期刊文献+
共找到32篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
污水新型冠状病毒监测研究进展及启示 被引量:8
1
作者 侯敏 谢玉为 +10 位作者 毛怡心 张晓 张良 王园媛 郑和辉 顾雯 雒月云 周海健 姚孝元 张岚 唐宋 《环境科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期2647-2656,共10页
新冠肺炎疫情暴发以来,全球多个国家和地区频繁在污水中检测出新型冠状病毒核酸.开展基于污水流行病学的污水新型冠状病毒监测,可作为人群新冠肺炎监测的重要补充,获得的核酸浓度数据和序列突变分析结果,可为新冠肺炎疫情早期预警、早... 新冠肺炎疫情暴发以来,全球多个国家和地区频繁在污水中检测出新型冠状病毒核酸.开展基于污水流行病学的污水新型冠状病毒监测,可作为人群新冠肺炎监测的重要补充,获得的核酸浓度数据和序列突变分析结果,可为新冠肺炎疫情早期预警、早期发现无症状感染者、评估感染规模、监测人群流行趋势、开展病毒溯源调查、制定防控政策等提供科学依据.鉴于此,本文系统介绍了国内外污水中新型冠状病毒的来源及影响病毒存活的主要因素,归纳了常用的污水新型冠状病毒富集浓缩和核酸检测方法,概括了全球已开展的监测项目、进展及现存科学问题,指出了现有研究的局限性,包括缺乏污水中新型冠状病毒的分布特征及感染性研究、预测预警模型开发与应用不足等.为我国下一阶段新冠肺炎疫情或者未来可能出现的突发重大疫情的精准防控提供借鉴与参考,提升我国应对传染病及非传染病的预测预警、流行规模评估及精准施策的能力. 展开更多
关键词 污水流行病学 新冠肺炎 暴发 病毒变异 富集浓缩 检测方法 精准防控
下载PDF
水中诺如病毒的两种富集方法的效果比较 被引量:7
2
作者 金萍 石利民 +3 位作者 张韶华 江晓 王璇 王炜 《医学动物防制》 2021年第12期1215-1219,共5页
目的利用MCE-PEG(混合硝酸纤维素膜富集和聚乙二醇)沉淀法和超滤法富集水中诺如病毒,评估超滤法对水中诺如病毒的富集效果。方法向1 L纯净水中加入一定量的诺如病毒进行稀释后,分别利用MCE-PEG沉淀法和超滤法对诺如病毒进行富集,最后用... 目的利用MCE-PEG(混合硝酸纤维素膜富集和聚乙二醇)沉淀法和超滤法富集水中诺如病毒,评估超滤法对水中诺如病毒的富集效果。方法向1 L纯净水中加入一定量的诺如病毒进行稀释后,分别利用MCE-PEG沉淀法和超滤法对诺如病毒进行富集,最后用实时荧光定量PCR技术检测并计算诺如病毒的回收率。结果MCE-PEG法对稀释度超过一万倍的水样中的诺如病毒几乎无富集作用,超滤法富集对一万倍稀释度的水样的病毒平均回收率为34.72%,对十万倍稀释度的水样病毒平均回收率为6.21%。结论超滤法比MCE-PEG沉淀法富集病毒的效果更好。 展开更多
关键词 诺如病毒 病毒富集 实时荧光定量PCR MCE-PEG沉淀法 超滤法
原文传递
草莓中甲型肝炎病毒检测 被引量:5
3
作者 高世光 王海燕 +3 位作者 郭慧 冯华炜 于洋 麻丽丹 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第24期213-218,共6页
目的:建立草莓中甲型肝炎病毒(hapatitis A virus,HAV)的有效富集方法及病毒RNA提取方法,用于草莓中HAV检测。方法:利用甲肝减毒疫苗对已知阴性的草莓样品进行人工污染,通过有效富集条件的优化及RNA提取后,采用实时荧光逆转录-聚合酶链... 目的:建立草莓中甲型肝炎病毒(hapatitis A virus,HAV)的有效富集方法及病毒RNA提取方法,用于草莓中HAV检测。方法:利用甲肝减毒疫苗对已知阴性的草莓样品进行人工污染,通过有效富集条件的优化及RNA提取后,采用实时荧光逆转录-聚合酶链式反应进行检测。结果:病毒富集选择Tris-甘氨酸-1 g/100 m L牛肉浸提物缓冲液洗脱、果胶酶30 U、氯仿-正丁醇为抑制剂去除剂、聚乙二醇沉淀、5℃孵育1 h等优化条件,检测灵敏度较高;最优RNA提取方法为美国ABI公司生产的RNA提取试剂盒。采用优化后的方法对草莓样品中HAV病毒的检测显示,该病毒粒子的检测灵敏度可以达31.36 CCID50/20 g样品。同时对50份送检样品进行检测,结果均为阴性。结论:所建立的病毒富集方法和核酸提取方法更适合草莓样品中HAV的检测,灵敏度较高。 展开更多
关键词 草莓 甲型肝炎病毒 病毒富集 RNA提取
下载PDF
利用荧光RT-PCR法检测环境水体中诺如病毒 被引量:5
