGF,RT-PCR检测VEGF mRNA的表达。结果:A组、B组愈合较好。C组愈合较差。免疫组织化学染色显示,A、B组VEGF阳性细胞显著多于C组,其中A组最多;RT-PCR结果显示,A、B组比C组表达更多的VEGF mRNA,其中A组最多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HAM和SIS均能上调皮肤创面组织中VEGF mRNA的表达、增加VEGF的分泌,其中HAM具有更强的促进皮肤缺损修复过程中血管形成作用。 展开更多

关键词 小肠 肠黏膜 脱细胞羊膜 血管内皮生长因子A 皮肤 免疫组织化学

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脱细胞羊膜的制备及其生物相容性研究 被引量：35

5

作者 罗静聪 李秀群 +1 位作者 杨志明 邓力 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2004年第2期108-111,共4页

目的　制备脱细胞人羊膜 (HAAM) ,检测其细胞相容性和组织相容性 ,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。　方法　新鲜人羊膜经漂洗后戊二醛交联 ,0 .5 % SDS震摇 2 4小时 ,胰蛋白酶消化 4小时 ,充分漂洗 ,冷冻干燥 ,分装 ,环氧乙烷消... 目的　制备脱细胞人羊膜 (HAAM) ,检测其细胞相容性和组织相容性 ,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。　方法　新鲜人羊膜经漂洗后戊二醛交联 ,0 .5 % SDS震摇 2 4小时 ,胰蛋白酶消化 4小时 ,充分漂洗 ,冷冻干燥 ,分装 ,环氧乙烷消毒备用。倒置相差显微镜和扫描电镜观察表面结构 ,测量孔径 ,并作 HE、Mallory染色。体外培养人成纤维细胞并复合于 HAAM,倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞的黏附、生长 ,四甲基偶氮唑盐 (MTT)法测定 HAAM浸提液对培养的人成纤维细胞的细胞毒性。将 HAAM植入 SD大鼠背部皮下 ,观察其组织相容性。　结果　 HAAM的一面为网状结构 ,孔径为 10～ 80 nm,另一面为致密纤维结构。HE、Mallory染色表明材料无细胞残留 ,均为胶原组成。成纤维细胞能在 HAAM上黏附、增殖。 MTT示材料细胞毒性为 0或 1级 ,动物埋置实验无异常反应。　结论　应用去垢剂 -酶消化法处理新鲜人羊膜 ,能有效去除组织中的细胞和可溶性成分 ,可进一步降低其免疫原性 ,保留基质及网状结构 ,有良好的细胞相容性和组织相容性 ,可作为组织缺损的修复材料及组织工程的膜支架材料。 展开更多

关键词 脱细胞羊膜 制备 生物相容性 检测 细胞相容性 组织相容性

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人脱细胞羊膜复合脂肪源性干细胞修复大鼠全层皮肤缺损的实验研究 被引量：17

6

作者 鞠晓军 潘锋 +3 位作者 柏树令 田晓红 佟浩 王军 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期143-149,共7页

