期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到77篇文章
< 1 2 … 4 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
野生型P53及其调控基因与子宫颈癌发病机制 被引量：15
1
作者 朱靖 周颖 凌斌 《国际妇产科学杂志》 CAS 2010年第3期187-189,共3页
P53基因是迄今发现与人类肿瘤的发生相关性最高的抑癌基因,在人类癌症中发生突变的频率高达50%。在子宫颈癌组织中表达则降低,且以野生型(wt)为主。wtP53第4外显子72密码的基因多态性与子宫颈癌发病机制密切相关。wtP53蛋白在子宫颈癌... P53基因是迄今发现与人类肿瘤的发生相关性最高的抑癌基因,在人类癌症中发生突变的频率高达50%。在子宫颈癌组织中表达则降低,且以野生型(wt)为主。wtP53第4外显子72密码的基因多态性与子宫颈癌发病机制密切相关。wtP53蛋白在子宫颈癌细胞中半衰期短,功能易失活,具有调节细胞周期、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长的功能。其功能失活与多种基因,如E6,E7,MDM2和STAT3等基因的降解作用有关。 展开更多
关键词 野生型p53 人乳头瘤病毒 子宫颈癌 凋亡
下载PDF
p53和p16基因过表达对人肺腺癌细胞株H1299生物学功能影响实验研究 被引量：9
2
作者 卞春安 蒋琰华 +2 位作者 陆世民 许林 李忠佑 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2018年第5期307-314,共8页
目的 p53及p16基因是肺腺癌的两种重要的驱动基因,但其在肺腺癌发生发展中的作用尚不明确。本研究探讨外源性突变型p53(p53mut)、野生型p53(p53wt)和p16基因过表达对人肺腺癌细胞株H1299生物学功能的影响。方法构建真核表达载体pIRES2-E... 目的 p53及p16基因是肺腺癌的两种重要的驱动基因,但其在肺腺癌发生发展中的作用尚不明确。本研究探讨外源性突变型p53(p53mut)、野生型p53(p53wt)和p16基因过表达对人肺腺癌细胞株H1299生物学功能的影响。方法构建真核表达载体pIRES2-EGFP-p53mut、pIRES2-EGFP-p53wt和pIRES2-EGFP-p16,将H1299细胞分为空白对照组、阴性对照组和转染组(p53mut转染组、p53wt转染组、p53wt和p16联合转染组),空白对照组只加转染试剂,阴性对照组转染空载体,转染组转染含目的基因的过表达载体。蛋白质印迹法验证质粒载体转染效果,细胞增殖检测试剂盒8(cell counting kit8,CCK8)、划痕试验、Transwell小室侵袭实验分别检测转染前后细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化,流式细胞术检测转染前后细胞周期和凋亡的变化。结果真核表达载体质粒经测序鉴定证明构建正确。蛋白质印迹法证实,空白对照组及阴性对照组的H1299细胞不表达p53和p16蛋白。转染组的H1299细胞成功过表达目的基因(p53mut、p53wt及p16)。CCK8实验提示,空白对照组与阴性对照组在细胞增殖能力上差异无统计学意义(P>0.05),p53mut转染组细胞增殖能力增强,p53wt转染组及p53wt、p16共转染组细胞的增殖能力减弱,且以后者下降更为明显,P<0.001。划痕试验提示,空白对照组与阴性对照组细胞在迁移能力差异无统计学意义(P>0.05),p53mut转染组细胞迁移能力增强,p53wt转染组及p53wt、p16共转染组细胞迁移能力减弱,且以后者下降更为显著,P<0.001。Transwell小室侵袭实验提示,空白对照组与阴性对照组细胞的侵袭能力差异无统计学意义(P>0.05),p53mut转染组细胞侵袭能力增强,p53wt转染组及p53wt、p16共转染组细胞侵袭能力减弱,且以后者减弱更为明显,P<0.001。流式细胞术检测提示,空白对照组与阴性对照组G1期细胞比例差异无统计学意义(P>0.05),而p53wt转染组及p53wt、p16共转染� 展开更多
关键词 肺腺癌 突变型p53 野生型p53 p16
原文传递
宫颈鳞癌组织中HPVE6与野生型p53和PinX1表达的关系及其临床意义 被引量：5
3
作者 王婉 黄团明 +2 位作者 王滨 闫晓欢 郑英如 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期782-786,共5页
