期刊文献+
共找到55篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
基因修饰技术研究进展 被引量:13
1
作者 张白雪 孙其信 李海峰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1162-1174,共13页
基因修饰技术是用于基因组定点改造的分子工具,目前主要有锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas)技术。这些核酸酶都可以在DNA靶位点产生双链断裂(DSB),诱发细胞内源性的修复机制,... 基因修饰技术是用于基因组定点改造的分子工具,目前主要有锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas)技术。这些核酸酶都可以在DNA靶位点产生双链断裂(DSB),诱发细胞内源性的修复机制,激活体内非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HR)两种不同的修复机制,从而实现内源基因的敲除或外源基因的定点敲入。近年来,基因修饰技术已成功应用到细菌、酵母、人类细胞、果蝇、斑马鱼、小鼠、大鼠、家畜、食蟹猴、拟南芥、水稻、烟草、玉米、高粱、小麦和大麦等多种生物,显示了其强大的基因编辑优势。特别是新近出现的CRISPR-Cas9技术,降低了成本,使基因编辑变得简洁、高效和易于操作,得到了很多研究人员的关注。本文系统介绍了以上3种技术的原理及最新研究进展,并对未来的研究和应用做出了展望。 展开更多
关键词 基因修饰 锌指核酸酶(ZFN) 转录激活子样效应物核酸酶(TALEN) CRISPR-Cas核酸酶
原文传递
锌指蛋白核酸酶的作用原理及其应用 被引量:11
2
作者 钟强 赵书红 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期123-130,共8页
锌指蛋白核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN)因其能特异性识别并切割DNA序列以及可设计性,被用于基因定点突变和外源基因定点整合。目前,ZFN技术以其准确的靶位点设计能力和诱发高效率基因打靶的优势,越来越受到基因改造研究者的重视,... 锌指蛋白核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN)因其能特异性识别并切割DNA序列以及可设计性,被用于基因定点突变和外源基因定点整合。目前,ZFN技术以其准确的靶位点设计能力和诱发高效率基因打靶的优势,越来越受到基因改造研究者的重视,已经成功应用于动植物细胞、胚胎的基因改造。随着鉴定靶DNA高亲和力的锌指蛋白(Zinc finger protein,ZFP)实验技术日渐成熟,可以预见到不久的将来这项技术会在基因工程和育种中得到广泛应用。文章介绍了锌指蛋白识别DNA靶位点和ZFN介导的基因打靶(Double strand break gene targeting,DSB-GT)的原理,同时还综述了目前ZFN技术用于基因改造的研究进展。 展开更多
关键词 锌指结构域 锌指蛋白 锌指蛋白核酸酶 同源重组 基因打靶
下载PDF
锌指核酸酶在基因组靶向修饰中的应用 被引量:12
3
作者 王令 张存芳 张智英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期585-589,共5页
同源重组和逆转录病毒介导转基因法是目前基因组修饰中常用的两种主要方法.由于这些传统方法效率低,特异性差等缺点,制约了其在研究中的应用.锌指核酸酶(zinc finger nuclease,ZFN)是一种人工合成酶,含有锌指蛋白DNA结合域和非特异性核... 同源重组和逆转录病毒介导转基因法是目前基因组修饰中常用的两种主要方法.由于这些传统方法效率低,特异性差等缺点,制约了其在研究中的应用.锌指核酸酶(zinc finger nuclease,ZFN)是一种人工合成酶,含有锌指蛋白DNA结合域和非特异性核酸酶FokI结构域.ZFN在对基因组的靶向修饰时,表现出高度特异性和高效性.最新研究结果显示,锌指核酸酶在哺乳动物细胞和斑马鱼基因组靶向敲除的效率高达20%.这一技术的出现,将给基因组靶向修饰的研究和应用领域带来革命,特别是在基因治疗人类疾病方面有巨大的潜力和广阔的前景. 展开更多
关键词 锌指核酸酶 同源重组 基因组 靶向修饰 基因治疗
下载PDF
基因组定点编辑技术的研究进展 被引量:6
4
作者 张智辉 董少忠 寸韡 《生命科学》 CSCD 2013年第7期735-742,共8页
