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胃复方调控HIF-1α/VEGF信号通路抑制胃癌细胞增殖及血管生成机制研究 被引量：4
1
作者 孙蕊 李东芳 《新中医》 CAS 2023年第17期157-164,共8页
目的:观察不同浓度胃复方水提物(WFF)对人胃癌HGC-27细胞的增殖抑制作用,进一步探讨WFF调控HIF-1α/VEGF信号通路的作用机制。方法:采用不同浓度(1.2 mg/mL、1.3 mg/mL、1.4 mg/mL、1.5 mg/mL、1.6 mg/mL、1.7 mg/mL、1.8 mg/mL)的WFF,C... 目的:观察不同浓度胃复方水提物(WFF)对人胃癌HGC-27细胞的增殖抑制作用,进一步探讨WFF调控HIF-1α/VEGF信号通路的作用机制。方法:采用不同浓度(1.2 mg/mL、1.3 mg/mL、1.4 mg/mL、1.5 mg/mL、1.6 mg/mL、1.7 mg/mL、1.8 mg/mL)的WFF,CCK-8法寻找最佳干预浓度并观察不同的干预组别[非特异性对照组(NC组)、WFF组、WFF+HIF-1α过表达质粒组、WFF+2-MeOE2 (HIF-1α抑制剂)组、HIF-1α过表达质粒组、2-MeOE2组、甲磺酸阿帕替尼组]对HGC-27细胞增殖的影响;运用血管生成实验观察不同组别对胃癌细胞血管生成能力的影响;进一步采用Western blot法观察不同组别[NC组、WFF组、WFF+HIF-1α过表达质粒组、WFF+2-MeOE2组(HIF-1α抑制剂)、HIF-1α过表达质粒组、2-MeOE2组]对HIF-1α/VEGF信号通路相关蛋白表达的影响。结果:CCK-8法验证了WFF与NC组比较,对HGC-27细胞增殖具有抑制作用,差异有统计学意义(P<0.01),且呈剂量依赖性。与NC组比较,WFF组、WFF+HIF-1α过表达质粒组、WFF+2-MeOE2 (HIF-1α抑制剂)组、2-MeOE2组、甲磺酸阿帕替尼组对HGC-27细胞增殖具有抑制作用,差异有统计学意义(P<0.01);与WFF组比较,WFF+HIF-1α过表达质粒组细胞活性增高,差异有统计学意义(P<0.01),WFF+2-MeOE2组活性降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与HIF-1α过表达质粒组比较,WFF+HIF-1α过表达质粒组有效抑制了HGC-27细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.01);与2-MeOE2组比较,WFF+2-MeOE2组有效抑制了HGC-27细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.01)。血管生成实验验证了WFF有效降低了人胃癌HGC-27细胞血管生成能力,除HIF-1α过表达质粒组外,其余各组与NC组比较,均降低了HGC-27细胞血管生成能力,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与WFF组比较,WFF+HIF-1α过表达质粒组,成管数目、交叉点、网眼数及长度增多,差异有统计学意义(P<0.01),WFF+2-MeOE2组,成管数目、交叉点、网眼数及长度减少,差异有统计学意义(P<0.0 展开更多
关键词 胃癌 胃复方 增殖 抗血管生成 HIF-1α/VEGF
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胃复方干预SGC-7901荷瘤裸鼠的血浆非靶标代谢组学研究
2
作者 唐麒 孙蕊 +3 位作者 卞希岚 焦蕉 李淑敏 李东芳 《肿瘤药学》 CAS 2024年第3期261-270,共10页
目的利用超高效液相色谱-质谱(UHPLC-MS)非靶标技术探索胃复方干预SGC-7901荷瘤裸鼠的潜在代谢通路,为研究胃复方的体内代谢机制提供基础。方法将胃癌细胞SGC-7901接种于6只裸鼠右侧乳垫处皮下,制备供瘤鼠模型。供瘤鼠瘤块长至10 mm... 目的利用超高效液相色谱-质谱(UHPLC-MS)非靶标技术探索胃复方干预SGC-7901荷瘤裸鼠的潜在代谢通路,为研究胃复方的体内代谢机制提供基础。方法将胃癌细胞SGC-7901接种于6只裸鼠右侧乳垫处皮下,制备供瘤鼠模型。供瘤鼠瘤块长至10 mm×10 mm左右时,剥离瘤体进行鼠间传代接种,建立SGC-7901皮下移植瘤模型。将24只实验鼠按随机数字表法分为对照组和胃复方高、中、低剂量组,每组6只。对照组裸鼠每天给予0.2 mL生理盐水灌胃,胃复方高、中、低剂量组裸鼠每天给予0.2 mL相应药物灌胃,均连续给药14 d。通过祼鼠体质量、瘤体质量、抑瘤率分析干预效果,采用HE染色观察肿瘤标本。使用R程序包提取代谢物信息后,运用SIMCA软件进行主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),在Metabo Analyst软件中筛选出意义最大的代谢通路。结果与对照组比较,中剂量胃复方抑制肿瘤生长效果较好(P<0.05),抑瘤率为35.97%,其次是高剂量和低剂量(P<0.05),抑瘤率分别为30.29%、30.07%。给药14 d内,对照组裸鼠体质量均高于胃复方高、中、低剂量组;第11天起,胃复方高、中剂量组裸鼠体质量均明显低于对照组(P<0.05)。胃复方干预荷瘤裸鼠后,筛选出19种显著差异代谢物,包括甜菜碱、葫芦巴碱、水苏碱、蛋氨酸亚砜、L-酪氨酸、2,3-二羟基-3-甲基丁酸酯、肌酸、鸟氨酸、L-脯氨酸、N-乙酰亮氨酸等,其中精氨酸和脯氨酸代谢通路,烟酸和烟酰胺代谢通路,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸代谢通路为3条关键代谢通路。结论胃复方能抑制SGC-7901荷瘤裸鼠肿瘤生长,可能与调节体内氨基酸代谢通路有关。 展开更多