目的人脱细胞羊膜(human acellular amniotic membrane,HAAM)含胶原、糖蛋白、蛋白多糖、整合素和板层体等多种成分,这些成分能为细胞增殖、分化提供丰富营养。研究HAAM与脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的生物相容性... 目的人脱细胞羊膜(human acellular amniotic membrane,HAAM)含胶原、糖蛋白、蛋白多糖、整合素和板层体等多种成分,这些成分能为细胞增殖、分化提供丰富营养。研究HAAM与脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的生物相容性,探讨HAAM复合ADSCs构建真皮替代物修复全层皮肤缺损的可能性。方法取健康4月龄SD大鼠30只,雌雄不限,体重250～300g,于腹股沟处获取脂肪行ADSCs体外分离、培养和传代;取第3代细胞行HE染色及CD44、CD49d、CD34免疫细胞化学染色鉴定。应用物理和酶消化法处理自愿捐赠的人羊膜获得HAAM,行HE染色观察细胞是否脱除干净,扫描电镜观察HAAM结构特征。将第3代ADSCs以2×105个/cm2密度接种于HAAM上皮面,体外共培养1～5d后分别行扫描电镜和MTT检测,不加材料组设为对照组。将大鼠随机分为3组,每组10只,建立背部直径为2cm的全层皮肤缺损模型。A组创面植入复合ADSCs的HAAM,B组植入单纯HAAM,C组常规包扎。术后行大体观察,于术后1、2、4周计算创面愈合率,并取创面皮肤行HE染色和细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)免疫组织化学染色观察。结果HE染色示第3代ADSCs呈梭形,胞核为椭圆形,位于细胞中央;免疫细胞化学染色示第3代ADSCs表达CD44和CD49d,不表达CD34。HAAM行HE染色未见细胞残留;扫描电镜下见HAAM两面具有不同的三维结构,上皮面为较致密的网状纤维;基质面为较稀疏的胶原纤维,未见纤维发生融合、断裂和降解。ADSCs-HAAM复合培养3d后扫描电镜下可见细胞生长状态良好,胞体肥大呈梭形隆起,胞膜外绒毛致密略有弯曲,胞体下方形成丰富的伪足牢固黏附于HAAM上;培养1～5d,MTT检测示实验组和对照组吸光度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。移植术后1、2、4周,A组创面愈合率均高于B、C组,B组高于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色示A组创面愈合速度快于B、C组;A组CK19表达亦明 展开更多

关键词 组织工程皮肤 人脱细胞羊膜 脂肪源性干细胞 皮肤缺损 创面愈合 大鼠

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成骨细胞Cbfa1和Osterix基因在体外构建组织工程骨膜中的表达 被引量：7

7

作者 祁洁 杨志明 罗静聪 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期666-669,共4页

目的体外构建组织工程骨膜,研究生物衍生羊膜(humanacellularamnioticmembrane,HAAM)对成骨细胞分化的影响。方法采用人胚骨膜来源的成骨细胞与HAAM体外复合培养构建组织工程骨膜(n=60)。于培养后2、4、6、8和10d,分别提取总RNA,经过逆... 目的体外构建组织工程骨膜,研究生物衍生羊膜(humanacellularamnioticmembrane,HAAM)对成骨细胞分化的影响。方法采用人胚骨膜来源的成骨细胞与HAAM体外复合培养构建组织工程骨膜(n=60)。于培养后2、4、6、8和10d,分别提取总RNA,经过逆转录成cDNA,行实时定量PCR,分别扩增成骨细胞特异转录因子(Cbfa1)和成骨细胞特异基因(Osterix),读取扩增循环数(cyclethreshold,Ct)。以单纯培养的成骨细胞作为对照组(n=20)。结果实验组Cbfa1表达以培养后2d和10d最高,且培养后2d与4、6、8d比较,以及培养后10d与4、8d比较,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组Osterix表达随培养时间延长逐渐升高,培养后8d达最高,与其余各时间点比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组Cbfa1和Osterix表达均随培养时间延长逐渐降低。组间各时间点两基因表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论成骨细胞与HAAM结合后,Cbfa1和Osterix可持续正常表达。HAAM作为支架材料,可诱导并促进成骨细胞分化。成骨细胞与HAAM构建的组织工程骨膜在分子水平已具有产生骨组织的基础。 展开更多

关键词 组织工程骨膜 成骨细胞 生物衍生羊膜 基因表达

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脱细胞羊膜制备及生物学评价 被引量：5

8

作者 肖光礼 聂卫 +2 位作者 高萍 祝君梅 种影影 《临床医学工程》 2009年第1期1-4,7,共5页

目的:制备脱细胞羊膜,经过干燥、辐照灭菌,生物学试验,评价脱细胞羊膜作为眼表损伤修复材料的安全性,为建立产业化的行业标准提供依据。方法:在洁净无菌环境下新鲜羊膜经冲洗处理后,胰蛋白酶酶解,细胞刮子去除细胞,干燥、辐照灭菌,根据G... 目的:制备脱细胞羊膜,经过干燥、辐照灭菌,生物学试验,评价脱细胞羊膜作为眼表损伤修复材料的安全性,为建立产业化的行业标准提供依据。方法:在洁净无菌环境下新鲜羊膜经冲洗处理后,胰蛋白酶酶解,细胞刮子去除细胞,干燥、辐照灭菌,根据GB/T16886-ISO10993系列标准方法进行生物学评价试验。结果:制备的脱细胞羊膜为白色半透明膜,HE染色,光学显微镜观查无上皮细胞残留,生物学检测结果无菌、细菌内毒素、细胞毒性、皮肤刺激、眼刺激反应、皮下植入试验,符合三类医疗器械评价标准。结论:在洁净无菌环境下制备的脱细胞羊膜,作为眼表损伤修复材料是安全性的,可根据该标准方法对其进行质量控制,实现产业化。 展开更多