基因组编辑是建立在基因靶向修饰的基础上,对生物基因组进行改造的一项新技术。通过利用人工核酸酶ZFn、TALEN和细菌获得性免疫系统CRISPR,可在靶位点制造DNA双链切口进而诱导细胞内源性修复机制,通过同源重组修复或非同源末端连接途径... 基因组编辑是建立在基因靶向修饰的基础上,对生物基因组进行改造的一项新技术。通过利用人工核酸酶ZFn、TALEN和细菌获得性免疫系统CRISPR,可在靶位点制造DNA双链切口进而诱导细胞内源性修复机制,通过同源重组修复或非同源末端连接途径实现基因敲除、替换和纠正。对目前3个主要的基因组定点编辑技术的应用和发展作一综述。 展开更多
关键词 定点基因组编辑 锌指核酸酶 TALEN CRISPR Cas9
原文传递
基因编辑技术在免疫缺陷动物模型研究中的应用进展
5
作者 马云辉 王晓堂 +1 位作者 高继萍 宋国华 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期134-143,共10页
免疫缺陷动物模型在临床前研究中发挥重要作用,是现代生物医学研究领域的重要实验工具,广泛应用于免疫学、遗传学、肿瘤学与微生物学等研究领域。基因编辑是针对生物体基因组进行靶向修饰的技术,从出现到应用,极大推动了生物医学研究领... 免疫缺陷动物模型在临床前研究中发挥重要作用,是现代生物医学研究领域的重要实验工具,广泛应用于免疫学、遗传学、肿瘤学与微生物学等研究领域。基因编辑是针对生物体基因组进行靶向修饰的技术,从出现到应用,极大推动了生物医学研究领域的发展。基因编辑技术主要包括HEs、ZFNs、TALENs与CRISPR/Cas9系统。目前,研究者已利用该技术建立了多种类型的免疫缺陷动物模型,各有其优势和局限性。近年来,大量研究证实人源化免疫缺陷动物模型能够精准模拟癌细胞、药物以及免疫系统在人体内的作用,可以更好地模拟人类疾病,广泛用于研究人类免疫生物学及人类复杂疾病的潜在机制。本文对利用基因编辑技术构建免疫缺陷动物模型的研究应用进展进行综述,对基因编辑技术在免疫缺陷动物模型制备中存在的问题及优化策略深入探讨,并对其未来发展前景进行了展望,以期为研究者选用和建立免疫缺陷动物模型提供参考。 展开更多
关键词 免疫缺陷动物模型 基因编辑技术 锌指核酸酶 转录激活因子样效应核酸酶 CRISPR/Cas9
下载PDF
可编辑核酸酶介导的哺乳动物基因敲入技术最新进展 被引量:5
6
作者 张敏杰 孙玲 +4 位作者 刘真 蔡毅君 孙强 杨宇丰 陈文锋 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第1期72-80,共9页
实验哺乳动物模型是研究基础生物学及人类疾病的重要工具,对实现转基因操作,尤其是基因敲入(knock-in,KI),具有重大意义。锌指核酸酶(zinc-fi nger nucleases,ZFN)、类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector ... 实验哺乳动物模型是研究基础生物学及人类疾病的重要工具,对实现转基因操作,尤其是基因敲入(knock-in,KI),具有重大意义。锌指核酸酶(zinc-fi nger nucleases,ZFN)、类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALEN)和RNA介导的、基于成簇的规律间隔的短回文重复序列和Cas9蛋白的DNA核酸内切酶[clustered regulatory interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/Cas9-based RNA-guided DNA endonucleases,CRISPR/Cas9]等的出现,为科研工作者提供了革命性的转基因操作工具。这些可编辑核酸酶通过在靶标序列位置产生双链断裂缺口(double strand breaks,DSBs),并在同源修复模板存在的情况下发生同源重组,进而实现精确的基因敲入。该文主要综述了这些技术的原理及其在哺乳动物KI中取得的最新进展、提高KI效率以及降低脱靶效应的举措等,将有助于KI技术在未来转基因实践中的广泛应用。 展开更多
关键词 基因敲入 锌指核酸酶 类转录因子效应物核酸酶 CRISPR/Cas9 哺乳动物
原文传递
植物转基因技术及其在林木遗传改良中的应用 被引量:5
7
作者 崔旭东 张冰玉 +1 位作者 丁昌俊 苏晓华 《世界林业研究》 CSCD 北大核心 2013年第5期41-46,共6页