目的探讨宫颈鳞癌、宫颈鳞癌癌旁及正常宫颈组织中HPV E6、野生型p53及Pin X1表达及其关系。方法收集第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科2013年3月至2014年2月17例宫颈鳞癌患者宫颈鳞癌、宫颈鳞癌癌旁组织,选取10例正常宫颈组织... 目的探讨宫颈鳞癌、宫颈鳞癌癌旁及正常宫颈组织中HPV E6、野生型p53及Pin X1表达及其关系。方法收集第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科2013年3月至2014年2月17例宫颈鳞癌患者宫颈鳞癌、宫颈鳞癌癌旁组织,选取10例正常宫颈组织作为对照。采用Real-Time PCR、Western blot、免疫组织化学方法检测3组组织中HPV E6、野生型p53和Pin X1的mRNA、蛋白的表达及分布。结果宫颈鳞癌组织中mRNA及蛋白水平结果均显示HPV E6的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),而野生型p53和Pin X1的表达水平明显低于癌旁及正常组织(P<0.05)。相关性分析提示:宫颈鳞癌组织中野生型p53(R=-0.605,P<0.01)和Pin X1(R=-0.496,P<0.05)表达水平的下降与HPV E6的表达水平升高存在负相关,野生型p53与Pin X1的表达呈正相关(R=0.824,P<0.01)。结论宫颈鳞癌组织中HPV E6表达上调与野生型p53、Pin X1的表达负相关,Pin X1的表达与野生型p53密切相关,HPV E6可能通过抑制野生型p53、Pin X1导致宫颈鳞癌的发生、发展。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 HpV E6 野生型p53 pinX1
下载PDF
外源性P_(53)基因转染的人肝癌细胞化疗药物敏感性的研究 被引量：4
4
作者 杨晓红 唐恩洁 任碧轩 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期148-149,共2页
目的　探讨外源性P53基因转染对人肝癌细胞系HepG 2化疗敏感性的影响。方法　将人野生型P53基因表达载体导入HepG 2细胞中,经筛选和鉴定后,采用MTT法观察其对甲氨蝶呤(MTX)和足叶乙甙(VP16 )作用后的HepG 2细胞生长抑制及凋亡的影响。... 目的　探讨外源性P53基因转染对人肝癌细胞系HepG 2化疗敏感性的影响。方法　将人野生型P53基因表达载体导入HepG 2细胞中,经筛选和鉴定后,采用MTT法观察其对甲氨蝶呤(MTX)和足叶乙甙(VP16 )作用后的HepG 2细胞生长抑制及凋亡的影响。结果　外源性P53基因在转染细胞中有效表达。增强了MTX和VP16对HepG 2细胞生长抑制并促进了药物诱导的细胞凋亡。结论　外源性P53基因能增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 野生型p53基因 人肝癌细胞系 化疗敏感性
下载PDF
5-氟尿嘧啶对人胃癌细胞系p53β表达的影响 被引量：2
5
作者 马景荣 王玉凤 +1 位作者 高志星 季万胜 《潍坊医学院学报》 2014年第1期57-59,共3页
目的检测5-氟尿嘧啶(5-FU)对人胃癌细胞株MKN45及SGC-7901 p53,p53β表达的影响。方法将不同浓度5-FU作用细胞48h,用western-blot检测p53及P53β在蛋白水平表达的变化。结果 Westernblot结果显示,化疗药物5-FU作用MKN45胃癌细胞48h后,p... 目的检测5-氟尿嘧啶(5-FU)对人胃癌细胞株MKN45及SGC-7901 p53,p53β表达的影响。方法将不同浓度5-FU作用细胞48h,用western-blot检测p53及P53β在蛋白水平表达的变化。结果 Westernblot结果显示,化疗药物5-FU作用MKN45胃癌细胞48h后,p53,P53β较未加药组表达增加,并且随药物浓度的增加其表达也随之增高,人正常胃黏膜细胞中p53,p53β的表达低于药物干预后的胃癌细胞;而相同条件下,在SGC-7901细胞系中,随药物浓度的增加p53,p53β的表达无明显变化。结论 5-FU能够抑制表达野生型p53人胃癌细胞系MKN45的增殖,并能上调p53,p53β的表达,推测p53β异构体参与的p53途径是5-FU诱导的肿瘤生长抑制的重要途径之一。5-FU能够抑制人胃中分化腺癌细胞SGC-7901的增殖,但与p53,p53β无明显关联。 展开更多