关键词 胃复方 胃癌 氨基酸代谢 代谢组学 裸鼠
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基于网络药理学和实验验证探讨胃复方对胃癌的效应及作用机制
3
作者 刘丝雨 李东芳 +3 位作者 何迎春 唐麒 孙蕊 邓振中 《肿瘤药学》 2023年第6期719-728,共10页
目的 基于网络药理学探究胃复方治疗胃癌的作用机制。方法 应用中药系统药理学数据库及分析平台、DrugBank、GeneCards等数据库检索胃复方所含12味中药的有效化学成分及治疗胃癌的潜在靶点,将潜在靶点导入DAVID数据库进行基因本体论(GO... 目的 基于网络药理学探究胃复方治疗胃癌的作用机制。方法 应用中药系统药理学数据库及分析平台、DrugBank、GeneCards等数据库检索胃复方所含12味中药的有效化学成分及治疗胃癌的潜在靶点,将潜在靶点导入DAVID数据库进行基因本体论(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析,筛选出潜在的生物过程和涉及的信号通路。采用CCK-8及Western blotting对KEGG分析富集程度最大的信号通路进行验证。结果 胃复方治疗胃癌可能涉及以槲皮素、木樨草素为代表的88种有效活性成分,可能作用于以TP53、STAT3、Akt为代表的194个靶点。GO分析涉及148个生物过程,KEGG分析筛选出PI3K/Akt、TNF、HIF-1等信号通路。体外实验证实胃复方提取物可抑制人胃癌细胞HGC-27增殖,降低其p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白表达水平;而对于人正常胃黏膜上皮细胞GES-1,胃复方提取物可促进其增殖,上调其p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白表达。结论 本研究初步预测了胃复方治疗胃癌“中药-多成分-多靶点-多通路”的调控网络,并验证了胃复方提取物可能通过抑制PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达发挥抑制胃癌细胞增殖的作用,证明了网络药理学技术挖掘胃复方具有一定的可信度,但同时兼有不全面性,为进一步探索胃复方的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 网络药理学 胃复方 胃癌 PI3K/AKT
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胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞增殖影响的实验研究 被引量：3
4
作者 张顺荣 李东芳 +5 位作者 何寄琴 蒙菲 焦蕉 李玉明 周珉 吴鸿 《世界中西医结合杂志》 2019年第4期505-509,共5页
目的基于过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)、垂体肿瘤转化基因(PTTG)途径探讨胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞株增殖的影响。方法制备胃复方含药血浆,用不同浓度含药血浆作用人胃癌BGC-823细胞株,24 h、48 h、72 h后分别用MTS... 目的基于过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)、垂体肿瘤转化基因(PTTG)途径探讨胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞株增殖的影响。方法制备胃复方含药血浆,用不同浓度含药血浆作用人胃癌BGC-823细胞株,24 h、48 h、72 h后分别用MTS法检测细胞增殖抑制率并计算半数抑制率IC_(50)。并以1/4IC_(50)浓度胃复方含药血浆作用胃癌BGC-823细胞株72 h后,流式细胞术检测细胞凋亡变化、Western blot方法测定人胃癌BGC-823细胞中PPARγ、PTTG、原癌基因(c-Myc)、端粒酶亚单位(h TERT)蛋白表达情况。结果胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞有明显的增殖抑制作用,且呈剂量及时间依赖性,5%、10%、20%浓度的药物干预后各组间比较差异有统计学意义(P <0. 05),而10%浓度以上的各药物组细胞生长大部分停滞,24 h、48 h各组间比较差异无统计学意义(P> 0. 05),72 h各组间比较差异有统计学意义(P <0. 05)。胃复方含药血浆低、中、高剂量组IC_(50)分别为30. 32%、19. 37%、14. 69%。与空白组、PBS阴性对照组凋亡率比较,胃复方组凋亡率升高(P <0. 01)。与PBS阴性对照组比较,中剂量1/4IC_(50)含药血浆作用细胞72 h后,PPARγ蛋白表达升高(P <0. 05,P <0. 01),PTTG、c-Myc、hTERT蛋白表达下调(P <0. 01)。结论胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞有增殖抑制作用,呈时间和浓度依赖性;胃复方含药血浆可能通过上调PPARγ蛋白表达及下调PTTG、c-Myc、hTERT蛋白表达来抑制人胃癌BGC-823细胞增殖,从而诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃复方 胃癌BGC-823细胞株 增殖 PPARΓ
