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参麦注射液对内毒素诱导心肌细胞凋亡的抑制作用及细胞Wnt2/β-catenin表达的影响 被引量:1
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作者 李振永 时双 刘玉军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期4186-4191,共6页
为探讨参麦注射液诱导心肌细胞凋亡的作用机理,本研究分别选取对照组、内毒素(LPS)处理组、参麦注射液(SMI)+内毒素(LPS)处理组,共3组小鼠心肌细胞进行试验。通过MTT检测了各实验组的心肌细胞存活率,利用流式细胞仪检测心肌细胞... 为探讨参麦注射液诱导心肌细胞凋亡的作用机理,本研究分别选取对照组、内毒素(LPS)处理组、参麦注射液(SMI)+内毒素(LPS)处理组,共3组小鼠心肌细胞进行试验。通过MTT检测了各实验组的心肌细胞存活率,利用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡数量,最后利用RT-PCR和Western blotting分别检测心肌细胞Wnt2/β-catenin m RNA的表达和细胞内Wnt2/β-catenin蛋白的表达。结果显示SMI进行剂量干预后,内毒素诱导心肌细胞存活率显著升高(p〈0.05)。当SMI的干预量为0.8 g/L时,细胞存活率高于LPS组(p〈0.05);SMI以1 g/L剂量进行干预时,细胞存活率显著高于LPS组(p〈0.01)。同时,SMI干预的心肌细胞中,UR、LR区的细胞比例较LPS组有显著下降(p〈0.05)。SMI干预内毒素诱导心肌细胞后,显著逆转内毒素诱导心肌细胞内Wnt2/β-catenin m RNA的表达(p〈0.05),并且Wnt2/β-catenin蛋白的表达也得到显著性逆转(p〈0.05)。该结果表明参麦注射液主要是通过影响心肌细胞Wnt2/β-catenin信号通路,从而抑制内毒素诱导的心肌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 参麦注射液 内毒素 细胞凋亡 wnt2/β-catenin
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黄芪甲苷通过调控FoxO3a/Wnt2/β-catenin通路抑制去卵巢大鼠骨质疏松的作用 被引量:44
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作者 成鹏 白银亮 +2 位作者 胡彩莉 连佛彦 周海宇 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第15期161-166,共6页
目的:通过调控转录因子叉头框蛋白O3a(FoxO3a)/分泌型糖蛋白2(Wnt2)/β-连环蛋白(β-catenin)通路评价黄芪甲苷对去卵巢大鼠骨质疏松的作用,并探讨其作用机制。方法:雌性SD大鼠随机均分6组,分别为假手术组,模型组,阳性药组(尼... 目的:通过调控转录因子叉头框蛋白O3a(FoxO3a)/分泌型糖蛋白2(Wnt2)/β-连环蛋白(β-catenin)通路评价黄芪甲苷对去卵巢大鼠骨质疏松的作用,并探讨其作用机制。方法:雌性SD大鼠随机均分6组,分别为假手术组,模型组,阳性药组(尼尔雌醇,1.5 mg·kg-1),黄芪甲苷低、中、高剂量组(20,40,80 mg·kg-1),每组8只。通过摘除大鼠双侧卵巢复制绝经后大鼠骨质疏松模型。术后6周,灌胃给药,每日1次,连续8周。酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测大鼠骨钙素(bone gla protein,BGP),降钙素(calcitonin,CT),骨保护素(osteoprotegerin,OPG),核转录因子-κB(NF-κB)受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL),丙二醛(malondialdehyde,MDA),过氧化氢酶(catalase,CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量,双能X射线骨密度检测仪分别测定股骨和腰椎的骨密度值(bone mineral density,BMD),采用三点弯曲法测量胫骨生物力学指标,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠股骨组织中β-catenin,FoxO3a,Wnt2,p66(shc),p-p66(shc)蛋白的表达。结果:与模型组比较,黄芪甲苷组CT和OPG水平显著升高,BGP和RANKL水平则显著降低(P〈0.05,P〈0.01);黄芪甲苷显著升高腰椎、股骨的BMD和胫骨的最大载荷及最大应力(P〈0.05,P〈0.01);同时,黄芪甲苷显著降低MDA水平(P〈0.05),升高CAT,SOD和GSH-Px水平(P〈0.05,P〈0.01)。Western blot显示,黄芪甲苷显著降低p-p66(shc)/p66(shc)水平(P〈0.05);升高β-catenin和Wnt2蛋白表达水平(P〈0.05,P〈0.01),抑制FoxO3a蛋白表达水平(P〈0.01)。结论:黄芪甲苷能够有效缓解氧化应激介导的去卵巢大鼠的骨质疏松,该作用可能与其调节FoxO3a/Wnt2/β-catenin通路有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 骨质疏松 去卵巢大鼠 转录因子叉头框蛋白O3a(FoxO3a)/分泌型糖蛋白2(wnt2)/β-连环蛋白(β-catenin)通路