4
作者 李巧艳 吴新伟 +3 位作者 刘于飞 伍业健 高国全 杨霞 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第2期382-385,共4页
目的:建立一种快速敏感的方法检测环境水体中的诺如病毒。方法:选择诺如病毒阳性的粪便标本,10倍梯度稀释,模拟被污染水体,用16%聚乙二醇8000-0.525mol/L NaCl溶液浓缩病毒,用实时定量RT-PCR检测病毒核酸。结果:重组质粒标准品做标... 目的:建立一种快速敏感的方法检测环境水体中的诺如病毒。方法:选择诺如病毒阳性的粪便标本,10倍梯度稀释,模拟被污染水体,用16%聚乙二醇8000-0.525mol/L NaCl溶液浓缩病毒,用实时定量RT-PCR检测病毒核酸。结果:重组质粒标准品做标准曲线,标准品拷贝数的对数(x)与Ct值的关系为Ct=39.886-3.485x,相关系数R2=0.995,灵敏度为100拷贝,比普通RT-PCR高1个数量级,比ELISA高3个数量级,重复性佳,回收率在14%~44%之间,随着样品中NV浓度降低而下降,。用实时定量RT-PCR、常规RT-PCR和ELISA方法检测了42份现场水样,阳性率分别为40%、24%和0。结论:为环境水体中诺如病毒的检测提供了一种灵敏、可行的定量检测方法。 展开更多
关键词 诺如病毒 环境水体 病毒浓缩 实时定量RT-PCR
原文传递
蓝莓中诺如病毒检测方法的优化及其在果蔬中的应用 被引量:5
5
作者 施晓峰 程东庆 +1 位作者 章荣华 廖宁波 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第12期232-239,共8页
目的:建立蓝莓等浆果类和蔬菜类食品中GII型诺如病毒(NoV GII)的有效检测方法。方法:利用已知NoV GII病毒样本对阴性的蓝莓进行人工染毒,分别比较7种洗脱液和2种浓缩方法的回收效果,优化RNA提取方法,最后采用荧光定量PCR方法进行检测。... 目的:建立蓝莓等浆果类和蔬菜类食品中GII型诺如病毒(NoV GII)的有效检测方法。方法:利用已知NoV GII病毒样本对阴性的蓝莓进行人工染毒,分别比较7种洗脱液和2种浓缩方法的回收效果,优化RNA提取方法,最后采用荧光定量PCR方法进行检测。用新建立的诺如病毒浓缩检测方法,对7种市购浆果和蔬菜样品进行检测并研究其最低检出限。结果:实时荧光RT-PCR检测结果表明,人工染毒后的蓝莓等浆果样品(表皮和基质)采用TP ALK洗脱液洗脱,经酶处理后超滤法浓缩,最后采用病毒核酸提取试剂盒(QIAamp Viral RNA Mini Kit)提取浓缩病毒的RNA,诺如病毒的回收效率达到较高的水平,其灵敏度达3.5~350 PCRU/10g。将该方法用于草莓、杨梅、葡萄、小番茄、生菜、胡萝卜、黄瓜等7种水果蔬菜中诺如病毒的检测,其中杨梅和小番茄的检测灵敏度达到3.5~3 500 PCRU/10 g,草莓、生菜和胡萝卜次之,为35~35 000 PCRU/10 g,黄瓜和葡萄的灵敏度较低。结论:所建立的果蔬中诺如病毒富集方法和核酸提取方法操作简便,灵敏度较高,适合于蓝莓等浆果和蔬菜类样品中NoV GII的检测。 展开更多
关键词 诺如病毒 蓝莓 方法优化 病毒富集 实时荧光RT-PCR
原文传递
Automated robot and artificial intelligence-powered wastewater surveillance for proactive mpox outbreak prediction
6
作者 Guanyong Ou Yuxuan Tang +11 位作者 Jiexiang Liu Yabin Hao Zhi Chen Ting Huang Shaxi Li a Shiyu Niu Yun Peng Jiaqi Feng Hongwei Tu Yang Yang Han Zhang Yingxia Liu 《Biosafety and Health》 CAS CSCD 2024年第4期225-234,共10页
