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过氧蛋白同源物通过调控Wnt/β-连环蛋白信号通路影响胃癌MGC803细胞生长和侵袭迁移能力 被引量：1
1
作者 钟文进 林建安 +2 位作者 孙亚锋 许建华 叶凯 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期412-415,共4页
目的探讨过氧蛋白同源物(PXDN)基因对人胃癌MGC803细胞生长和侵袭迁移能力的影响及其机制。方法收集从2019年4月到2019年6月期间福建医科大学附属第二医院胃肠外科确诊为胃癌的未经过放疗和化疗的手术标本及配对的癌旁组织,各10例。通... 目的探讨过氧蛋白同源物(PXDN)基因对人胃癌MGC803细胞生长和侵袭迁移能力的影响及其机制。方法收集从2019年4月到2019年6月期间福建医科大学附属第二医院胃肠外科确诊为胃癌的未经过放疗和化疗的手术标本及配对的癌旁组织,各10例。通过癌症肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库筛选与胃癌相关的突变基因,并通过筛选GEO数据库中与胃癌相关的RNA测序数据集(GSE122796)分析突变基因的差异表达状况。收集临床上未经放、化疗的胃癌组织及配对的癌旁组织各10例,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法和蛋白质印迹法(Western blot)检测PXDN在癌旁组织和胃癌组织中的表达。通过Western blot检测PXDN在4种人胃癌细胞株的表达。构建小干扰RNA沉默PXDN的表达,将培养的细胞随机随机分为NC-SiRNA组(转染阴性对照组)和PXDN-SiRNA组,并采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验、Transwell法,检测MGC803细胞的增殖、侵袭和迁移的变化。此外,Western blot检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的改变。应用SPSS 22.0统计软件分析,采用t检验或单因素方差进行分析。结果TCGA与GEO数据库显示PXDN是胃癌发病相关的高突变率(15.4%)及显著差异基因[Log2 FC=2.83±0.72,padj=0.031,P<0.05]。RT-qPCR和Western blot结果显示PXDN在胃癌组织表达量明显上调[(0.92±0.12)比(0.61±0.09)、(1.65±0.23)比(1.00±0.25),t=12.680、17.520,P<0.05],差异有统计学意义。Western blot检测PXDN在MGC803细胞株表达量较其他细胞株高(F=23.810,P<0.05),差异有统计学意义。沉默PXDN基因可显著抑制MGC803细胞的增殖[吸光度(A)值:(0.62±0.05)比(1.05±0.08),t=7.740,P<0.05]、迁移[(41.25±5.67)个比(85.23±4.28)个,t=21.120,P<0.05]、侵袭[(42.47±3.98)个比(86.16±4.19)个,t=20.090,P<0.05],差异有统计学意义。此外,沉默PXDN后,糖原合成酶激酶-3β(Gsk-3β)蛋白表达水平显著上调,β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期� 展开更多
关键词 胃癌 过氧蛋白同源物 增殖 迁移和侵袭 wnt3a/β-连环蛋白
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芬太尼通过Wnt3a/β-连环蛋白信号通路促进乳腺癌细胞干细胞特性的研究 被引量：6
2
作者 周晶 崔金花 +3 位作者 张乙 杨红芳 姚佳琦 隋成 《中国医师进修杂志》 2020年第7期624-628,共5页