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姜黄素通过Wnt2/β-catenin通路逆转食管癌Eca-109/VCR细胞多药耐药性研究 被引量:8
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作者 任海玉 孙剑经 +4 位作者 李多 牛树荣 刘华 罗强 张林西 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1455-1460,共6页
目的研究姜黄素(curcumin,Cur)对人食管癌耐药细胞株Eca-109/VCR多药耐药的逆转作用,并探讨其可能的逆转机制。方法 CCK-8法检测不同浓度Cur和VCR对Eca-109/VCR细胞增殖的影响,以及Cur(20μmol·L^(-1))对Eca-109/VCR细胞多药耐药... 目的研究姜黄素(curcumin,Cur)对人食管癌耐药细胞株Eca-109/VCR多药耐药的逆转作用,并探讨其可能的逆转机制。方法 CCK-8法检测不同浓度Cur和VCR对Eca-109/VCR细胞增殖的影响,以及Cur(20μmol·L^(-1))对Eca-109/VCR细胞多药耐药的逆转作用;FCM检测细胞凋亡率;ELISA法检测P-gp蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR分析Wnt2、β-catenin mRNA的相对表达量;Western blot检测Wnt2、β-catenin、MMP-2、HMGB1的蛋白表达水平。结果随着Cur浓度的增加,细胞抑制率逐渐升高,呈剂量依赖性。Cur(20μmol·L^(-1))与不同浓度VCR联合作用可明显提高细胞增殖抑制率,逆转倍数为3.49。Cur(20μmol·L^(-1))与VCR(2.0 mg·L^(-1))联合作用可明显提高细胞凋亡率,降低P-gp蛋白含量,下调Wnt2、β-catenin mRNA的相对表达,并抑制Wnt2、β-catenin、MMP-2、HMGB1蛋白的表达。结论 Cur具有逆转食管癌细胞多药耐药的作用,其作用机制可能与下调Wnt2、β-catenin的表达,抑制Wnt2/β-catenin通路活性,以及下调侵袭相关蛋白MMP-2、HMGB1的表达有关。 展开更多
关键词 食管癌 wnt2/β-catenin通路 姜黄素 长春新碱 多药耐药 实时荧光定量PCR
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姜黄素对食管癌细胞中5-FU化疗敏感性的影响 被引量:2
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作者 秦文兵 李瑞佳 张月丽 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期960-964,共5页
目的探讨姜黄素对食管癌细胞中5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响。方法选取食管癌细胞EC-9706和EC-109,单独给予5-FU或联合姜黄素干预后,采用CCK-8法检测细胞增殖,RT-qPCR法检测miR-590-3p表达,Western blot法检测Wnt-2、β-catenin蛋... 目的探讨姜黄素对食管癌细胞中5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响。方法选取食管癌细胞EC-9706和EC-109,单独给予5-FU或联合姜黄素干预后,采用CCK-8法检测细胞增殖,RT-qPCR法检测miR-590-3p表达,Western blot法检测Wnt-2、β-catenin蛋白表达。结果姜黄素能够抑制食管癌EC-9706和EC-109细胞的增殖(P<0.05),并呈剂量依赖性。姜黄素能够增强食管癌细胞EC-9706和EC-109对5-FU的敏感性,降低其IC50值(P<0.01)。miR-590-3p在食管癌细胞系中低表达;过表达miR-590-3p能够抑制食管癌细胞的增殖,并增加EC-9706和EC-109细胞对5-FU的敏感性,降低其IC_(50)值(P<0.01)。姜黄素能够增加食管癌细胞中miR-590-3p的表达;抑制miR-590-3p的表达能够逆转姜黄素对食管癌细胞增殖的影响。姜黄素能够通过调节miR-590-3p表达抑制Wnt-2、β-catenin蛋白表达(P<0.01)。结论姜黄素能够增加5-FU对食管癌的化疗敏感性,其机制可能是通过调控miR-590-3p表达从而抑制Wnt-2/β-catenin通路的活性。 展开更多
关键词 姜黄素 5-氟尿嘧啶(5-FU) 食管癌细胞EC-9706 miR-590-3p 食管癌细胞EC-109 wnt-2/β-catenin信号通路
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Rhopaladins类似物对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的影响及其机制 被引量:2