关键词 p53 p53β 5-氟尿嘧啶 野生型p53 突变型p53
下载PDF
HSV-tk与p53基因对涎腺多形性腺瘤细胞的杀伤作用 被引量：3
6
作者 王旭 王洁 +2 位作者 董福生 董玉英 侯亚丽 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期65-68,共4页
目的　观察腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV_tk)基因、野生型p53基因(wt_p53)联合杀伤人涎腺 多形性腺瘤细胞的效果。方法　采用腺病毒介导的HSV_tk基因、wt_p53基因联合转染人涎腺多形性腺瘤细胞,逆 转录聚合酶链式反应(RT... 目的　观察腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV_tk)基因、野生型p53基因(wt_p53)联合杀伤人涎腺 多形性腺瘤细胞的效果。方法　采用腺病毒介导的HSV_tk基因、wt_p53基因联合转染人涎腺多形性腺瘤细胞,逆 转录聚合酶链式反应(RT_PCR)检测转染后的基因表达;四唑盐比色(MTT)法测定tk与p53基因治疗后对肿瘤细 胞的杀伤作用及旁观者效应,并采用相差显微镜观察基因治疗后肿瘤细胞的形态学变化。结果　单独转染wt_p53 及HSV_tk GCV基因5d后,涎腺多形性腺瘤细胞的存活率分别为54%和38%;两者联合转染5d后,细胞的存活率 降至20%,两者差异有显著性(P<0.05)。结论　HSV_tk、wt_p53基因联合应用对涎腺多形性腺瘤的杀伤作用强于 此两基因单独应用的杀伤作用。 展开更多
关键词 腺瘤 涎腺 基因治疗 野生型p53 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因
下载PDF
野生型-p53与JunB融合基因对裸鼠肝细胞肝癌移植瘤的抑制作用 被引量：4
7
作者 郭成 段建峰 +4 位作者 刘青光 张雷 杨雪 宋涛 姚英民 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期703-706,共4页
目的探讨野生型(wt)-p53与JunB融合基因抑制裸鼠肝细胞肝癌(肝癌)移植瘤的作用。方法将18只BALB/c裸鼠按随机数字表法随机分为实验组、阴性对照组和空白对照组,每组6只,分别接种wt-p53与JunB融合基因质粒、携带GFP的空质粒及单纯肝癌细... 目的探讨野生型(wt)-p53与JunB融合基因抑制裸鼠肝细胞肝癌(肝癌)移植瘤的作用。方法将18只BALB/c裸鼠按随机数字表法随机分为实验组、阴性对照组和空白对照组,每组6只,分别接种wt-p53与JunB融合基因质粒、携带GFP的空质粒及单纯肝癌细胞HepG2,于注射后的28d处死荷瘤裸鼠,测量肿瘤体积、肿瘤重量,计算肿瘤抑制率。结果 3组裸鼠移植瘤位于背侧皮下,实验组裸鼠移植瘤较小,阴性对照组与空白对照组裸鼠移植瘤均明显隆起于裸鼠背部皮下。实验组移植瘤的体积、重量明显小于阴性对照组,差异均有统计学意义(LSD-t=4.63,P=0.006;LSD-t=19.56,P<0.01);实验组移植瘤的体积、重量也明显小于空白对照组,差异均有统计学意义(LSD-t=5.74,P=0.002;LSD-t=27.22,P<0.01);阴性对照组与空白对照组间移植瘤的体积、重量差异无统计学意义(LSD-t=1.59,P=0.171;LSD-t=2.00,P=0.101)。实验组平均肿瘤抑制率为84%。结论 wt-p53和JunB融合基因可明显抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长。 展开更多
关键词 野生型-p53 JUNB 融合基因 转染 HEpG2 裸鼠移植瘤
下载PDF
野生型p53对热休克蛋白90β基因表达的调控作用 被引量：2
8
作者 张业 崔玉坤 +1 位作者 吴宁华 沈珝琲 《基础医学与临床》 CSCD 2000年第3期76-79,共4页
为了阐明野生型p53分热休克蛋白90β（hsp90β）基因表达调控中的作用，我们利用野生型p53的表达质粒转染Jurkat细胞，发现野生型p53可以剂量依赖方式抑制hsp90β基因的启动子活性，并且证实hsp90β基因的表达在mRNA和蛋白水平均明显减少。