目的研究芬太尼对乳腺癌细胞干细胞特性(简称干性)的影响及分子机制。方法2018年1月至2019年10月采用人乳腺癌细胞系BT549作为体外研究对象,经0.01和0.10μmol/L芬太尼处理后,通过成球能力实验和克隆形成能力实验检测乳腺癌细胞干性的变... 目的研究芬太尼对乳腺癌细胞干细胞特性(简称干性)的影响及分子机制。方法2018年1月至2019年10月采用人乳腺癌细胞系BT549作为体外研究对象,经0.01和0.10μmol/L芬太尼处理后,通过成球能力实验和克隆形成能力实验检测乳腺癌细胞干性的变化;采用实时定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测干性相关转录因子性别决定区Y框蛋白2(Sox2)、八聚体结合转录因子4(Oct4)和Nanog mRNA表达水平;利用蛋白免疫印迹实验检测Wnt信号通路关键蛋白Wnt3a、磷酸化糖原合酶激酶-3β(p-GSK-3β)、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。下调Wnt3a后,再行蛋白免疫印迹实验和成球能力实验。结果0.01和0.10μmol/L芬太尼处理的乳腺癌细胞球体直径、克隆形成率、Sox2 mRNA、Oct4 mRNA、Nanog mRNA、Wnt3a、p-GSK-3β、GSK-3β和β-catenin明显大于空白对照[(131.22±1.06)和(636.37±0.02)μm比(72.68±0.13)μm、(41.33±0.03)%和(60.58±1.08)%比(20.93±0.15)%、2.25±0.20和3.82±0.84比1.00、1.87±1.06和3.35±0.04比1.00、2.85±0.03和4.36±0.50比1.00、1.82±0.03和2.57±0.42比1.00、2.04±0.13和2.81±0.05比1.00、1.62±0.17和2.93±0.06比1.00、2.15±0.02和3.54±0.21比1.00],0.10μmol/L芬太尼处理的乳腺癌细胞各指标明显大于0.01μmol/L芬太尼处理的乳腺癌细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。干扰Wnt3a后,p-GSK-3β、GSK-3β、β-catenin、Sox2、Oct4和球体直径的表达明显低于空白对照[0.12±0.05比1.00、0.53±0.06比1.00和0.24±0.21比1.00、0.28±0.10比1.00和0.06±0.01比1.00、(18.14±0.30)μm比(74.32±0.12)μm],差异有统计学意义(P<0.01)。结论芬太尼通过激活Wnt3a/β-catenin信号通路促进乳腺癌细胞干性。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 芬太尼 肿瘤干细胞 wnt3a/β-连环蛋白信号通路
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肠型胃癌Correa级联反应不同病理阶段Shh与Wnt3A/β-catenin表达变化 被引量：5
3
作者 刘先勇 王玉红 +6 位作者 张若梅 杨进 孟春芹 王建宁 仇伟 李加虎 周宇 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第20期1525-1530,共6页
目的音猬因子(sonic hedgehog,Shh)与Wnt3A/β-catenin在Correa级联反应中发生了深刻变化,与肠型胃癌(intestinal-type gastric cancer,IGC)的发病密切相关。本研究观察Shh与Wnt3A/β-catenin在IGC的Correa级联反应不同病理阶段中表达特... 目的音猬因子(sonic hedgehog,Shh)与Wnt3A/β-catenin在Correa级联反应中发生了深刻变化,与肠型胃癌(intestinal-type gastric cancer,IGC)的发病密切相关。本研究观察Shh与Wnt3A/β-catenin在IGC的Correa级联反应不同病理阶段中表达特点,揭示IGC重要发病分子生物学机制。方法选取2016-01-01-2018-12-31南京医科大学附属江宁医院内镜室和病理科获得的40例慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)、40例慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)伴肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)及40例IGC标本,运用免疫组织化学法及蛋白质印迹法检测各组标本Shh和Wnt3A/β-catenin蛋白表达水平,并分析相关性。