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作者 王彦娇 曾小华 +3 位作者 柯丽娜 朱秀莲 陈琴华 李斌 《山东医药》 CAS 2022年第12期30-34,共5页
目的观察Rhopaladins类似物(RPDPB)对宫颈Hela细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期Hela细胞,将细胞分为实验组、对照组、空白组,实验组又分为不同剂量组,不同剂量组分别以3.125、6.25、12.5、25、50、100μmol/L R... 目的观察Rhopaladins类似物(RPDPB)对宫颈Hela细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期Hela细胞,将细胞分为实验组、对照组、空白组,实验组又分为不同剂量组,不同剂量组分别以3.125、6.25、12.5、25、50、100μmol/L RPDPB干预,对照组只加DMSO培养液,空白组加入不含细胞的MEM培养液,分别于24、48、72 h采用CCK-8法检测OD值,计算细胞增殖抑制率。取对数生长期Hela细胞,将细胞分为实验组、对照组,实验组又分为不同剂量组,不同剂量组分别以12.5、25、50μmol/L RPDPB干预,对照组只加DMSO不加药,48 h后采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测Annexin V-FITC和PI,计算细胞凋亡率。取对数生长期Hela细胞,将细胞分为实验组、对照组,实验组又分为不同剂量组,不同剂量组分别以12.5、25、50μmol/L RPDPB干预,对照组只加DMSO不加药,48 h后采用RT-PCR法检测细胞人乳头瘤病毒18 E6(HPV18 E6)、人乳头瘤病毒18 E7(HPV18 E7)、WNT2B、β-catenin mRNA和miR-145 RNA。取对数生长期Hela细胞,将细胞分为实验组、对照组,实验组又分为不同剂量组,不同剂量组分别以12.5、25、50μmol/L RPDPB干预,对照组只加DMSO不加药,48 h后采用Western blot法检测细胞WNT2B、β-catenin蛋白。结果与对照组比较,实验组细胞增殖抑制率增加,且呈时间和剂量依赖性(P均<0.05)。与对照组比较,实验组细胞早期凋亡率和晚期凋亡率增加,且呈剂量依赖性(P均<0.05)。与对照组比较,实验组HPV18 E6 mRNA、HPV18 E7 mRNA、WNT2B mRNA、β-catenin mRNA相对表达量降低,miR-145 RNA相对表达量升高,且呈剂量依赖性(P均<0.05)。与对照组比较,实验组WNT2B、β-catenin蛋白相对表达量降低,且呈剂量依赖性(P均<0.05)。结论RPDPB可抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并诱导细胞凋亡,呈时间和剂量依懒性,作用机制可能是其通过下调HPVE6/E7 mRNA表达,导致miR-145 RNA表达上调,进而抑制下游WNT2B/β-catenin通路中W 展开更多
关键词 Rhopaladins类似物 宫颈癌 细胞增殖 细胞凋亡 人乳头瘤病毒18 E6 人乳头瘤病毒18 E7 微小RNA-145 wnt2B/β-catenin信号通路
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Wnt2b/β-catenin/C-myc信号途径在小鼠胚胎心脏中的时空表达
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作者 孙莉 丁玉龙 +1 位作者 陈筠 侯巧燕 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期236-240,共5页
目的探讨Wnt2b/β-catenin/C-myc信号途径在小鼠胚胎心脏发育中的时空表达。方法正常孕10d、12.5d、15d、17d、18.5d及出生后当天的小鼠胚胎心脏,免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting等方法检测Wnt2b、β-catenin及C-myc在小鼠胚胎... 目的探讨Wnt2b/β-catenin/C-myc信号途径在小鼠胚胎心脏发育中的时空表达。方法正常孕10d、12.5d、15d、17d、18.5d及出生后当天的小鼠胚胎心脏,免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting等方法检测Wnt2b、β-catenin及C-myc在小鼠胚胎心脏发育不同时期的表达。结果 Wnt2b、β-catenin和C-myc的mRNA及蛋白量随胚胎发育时间的推移表达量逐渐降低;并且Wnt2b、β-catenin和C-myc的mRNA水平两两相关(P<0.05)。结论 Wnt2b/β-catenin/C-myc途径在小鼠胚胎心脏发育过程中发挥着重要作用;C-myc可能是与Wnt2b表达相关的下游靶基因之一。 展开更多
关键词 wnt2b/β-catenin/C-myc 胚胎 心脏 免疫组织化学 反转录-聚合酶链式反应 印迹印迹法 小鼠
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