转基因技术不断进步为基因的功能解析和生物的定向改良提供了最为有效的途径。林木基因工程育种也随着转基因技术的成熟而步入快速发展时期,但目前国内对林木基因工程育种中处于关键地位的转基因技术进行系统论述的还比较少。文中从原... 转基因技术不断进步为基因的功能解析和生物的定向改良提供了最为有效的途径。林木基因工程育种也随着转基因技术的成熟而步入快速发展时期,但目前国内对林木基因工程育种中处于关键地位的转基因技术进行系统论述的还比较少。文中从原理、过程和优缺点等几个方面系统介绍了几种应用于植物基因工程的转基因技术,评述了转基因技术在林木中的应用现状,并对其在林木遗传改良中的应用前景进行展望,以期为后续的林木基因工程研究及应用提供参考。 展开更多
关键词 转基因技术 转基因方法 应用 林木 锌指核酸酶
原文传递
动物转基因新技术研究进展 被引量:5
8
作者 陈青 曹文广 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2168-2175,共8页
动物转基因技术是将外源基因导入动物体内,外源基因随机整合或定点整合(打靶)在染色体基因组上并得到表达和遗传的生物技术。该技术自发现以来,在畜牧业、医药产业、环境保护以及新型生物材料等领域已得到了广泛应用。本文主要就近年来... 动物转基因技术是将外源基因导入动物体内,外源基因随机整合或定点整合(打靶)在染色体基因组上并得到表达和遗传的生物技术。该技术自发现以来,在畜牧业、医药产业、环境保护以及新型生物材料等领域已得到了广泛应用。本文主要就近年来迅速发展起来的慢病毒载体导入法、精原干细胞法、锌指核酸酶介导的基因打靶、RNA干扰介导的基因沉默等新的高效转基因技术进行了概述。 展开更多
关键词 转基因技术 动物 慢病毒载体 精原干细胞 锌指核酸酶 RNA干扰
下载PDF
Genome engineering technologies for targeted genetic modification in plants
9
作者 Wei Tang Anna Y. Tang 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第4期875-887,共13页
Well-established targeted technologies to engi- neer genomes such as zinc-finger nuclease-based editing (ZFN), transcription activator-like effector nuclease-based editing (TALEN), and clustered regularly interspa... Well-established targeted technologies to engi- neer genomes such as zinc-finger nuclease-based editing (ZFN), transcription activator-like effector nuclease-based editing (TALEN), and clustered regularly interspaced short palindromic repeats and associated protein system-based editing (CRISPR/Cas) are proving to advance basic and applied research in numerous plant species. Compared with systems using ZFNs and TALENs, the most recently developed CRISPR/Cas system is more efficient due to its use of an RNA-guided nuclease to generate double-strand DNA breaks. To accelerate the applications of these technologies, we provide here a detailed overview of these systems, highlight the strengths and weaknesses of each, summarize research advances made with these technologies in model and crop plants, and discuss their applications in plant functional genomics. Such targeted approaches for genetically modifying plants will benefit agricultural production in the future. 展开更多