关键词 脱细胞羊膜 制备 生物学评价

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两种羊膜脱细胞基质制备方法的比较 被引量：4

9

作者 雷宁静 胡炜 +3 位作者 王成春 朱根明 杨琳琳 关方霞 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第4期572-575,共4页

目的:探究制备羊膜脱细胞基质的方法。方法:取新鲜羊膜标本,分别采用TritonX-100(Triton组)预处理(恒温36h)和甘油预处理(4℃,24h×3次),再经胰蛋白酶、EDTA酶消化(分别用时4h和10h),制备羊膜脱细胞基质。经HE染色和扫描电镜观察2... 目的:探究制备羊膜脱细胞基质的方法。方法:取新鲜羊膜标本,分别采用TritonX-100(Triton组)预处理(恒温36h)和甘油预处理(4℃,24h×3次),再经胰蛋白酶、EDTA酶消化(分别用时4h和10h),制备羊膜脱细胞基质。经HE染色和扫描电镜观察2组羊膜脱细胞基质残留细胞数和组织结构,并观察接种的第3代人脐带间质干细胞在2种羊膜脱细胞基质上的黏附、生长状况。结果:上述2种方法制备的羊膜脱细胞基质均为白色、半透明膜状物,无细胞及其他组织残留。Triton组羊膜脱细胞基质结构均匀平整,操作时间短。甘油组样本表面凹凸不平,看不到细胞形态。脐带间质干细胞在2种羊膜脱细胞基质表面黏附、增殖状况均良好,Triton组细胞增殖状况总体优于甘油组(P<0.05)。结论:TritonX-100预处理并酶消化法是制备羊膜脱细胞基质较好的方法。 展开更多

关键词 羊膜脱细胞基质 脐带间质干细胞 生物相容性

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脱细胞人羊膜支架材料对羊膜源性干细胞增殖作用的影响

10

作者 渠亚超 殷继明 +6 位作者 任锋 樱川宣男 加茂功 鲍旭丽 陈德喜 李宁 朴正福 《西部医学》 2022年第5期639-643,共5页

目的研究脱细胞人羊膜支架材料的制备及其对羊膜源性干细胞增殖作用的影响。方法利用38~40周孕妇剖宫产术后的羊膜,洗净后用物理及酶消化的方法清除羊膜细胞成分,得到脱细胞人羊膜支架材料,并制备了不同浓度的包被培养皿。剥离剖宫产后... 目的研究脱细胞人羊膜支架材料的制备及其对羊膜源性干细胞增殖作用的影响。方法利用38~40周孕妇剖宫产术后的羊膜,洗净后用物理及酶消化的方法清除羊膜细胞成分,得到脱细胞人羊膜支架材料,并制备了不同浓度的包被培养皿。剥离剖宫产后的羊膜利用流式细胞分选技术从中分离干细胞,并在包被培养皿上探讨细胞增殖活性,与其他生物材料包被培养皿做比较。结果羊膜源性干细胞在脱细胞人羊膜支架材料的包被培养皿上增殖速度明显增强,且与包被浓度明显相关。与常用的支架材料相比其对干细胞增殖效果更强,差异显著。结论脱细胞人羊膜支架材料有望成为干细胞研究与再生医疗领域中的新型生物材料。 展开更多