In the wake of the largest‐ever recorded outbreak of mpox in terms of magnitude and geographical spread in human history since May 2022,we innovatively developed an automated online sewage virus enrichment and concen... In the wake of the largest‐ever recorded outbreak of mpox in terms of magnitude and geographical spread in human history since May 2022,we innovatively developed an automated online sewage virus enrichment and concentration robot for disease tracking.Coupled with an artificial intelligence(AI)model,our research aims to estimate mpox cases based on the concentration of the monkeypox virus(MPXV)in wastewater.Our research has revealed a compelling link between the levels of MPXV in wastewater and the number of clinically confirmed mpox infections,a finding that is reinforced by the ability of our AI prediction model to forecast cases with remarkable precision,capturing 87%of the data’s variability.However,it is worth noting that this high precision in predictions may be related to the relatively high frequency of data acquisition and the relatively non‐mobile isolated environment of the hospital itself.In conclusion,this study represents a significant step forward in our ability to track and respond to mpox outbreaks.It has the potential to revolutionize public health surveillance by utilizing innovative technologies for disease surveillance and prediction。 展开更多
关键词 Automated online sewage virus enrichment robot Artificial intelligence(AI)model Early warning system Mpox Monkeypox virus(MPXV)
原文传递
环境中病毒富集与检测方法研究进展 被引量:3
7
作者 魏小兵 贺会利 +3 位作者 刘明成 勾肖晶 闫艺婷 刘兴友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期270-274,共5页
随着集约化养殖的发展和养殖密度的增大,环境中病毒存在会造成疫病的流行和传播,给人和动物的健康造成严重的危害,对养殖企业造成严重的经济损失。为及时了解养殖环境中病毒情况,需加强致病性病毒的环境监测,形成猪场疾病预警监测机制... 随着集约化养殖的发展和养殖密度的增大,环境中病毒存在会造成疫病的流行和传播,给人和动物的健康造成严重的危害,对养殖企业造成严重的经济损失。为及时了解养殖环境中病毒情况,需加强致病性病毒的环境监测,形成猪场疾病预警监测机制。作者就环境中的病毒富集和检测方法加以阐述,为进一步完善环境病毒监测预警机制奠定基础。 展开更多
关键词 环境病毒 病毒富集 病毒检测
下载PDF
几种典型介水传播病毒流行现状及检测技术研究进展 被引量:3
8
作者 苗静 张坤明 +1 位作者 李君文 金敏 《解放军预防医学杂志》 CAS 2017年第7期822-826,共5页
介水传播病毒给人类健康带来巨大威胁。水中病毒检测是控制和预防介水传播病毒危害的重要手段之一。本文从几种典型的介水传播病毒(诺如病毒、轮状病毒、肠道病毒71型和戊型肝炎病毒)入手,就其流行现状、水中病毒富集及检测技术等研究... 介水传播病毒给人类健康带来巨大威胁。水中病毒检测是控制和预防介水传播病毒危害的重要手段之一。本文从几种典型的介水传播病毒(诺如病毒、轮状病毒、肠道病毒71型和戊型肝炎病毒)入手,就其流行现状、水中病毒富集及检测技术等研究进展进行综述,为水中病毒检测和控制提供参考。 展开更多