关键词 Double-stranded DNA break Genomeediting CRISPR system Transcription activator-likeeffector nucleases zinc-finger nucleases
下载PDF
Gene editing for corneal disease management
10
作者 Sudhanshu P Raikwar Apoorva S Raikwar +1 位作者 Shyam S Chaurasia Rajiv R Mohan 《World Journal of Translational Medicine》 2016年第1期1-13,共13页
Gene editing has recently emerged as a promising technology to engineer genetic modifications precisely in the genome to achieve long-term relief from corneal disorders.Recent advances in the molecular biology leading... Gene editing has recently emerged as a promising technology to engineer genetic modifications precisely in the genome to achieve long-term relief from corneal disorders.Recent advances in the molecular biology leading to the development of clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPRs) and CRISPR-associated systems,zinc finger nucleases and transcription activator like effector nucleases have ushered in a new era for high throughput in vitro and in vivo genome engineering.Genome editing can be successfully used to decipher complex molecular mechanisms underlying disease pathophysiology,develop innovative next generation gene therapy,stem cell-based regenerative therapy,and personalized medicine for corneal and other ocular diseases.In this review we describe latest developments in the field of genome editing,current challenges,and future prospects for the development of personalized genebased medicine for corneal diseases.The gene editing approach is expected to revolutionize current diagnostic and treatment practices for curing blindness. 展开更多
关键词 ADENO-ASSOCIATED virus Clustered Regularly-Interspaced SHORT Palindromic Repeats associated protein 9 Cornea Clustered regularly interspaced SHORT palindromic repeat Double strand breaks GENE EDITING sgRNA GENE targeting Homology directed repair Homologous recombination Indels LENTIVIRAL vector Protospacer-adjacent motif Transcription activator like effector nucleases zinc finger nucleases
下载PDF
利用人工锌指蛋白核酸酶进行植物基因定点突变和置换 被引量:2
11
作者 张余洋 张晓辉 张婵娟 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期110-115,共6页