关键词 HSp90Β基因 基因表达调控 p53 热休克蛋白
下载PDF
E1A基因对鼻咽癌细胞放射敏感性影响的初步实验研究 被引量：2
9
作者 肖华平 陈建武 +1 位作者 廖遇平 周蓉蓉 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第6期489-491,共3页
目的探讨E1A基因对鼻咽癌细胞放射增敏作用及相关机制。从而为提高鼻咽癌放射治疗疗效提供实验依据。方法经腺病毒介导，将E1A基因导入人鼻咽癌细胞系CNE2细胞。经RT-PCR鉴定，获得含E1A的阳性克隆。将未转染的CNE2细胞、转染对照空载体... 目的探讨E1A基因对鼻咽癌细胞放射增敏作用及相关机制。从而为提高鼻咽癌放射治疗疗效提供实验依据。方法经腺病毒介导，将E1A基因导入人鼻咽癌细胞系CNE2细胞。经RT-PCR鉴定，获得含E1A的阳性克隆。将未转染的CNE2细胞、转染对照空载体Ad-B-gal的CNE2细胞和转染Ad-E1A的CNE2细胞用6MVX线分别照射0、2、4、6、8Gy后进行成克隆分析并绘制细胞存活曲线，计算放射增敏比。流式细胞术和RT—PCR检测转染前后的细胞周期分布以及wtp53表达情况。结果转染后阳性克隆细胞RT—PCR结果说明E1A已整合到细胞基因组中并且稳定表达。细胞存活曲线结果显示转染E1A的CNE2细胞放射增敏比分别为1．37（D0值比）、1．95（Dq值比）、1．46（SF2值比）。未转染及空载体转染后的CNE2细胞照射后细胞存活曲线分析结果显示无差异，D0、Dq、SF2值分别为1．57Gy及1．53Gy、1．82Gy及1．78Gy、0．89及0．82。流式细胞术显示细胞周期出现G2＋M期阻滞，RT-PCR结果显示E1A基因能提高wtp53的表达。结论E1A基因能显著提高人鼻咽癌细胞的放射敏感性，其作用机制可能与E1A基因提高wtp53基因的表达和引起G2＋M期阻滞有关。 展开更多
关键词 细胞系 鼻咽癌 E1A基因 放射增敏 野生型p53
原文传递
ERK抑制对乳腺癌细胞(MCF-7)PCAF的影响和意义 被引量：2
10
作者 李苏华 邓华瑜 郑维萍 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1155-1159,共5页
目的:研究ERK抑制在雌激素对乳腺癌细胞MCF-7促细胞周期转化、抗凋亡过程中核受体辅激活因子PCAF及野生型p53蛋白的表达、转录水平变化,探讨ERK通过PCAF对雌激素受体信号通路的作用和机理。方法:以雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7为研究... 目的:研究ERK抑制在雌激素对乳腺癌细胞MCF-7促细胞周期转化、抗凋亡过程中核受体辅激活因子PCAF及野生型p53蛋白的表达、转录水平变化,探讨ERK通过PCAF对雌激素受体信号通路的作用和机理。方法:以雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7为研究对象,实验分组为17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)处理组、17β-E2+ERK抑制剂PD98059处理组和细胞对照组。流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期;Western blot检测P-ERK1/2、PCAF和野生型P53蛋白水平;RT-PCR检测野生型PCAFmRNA、p53mRNA水平。结果:应用ERK磷酸化抑制剂PD98059后,能抑制17β-E2抗MCF-7细胞凋亡的作用,使细胞早期凋亡率增加,其差异具有统计学意义(P<0.05);能抑制17β-E2促进MCF-7细胞周期转化作用,使G1期细胞增加,S期和G2期细胞减少,其差异具有显著统计学意义(P<0.01);PCAF和P-ERK1/2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),PCAFmRNA转录水平差异无统计学意义(P>0.05);野生型P53蛋白表达和p53mRNA转录水平升高(P<0.01)。结论:ERK在17β-E2抗乳腺癌细胞MCF-7凋亡、促细胞周期转化中的作用与PCAF增强雌激素受体信号及野生型p53蛋白表达和基因转录水平改变有关。 展开更多
关键词 17Β-雌二醇 pD98059 ERK pCAF 野生型p53 乳腺癌
下载PDF
奥曲肽诱导人肝癌细胞Hep G2凋亡
11
