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遗传标志性基因Z0372 PCR检测肠出血大肠杆菌O157:H7 被引量:3
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作者 张雪寒 张碧成 +3 位作者 栾晓婷 汪伟 周俊明 何孔旺 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期409-413,共5页
肠出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7是重要的食源性病原菌,导致严重的人兽共患病。本文旨在建立以Z0372基因为靶基因的PCR检测技术,特异性检测EHEC O157:H7。以Z0372基因为靶序列,设计引物,建立Z0372-PCR,分... 肠出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7是重要的食源性病原菌,导致严重的人兽共患病。本文旨在建立以Z0372基因为靶基因的PCR检测技术,特异性检测EHEC O157:H7。以Z0372基因为靶序列,设计引物,建立Z0372-PCR,分析敏感性、特异性,并检测模拟阳性污染样品。结果表明,Z0372-PCR对纯培养物检测限103~104CFU/m L,模拟阳性污水样和肉样,增菌后检测限10~102CFU/m L(g)。非大肠杆菌O157和其他肠道病原全部为阴性扩增,只有肠出血性大肠杆菌O157:H7扩增出清晰而特异的条带。模拟阳性样品检测,条带特异,无任何杂带,测序与Gen Bank序列高度同源。因此,Z0372-PCR是特异性检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的技术,操作简便,成本低廉,适合实验室肠道内容物、刮取物、污水和食品等的快速检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 Z0372 聚合酶链反应 食品 排泄物
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MSMEG_0372基因敲除、回补及过表达耻垢分枝杆菌的构建与鉴定
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作者 刘仪 牛宏红 +2 位作者 杨赛丽 曹旭东 袁俐 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第5期620-626,共7页
目的为研究MSMEG_0372基因的功能,构建该基因敲除、回补及过表达耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,M.smegmatis)并鉴定。方法聚合酶链反应(PCR)扩增MSMEG_0372基因的左、右臂(即等位基因互换底物,allele exchange substrates,AES)... 目的为研究MSMEG_0372基因的功能,构建该基因敲除、回补及过表达耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,M.smegmatis)并鉴定。方法聚合酶链反应(PCR)扩增MSMEG_0372基因的左、右臂(即等位基因互换底物,allele exchange substrates,AES)。AES与p0004s经过酶切并连接,构建p0004s-AES质粒。p0004s-AES与phAE159经过酶切并连接,构建phAE159-AES噬菌粒。噬菌粒转化至M.smegmatis,30℃培养,扩增重组噬菌体。用重组噬菌体侵染M.smegmatis,37℃培养,发生基因同源重组,形成MSMEG_0372基因敲除菌株。筛选阳性菌落,PCR鉴定。PCR扩增MSMEG_0372基因,构建pMV361-MSMEG_0372质粒。将pMV361-MSMEG_0372质粒分别导入MSMEG_0372基因敲除菌株和野生型M.smegmatis,构建MSMEG_0372基因回补菌株和MSMEG_0372基因过表达菌株。筛选阳性菌落,PCR鉴定。结果PCR扩增出MSMEG_0372的左、右臂(AES),构建了p0004s-AES质粒和phAE159-AES噬菌粒,制备了高滴度的重组噬菌体并侵染M.smegmatis,从而成功构建了MSMEG_0372基因敲除菌株。构建了pMV361-MSMEG_0372质粒,成功构建了MSMEG_0372基因回补和过表达菌株。结论成功构建并鉴定了MSMEG_0372基因敲除、回补及过表达M.smegmatis,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 耻垢分枝杆菌 MSMEG_0372基因 基因敲除 基因回补 基因过表达
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新基因KIAA0372在淋巴瘤中的表达及其生物信息学分析
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作者 苏良平 颜波 +6 位作者 潘桂红 陈卫珍 白向阳 卢运萍 马丁 周剑峰 李双 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2007年第6期405-409,共5页
目的研究淋巴瘤和反应性增生淋巴结基因表达的差异,并采用生物信息学方法对一条淋巴瘤高表达基因 KIAA0372进行初步分析。方法分别将淋巴瘤淋巴结标本和反应性增生淋巴结标本的 mRNA 与表达谱芯片杂交,通过信号扫描、处理后获得两者的... 目的研究淋巴瘤和反应性增生淋巴结基因表达的差异,并采用生物信息学方法对一条淋巴瘤高表达基因 KIAA0372进行初步分析。方法分别将淋巴瘤淋巴结标本和反应性增生淋巴结标本的 mRNA 与表达谱芯片杂交,通过信号扫描、处理后获得两者的表达差异基因。并用生物信息学方法对一条无功能研究的新基因 KIAA0372进行初步分析,预测它的基因结构、染色体定位、编码蛋白质的理化性质、亚细胞定位、蛋白质功能域等信息。并对多物种中的相似性蛋白进行了系统进化分析。结果表达谱芯片共发现了152条差异表达基因。对淋巴瘤相关新基因 KIAA0372的上述性质进行了有效的预测,基本明确了该基因编码一胞外分泌蛋白,可能作为 TGFβ信号通路的一个配基参与淋巴瘤细胞的生成。结论表达谱芯片技术是一种研究肿瘤基因表达差异的有效的高通量研究方法。新基因 KIAA0372是一个有研究价值的新靶点。 展开更多
关键词 基因表达谱 寡核苷酸序列分析 淋巴瘤 计算生物学 KIAA0372
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Expression and bioinformatic analysis of lymphoma-associated novel gene KIAA0372
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作者 BAI Xiangyang TANG Duozhuang +5 位作者 ZHU Tao SUN Lishi YAN Lingling LU Yunping ZHOU Jianfeng MA Ding 《Frontiers of Medicine》 SCIE CSCD 2007年第1期93-98,共6页
The purpose of this study was to explore the differentially expressed genes in lymph-node cells(LNC)of lymphomas and reactive lymph node hyperplasia,and to perform an initial bioinformatic analysis on a novel gene,KIA... The purpose of this study was to explore the differentially expressed genes in lymph-node cells(LNC)of lymphomas and reactive lymph node hyperplasia,and to perform an initial bioinformatic analysis on a novel gene,KIAA0372,which is highly expressed in the LNC of lymphomas.mRNA extracted from LNC of lymphomas and reactive lymph node hyperplasia were respectively marked with biotin and hybridized with Gene Expression Chips,resulting in differentially expressed genes.Initial bioinformatic analysis was then performed on a novel gene named KIAA0372,whose function has not yet been explored.Its structure and genomic location,its product’s physical and chemical properties,subcellular localization and functional domains,were also predicted.Further,a systematic evolution analysis was performed on similar proteins from among several species.Using Gene Expression Chips,many differentially expressed genes were uncovered.Efficient bioinformatic analysis has fundamentally determined that KIAA0372 is an extracellular protein which may be involved in TGF-b signaling.Microarray is an efficient and high throughput strategy for detection of differentially expressed genes.And KIAA0372 is thought to be a potential target for tumor research using bioinformatic analysis. 展开更多
关键词 cDNA microarray LYMPHOMA BIOINFORMATICS KIAA0372
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