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神经黏附分子NB-3在转基因小鼠脑的发育表达 被引量：1
1
作者 赵华 赵彤 +4 位作者 黄欣 刘朝晖 吴丽颖 朱玲玲 范明 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期183-186,共4页
目的检测NB-3在小鼠大脑组织中不同时期的表达情况。方法采用带LacZ基因的NB-3基因敲除的杂合子小鼠,分别取E12、E14、E16、E18、P0、P7、P14及成年小鼠的脑组织固定,采用X-gal染色方法检测LacZ基因产物β-半乳糖苷酶的表达以显示NB-3... 目的检测NB-3在小鼠大脑组织中不同时期的表达情况。方法采用带LacZ基因的NB-3基因敲除的杂合子小鼠,分别取E12、E14、E16、E18、P0、P7、P14及成年小鼠的脑组织固定,采用X-gal染色方法检测LacZ基因产物β-半乳糖苷酶的表达以显示NB-3的表达及定位。结果1.NB-3在胚胎发育期间从E14开始有微弱的表达,后逐渐在侧脑室周围、皮层、丘脑、下丘脑及海马等部位表达。其中在皮层中的表达主要集中在Ⅱ/Ⅲ、Ⅴ层。2.NB-3在出生后小鼠大脑中的表达明显升高,在P7时表达最高,此后稍有下降直至成年。3.NB-3在成年小鼠大脑组织中的表达分布广泛。表达最强的部位分别是大脑皮层的II/III、V层、梨状皮层、杏仁核周皮质、丘脑、下丘脑以及海马的CA1区等。结论NB-3在发育和成体小鼠中枢神经系统中均有表达,且不同时期的表达量有所不同。提示NB-3在神经系统的发育过程中可能具有重要的作用。 展开更多
关键词 神经细胞黏附分子 NB-3 中枢神经系统 x-gal染色 转基因小鼠
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基于Cre/Loxp系统Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶转基因小鼠的建立
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作者 张淑静 江其辉 +3 位作者 卢清君 王宁利 陈振文 卢清显 《实验动物科学》 2011年第2期1-6,I0001,I0002,共8页
目的采用大肠杆菌β-半乳糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠。与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、Axl的转基因小鼠,为研究其在各个组织中的功能奠定基础。方法构建含有l... 目的采用大肠杆菌β-半乳糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠。与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、Axl的转基因小鼠,为研究其在各个组织中的功能奠定基础。方法构建含有loxp位点的Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶质粒,测序正确后,通过显微注射法将插入CAG启动子下游的Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3基因的转基因载体注射入BDF1供体鼠受精卵,移植受精卵至ICR受体鼠,待产仔后,通过双引物PCR鉴定F0以及Fn代小鼠的基因型,RT-PCR,X-gal染色观察小鼠组织中LacZ基因,运用WB(Western Blot)检测转基因小鼠和野生型小鼠体内目的蛋白表达的差异。结果获得了含有目的基因的转基因阳性小鼠;通过RT-PCR对阳性小鼠证明LacZ基因的存在;对存在LacZ基因的小鼠进行X-gal染色,在Geo-STOP-msTyro3的脑、睾丸、胸腺中观察到蓝色沉淀,在Geo-STOP-msAxl的脑、心、肾中观察到蓝色沉淀,间接说明目的基因能表达的组织和器官;对双阳性的Geo-STOP-msTyro3、Geo-STOP-msAxl转基因小鼠和野生型小鼠,WB检验证实Tyro3、Axl基因的表达没有差异,说明在加入stop序列之后,Tyro3基因确实存在,而且表达受到抑制。结论成功建立Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3酪氨酸受体转基因小鼠。 展开更多
关键词 Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶 LOxP位点 x-gal染色
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