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基于PPARγ、PTEN基因探讨胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞的影响 被引量：2
5
作者 李东芳 李超年 +5 位作者 张顺荣 何寄琴 焦蕉 唐继云 何欣 周珉 《肿瘤药学》 CAS 2019年第4期565-571,共7页
目的观察胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞凋亡及PPARγ、PTEN表达的影响,并探讨其作用机制。方法通过灌胃给药制备胃复方含药血浆,采用MTS法检测胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞生长的影响,并确定后续给药浓度。将体外培养的人胃... 目的观察胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞凋亡及PPARγ、PTEN表达的影响,并探讨其作用机制。方法通过灌胃给药制备胃复方含药血浆,采用MTS法检测胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞生长的影响,并确定后续给药浓度。将体外培养的人胃癌BGC-823细胞随机分为胃复方含药血浆组(15%胃复方含药血浆)、空白对照组(15%磷酸缓冲盐溶液)、阳性对照组(15%氟尿嘧啶含药血浆)、阴性对照组(15%蒸馏水血浆),处理72 h后采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用RT-PCR法、蛋白质印迹法分别检测PPARγ、PTEN mRNA或蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,胃复方含药血浆组与阳性对照组的细胞凋亡率、PPARγmRNA及蛋白表达水平、PTEN mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与阴性对照组比较,胃复方含药血浆组与阳性对照组的细胞凋亡率、PPARγmRNA及蛋白表达水平、PTEN mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);但胃复方含药血浆组的细胞凋亡率、PPARγmRNA及蛋白表达水平、PTEN mRNA及蛋白表达水平均显著低于阳性对照组(P<0.05)。结论胃复方含药血浆可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡,其作用机制可能与活化的PPARγ上调PTEN表达有关。 展开更多
关键词 胃复方 含药血浆 PPARΓ PTEN BGC-823细胞 细胞凋亡
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胃复方对裸鼠胃癌BGC-823移植瘤及PPARγ表达的影响 被引量：2
6
作者 何寄琴 唐继云 +3 位作者 张顺荣 何欣 肖沛玲 李东芳 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2018年第6期500-506,511,共8页
[目的]通过观察胃复方对裸鼠胃癌BGC-823移植瘤及对过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨胃复方抑制裸鼠胃癌BGC-823移植瘤的可能机制。[方法]用不同浓度的胃复方药液处理BGC-823移植瘤裸鼠,观察不同剂量胃复方干预后瘤体... [目的]通过观察胃复方对裸鼠胃癌BGC-823移植瘤及对过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨胃复方抑制裸鼠胃癌BGC-823移植瘤的可能机制。[方法]用不同浓度的胃复方药液处理BGC-823移植瘤裸鼠,观察不同剂量胃复方干预后瘤体大小的变化,苏木精-伊红染色观察瘤体组织病理学改变、免疫组织化学和蛋白印迹法检测瘤体组织PPARγ的表达。[结果]胃复方能抑制裸鼠胃癌BGC-823移植瘤的生长,作用于移植瘤裸鼠2周后,5-Fu阳性对照组(5-Fu组)、胃复方低剂量组(低剂量组)、中剂量组、高剂量组的抑瘤率分别为30.67%、19.00%、49.52%、29.36%,以中剂量组最佳;通过免疫组织化学检测,蒸馏水组、5-Fu组、低剂量组、中剂量组、高剂量组PPAR-γ基因表达的IOD值分别为:0.04±0.02、0.05±0.01、0.05±0.01、0.09±0.02、0.06±0.01。胃复方中剂量组与其他各组比较,均差异有统计学意义(均P<0.05)。蛋白印迹法检测PPAR-γ基因表达,蒸馏水组、5-Fu组、低剂量组、中剂量组、高剂量组分别为:0.316 0±0.013 6、0.724 0±0.018 1、0.564 0±0.019 9、0.718 0±0.028 9、0.570 0±0.020 0,蒸馏水组与其他各组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);5-Fu组与中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05);5-Fu组与低剂量、高剂量组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。中剂量组与低、高剂量组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。[结论]胃复方可能通过上调PPARγ表达的途径来抑制胃癌BGC-823移植瘤的生长,且以1倍剂量效果最佳。 展开更多
关键词 胃复方 胃癌 移植瘤 过氧化物酶增殖激活受体γ
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