关键词 介水传播病毒 流行现状 病毒富集 检测
下载PDF
甲型流感病毒致肺损伤的机制分析 被引量:2
9
作者 杨灿 沃恩康 +5 位作者 杨新燕 徐琦 杨柳 邓冠聪 路鑫怡 郭潮潭 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2021年第1期27-32,共6页
目的运用生物信息学方法探讨甲型流感病毒所致肺损伤的可能机制。方法从Gene Expression Ominbus(GEO)数据库中选择基因表达谱GSE57455、GSE63786和GSE64800,通过GEO2R工具在线分析,筛选出差异表达基因(DEGs),基于STRING构建蛋白互作网... 目的运用生物信息学方法探讨甲型流感病毒所致肺损伤的可能机制。方法从Gene Expression Ominbus(GEO)数据库中选择基因表达谱GSE57455、GSE63786和GSE64800,通过GEO2R工具在线分析,筛选出差异表达基因(DEGs),基于STRING构建蛋白互作网络图,筛选出显著模块;并对获取的DEGs进行Gene Ontology(GO)分析和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)通路富集分析。通过Cystoscape软件筛选出具有高度连接性的关键基因,并构建生物学功能图。结果筛选得到119个交集DEGs,其中上调基因有106个,下调基因13个。GO分析显示,DEGs显著富集于免疫应答、细胞分裂等生物学过程中;显著富集于细胞外间隙、胞外区部分等细胞组成上;显著富集于趋化因子活性、细胞因子受体结合等分子功能上。KEGG通路富集显示,DEGs显著富集于细胞因子及受体相互作用信号通路、趋化因子等信号通路。同时,共筛选得到7个关键基因:FIGNL1、GBP5、ICOS、ARG1、IRF7、CYSLTR1和SLMAF8,其富集作用主要在免疫应答、精氨酸代谢、B细胞反应等生物学功能。结论FIGNL1介导的肺组织细胞受损、IRF7和GBP5介导的Ⅰ型IFN反应、ARG1介导的精氨酸代谢以及ICOS、CYSLTR1和SLAMF8介导的趋化因子和炎性因子的活化与甲型流感病毒所导致的肺损伤密切相关。 展开更多
关键词 流感病毒A型 肺损伤 生物信息学 富集分析 免疫应答 炎性因子
原文传递
饮用水中病毒富集、检测方法及标准的探讨 被引量:1
10
作者 官杰 孙胜敏 +5 位作者 高翠玲 王祎珂 彭晓辉 王肖 索依拉 朱风亮 《中国标准化》 2023年第1期197-202,共6页
新冠疫情爆发后,多个研究机构从城市排水系统中检测到新冠病毒,目前为止已经发现700余种病毒可通过水体传播。由于病毒的粒径远小于细菌,富集浓缩、检测方法也不同,本文综述了饮用水中病毒浓缩富集及相关检测方法,并探讨了相关的国内外... 新冠疫情爆发后,多个研究机构从城市排水系统中检测到新冠病毒,目前为止已经发现700余种病毒可通过水体传播。由于病毒的粒径远小于细菌,富集浓缩、检测方法也不同,本文综述了饮用水中病毒浓缩富集及相关检测方法,并探讨了相关的国内外关于饮用水中病毒的标准要求。 展开更多
关键词 饮用水 病毒 浓缩富集 检测 标准
下载PDF
纯净水中病毒三种富集方法的比较 被引量:1
11
作者 倪云龙 乔昕 +4 位作者 王燕梅 秦思 田亭 杨佳昭 霍翔 《中国食品卫生杂志》 CSCD 北大核心 2023年第3期353-359,共7页
目的比较膜吸附法、膜吸附-PEG法和膜吸附-超滤法对纯净水中病毒的富集效果,并对优选的富集方法的实验条件进行比对,旨在寻找高效的方法,为其他水体中病毒富集检测提供技术借鉴。方法本文以MS2噬菌体为目标病毒,制作高、低浓度水样,建... 目的比较膜吸附法、膜吸附-PEG法和膜吸附-超滤法对纯净水中病毒的富集效果,并对优选的富集方法的实验条件进行比对,旨在寻找高效的方法,为其他水体中病毒富集检测提供技术借鉴。方法本文以MS2噬菌体为目标病毒,制作高、低浓度水样,建立逆转录-荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)方法的标准曲线,进行定量检测。使用膜吸附法、膜吸附-PEG法和膜吸附-超滤法富集水样,并比较不同过滤膜、不同超滤管及两种核酸提取方法的回收率,选择最适方法。结果膜吸附-超滤法、膜吸附-PEG法和膜吸附法回收率均值分别为19.80%±12.19%、12.71%±9.09%和9.05%±4.89%,各因素对回收率的影响顺序为:膜吸附-超滤法>膜吸附-PEG法>膜吸附法;高浓度>低浓度。混合纤维素酯膜的富集效果优于尼龙膜。100 K和50 K的超滤管富集效果无差异。硅胶离心柱法和磁珠法核酸提取效果无差异。结论通过二次富集可提高富集效率,膜吸附-超滤法优于另两种方法,且其操作简单、耗时短、对设备依赖性低,易于推广。膜吸附-超滤法的实验条件仍可优化、完善,拓展其在不同水体和不同病毒富集中的应用。 展开更多