基因定点突变技术在基因组原位改变基因特定序列,避免常规转基因过程中位置效应和插入失活。定点突变生物体不含转基因或标记基因,降低风险性。高等植物基因定点突变研究初见端倪,将可能为基因原位功能研究、作物遗传改良和分子设计提... 基因定点突变技术在基因组原位改变基因特定序列,避免常规转基因过程中位置效应和插入失活。定点突变生物体不含转基因或标记基因,降低风险性。高等植物基因定点突变研究初见端倪,将可能为基因原位功能研究、作物遗传改良和分子设计提供有效策略。利用锌指蛋白核酸酶(zinc finger nucleases,ZFN)引入DNA定点断裂(double-strand breaks,DSBs)可以高效介导基因定点突变,使得ZFN在基因定点突变中倍受关注。综述了植物基因定点突变的一般策略,重点介绍了锌指蛋白的结构、原理、应用,特别是ZFN介导的植物基因定点突变与置换研究进展,并对ZFN介导的植物基因定点突变与置换应用前景进行了讨论。 展开更多
关键词 基因定点突变 基因定点置换 锌指蛋白核酸酶 植物
下载PDF
人工锌指核酸酶突变EGFP基因的功能分析 被引量:1
12
作者 袁玉国 于宝利 +5 位作者 宋绍征 周峰 张利清 顾迎迎 禹明慧 成勇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1573-1580,共8页
锌指核酸酶技术在基因定点修饰中具有效率高和特异性好等特点,并成功应用于数十种生物。目前,该技术是否能应用羊上尚未报道。为了敲除转基因山羊标记基因(EGFP),构建了一对针对EGFP外显子上的锌指核酸酶表达载体,将其电转染至转EGFP基... 锌指核酸酶技术在基因定点修饰中具有效率高和特异性好等特点,并成功应用于数十种生物。目前,该技术是否能应用羊上尚未报道。为了敲除转基因山羊标记基因(EGFP),构建了一对针对EGFP外显子上的锌指核酸酶表达载体,将其电转染至转EGFP基因胎儿成纤维细胞中,研究了锌指核酸酶突变EGFP基因的效率和方式,利用基因显微注射单细胞获得获得的转基因(EGFP)细胞系作为锌指核酸酶的靶细胞。结果显示,通过锌指核酸酶的突变作用,转染后的细胞发绿色荧光比例下降,测序结果显示在EGFP外显子中插入1个碱基G,导致编码EGFP基因的阅读框改变,从而起到基因突变的作用。结果表明,文中构建的锌指核酸酶对EGFP基因有突变作用,可以为以后获得无标记基因供核细胞进行体细胞核移植生产克隆羊奠定基础。 展开更多
关键词 人工锌指核酸酶 核移植 EGFP 基因打靶 细胞显微注射 山羊体细胞
原文传递
锌指核酸内切酶:基因操作的有力工具 被引量:1
13
作者 杜忆南 胡边 黄行许 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期894-901,共8页
针对动植物进行基因靶向操作的技术,是解析基因功能、研究疾病,以及农业经济生产中一个有用的工具。至今,基因靶向操作主要是通过在胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES cell)中进行同源重组或者是体细胞核转移的方法进行,但同源重组方... 针对动植物进行基因靶向操作的技术,是解析基因功能、研究疾病,以及农业经济生产中一个有用的工具。至今,基因靶向操作主要是通过在胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES cell)中进行同源重组或者是体细胞核转移的方法进行,但同源重组方法由于需要ES细胞而被限制在个别物种,而核转移方法存在核去分化、效率低、成本高的缺陷。近几年,一种基于锌指核酸内切酶(zinc-finger nuclease,ZFN)基因靶向修饰的新技术被应用于包括植物、果蝇、爪蟾、斑马鱼和大鼠等不同物种的基因操作。通过胚胎注射ZFN的质粒或是mRNA可以有效地定靶并迅速地在内源基因上引起可遗传的突变。ZFN介导基因靶向敲除的可行性,使得那些无法获得ES细胞和克隆技术支持的物种的基因靶向修饰成为可能。 展开更多
关键词 锌指核酸内切酶 靶向基因操作 同源重组 核转移 模式动物
原文传递
锌指核酶技术的原理及应用 被引量:1
14
作者 邓珊珊 王颖芝 马端 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期162-165,共4页