作者 谢怡 《重庆医学》 CAS CSCD 2005年第7期1037-1038,共2页
目的探讨奥曲肽诱导人肝癌细胞HepG2凋亡作用及机理。方法采用DNA末端原位标记染色法(TUNEL)、AnnexinⅤ荧光标记法分别检测肝癌细胞早期和晚期凋亡,细胞免疫化学法检测p53表达。结果1×10-5mol/L奥曲肽使HepG2细胞早期凋亡阳性率... 目的探讨奥曲肽诱导人肝癌细胞HepG2凋亡作用及机理。方法采用DNA末端原位标记染色法(TUNEL)、AnnexinⅤ荧光标记法分别检测肝癌细胞早期和晚期凋亡,细胞免疫化学法检测p53表达。结果1×10-5mol/L奥曲肽使HepG2细胞早期凋亡阳性率和凋亡指数(AI)增加至(14.2±2.6)%和(18.8±3.3)%,与对照组(1.2±0.1)%(P<0.05)和(3.6±0.9)%(P<0.01)比较差异显著;该浓度奥曲肽能明显增加HepG2细胞野生型wp53表达(P<0.05)。结论奥曲肽能诱导肝癌细胞早期及晚期凋亡,这和奥曲肽能使HepG2肝癌细胞wp53表达增加有关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 奥曲肽 凋亡 野生型p53
下载PDF
制备两种p53重组腺病毒和流式细胞仪定量外源绿荧光蛋白表达
12
作者 汪惠 赖百塘 +4 位作者 李伟英 杨学惠 张春燕 韦攀健 李金照 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第5期470-476,共7页
背景与目的p53作为转录因子,在细胞应激时呈活化型,可调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长,通常通过各种机制可使p53呈现非活化状态,其中包括p53C-末端负调控序列的作用。本研究旨在制备携带全长和缺失这些负调控序列p53的两种重组腺... 背景与目的p53作为转录因子,在细胞应激时呈活化型,可调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长,通常通过各种机制可使p53呈现非活化状态,其中包括p53C-末端负调控序列的作用。本研究旨在制备携带全长和缺失这些负调控序列p53的两种重组腺病毒,并采用流式细胞仪散点图(flow cytometry scatter plot,FCM)检测人肺癌细胞外源绿荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)表达。方法利用pAdEasy-Track载体系统,构建两种p53重组质粒并在细菌中产生重组体,转染L293细胞产生三种重组腺病毒,测序证明。三种不同浓度病毒分别感染人肺癌801D细胞,FCM scatter plot检测其GFP表达。结果测序证明重组腺病毒:Ad-p53(del)缺失p53C-末端终止密码子前111个碱基和非编码区,Ad-p53(wtp)无p53碱基缺失。Ad-(empty carrier)无p53。FCM scatter plot显示三种病毒感染801D细胞表达GFP百分率接近并随病毒浓度递增。801D包含了不同荧光强度比率的细胞。结论构建和制备了去C-末端p53和全长p53的两种重组腺病毒:Ad-p53(del)、Ad-p53(wtp)及空载体Ad-(empty carrier)。流式细胞仪散点图证明该病毒试验系统可靠,可定量外源GFP表达为病毒感染细胞选择浓度提供准确方法。 展开更多
关键词 野生型p53 缺失C-末端p53 3’端非编码区 重组腺病毒 流式细胞仪散点图 绿荧光蛋白表达
下载PDF
显微注射法建成野生型p53转基因小鼠 被引量：1
13
作者 谢卫兵 陈汉源 +2 位作者 余焱林 曾位森 罗琛 《第一军医大学学报》 CSCD 1997年第3期233-235,共3页
用显微注射法将野生型p53基因导入C57BL／6J×SJL杂交F1代受精卵的雄性原核中，以ICR品系小鼠为假孕母鼠。结果出生37只原代小鼠，其中有13只在检测前不明原因死亡，其余的24只原代小鼠中有2只基因组中整合有p53基因，整合率为8.3％。
关键词 显微注射 野生型 p53基因 转基因小鼠 抑癌基因
下载PDF
外源性p53基因导入对乳腺癌细胞系MCF-7中MDM2表达的影响 被引量：1
14
作者 聂明辉 戚林 +1 位作者 李志生 王巍 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第8期1048-1050,共3页