关键词 介水病毒 富集 膜吸附 超滤
原文传递
适配器-超速离心法提高电镜检测病毒的灵敏度 被引量:1
12
作者 屈建国 余兴明 +3 位作者 鲁茁壮 邹小辉 宋敬东 洪涛 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期373-378,共6页
通过专用超速离心机将病毒直接离心至载网是重要的提高诊断电镜灵敏度的方法,作者尝试建立适配器-超速离心法实现相同目的。设计制造了外形类似离心管的载网适配器,其内部有一平底的凹槽,可以放置电镜载网,添加病毒悬液后,经过超速离心... 通过专用超速离心机将病毒直接离心至载网是重要的提高诊断电镜灵敏度的方法,作者尝试建立适配器-超速离心法实现相同目的。设计制造了外形类似离心管的载网适配器,其内部有一平底的凹槽,可以放置电镜载网,添加病毒悬液后,经过超速离心,能够将病毒粒子直接离心到载网上。利用重组腺病毒和重组腺相关病毒为模式病毒,适配器-超速离心法较悬滴法的病毒检测灵敏度提高了50~200倍;对人腺病毒41型(Ad41)细胞培养物进行电镜检测,灵敏度提高了50倍。如果将免疫凝集法(immune clumping)与适配器-超速离心法相联合进行电镜制样,检测灵敏度较常规免疫凝集法提高1~2个数量级。这些结果说明适配器-超速离心法能够高效地富集病毒,可以应用于病毒的电镜检测工作。 展开更多
关键词 病毒富集 适配器 超速离心 诊断电镜 免疫凝集
下载PDF
纯净水中病毒富集和浓缩方法优化及筛选
13
作者 杨佳昭 倪云龙 +3 位作者 乔昕 王燕梅 杜佳露 霍翔 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1625-1629,共5页
目的使用膜吸附(混合纤维素酯膜,MCE)–超滤法对纯净水中的病毒进行富集浓缩,通过优化其富集试验条件,研究不同试验条件下纯净水中病毒的富集和浓缩效率,筛选最优试验条件。方法以噬菌体MS2为目标病毒,首先对膜吸附过程中4个影响因素进... 目的使用膜吸附(混合纤维素酯膜,MCE)–超滤法对纯净水中的病毒进行富集浓缩,通过优化其富集试验条件,研究不同试验条件下纯净水中病毒的富集和浓缩效率,筛选最优试验条件。方法以噬菌体MS2为目标病毒,首先对膜吸附过程中4个影响因素进行多水平的排列组合试验,再使用筛选出的最优条件与超滤过程中2个影响因素进行组合筛选,使用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术检测、计算噬菌体MS2的回收率,最后对试验数据进行统计学分析。结果MCE-超滤法的最优富集条件为:阳离子浓度(0.025 mol/L)、MCE膜的孔径(0.22μm)、洗脱液(1%TGBE)、洗脱方式(震荡洗脱)、超滤管截留分子量(30 kD)、离心力(3000 g)。优化后的MCE-超滤法对纯净水中的噬菌体MS2病毒回收率可达到81.20%(95%CI=71.86%~90.54%)。结论经优化后的MCE-超滤法对纯净水中的噬菌体MS2病毒有较高的回收率,可用于纯净水中病毒的富集浓缩。 展开更多
关键词 膜吸附-超滤法 正交试验 病毒 富集
原文传递
3种水体病毒富集方法的效率测定及应用研究
14
作者 李平 庞燕 +3 位作者 欧凯丽 刘超 赵光远 郑卫青 《中国卫生检验杂志》 CAS 2023年第19期2312-2315,共4页
目的测试并对比反渗透装置与实验室常见的两种水体富集设备Milliflex Plus Pump以及CPS微生物快速富集系统对水体中病毒的富集效率及其对实际样品的富集检测能力。方法以脊髓灰质炎灭活病毒疫苗与手足口灭活病毒疫苗以及海南省各个地区... 目的测试并对比反渗透装置与实验室常见的两种水体富集设备Milliflex Plus Pump以及CPS微生物快速富集系统对水体中病毒的富集效率及其对实际样品的富集检测能力。方法以脊髓灰质炎灭活病毒疫苗与手足口灭活病毒疫苗以及海南省各个地区所采集的水样为样本,使用3种富集设备分别对待测样品进行富集浓缩,而后通过实时荧光定量PCR实验测定富集结果并进行比对,同时对其富集时间、成本、耗材以及适用场景等因素进行分析。结果反渗透装置、Milliflex Plus Pump与CPS微生物快速富集系统3种方案对脊髓灰质炎病毒以及手足口病毒的平均富集效率分别为22.31%、22.67%、12.07%,并均可用于实际水样的病毒检测。结论反渗透富集法富集速度快,无使用场地限制,可适用于现场快速检测。 展开更多
