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巨噬细胞转录因子阴阳1基因通过调节脂肪细胞因子影响胰岛素敏感性
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作者 于汐 刘醒 +5 位作者 赵洁洁 焦阳 陆炎 杨琰英 李小英 汤其群 《上海医学》 CAS 2022年第12期818-823,共6页
目的探讨巨噬细胞转录因子阴阳1(YY1)基因对葡萄糖耐量、胰岛素敏感性的影响。方法通过Cre-Loxp系统,成功获得巨噬细胞YY 1基因特异性敲除(YY 1^(f/f);lyz2-cre)小鼠。高脂喂养小鼠12~13周,检测小鼠葡萄糖耐量(血糖水平)和胰岛素耐量(... 目的探讨巨噬细胞转录因子阴阳1(YY1)基因对葡萄糖耐量、胰岛素敏感性的影响。方法通过Cre-Loxp系统,成功获得巨噬细胞YY 1基因特异性敲除(YY 1^(f/f);lyz2-cre)小鼠。高脂喂养小鼠12~13周,检测小鼠葡萄糖耐量(血糖水平)和胰岛素耐量(相对血糖值)。将高脂喂养的YY 1基因敲除小鼠(实验组,YY 1^(f/f);lyz2-cre)与对照组(YY 1^(f/f))小鼠分别注射0.9%氯化钠溶液和胰岛素(剂量均为0.75 U/kg),取其附睾脂肪、肌肉、肝脏组织,采用免疫印迹法检测蛋白激酶B(Akt)-糖原合成酶激酶3β(Gsk3β)通路关键蛋白(Akt、Gsk3β)的磷酸化水平。采用ELISA法检测高脂饮食后实验组小鼠与对照组小鼠血清胰岛素、脂联素和瘦素水平。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常饮食的两组小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)中炎症因子mRNA相对表达量。结果琼脂糖凝胶电泳见700 bp处显示条带,表明lyz2-cre基因成功表达。实验组小鼠BMDM中,YY 1基因mRNA相对表达量显著低于对照组,表明巨噬细胞YY 1基因特异性敲除小鼠模型构建成功。高脂喂养下,实验组小鼠注射葡萄糖后60、90 min时的血糖水平均显著低于对照组同时间点(P值均<0.05),实验组小鼠注射胰岛素后30、60、90 min时的相对血糖值均显著低于对照组同时间点(P值分别<0.05、0.001、0.01)。正常饮食喂养下,两组各时间点间血糖水平和相对血糖值的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。实验组小鼠附睾脂肪中胰岛素信号通路关键蛋白Akt及Gsk3β磷酸化水平较对照组均明显上调,肌肉和肝脏组织中无明显变化。实验组小鼠血清瘦素、脂联素水平均显著高于对照组(P值均<0.05);实验组小鼠血清胰岛素水平较对照组有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。实验组小鼠BMDM中IL-6 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA相对表达量均显著低于对照组(P值均<0.001)。结论巨噬细胞转录因子YY1基因敲除,可以通过� 展开更多
关键词 阴阳1转录因子 炎症 巨噬细胞 胰岛素敏感性 脂联素
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阴阳蛋白1转录调控乙酰辅酶A羧化酶1对卵巢癌细胞迁移和脂质合成的影响
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作者 李晓红 许萍 +1 位作者 李国福 陈真云 《肿瘤研究与临床》 CAS 2023年第7期481-487,共7页
目的探讨卵巢癌组织和细胞中乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)的表达情况, 及其对卵巢癌细胞迁移和脂质合成影响的相关机制。方法收集2019年1月至2021年12月于临沂市肿瘤医院手术切除并经病理诊断的1例正常卵巢组织、1例卵巢癌原发灶组织及1例卵... 目的探讨卵巢癌组织和细胞中乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)的表达情况, 及其对卵巢癌细胞迁移和脂质合成影响的相关机制。方法收集2019年1月至2021年12月于临沂市肿瘤医院手术切除并经病理诊断的1例正常卵巢组织、1例卵巢癌原发灶组织及1例卵巢癌网膜转移灶组织, 采用免疫组织化学法检测各组织中ACC1和阴阳蛋白1(YY1)的水平。