目的:探讨野生型p53导入对乳腺癌细胞系MCF-7生存的影响,及对MDM2表达的影响。方法:人腺病毒p53注射液处理人乳腺癌细胞系MCF-7,将野生型p53基因导入细胞中,用MTT和流式细胞仪研究两组MCF-7细胞的增殖凋亡情况,Western blot检测MDM2蛋... 目的:探讨野生型p53导入对乳腺癌细胞系MCF-7生存的影响,及对MDM2表达的影响。方法:人腺病毒p53注射液处理人乳腺癌细胞系MCF-7,将野生型p53基因导入细胞中,用MTT和流式细胞仪研究两组MCF-7细胞的增殖凋亡情况,Western blot检测MDM2蛋白表达情况。结果:外源性野生型p53基因导入组增殖能力低于对照组,凋亡率明显高于对照组,且外源性野生型p53基因导入组MDM2表达明显高于对照组。结论:野生型p53导入可以诱导人乳腺癌细胞系MCF-7凋亡增加,且可以上调MDM2的表达,这可能与外源性p53增加后其负反馈泛素化降解酶也增加有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 野生型p53 MDM2
下载PDF
尿刊酸修饰的壳聚糖介导野生型p53基因转染对人肺腺癌细胞系H1299增殖和凋亡的影响 被引量：1
15
作者 王伟 姚静 +2 位作者 周建平 李夷平 陶磊 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期440-444,共5页
目的:研究尿刊酸修饰的壳聚糖(UAC)介导野生型p53(wt-p53)基因转染对人肺腺癌细胞系H1299(p53基因缺失)的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法:UAC介导wt-p53基因转染H1299细胞后,采用荧光显微术、RT-PCR法和West-ernblot法分别检测细胞内绿... 目的:研究尿刊酸修饰的壳聚糖(UAC)介导野生型p53(wt-p53)基因转染对人肺腺癌细胞系H1299(p53基因缺失)的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法:UAC介导wt-p53基因转染H1299细胞后,采用荧光显微术、RT-PCR法和West-ernblot法分别检测细胞内绿色荧光蛋白(GFP)、wt-p53mRNA和蛋白的表达,并通过MTT法分析基因转染对细胞的生长抑制作用,DAPI染色法和琼脂糖凝胶电泳法评价其对细胞的诱导凋亡作用。结果:UAC介导wt-p53基因转染H1299细胞后,大量细胞表达GFP,细胞内wt-p53mRNA和蛋白表达水平明显上调,细胞生长受到显著地抑制,凋亡细胞数量明显增加,并有清晰的DNA梯状条带出现。结论:UAC介导wt-p53基因转染能够显著地抑制人肺腺癌细胞系H1299的增殖,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 尿刊酸修饰的壳聚糖 野生型p53 人肺腺癌细胞系 增殖 凋亡
下载PDF
新型阳离子聚合物非病毒载体介导野生型p53基因体外转染效果的研究
16
作者 王伟 王玉 +3 位作者 王若宁 徐苏颖 丁杨 周建平 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2011年第11期1227-1233,共7页
目的:研究新型阳离子聚合物非病毒载体———尿刊酸修饰的壳聚糖(UAC)介导野生型p53(wt-p53)基因体外转染人肝癌细胞系HepG2的效果。方法:载体UAC包裹含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因和wt-p53治疗基因的质粒(pEGFP-p53)转染HepG2细胞,利用... 目的:研究新型阳离子聚合物非病毒载体———尿刊酸修饰的壳聚糖(UAC)介导野生型p53(wt-p53)基因体外转染人肝癌细胞系HepG2的效果。方法:载体UAC包裹含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因和wt-p53治疗基因的质粒(pEGFP-p53)转染HepG2细胞,利用流式细胞术和荧光显微术检测细胞内GFP的表达,优选最佳转染条件;采用RT-PCR法检测细胞内p53mRNA的表达,流式细胞术评价基因转染对细胞周期的影响,Western blot法检测细胞内p53及其下游细胞周期调控蛋白的表达。结果:在低pH(pH=6.9)条件下,采用低壳聚糖分子量(20000)的UAC作为载体,与pEGFP-p53形成高N/P(N/P=30)的UAC/pEGFP-p53复合物转染HepG2细胞,可获得最佳转染效果;载体UAC介导wt-p53基因转染细胞后,p53mRNA表达水平明显上调,G0/G1期出现显著阻滞,p53、p21和Rb蛋白表达水平明显上调,cyclin D1和CDK4蛋白表达水平明显下调。结论:载体UAC可成功介导wt-p53基因转染HepG2细胞,并诱导其产生细胞周期阻滞。 展开更多