关键词 环境卫生 水体病毒 富集浓缩 应用研究
原文传递
一种寨卡病毒富集检测方法的性能评价
15
作者 李阿茜 孔令君 +4 位作者 刘洋 伊洁 李川 梁米芳 窦亚玲 《协和医学杂志》 CSCD 2022年第3期455-460,共6页
目的 对一种无需核酸提取纯化的寨卡病毒实时荧光定量反转录PCR检测方法的性能进行评价。方法 该检测方法基于实时荧光定量反转录PCR技术,样本处理采用病毒富集法:取100~200μL待测样本,加入112~224μL样本处理液Ⅰ,5~10μL样本处理液Ⅱ... 目的 对一种无需核酸提取纯化的寨卡病毒实时荧光定量反转录PCR检测方法的性能进行评价。方法 该检测方法基于实时荧光定量反转录PCR技术,样本处理采用病毒富集法:取100~200μL待测样本,加入112~224μL样本处理液Ⅰ,5~10μL样本处理液Ⅱ,混匀后进行离心富集(12 000 r/min,离心半径8.6 cm,离心5 min)。离心后弃上清液,加入20μL复溶缓冲液重悬沉淀;取10μL重悬液,加入50μL PCR反应液上机检测。从定量检测下限、交叉反应、抗干扰性、精密度方面评价该检测方法的性能。收集北京协和医院检验科临床样本(血清、尿液、唾液样本),随机选取约1/5构建寨卡病毒感染模拟临床样本,进一步评定该检测方法的性能。结果 该检测方法对MR766、ZKC2/2016毒株的检测下限均为10;半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective dose, TCID50)/mL;对17种常见虫媒病原体检测结果均为阴性,无交叉反应发生;潜在干扰物质胆红素(15 mg/L)、血红蛋白(100 mg/L)、甘油三酯(2000 mg/L)、IgG(37.5 g/L)和EDTA-Na;(2.5 g/L)对其检测结果无干扰;检测低、中、高浓度寨卡病毒的批次内和批次间Ct值变异系数均<10%,精密度良好。共收集344份北京协和医院检验科临床样本,其中构建寨卡病毒感染模拟临床样本73份。采用该检测方法对344份样本进行检测,结果均与实际相符,无假阳性和假阴性。结论 寨卡病毒简单富集后再检测的方法特异性高、重复性好,检测结果不受干扰物质的影响,检测下限满足临床需求,且操作简便,但应用效果仍需在真实临床样本中进一步验证。 展开更多
关键词 寨卡病毒 快速检测 病毒富集法 性能评价
下载PDF
基于RNA-Seq技术的真菌病毒AfPV1感染对寄主黄曲霉基因表达的影响
16
作者 江银辉 杨碧 +4 位作者 刘翔 田询 禹文峰 齐晓岚 吴昌学 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第12期1377-1384,共8页
目的基于转录组测序(RNA-Seq)技术探讨真菌病毒黄曲霉(A.flavus)partitivirus 1(AfPV1)感染对寄主A.flavus基因表达的影响。方法分别提取无病毒感染的A.flavus菌株LD-F1和真菌病毒AfPV1感染的A.flavus菌株LD-F1-b的RNA进行文库构建和RNA... 目的基于转录组测序(RNA-Seq)技术探讨真菌病毒黄曲霉(A.flavus)partitivirus 1(AfPV1)感染对寄主A.flavus基因表达的影响。方法分别提取无病毒感染的A.flavus菌株LD-F1和真菌病毒AfPV1感染的A.flavus菌株LD-F1-b的RNA进行文库构建和RNA-Seq;以A.flavus菌株NRRL 3357(GCA_009017415.1)的基因组为参考,分析RNA-Seq测序结果中有差异表达的基因(DEGs),并对DEGs进行基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能富集分析;随机选取12个DEGs,使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对转录组进行验证。