关键词 羊膜 脱细胞人羊膜支架 羊膜源性干细胞 生物材料 再生医学

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组织工程骨膜技术及其在治疗骨缺损中的应用 被引量：3

11

作者 肖正俊 阿良 +2 位作者 李洪秋 邓纯博 沈晓桐 《沈阳医学院学报》 2018年第1期85-87,92,共4页

目前,外伤、感染、肿瘤等疾病所导致的骨缺损的治疗仍是临床上急需解决的问题。传统自体骨移植是治疗局部骨缺损的金标准,但存在供骨区并发症及数量有限等缺点。而异体骨移植则存在排异和传染疾病等缺点。因此研究者利用组织工程技术,... 目前,外伤、感染、肿瘤等疾病所导致的骨缺损的治疗仍是临床上急需解决的问题。传统自体骨移植是治疗局部骨缺损的金标准,但存在供骨区并发症及数量有限等缺点。而异体骨移植则存在排异和传染疾病等缺点。因此研究者利用组织工程技术,从结构和功能上模拟天然骨膜,从而修复骨缺损。本文对组织工程骨膜技术及其在治疗骨缺损中的应用进展进行综述。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 人脱细胞羊膜 组织工程骨膜 骨缺损

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兔包皮来源的上皮细胞与人来源脱细胞羊膜基质(HAAM)组织工程共同培养细胞层片的体外研究 被引量：3

12

作者 谢雪锋 陈刚 +1 位作者 吴复跃 侯剑刚 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期399-403,共5页

目的探讨兔包皮来源的上皮细胞与人来源脱细胞羊膜基质(human acellular amniotic membrane matrix,HAAM)组织工程共同培养细胞层片的效果。方法将兔包皮来源的上皮细胞接种于实验组(脱细胞羊膜基质)和对照组(未脱细胞的羊膜上基质)上,... 目的探讨兔包皮来源的上皮细胞与人来源脱细胞羊膜基质(human acellular amniotic membrane matrix,HAAM)组织工程共同培养细胞层片的效果。方法将兔包皮来源的上皮细胞接种于实验组(脱细胞羊膜基质)和对照组(未脱细胞的羊膜上基质)上,待细胞在两种羊膜基质上生长至铺满表面,用活细胞示踪剂标记细胞,然后通过组织学观察上皮细胞在两种羊膜基质上的黏附及生长情况。结果包皮来源的上皮细胞在两组羊膜基质上均能增殖生长,细胞呈单层生长,活细胞示踪剂显示细胞生长良好,并具有活细胞功能。结论包皮来源的上皮细胞是良好的实验室组织工程化的种子细胞,脱细胞羊膜基质是良好的组织工程化尿道支架材料,该方法可成功培养上皮细胞层片,有望用于尿道重建。 展开更多

关键词 组织工程 包皮细胞 人来源脱细胞羊膜基质(HAAM) 共同培养 细胞层片

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人脱细胞羊膜与家兔骨髓间充质干细胞构建组织工程骨膜的体外实验研究 被引量：2

13

作者 肖正俊 阿良 +1 位作者 李洪秋 邓纯博 《实用手外科杂志》 2019年第3期321-325,共5页

目的本项目拟构建生物学活性与人体骨膜相似的组织工程骨膜,即骨髓间充质干细胞(BMSCs)和取健康足月孕妇羊膜制备人脱细胞羊膜(HAAM)复合而成,体外观察组织工程骨膜的生物活性,并检测其相容性,为体内修复大段骨缺损奠定基础。方法通过... 目的本项目拟构建生物学活性与人体骨膜相似的组织工程骨膜,即骨髓间充质干细胞(BMSCs)和取健康足月孕妇羊膜制备人脱细胞羊膜(HAAM)复合而成,体外观察组织工程骨膜的生物活性,并检测其相容性,为体内修复大段骨缺损奠定基础。方法通过人脱细胞羊膜与家兔骨髓间充质干细胞构建组织工程骨膜的体外实验研究。在HE染色、扫描电镜(SEM)下观察人脱细胞羊膜的结构,MTT描绘出骨髓间充质干细胞在人脱细胞羊膜上的生长情况,钙结节染色检测(茜素红染色、Von kossa染色)、 ALP(碱性磷酸酶)的检测说明复合而成组织工程骨膜可以产生成骨细胞。结果⑴通过物理和化学等方法处理人脱细胞羊膜,其表面无细胞残留,没有破坏其结构和成分,纤维组织呈网状交错分布的三维空间结构;⑵通过对骨髓间充质干细胞在人脱细胞羊膜上的生长曲线检测,说明实验组增殖细胞量比对照组多;⑶家兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)经过成骨诱导液诱导形成成骨细胞,碱性磷酸酶(ALP)和钙素结节是成骨细胞的标志,可以检测出ALP和钙素结节的含量。结论本研究基于家兔大段骨缺损的治疗,通过建立了家兔骨缺损的模型,体外评价组织工程骨膜的生物学特性,为构建的组织工程骨膜体内修复大段骨缺损奠定了基础。 展开更多

