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miR-590-5p与信号传导及转录激活因子3的靶向作用关系及其对视网膜母细胞瘤Y-79细胞生长和转移能力的影响 被引量：3
1
作者 刘青 宁超 +1 位作者 杨捷玲 岳小丁 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第6期640-647,共8页
目的探讨miR-590-5p与信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的靶向作用关系及其对视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)Y-79细胞生长和转移能力的影响。方法临床收集人RB组织样本和癌旁... 目的探讨miR-590-5p与信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的靶向作用关系及其对视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)Y-79细胞生长和转移能力的影响。方法临床收集人RB组织样本和癌旁组织样本各20份,RT-PCR检测miR-590-5p和STAT3基因的转录水平,并分析两者的相关性。RT-PCR检测RB细胞株Y-79和SO-RB50及正常视网膜细胞株HREC中miR-590-5p基因的转录水平。荧光素酶报告基因试验检测miR-590-5p和STAT3的相互作用关系。将Y-79细胞分为Y-79、miR-NC、miR-590-5p mimic和mi R-590-5p mimic+STAT3组,转染相应的miRNA及载体,RT-PCR检测mi R-590-5p和STAT3基因转录水平,Western blot检测STAT3、增殖蛋白Ki67、活化半胱天冬酶(cleave caspase-3,cl-caspase-3)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)蛋白表达水平,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果与正常视网膜组织比较,RB组织中mi R-590-5p基因转录水平显著降低,STAT3基因转录水平显著升高(P<0.01),且miR-590-5p与STAT3基因转录水平呈负相关(r=-0.8835,P<0.001)。与正常视网膜细胞比较,SO-RB50和Y-79细胞miR-590-5p转录水平显著降低(P<0.01),从中选取miR-590-5p转录水平最低的Y-79细胞进行后续试验。与Y-79组比较,miR-590-5p mimic组mi R-590-5p表达水平显著升高,STAT3基因转录和蛋白表达水平显著降低,细胞增殖水平显著降低,细胞凋亡率显著升高,Ki67、VEGF、MMP-9蛋白表达水平显著降低,cl-caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与miR-590-5p mimic组比较,miR-590-5p mimic+STAT3组STAT3蛋白表达水平显著升高,细胞增殖水平显著升高,细胞凋亡率显著降低,Ki67、VEGF、MMP-9蛋白表达水平显著升高,cl-caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与STAT3 WT+miR-NC组比较,STAT3 WT+miR-590-5p mimic组荧光素酶活性显著降低(P<0.01)。结论miR-590-5 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 y-79细胞株 miR-590-5p 信号传导及转录激活因子3 生长 转移
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紫草素通过PKM2/Hif-1α通路抑制视网膜母细胞瘤Y79细胞株增殖的影响及其潜在机制 被引量：2
2
作者 戴汉军 罗红 曾卫娟 《医学分子生物学杂志》 CAS 2019年第6期501-505,共5页
目的 探究紫草素对人视网膜母细胞瘤Y79细胞株增殖的影响及其潜在机制.方法 采用细胞计数的方法统计Y79细胞在不同处理情况下的细胞密度.采用免疫印迹方法检测Y79人视网膜母细胞瘤细胞 (Y79细胞) 在不同处理情况下的M2型丙酮酸脱氢酶 ( ... 目的 探究紫草素对人视网膜母细胞瘤Y79细胞株增殖的影响及其潜在机制.方法 采用细胞计数的方法统计Y79细胞在不同处理情况下的细胞密度.采用免疫印迹方法检测Y79人视网膜母细胞瘤细胞 (Y79细胞) 在不同处理情况下的M2型丙酮酸脱氢酶 ( PKM2) 和低氧诱导因子-1α ( hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α) 的蛋白水平.采用转染PKM2-siRNA或Hif-1α-siRNA的方法, 分别下调 Y79 细胞中的PKM2或Hif-1α水平.结果 处理紫草素可抑制Y79细胞生长, 同时, 紫草素下调Y79细胞内的PKM2和Hif-1α水平. PKM2-siRNA或Hif-1α-siRNA转染Y79 细胞下调PKM2 或Hif-1α, 可分别抑制Y79 细胞的生长.预处理抑制PKM2或Hif-1α均可阻断紫草素引起的Y79细胞生长变缓.抑制PKM2可引起Y79细胞内Hif-1α水平下调;且抑制PKM2可阻断紫草素对Y79细胞内Hif-1α水平的影响.结论 紫草素可通过抑制PKM2进而下调Hif-1α, 从而抑制Y79细胞的增殖. 展开更多
关键词 紫草素 y79细胞株 PKM2 HIF-1Α 细胞增殖
原文传递
miRNA-26b/PTEN/TDP-43信号通路在视网膜母细胞瘤Y79细胞株增殖中的作用研究 被引量：1
3
作者 戴汉军 《实用癌症杂志》 2019年第9期1393-1397,共5页
目的探究miRNA-26b通过PTEN/TDP-43信号通路调节视网膜母细胞瘤Y79细胞株增殖的潜在机制。方法采用Q-PCR的方法,测定miRNA-26b的水平。采用转染TDP-43-siRNA或PTEN-cDNA的方法,分别下调TDP-43或上调PTEN。采用细胞计数的方法统计Y79细... 目的探究miRNA-26b通过PTEN/TDP-43信号通路调节视网膜母细胞瘤Y79细胞株增殖的潜在机制。方法采用Q-PCR的方法,测定miRNA-26b的水平。采用转染TDP-43-siRNA或PTEN-cDNA的方法,分别下调TDP-43或上调PTEN。采用细胞计数的方法统计Y79细胞在处理miRNA-26b抑制剂或激活剂、转染TDP-43-siRNA、转染PTEN-cDNA后0 h、12 h、24 h时的细胞密度。采用免疫印迹的方法检测Y79细胞在不同处理情况下的TDP-43和PTEN的水平。结果抑制miRNA-26b可抑制Y79细胞细胞生长,反之,激活miRNA-26b促进Y79细胞细胞生长。抑制miRNA-26b可下调TDP-43、上调PTEN,激活miRNA-26b可上调TDP-43、下调PTEN;抑制TDP-43或过表达PTEN可抑制Y79细胞生长。过表达PTEN可下调TDP-43水平;在过表达PTEN的情况下激活miRNA-26b,TDP-43水平无显著变化,Y79细胞生长速度无显著差异。结论miRNA-26b可通过上调PTEN反向调节TDP-43水平,进而抑制Y79细胞的增殖。 展开更多
关键词 y79细胞株 MiRNA-26b TDP-43 PTEN 细胞增殖
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