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不同亚基组成的N型钙离子通道电学特性研究
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作者 张树卓 戴薇薇 +3 位作者 孙洪良 李昕 郑建全 李锦 《军事医学科学院院刊》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期322-325,329,共5页
目的:建立不同辅助亚基与功能亚基重组体瞬时表达的N型钙离子通道细胞模型,观察不同亚基组成的N型钙离子通道的电学特征,揭示不同辅助亚基对功能亚基的调节作用。方法:将N型钙离子通道亚基α1B/α2δ/β1b的cDNA分别体外转录为cRNA后,... 目的:建立不同辅助亚基与功能亚基重组体瞬时表达的N型钙离子通道细胞模型,观察不同亚基组成的N型钙离子通道的电学特征,揭示不同辅助亚基对功能亚基的调节作用。方法:将N型钙离子通道亚基α1B/α2δ/β1b的cDNA分别体外转录为cRNA后,注射至去除滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞中,表达48h后使用双电极电压钳技术记录其电流。结果:向注射N型钙通道cRNA的细胞以一系列去极化刺激可诱发90%的细胞记录到内向电流。其电流可被N型钙离子通道特异性拮抗剂ω-CTXMVⅡA(1μmol/L)完全阻断。at。B单独表达时可形成功能性N型钙离子通道,通过记录到电流后而得出电流一电压曲线(Ⅰ-Ⅴ曲线),可知产生电流峰值的膜电压约为20mV(21.17±1.44)mV(n=7);α1B/β1b共表达时Ⅰ-Ⅴ曲线方向为超极化,电流达到峰值的电压为(12.35±0.88)mV(n=7,P<0.01);功能亚基与α2δ亚基共表达时,Ⅰ-Ⅴ曲线稍向正电位方向,电流达到峰值的电压为(23.25±1.25)mV(n=7,P<0.01);在α1B/α2δ/β1b共表达时,尽管有α2δ亚基存在时,β1b亚基仍显著地使Ⅰ-Ⅴ曲线向超级化方向(17.08±1.86)mV(n=7)。本实验也观察了不同重组体电流的稳态失活电压,其中α1B表达电流的半数失活电压为-12.0mV,α1B/α2δ表达电流的半数失活电压为-13.5mV,α1B/β1b表达电流的半数失活电压为-51.4mV,而α1B/α2δ/β1b共表达时电流半数失活电压为-54.9mV。结论:成功地建立不同亚基组成的N型钙离子通道在爪蟾卵母细胞的功能性表达,不同的辅助亚基与功能亚基组合体现了通道不同的动力学特性,表明N型钙通道在体内可能具有功能的多样性。这些结果为今后深入研究N型钙通道奠定了基础。 展开更多
关键词 爪蟾卵母细胞 N型钙离子通道 电生理学
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