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4种全自动核酸提取仪提取全血DNA效率的比较 被引量：6
1
作者 沙燕华 黄宪章 +5 位作者 黄小亭 曹顺旺 熊玉娟 柯培锋 林海标 陈曲波 《国际医药卫生导报》 2019年第15期2487-2490,共4页
目的比较4种全自动核酸提取仪在全血基因组检测中的核酸提取效果。方法分别用4个厂家的全自动核酸提取仪按预定的提取程序自动执行全血核酸提取,并与本实验室手工提取的核酸进行纯度和浓度比较。结果 4种全自动核酸提取仪提取全血核酸的... 目的比较4种全自动核酸提取仪在全血基因组检测中的核酸提取效果。方法分别用4个厂家的全自动核酸提取仪按预定的提取程序自动执行全血核酸提取,并与本实验室手工提取的核酸进行纯度和浓度比较。结果 4种全自动核酸提取仪提取全血核酸的260/280值均满足纯度1.7~2.0要求,并且核酸提取浓度高于本实验手工提取法或与本实验室手工提取法相当。结论 这4种全自动核酸提取仪提取效果优,自动化程度高,能满足临床标本应用。 展开更多
关键词 全自动核酸提取仪 磁珠分离 分子生物学 全血dna
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改良全血DNA提取法的质量与效度分析
2
作者 左文博 王嘉政 +3 位作者 徐颖 杨小婷 倪维 胡松 《江汉大学学报（自然科学版）》 2020年第5期42-46,共5页
目的为适应大批量提取外周血DNA需求,针对现有试剂盒提取法进行改良。方法将武汉地区健康人群血液样本80份,随机分为两组,每组40份。分别采用改良全血DNA提取法和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)DNA提取法提... 目的为适应大批量提取外周血DNA需求,针对现有试剂盒提取法进行改良。方法将武汉地区健康人群血液样本80份,随机分为两组,每组40份。分别采用改良全血DNA提取法和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)DNA提取法提取DNA,比较其效度和质量。结果通过比较分析实验时间、提取DNA的质量、纯度和PCR结果,发现改良全血DNA提取法提取的时间显著少于全血PBMC DNA提取法,提取DNA质量显著高于全血PBMC DNA提取法(P<0.05),而两种方法提取的基因组DNA的OD260/OD280数值差异无统计学意义(P>0.05),且PCR产物均可见单一且明亮的条带。结论本实验中改良全血DNA提取法是一种快速、经济、高效的DNA提取方法,可在临床移植配型、临床基因多样性检测中发挥作用。 展开更多
关键词 改良全血dna提取法 全血PBMC dna提取法 基因组dna
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全血DNA滤纸片中HIV1前病毒基因的PCR检测
3
作者 鲁晓晴 周晓彬 +3 位作者 王斌 路永波 罗兵 李怡 《山西医药杂志》 CAS 1998年第5期393-396,共4页
建立套式引物聚合酶链式反应检测全血ＤＮＡ滤纸片中的ＨＩＶ１前病毒基因ｐｏ１ＤＮＡ片段。分别采集１２例ＨＩＶ１感染者的外周血约５０μｌ，经与ＥＤＴＡ－蛋白酶ｋ孵育后滴在无菌滤纸片上，３７℃下干燥，将滤纸片密封于塑料袋中... 建立套式引物聚合酶链式反应检测全血ＤＮＡ滤纸片中的ＨＩＶ１前病毒基因ｐｏ１ＤＮＡ片段。分别采集１２例ＨＩＶ１感染者的外周血约５０μｌ，经与ＥＤＴＡ－蛋白酶ｋ孵育后滴在无菌滤纸片上，３７℃下干燥，将滤纸片密封于塑料袋中，在４℃及室温下保存１周～６０周后，分别将滤纸片置０．５ｍｌ试管中直接进行ＨＩＶ１ｐｏ１基因的外侧引物ＰＣＲ检测，然后进行内侧引物的ＰＣＲ检测。结果表明，全血ＤＮＡ滤纸片在室温下保存２８周，在４℃下保存３４周仍可检出ＨＩＶ１目的基因。根据ＰＣＲ产物的琼脂糖凝胶电泳溴化乙啶染色带形并参比实验设立的标准对照可直接判断结果。该方法具有快速、特异、敏感的特点，敏感性可以达到检出１０个靶ＤＮＡ分子。 展开更多
关键词 艾滋病 HIV病毒 全血dna 聚合酶链反应
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全血EBV DNA载量检测在儿童EB病毒感染中的应用价值 被引量：3
4
作者 胡荣盛 徐亚丽 +1 位作者 俞晓春 薛静俊 《浙江医学》 CAS 2014年第9期766-769,共4页
目的 评价全血EBV DNA载量检测在儿童EB病毒(EBV)感染中的应用价值。方法 将231例EBV活动感染儿童(原发感染174例,复发感染57例)、258例非活动EBV感染儿童(EBV既往感染)、45例无EBV感染健康儿童采用自动核酸提取实时荧光定量PCR法检... 目的 评价全血EBV DNA载量检测在儿童EB病毒(EBV)感染中的应用价值。方法 将231例EBV活动感染儿童(原发感染174例,复发感染57例)、258例非活动EBV感染儿童(EBV既往感染)、45例无EBV感染健康儿童采用自动核酸提取实时荧光定量PCR法检测全血EBV DNA载量,探讨其与EBV感染的关系。结果 EBV活动性感染组全血EBV DNA阳性率81.8%,全血EBV DNA载量为(3.99±0.96)Ig Copies/mI。EBV原发感染组与复发感染组的全血EBV DNA阳性率差异无统计学意义(x^2=0.419,P=0.517)。EBV DNA载量差异无统计学意义(t=1.236,P=0.221)。非活动EBV感染儿童组全血EBV DNA阳性率10 9%,全血EBV DNA载量为(2.89±0.20)lq Copies/ml。EBV活动性感染组与非活动性感染组的全血EBV DNA阳性率差异有统计学意义(x^2=251.600,P=0.0001),全血EBV DNA载量差异有统计学意义(t=3.389,P=0.001)。非EBV感染组全血EBV DNA阳性率0。EBV原发感染组中,全血EBV DNA阳性率(82 7%)高于EBV-CA IgM阳性率(75.8%),差异有统计学意义(x^2=6.160,P=0.008),两者结果一致性不佳(Kappa=0.687)。以全血EBV DNA载量检测阳性作为诊断依据,敏感度75.9%,特异度91.2%,诊断符合率84.4%;在全血E—BV DNA载量为3.001gCopies/mI时,是判断儿童EBV活动性感染的最佳临界点,敏感度70.1%,特异度95.3%,诊断符合率83.4%。结论全血EBV DNA载量是监测EBV活动性感染的独立指标,在儿童EBV感染诊断、疗效观察和愈后评估中的具有重要意义。 展开更多
关键词 儿童 dna载量 EB病毒 活动性感染
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