关键词 人脱细胞羊膜 家兔骨髓间充质干细胞 组织工程骨膜 体外实验研究

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“去细胞”羊膜基质种植人脐静脉内皮细胞的实验研究 被引量：1

14

作者 赵宏伟 王贵学 +1 位作者 危当恒 龙光 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2006年第4期286-290,297,共6页

目的 制备“去细胞”羊膜基质（HAAM），观察内皮细胞在HAAM上的种植效果及细胞种植后的一氧化氮（NO）分泌功能和粘附能力，为进一步研究以HAAM覆盖修饰血管内支架并种植内皮细胞治疗再狭窄提供理论和实验依据。方法 胰酶消化去除羊膜... 目的 制备“去细胞”羊膜基质（HAAM），观察内皮细胞在HAAM上的种植效果及细胞种植后的一氧化氮（NO）分泌功能和粘附能力，为进一步研究以HAAM覆盖修饰血管内支架并种植内皮细胞治疗再狭窄提供理论和实验依据。方法 胰酶消化去除羊膜上皮细胞，保留基底膜作为载体，种植人脐静脉内皮细胞（HUVEC），体外培养形成单层，并进行细胞形态观察、NO分泌功能及细胞粘附力测定。结果 HUVEC可在HAAM上粘附生长并增殖，体外培养6-7天融合形成单层，其形态、分泌NO功能及细胞粘附力均优于对照组培养的内皮细胞。结论 羊膜基质可作为内皮细胞生长粘附的载体并增强其功能。 展开更多

关键词 羊膜细胞外基质 人脐静脉内皮细胞 细胞形态 一氧化氮 细胞粘附力

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人尿道黏膜上皮细胞系与脱细胞羊膜基质复合培养的实验研究 被引量：2

15

作者 范巨峰 芮宏亮 +7 位作者 宋森 张岩崑 范微微 吕伟 周璐 李晶 黄文罡 侯莹 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2016年第4期246-249,共4页

目的探讨人尿道黏膜上皮细胞系与脱细胞羊膜基质复合培养的效果。方法将人尿道黏膜上皮细胞系接种于脱细胞羊膜基质上,待细胞在脱细胞羊膜基质上生长至铺满表面,用活细胞示踪剂标记细胞,然后将脱细胞羊膜基质固定、封片,倒置相差和荧光... 目的探讨人尿道黏膜上皮细胞系与脱细胞羊膜基质复合培养的效果。方法将人尿道黏膜上皮细胞系接种于脱细胞羊膜基质上,待细胞在脱细胞羊膜基质上生长至铺满表面,用活细胞示踪剂标记细胞,然后将脱细胞羊膜基质固定、封片,倒置相差和荧光显微镜下进行观察。结果人尿道黏膜上皮细胞系细胞在脱细胞羊膜基质上生长,细胞呈单层生长,活细胞示踪剂显示细胞生长良好,并具有活细胞功能。结论人尿道黏膜上皮细胞系是良好的实验室组织工程化尿道种子细胞,脱细胞羊膜基质是良好的实验室组织工程化尿道支架材料,适用于实验室组织工程化尿道复合过程研究。 展开更多

关键词 组织工程 人尿道黏膜上皮细胞系 脱细胞羊膜基质 复合培养

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人脱细胞羊膜在生物医学领域中的应用研究进展

16

作者 许发亚 何琪 +2 位作者 李细艳 涂皎 肖雁冰 《实用临床医药杂志》 CAS 2022年第22期123-127,共5页

人脱细胞羊膜(HAAM)是经过物理、化学或生物酶制剂将人新鲜羊膜进行脱细胞处理后得到的一种天然支架材料,其具有良好的生物相容性、低免疫原性、三维立体空间结构及取材方便等优点,在软组织修复、气管及尿道重建、皮肤伤口愈合、骨缺损... 人脱细胞羊膜(HAAM)是经过物理、化学或生物酶制剂将人新鲜羊膜进行脱细胞处理后得到的一种天然支架材料,其具有良好的生物相容性、低免疫原性、三维立体空间结构及取材方便等优点,在软组织修复、气管及尿道重建、皮肤伤口愈合、骨缺损修复、预防粘连等方面具有广泛的应用前景。本研究结合相关文献对HAAM支架在生物医学领域的应用研究进展进行综述。 展开更多