通过PROMO数据库预测YY1可能具有与ACC1启动子区域的结合位点。通过组装的病毒载体, 使人卵巢癌HEY细胞过表达ACC1或YY1[阴性对照(NC)为未经处理的细胞], 或者敲低ACC1或YY1(转入目的基因的干扰序列sh1、sh2、sh3, 对照为转入干扰序列的阴性对照序列shNC)。采用双荧光素酶报告基因实验验证YY1与ACC1启动子的结合位点及转录调控活性。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法分别检测经相应处理的HEY细胞ACC1、YY1 mRNA和蛋白表达水平;采用Transwell实验检测HEY细胞迁移能力;采用油红O染色和尼罗红染色检测HEY细胞中脂滴形成情况。结果正常卵巢组织、卵巢癌原发灶和网膜转移灶中ACC1的免疫组织化学评分分别为0、2、8分, YY1评分分别为0、4、6分。Transwell实验显示, ACC1过表达组侵袭的HEY细胞数较NC组多[(87.7±7.4)个比(52.2±4.2)个, t=5.19, P=0.003];ACC1敲低的ACC1-sh1组和ACC1-sh2组侵袭的HEY细胞数均少于shNC组[(21.2±1.5)个、(29.7±2.3)个比(56.2±5.3)个, t值分别为6.41、3.77, P值分别为<0.001、0.005]。ACC1过表达组HEY细胞中脂滴数较NC组多[油红O染色:(301±25)个比(215±21)个, 尼罗红染色:(287±15)个比(207±10)个;均P<0.05], ACC1敲低的ACC1-sh1、ACC1-sh2组HEY细胞脂滴数均较ACC1-shNC组少[油红O染色:(113±8)个、(119±12)个比(195±18)个, 尼罗红染色:(82±8)个、(117±11)个比(165±17)个;均P<0.05]。双荧光素酶报告基因实验显示, YY1过表达促进野生型ACC1启动子区域报告基因的荧光素酶� 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 乙酰CoA羧化酶 阴阳蛋白转录因子 脂肪生成 肿瘤转移
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YY1基因在肺癌组织中的表达及其对肺癌细胞功能的影响 被引量：2
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作者 王玉 刘奔 +3 位作者 曲金力 俞晓 冯楠楠 钱碧云 《天津医药》 CAS 2016年第7期839-842,共4页
目的检测转录因子YY1在肺癌组织中的表达情况,并分析其对肺癌细胞的增殖、迁移及侵袭的影响。方法应用Taqman探针实时荧光定量PCR方法检测235例肺癌组织以及62例配对癌旁组织中YY1 mRNA的表达,并分析其表达与患者临床病理特征的关系。应... 目的检测转录因子YY1在肺癌组织中的表达情况,并分析其对肺癌细胞的增殖、迁移及侵袭的影响。方法应用Taqman探针实时荧光定量PCR方法检测235例肺癌组织以及62例配对癌旁组织中YY1 mRNA的表达,并分析其表达与患者临床病理特征的关系。应用Lipofectamine 3000试剂在肺癌细胞系转染YY1过表达质粒及对照质粒。噻唑蓝(MTT)分别检测对照组和YY1过表达组在24、48及72 h时A549和H1299细胞增殖能力的变化。划痕实验和Transwell实验检测YY1过表达对肺癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。结果与癌旁组织(5.80±0.58)相比,YY1 mRNA在肺癌组织(5.07±0.58)中表达下调(P<0.01),且YY1 mRNA的表达在不同性别、吸烟状态、病理类型及临床分期中差异有统计学意义(P<0.05)。YY1过表达组H1299细胞增殖能力在48 h和72 h均低于对照组(P<0.01),A549细胞在72 h低于对照组(P<0.05)。划痕实验和Transwell实验结果显示转染过表达YY1质粒后,肺癌细胞的侵袭能力及迁移能力明显下降(P<0.05)。结论 YY1在肺癌组织中低表达,上调YY1的表达可抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 肺肿瘤 细胞系 肿瘤 细胞迁移分析 肿瘤侵润 转录因子yin-yang1 A549细胞 H1299细胞
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