锌指核酶(zinc fingernueleases,ZFNs)是将锌指蛋白的DNA识别域和非特异性核酸内切酶Fok I人工连接而构成的一种核酶。1对ZFNs能在DNA上产生双链断裂(double—strand breaks,DSB),诱导细胞发生同源重组(homology recombination... 锌指核酶(zinc fingernueleases,ZFNs)是将锌指蛋白的DNA识别域和非特异性核酸内切酶Fok I人工连接而构成的一种核酶。1对ZFNs能在DNA上产生双链断裂(double—strand breaks,DSB),诱导细胞发生同源重组(homology recombination,HR)或非同源末端连接(nonhomologous end joining,NHEJ)。最近锌指核酶技术在基因功能的研究中受到重视。作者就ZFNs的作用原理、关键技术及其应用领域进行介绍。 展开更多
关键词 锌指核酶 基因沉默 基因治疗 定点整合
原文传递
锌指核酸酶技术在基因治疗中的应用研究进展 被引量:1
15
作者 李战伟 王令 +2 位作者 任刚 王昕 张智英 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2011年第6期55-60,共6页
锌指核酸酶技术是一种新兴的基因高效靶向修饰和调控技术,目前该技术已在人类疾病的基因治疗中得到应用,通过敲除致病基因使其丧失致病性或者通过修复突变基因使基因表达正常,实现了对多种人类疾病的基因治疗。基于提高锌指核酸酶效率... 锌指核酸酶技术是一种新兴的基因高效靶向修饰和调控技术,目前该技术已在人类疾病的基因治疗中得到应用,通过敲除致病基因使其丧失致病性或者通过修复突变基因使基因表达正常,实现了对多种人类疾病的基因治疗。基于提高锌指核酸酶效率、特异性和降低细胞毒性等方面的研究较少的现状,特就人工锌指核酸酶介导的基因敲除和基因同源重组修复等在人类疾病基因治疗方面的应用及存在问题进行了综述,并对相关研究的开展进行了展望。 展开更多
关键词 基因治疗 锌指核酸酶 同源重组 靶向修饰
下载PDF
锌指核酸酶在基因组编辑中的应用 被引量:1
16
作者 沈忠福 《价值工程》 2012年第11期303-305,共3页
基因组编辑是建立在基因靶向修饰的基础上,对生物基因组进行改造的一项新技术。锌指核酸酶(zinc finger nucleases,ZFN)是一种特异性强、应用范围广的人工合成酶,可在靶位点制造DNA双链切口(double-strand break,DSB)进而诱导细胞内源... 基因组编辑是建立在基因靶向修饰的基础上,对生物基因组进行改造的一项新技术。锌指核酸酶(zinc finger nucleases,ZFN)是一种特异性强、应用范围广的人工合成酶,可在靶位点制造DNA双链切口(double-strand break,DSB)进而诱导细胞内源性修复机制,通过同源重组修复(homology-directed repair,HDR)或非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)途径实现基因替换和纠正,因而成为基因组编辑的良好工具。本文将就最近文献中提到的锌指核酸酶在基因组编辑中的应用做一综述。 展开更多
关键词 锌指核酸酶 基因组编辑 同源重组
下载PDF
基因编辑技术在乙型肝炎基因治疗中的作用研究进展
17
作者 兰婷钰 孟忠吉 《中国病毒病杂志》 CAS 2020年第6期464-470,共7页
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染是一种全球性公共卫生疾病,是导致肝功能衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的主要病因。乙型肝炎的治疗虽然取得了长足进展,抗病毒/免疫调节联合治疗方案的优化使... 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染是一种全球性公共卫生疾病,是导致肝功能衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的主要病因。乙型肝炎的治疗虽然取得了长足进展,抗病毒/免疫调节联合治疗方案的优化使得HBV感染的治愈成为可能,但是HBV的功能性治愈率仍然很低。肝细胞核内HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA, cccDNA)的稳态水平是HBV持续感染和久治不愈的根源。现有的治疗方案不能作用于cccDNA,而基因编辑技术可以直接对基因组DNA进行剪切和编辑,在HBV感染的治疗研究中已经显示出较好的作用。本文主要综述了基因编辑技术在抗HBV治疗中的研究进展,包括锌指核酸内切酶、转录激活因子效应物核酸酶和规律成簇的间隔短回文重复(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins, Cas)系统。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因编辑 基因治疗 锌指核酸内切酶 转录激活因子效应物核酸酶 CRISPR/Cas