关键词 人脱细胞羊膜 生物工程 生物支架 组织修复 组织重建

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交联人脱细胞羊膜修复兔阴道黏膜缺损的研究

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作者 许培荣 吴氢凯 +3 位作者 程慧 戴淼 侯旻 滕银成 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1068-1073,共6页

目的探讨交联人脱细胞羊膜(HAM)修复兔阴道黏膜缺损的可行性。方法采用兔脂肪干细胞(ADSCs)对交联HAM进行体外细胞毒性实验。将16只成年雌性新西兰大白兔随机分为实验组和对照组(n=8),制作兔阴道后壁黏膜缺损模型,实验组用交联HAM覆盖... 目的探讨交联人脱细胞羊膜(HAM)修复兔阴道黏膜缺损的可行性。方法采用兔脂肪干细胞(ADSCs)对交联HAM进行体外细胞毒性实验。将16只成年雌性新西兰大白兔随机分为实验组和对照组(n=8),制作兔阴道后壁黏膜缺损模型,实验组用交联HAM覆盖缺损处,对照组不作任何处理。分别于术后3 d和1、2、4周时取全层阴道后壁组织行大体观察及HE染色评价阴道黏膜缺损的修复情况。结果交联HAM浸提液吸光度值与阴性对照差异无统计学意义(P>0.05),细胞毒性0-Ⅰ级,交联HAM符合医用生物材料的细胞毒性要求。两组实验动物均未发生伤口感染。HE染色示术后3 d、1周,两组均可见较多炎性细胞浸润,但实验组可见较多阴道上皮细胞及平滑肌生成;术后2周,实验组阴道壁缺损处已覆盖新生上皮,而对照组阴道壁缺损处上皮覆盖不完整;术后4周,实验组阴道壁缺损处与周围正常组织无明显区别,而对照组新生阴道上皮细胞排列紊乱。结论交联HAM可促进兔阴道黏膜缺损修复。 展开更多

关键词 人脱细胞羊膜 创面修复 阴道壁缺损 细胞毒性试验

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脱细胞人胎羊膜在促进大鼠皮肤全层切口愈合中的作用机制 被引量：1

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作者 陈帆 南燕 +2 位作者 段予新 申素芳 张洁 《新乡医学院学报》 CAS 2013年第12期945-947,共3页

目的研究脱细胞人胎羊膜(HAM)对大鼠皮肤全层切口愈合过程中转化生长因子β(TGF-β)及凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)表达的影响,探讨其促进全层切口愈合及无瘢痕愈合的发生机制。方法建立Sprague-Dawley大鼠全层皮肤缺损模型,然后将大鼠分为... 目的研究脱细胞人胎羊膜(HAM)对大鼠皮肤全层切口愈合过程中转化生长因子β(TGF-β)及凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)表达的影响,探讨其促进全层切口愈合及无瘢痕愈合的发生机制。方法建立Sprague-Dawley大鼠全层皮肤缺损模型,然后将大鼠分为对照组和HAM组,每组15只。对照组大鼠切口用生理盐水冲洗后纱布包裹,HAM组大鼠切口外敷HAM并用纱布包裹。应用免疫组织化学技术分析切创后不同时相大鼠皮肤组织中TGF-β及TSP-1的表达。结果切口处理后第3天对照组大鼠皮肤组织TGF-β及TSP-1表达高于HAM组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HAM可减少大鼠皮肤全层切口早期愈合过程中TGF-β及TSP-1的表达,促进切口愈合,减少瘢痕增生。 展开更多