结果 CSG组Shh主要表达在细胞浆和细胞膜,着色"+、++及+++"阳性率分别为10%、62.50%和27.50%;CAG伴IM组Shh阳性率分别为55%、35%和10%;IGC组Shh阳性率分别为25%、55%、10%和10%。3组Shh表达差异有统计学意义,H=37.335,P<0.001。CAG伴IM组和IGC组Shh表达水平低于CSG组,Z值分别为-4.055和-5.569,均P<0.001;IGC组Shh表达水平低于CAG伴IM组,Z=-3.083,P=0.002。CSG组β-catenin主要表达在细胞膜,着色阳性率97.5%;细胞核一般不表达,着色阳性率5%;CAG伴IM组和IGC组,β-catenin在细胞膜表达降低,着色阳性率分别为80%和82.5%,在细胞核表达增强,着色阳性率分别是27.5%和57.5%。3组β-catenin在细胞膜(H=10.937,P=0.004)和细胞核(H=31.306,P<0.001)表达差异有统计学意义。CAG伴IM组及IGC组细胞膜上β-catenin表达水平低于CSG组,Z值分别为-2.871和-2.834,P值分别为0.004和0.005;但两组细胞核上β-catenin表达水平高于CSG组,Z值分别为-2.722和-5.135,均P<0.05;β-catenin在IGC组细胞核中表达水平高于CAG伴IM组,Z=-3.533,P<0.001。Wnt3A在3组均不表达。蛋白质印迹法结果显示,从CSG、CAG伴IM发展至IGC过程中,Shh表达水平逐渐降低,β-catenin表达逐渐增加。3组中Shh蛋白相对表达量分别为1.00±0.08、0.51±0.09和0.14±0.11,� 展开更多
关键词 音猬因子 wnt3A/β连环蛋白 Correa级联反应 肠型胃癌 相关性
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外源性神经生长因子激活Wnt3α/β-catenin信号通路促进骨折愈合
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作者 赵研哲 刘建 石晓云 《河北医学》 CAS 2024年第10期1627-1634,共8页
目的:分析外源性神经生长因子激活Wnt3α/β-catenin信号通路促进骨折愈合的作用。方法:选取40只SPF级SD大鼠,10只大鼠作为对照组,30只构建胫骨骨折模型,共有27只大鼠建模成功,分为模型组9只、低剂量组9只、高剂量组9只。观察各组大鼠... 目的:分析外源性神经生长因子激活Wnt3α/β-catenin信号通路促进骨折愈合的作用。方法:选取40只SPF级SD大鼠,10只大鼠作为对照组,30只构建胫骨骨折模型,共有27只大鼠建模成功,分为模型组9只、低剂量组9只、高剂量组9只。观察各组大鼠病理组织学、骨钙、骨磷水平、血液流变学指标、BMD、骨痂直径、血管生成相关因子、炎症因子水平、Wnt3α/β-catenin通路关键基因Wnt3a、β-catenin、GSK-3β的mRNA表达量、Wnt3α/β-catenin通路关键蛋白Wnt3a、β-catenin、GSK-3β的表达。结果:与对照组相比,另外三组骨钙、骨磷、BMD、血管生成相关因子、Wnt3α、β-catenin相关mRNA表达量、Wnt3α、β-catenin表达量降低,全血黏度、血浆黏度、炎症因子水平、GSK-3β相关mRNA表达量、GSK-3β表达量升高,与模型组相比,低、高剂量组骨钙、骨磷、BMD、骨痂直径、血管生成相关因子、Wnt3α、β-catenin相关mRNA表达量、Wnt3α、β-catenin表达量升高,全血黏度、血浆黏度、炎症因子水平、GSK-3β相关mRNA表达量、GSK-3β表达量降低;且高剂量组体现出最高骨钙、骨磷、BMD、骨痂直径、血管生成相关因子、Wnt3α、β-catenin相关mRNA表达量、Wnt3α、β-catenin表达量,最低全血黏度、血浆黏度、炎症因子水平、GSK-3β相关mRNA表达量、GSK-3β表达量(P<0.05)。结论:采用外源性神经生长因子对胫骨骨质大鼠干预,可促使大鼠骨折的愈合,其作用机制可能与激活Wnt3α/β-catenin信号通路有关,具有较好的使用效果。 展开更多
关键词 胫骨骨折 外源性神经生长因子 wnt-3α/β-连环蛋白
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