原文传递
基因编辑技术及其在蚊媒研究中的应用
18
作者 方福瑾 张贻宏 +3 位作者 张鹏 刘俊杰 杨玉婷 常雪莲 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2019年第1期85-90,共6页
蚊是一类呈世界性分布的卫生害虫,传播疟疾等多种疾病,引发许多国际性的公共卫生事件,受到了全世界的广泛关注。基于传统的化学防治导致蚊抗药性的产生及环境污染都给蚊媒控制带来新的挑战。近年来分子生物学的飞速发展,基因编辑技术(ZF... 蚊是一类呈世界性分布的卫生害虫,传播疟疾等多种疾病,引发许多国际性的公共卫生事件,受到了全世界的广泛关注。基于传统的化学防治导致蚊抗药性的产生及环境污染都给蚊媒控制带来新的挑战。近年来分子生物学的飞速发展,基因编辑技术(ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9等)的相继出现,可以对蚊媒基因组进行精确的基因敲除、替换、纠正等靶向修饰,以期在蚊媒防治控制工作中取得新的突破。基因编辑技术的出现与发展为蚊媒的基因编辑、目标基因功能研究、甚至是蚊-病原体相互作用基因的定位提供一个强有力的工具。本文对目前3种主要基因编辑技术在蚊媒基因组中的研究和进展进行了综述。通过分析基因编辑技术在蚊媒研究的应用可以达到3个主要目的:(1)控制蚊媒与病原体;(2)研究蚊相关基因的功能;(3)对蚊基因组进行相关编辑与改造。基因编辑技术用于研究蚊媒基因的功能,会成为未来科学研究的一大热点。 展开更多
关键词 基因编辑 锌指核酸酶 TALEN CRISPR/Cas9
下载PDF
基因沉默技术在斑马鱼研究中的应用
19
作者 张艳丽 马端 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期331-334,共4页
模式生物斑马鱼主要应用于探索遗传学、发育生物学和分子生物学等研究领域的分子机制,常用的研究策略是DNA诱变和基于RNA的基因沉默。但化学诱变技术和传统反义核酸技术存在缺陷,目前在应用中已受到很大限制。反义morpholino技术具有... 模式生物斑马鱼主要应用于探索遗传学、发育生物学和分子生物学等研究领域的分子机制,常用的研究策略是DNA诱变和基于RNA的基因沉默。但化学诱变技术和传统反义核酸技术存在缺陷,目前在应用中已受到很大限制。反义morpholino技术具有稳定、方便的特点,广泛应用于斑马鱼基因功能的研究。新兴的锌指核酶基因敲除技术不依赖于胚胎干细胞使其前景更为广阔。 展开更多
关键词 斑马鱼 基因沉默 转基因技术 反义技术 锌指核酶技术
原文传递
基于GFP的锌指核酸酶真核细胞筛选体系的构建与验证
20
作者 李静心 王慧利 +4 位作者 孟春花 张庆晓 蒋进 王婧 曹少先 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期879-884,共6页
旨在构建基于GFP报告基因的ZFN真核细胞筛选体系,为ZFN的筛选提供一种直观、准确、灵敏的方法。以pEGFP-N1为基础,去除EGFP基因的起始密码子后在多克隆位点上游插入ATG,构建筛选体系的通用载体pEGFP-ATG。将ZFN的靶序列插入到通用载体E... 旨在构建基于GFP报告基因的ZFN真核细胞筛选体系,为ZFN的筛选提供一种直观、准确、灵敏的方法。以pEGFP-N1为基础,去除EGFP基因的起始密码子后在多克隆位点上游插入ATG,构建筛选体系的通用载体pEGFP-ATG。将ZFN的靶序列插入到通用载体EGFP基因上游,且使起始密码子和EGFP基因处于不同ORF中,构建筛选载体pEGFP-728。将pEGFP-728转入Hela细胞中,G418筛选Hela-728细胞系,转染ZFN到Hela-728,48h内通过观察荧光判断ZFN是否有效,挑取荧光细胞进行PCR、测序验证靶序列的敲除。测序分析表明,通用载体pEGFP-ATG和含靶序列的筛选载体pEGFP-728序列完全正确;pEGFP-728转入Hela细胞中观察不到绿色荧光,说明靶序列插入后使EGFP发生移框;转染靶序列对应的ZFN到Hela-728中,48h观察到荧光的表达,说明ZFN有效;挑取6个荧光细胞单克隆,PCR、测序表明4个克隆靶序列发生缺失突变。锌指核酸酶真核细胞筛选体系构建成功。相对于其他方法本筛选体系更加准确、直观、灵敏,更适用于动植物等真核细胞的ZFN筛选,同时还可应用于TALEN和CAS9的筛选。 展开更多
关键词 锌指核酸酶 筛选通用载体 绿色荧光蛋白 真核细胞
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部