关键词 脱细胞人胎羊膜 皮肤全层切口 凝血酶敏感蛋白1 转化生长因子β

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去细胞人羊膜基质的制备及免疫原性 被引量：2

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作者 路欣 袁洁 +5 位作者 郭昕悦 李卫红 尚宏伟 张立新 黄晓武 张海燕 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期557-562,共6页

目的制备去细胞人羊膜基质(AHAM)并分析其移植至小鼠体内后的免疫反应,评价去细胞人羊膜基质作为细胞移植支架的免疫原性。方法利用胰蛋白酶-EDTA消化人羊膜(HAM),去除人羊膜上皮细胞,制备新鲜去细胞人羊膜基质;新鲜去细胞人羊膜基质置... 目的制备去细胞人羊膜基质(AHAM)并分析其移植至小鼠体内后的免疫反应,评价去细胞人羊膜基质作为细胞移植支架的免疫原性。方法利用胰蛋白酶-EDTA消化人羊膜(HAM),去除人羊膜上皮细胞,制备新鲜去细胞人羊膜基质;新鲜去细胞人羊膜基质置于含硫酸软骨素及甘油的冷冻保护液中,-80℃保存;使用前经PBS复水处理后即冷冻去细胞人羊膜基质;免疫细胞化学分析去细胞人羊膜基质中人类白细胞抗原的表达情况;将冷冻的去细胞人羊膜基质移植至BALB/c小鼠肝脏内4周后,分析脾脏组织中CD4^+、CD8^+T淋巴细胞比例的变化。结果新鲜及冷冻保存后的去细胞人羊膜基质均不表达人类白细胞抗原;冷冻的去细胞人羊膜基质移植至小鼠体内后,脾脏组织中CD4^+、CD8^+T淋巴细胞无明显变化。结论去细胞人羊膜基质的免疫原性较低,移植后不会引起由T细胞介导的特异性排斥反应,可以作为免疫安全性的生物支架用于疾病的细胞移植治疗。 展开更多

关键词 去细胞人羊膜基质 免疫原性 移植 T淋巴细胞 小鼠

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完全脱细胞人羊膜联合生肌液抑制兔慢性皮肤溃疡形成的实验研究

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作者 徐强 冀晓娜 卢旭亚 《武警后勤学院学报（医学版）》 CAS 2020年第9期6-12,22,共8页

【目的】观察完全脱细胞人羊膜(thoroughly acellular human amniotic membrane,TAHAM)联合生肌液对白兔慢性皮肤溃疡(chronic cutaneous ulcers,CCUs)形成抑制的影响。【方法】选取50只日本大耳白兔,制作CCUs模型,数字表法随机分成空... 【目的】观察完全脱细胞人羊膜(thoroughly acellular human amniotic membrane,TAHAM)联合生肌液对白兔慢性皮肤溃疡(chronic cutaneous ulcers,CCUs)形成抑制的影响。【方法】选取50只日本大耳白兔,制作CCUs模型,数字表法随机分成空白对照组、生肌象皮膏组、TAHAM组、TAHAM生肌象皮膏组及TAHAM生肌液组,观察白兔存活情况、疮面愈合时间、疮面大体及HE染色情况以及不同时间点疮周血清白介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)水平情况。【结果】观察期间各组白兔均正常存活,TAHAM生肌液组愈合时间最短,相较其余各组差异具有统计学意义(P<0.05);治疗第7天时TAHAM生肌液组HE染色显示疮面炎症反应最轻,且愈后HE染色显示细胞排列最整齐。观察期间各组IL-1β呈逐渐下降趋势,且14 d及21 d时TAHAM生肌液组IL-1β水平最低;观察期间各组VEGF、EGF呈逐渐上升趋势,且治疗第14天及21天时TAHAM生肌液组VEGF、EGF水平明显高于其余各组(P<0.05)。【结论】TAHAM与生肌液相结合,既可以避免生肌象皮膏的恋邪作用,又能利用偎脓长肉及组织工程支架作用,减轻局部炎性反应,促进疮面新生血管及上皮细胞形成,最终加速疮面愈合,避免溃疡慢性化,为生物材料与外用中药的联合应用提供了一种新的思路。 展开更多

关键词 慢性皮肤溃疡 完全脱细胞人羊膜 生肌象皮膏 生肌液 恋邪

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