结果样品RNA完整无污染,测序结果可靠,错误率0.02%,测序的结果能够成功比对到A.flavus的基因组序列(>56%);获得真菌病毒AfPV1感染的A.flavus的DEGs有4127个;GO富集分析显示,DEGs涉及A.flavus的氧化还原过程、单生物过程、单生物代谢过程、跨膜转运、谷氨酰胺家族氨基酸代谢过程、谷氨酰胺家族氨基酸生物合成过程、二羟酸代谢过程及血红素结合等;KEGG富集分析显示,DEGs参与A.flavus代谢通路中的戊糖与葡萄糖醛酸互相转换、非同源重组末端连接、氮代谢、错配修复、同源重组、DNA复制、次级代谢产物的生物合成及碱基切除修复等;qRT-PCR的结果与转录组测序结果趋势一致。结论真菌病毒AfPV1感染A.flavus能够引起基因表达差异,DEGs涉及A.flavus生命过程中多个基因和多个信号通路。 展开更多
关键词 真菌病毒 转录组 黄曲霉 差异表达基因 基因功能注释 富集分析
下载PDF
饮用水中病毒的富集和检测技术概述
17
作者 张晓 高圣华 +1 位作者 金敏 张岚 《中国给水排水》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期50-55,共6页
介绍了近年来国内外介水传播病毒在各种水体中的存在水平,简单介绍了国内外有关水中病毒的控制要求及其标准检测方法,对饮用水中病毒的富集浓缩及细胞培养、分子生物学等检测方法进行了概述,并提出了水中病毒检测的发展方向,以期为建立... 介绍了近年来国内外介水传播病毒在各种水体中的存在水平,简单介绍了国内外有关水中病毒的控制要求及其标准检测方法,对饮用水中病毒的富集浓缩及细胞培养、分子生物学等检测方法进行了概述,并提出了水中病毒检测的发展方向,以期为建立饮用水中病毒的检测方法及开展健康风险评估提供技术支持。 展开更多
关键词 饮用水 病毒 富集 检测技术
原文传递
人冠状病毒NL63超速离心富集方法的建立及优化
18
作者 胡月超 宋敬东 +2 位作者 耿合员 朱娜 谭文杰 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2022年第2期199-204,共6页
目的建立并优化人冠状病毒NL63参考株(HCoV-NL63-NC_005831)的体外富集方法。方法以恒河猴肾细胞系(LLC-MK2)培养HCoV-NL63,以离心力135000×g、分别离心病毒培养上清4 h、6 h、8 h、10 h和12 h以富集病毒,并以商品化PEG沉淀试剂盒... 目的建立并优化人冠状病毒NL63参考株(HCoV-NL63-NC_005831)的体外富集方法。方法以恒河猴肾细胞系(LLC-MK2)培养HCoV-NL63,以离心力135000×g、分别离心病毒培养上清4 h、6 h、8 h、10 h和12 h以富集病毒,并以商品化PEG沉淀试剂盒富集方法作为对照。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、半数组织培养感染剂量(TCID50)和空斑实验对原始病毒液、富集病毒液分别进行病毒核酸和病毒生物活性定量检测,评价病毒富集效果;通过透射电镜负染观测病毒富集前后的形态。结果经层超速离心法及经PEG沉淀法分别进行体积100∶1富集处理,两种方法获得的富集病毒液相较于原液的病毒核酸浓度及活病毒浓度均有提高(P<0.001)。超速离心方法富集前后,电镜下观察到的病毒颗粒呈正常的负染形态;4 h、6 h、8 h、10 h和12 h超速离心后活病毒浓度平均分别是原病毒液的(7.35±1.62)倍、(13.98±1.71)倍、(36.36±10.41)倍、(48.16±9.38)倍、(54.26±7.02)倍,PEG沉淀后活病毒浓度是原病毒液的(3.39±0.16)倍,经超速离心法获得的富集病毒液的核酸浓度及活病毒浓度显著高于PEG沉淀法(P<0.05);8 h、10 h、12 h超速离心后病毒浓度显著高于4 h和6 h(P<0.05),但8 h、10 h、12 h之间病毒含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论超速离心法相较于商品化的PEG沉淀法能更有效富集HCoV-NL63病毒;离心力为135000×g时,选择8 h的超离时间可获得较优的体外富集效果。 展开更多
关键词 HCOV-NL63 超速离心 PEG QRT-PCR 病毒富集
原文传递
PEG沉降病毒富集法对极低载量HBV感染血浆的确认效果评价 被引量:9
19
作者 郭笑寒 周磊 +2 位作者 刘笑春 周璐 邓雪莲 《中国输血杂志》 CAS 2020年第1期17-21,共5页