关键词 尿刊酸修饰的壳聚糖 野生型p53 基因转染 人肝癌细胞系 细胞周期阻滞
下载PDF
rAAV-LyoVec载体介导血管抑素及野生型P53治疗C6胶质瘤
17
作者 吴畏 吴辉 任常山 《中国医学工程》 2008年第3期192-195,共4页
目的探讨重组腺病毒相关病毒(recombinant adenovirus-associated virus,rAAV)-阳离子脂质体(LyoVec)载体介导血管抑素(Angiastain)及野生型P53(wild typeP53)联合基因治疗C6胶质瘤。方法构建新型载体rAAV-LyoVec,建立裸鼠C6胶质瘤模型... 目的探讨重组腺病毒相关病毒(recombinant adenovirus-associated virus,rAAV)-阳离子脂质体(LyoVec)载体介导血管抑素(Angiastain)及野生型P53(wild typeP53)联合基因治疗C6胶质瘤。方法构建新型载体rAAV-LyoVec,建立裸鼠C6胶质瘤模型,观察各组不同时间肿瘤体积变化,免疫组织化学分析血管抑素、野生型P53及相关蛋白产物的表达情况,RT-PCR确认血管抑素基因在分子水平表达,电镜观察C6细胞凋亡、病毒转染、组织坏死等,从组织,细胞,蛋白,分子水平研究rAAV-LyoVec载体介导血管抑素及野生型P53联合治疗C6胶质瘤的有效性。结果rAAV-LyoVec载体介导血管抑素及野生型P53基因联合治疗C6胶质瘤,对比血管抑素及野生型P53单基因治疗效果显著(P<0.05),免疫组织化学检测各组细胞P53、VEGF及CD34蛋白均有不同程度的表达。RT-PCR法检测血管抑素在rAAV-angiastain-LyoVec组及rAAV-P53-LyoVec+rAAV-angiastain-LyoVec组表达。结论联合基因治疗是治疗脑胶质瘤的有效方法。 展开更多
关键词 重组腺病毒相关病毒-阳离子脂质体载体 血管抑素 野生型p53 C6胶质瘤
下载PDF
肝癌特异性多靶点慢病毒的体外实验研究
18
作者 牛坚 赵何伟 +4 位作者 王文 于彬 刘斌 王学浩 张业伟 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期372-376,共5页
目的研究anti—AFPscFv（抗AFP单链抗体）介导的慢病毒（1entivirus）载体对表达AFP肝癌细胞特异性基因转移以及双靶点基因系统对肝癌细胞生长的抑制作用。方法用脂质体Lipofectamine 2000将目的基因转移载体、包装结构及包膜结构质粒... 目的研究anti—AFPscFv（抗AFP单链抗体）介导的慢病毒（1entivirus）载体对表达AFP肝癌细胞特异性基因转移以及双靶点基因系统对肝癌细胞生长的抑制作用。方法用脂质体Lipofectamine 2000将目的基因转移载体、包装结构及包膜结构质粒共转染包装细胞293T，大量收集病毒上清，过滤、浓缩。用携带AFP—WtP53-pPRIME—miR30-shRNA-IGF1R融合基因的慢病毒体外转染培养的肝癌细胞HEP3B。荧光显微镜下观察感染效果。用PCR、Western blotting鉴定WtP53、miR30-shRNA—IGF1R在细胞中的整合转录结果。CCK8观察重组慢病毒对肝癌细胞生长的影响，TUNEL检测细胞凋亡。结果成功构建anti—AFPscFv介导的慢病毒；滴度为4．58×10^9 PFU／ml；PCR、Western blotting均显示阳性条带，证明anti—AFP scFv介导的慢病毒在靶细胞中整合且转录表达。重组慢病毒对肝癌细胞的生长有明显的抑制作用且有促进细胞凋亡的作用。结论anti—AFPscFv介导的慢病毒可将双靶点基因系统高效靶向性转染、杀伤肝癌细胞。 展开更多
关键词 肝癌细胞 人胰岛素样生长因子1类受体 野生型p53 慢病毒
原文传递
超声微泡介导Rb94联合野生型p53基因对鼠视网膜母细胞瘤的抑制
19
作者 高睿骐 周希瑗 +1 位作者 杨映雪 王志刚 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期908-913,共6页
背景研究表明，野生型p53（wtp53）和Rb94基因对人视网膜母细胞瘤（RB）的生长均有抑制作用，这2个基因是诱导和维持细胞衰老信号通路中重要的参与基因，因此2个基因联合应用是否对RB的生长抑制效果更好是近来关注的问题。目的观察超声... 背景研究表明，野生型p53（wtp53）和Rb94基因对人视网膜母细胞瘤（RB）的生长均有抑制作用，这2个基因是诱导和维持细胞衰老信号通路中重要的参与基因，因此2个基因联合应用是否对RB的生长抑制效果更好是近来关注的问题。目的观察超声微泡介导Rb94联合wtp53基因转染裸鼠RB后对其凋亡的影响。方法将HXO—Rb44细胞悬液种植至40只雌性SPF级BALB／e裸鼠视网膜下腔建立RB动物模型，造模成功的裸鼠按随机数字表法平均分为模型对照组、wtp53质粒组（含wtp53质粒的微泡悬液）、Rb94质粒组（含Rb94质粒）和wtp53＋Rb94质粒组（联合组）（含wtp53质粒及Rb94质粒），其中模型对照组不做任何处理，其他3个组造模后第7天均由鼠尾静脉注入含相应基因的微泡悬液后，每天以0．5W／cm^2。超声波辐照眼球4S，间隔24S，循环2次。转染基因超声辐照7d摘除肿瘤组织，利用半定量逆转录PCR（RT—PCR）法检测肿瘤组织中wtp53mRNA及Rb94mRNA的表达；采用Western blot法检测基因转染的肿瘤组织中wtp53及Rb94蛋白的表达；用免疫组织化学法测定肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达；采用TUNEL法检测基因转染后肿瘤组织的凋亡情况，计算凋亡指数（AI）。结果HXO-Rb44细胞悬液视网膜下腔注射后移植瘤构建的成功率为80％（32／40），常规组织病理学检查提示检测样本的细胞异型性明显。基因转染后7d，模型对照组无wtp53mRNA及Rb94mRNA的表达条带；wtp53组wtp53mRNA相对值为0．65±0．07，wtp53＋Rb94组为0．32±0．02，差异有统计学意义（t=11．743，P=0．000）；Rb94组Rb94mRNA相对值为0．42±0．03，wtp53＋Rb94组为0．23±0．03，差异有统计学意义（t=5．041，P=0．001）。wtp53、Rb94或wtp53＋Rb94转染后，各组可见与转染相应的蛋白表达条带，wtp53＋Rb94组可同时检测到wtp53及Rb94蛋白的表达条带，但模型对照组� 展开更多
关键词 基因转染/Rb94 野生型p53 超声微泡造影剂 视网膜母细胞瘤 凋亡
下载PDF
白藜芦醇联合野生型p53质粒诱导非小细胞肺癌H1299细胞凋亡
20
作者 张平 杜爱萍 黄霞丽 《襄阳职业技术学院学报》 2021年第2期89-92,107,共5页
目的实验以非小细胞肺癌H1299细胞(简称H1299细胞)为研究对象,主要探讨白藜芦醇联合野生型p53质粒对H1299细胞凋亡作用的影响以及进一步探讨其作用机制。方法在H1299细胞中导入野生型p53质粒,加入不同浓度的白藜芦醇,通过MTT法确定白藜... 目的实验以非小细胞肺癌H1299细胞(简称H1299细胞)为研究对象,主要探讨白藜芦醇联合野生型p53质粒对H1299细胞凋亡作用的影响以及进一步探讨其作用机制。方法在H1299细胞中导入野生型p53质粒,加入不同浓度的白藜芦醇,通过MTT法确定白藜芦醇联合野生型p53质粒的最佳作用浓度,并检测白藜芦醇联合野生型p53质粒对细胞增殖的影响;光镜下观察细胞形态学的变化;流式细胞术检测白藜芦醇联合野生型p53质粒对H1299细胞凋亡率的影响;RT-PCR实验方法检测细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase3、Caspase9的表达水平。结果白藜芦醇联合野生型p53质粒能明显抑制H1299细胞的增殖,诱导H1299细胞凋亡,明显抑制Bcl-2基因的表达水平,促进Bax、caspase3、caspase9基因的表达水平。结论白藜芦醇联合野生型p53质粒能够明显抑制H1299细胞的增殖,可能通过促凋亡基因Bax、凋亡蛋白酶Caspase3,Cas⁃pase9的表达,抑制抑凋亡基因Bcl-2的表达,从而激活细胞中线粒体介导的凋亡通路,诱导H1299细胞凋亡。 展开更多
关键词 白藜芦醇 非小细胞肺癌 H1299细胞 野生型p53 凋亡
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 4 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部