目的评价PEG沉降病毒富集法对极低载量HBV感染血浆的确认效果。方法建立PEG沉降病毒富集法(简称PEG富集法)并确认其HBV病毒富集效率;以本地区优势C型HBV毒株确认HBV序列多区段巢式PCR和qPCR的检测灵敏度;比较PEG富集法和超高速离心法分... 目的评价PEG沉降病毒富集法对极低载量HBV感染血浆的确认效果。方法建立PEG沉降病毒富集法(简称PEG富集法)并确认其HBV病毒富集效率;以本地区优势C型HBV毒株确认HBV序列多区段巢式PCR和qPCR的检测灵敏度;比较PEG富集法和超高速离心法分别与HBV序列多区段扩增相结合(分别简称为PEG体系和超离体系)时,对核酸初检反应性而鉴别试验无反应性即非重复反应性(Non-repeatable Reactive,NRR)但含有极低病毒载量的标本进行HBV感染确认的效果差异。结果 PEG富集法在30 IU/mL浓度的病毒富集效率为(81.5±30.3)%;巢式PCR对BCP片段扩增的检测具有最佳灵敏度为1 IU/mL;PEG体系灵敏度的推测范围为(0.12-3.07)IU/mL。69份NRR标本经PEG体系和超离体系分别确认出HBV感染标本37份(53.6%)和46份(66.5%),2体系对HBV感染的总确认率无差异(P>0.05)。但配对比较显示,超离体系在BCP和PreC/C区段扩增确认率显著高于PEG体系(P<0.05)。结论本研究建立的PEG富集法的成本较低、简单易行,可以作为超高速离心法的替代方法应用于普通血筛实验室对核酸检测反应性血浆的HBV感染的确认,但需要结合多个不同HBV序列区段的扩增检测以提高极低病毒载量血浆的确认率。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 核酸检测 PEG 血浆病毒富集
下载PDF
基于网络药理学和分子对接法探索化湿败毒方治疗COVID-19的分子机制研究 被引量:7
20
作者 郭鹏飞 方坚松 +4 位作者 许律捷 张宝月 赵君 刘艾林 杜冠华 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2021年第4期1048-1062,共15页
目的利用网络药理学和分子对接技术方法探索"化湿败毒方"抗新型冠状病毒肺炎(CoronaVirus Disease 2019,COVID-19)的分子机制。方法通过多个在线中药数据库检索化湿败毒方中14味中药的归经、化学成分和作用靶点。通过STRING... 目的利用网络药理学和分子对接技术方法探索"化湿败毒方"抗新型冠状病毒肺炎(CoronaVirus Disease 2019,COVID-19)的分子机制。方法通过多个在线中药数据库检索化湿败毒方中14味中药的归经、化学成分和作用靶点。通过STRING数据库对化湿败毒方药物靶标和疾病靶标之间靶蛋白相互作用关系进行分析并通过Circos Tableviewer、Cytoscape软件进行药物-归经网络、药物-靶点网络和药物靶向蛋白-疾病蛋白(PPI)等网络的构建。接着通过Fun Rich和DAVID数据库进行基因本体(GO)功能富集分析并基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,通过在线绘图软件Omic Share进行可视化。最后运用CB-Dock分子对接网站软件对新型冠状病毒(SARS-Co V-2)的3CL水解酶(Mpro)以及宿主蛋白ACE2和类药性>0.8的活性成分分别进行对接分析。结果研究发现,化湿败毒方14味中药里有10味中药都相对特异性的归属于肺经,从复方中共筛选出来240个符合标准的化学成分,主要包括常见化合物如黄酮类化合物槲皮素(quercetin)和木犀草素(luteolin)、醇类化合物如豆甾醇(stigmasterol)和β-谷甾醇(beta-sitosterol)以及有机酸如没食子酸(gadelaidic acid)等。其它成分还有酯类、酰胺类和萜类等化学成分;通路富集分析表明,候选靶标富集的通路主要包括与癌症相关的多条通路、B细胞受体信号通路、Toll样受体信号通路、T细胞受体信号通路、HIF-1信号通路、TGF-beta信号通路等;分子对接结果显示,化湿败毒方中kanzonol F、xambioona dehydroeburicoic acid、cavidine等成分与SARS-Co V-23CL水解酶和ACE2均有较好的亲和作用。结论本文运用网络药理学和分子对接的方法初步探索了化湿败毒方可能通过多成分作用于病毒复制相关靶点和关键宿主蛋白,进而调节机体免疫和代谢通路等多种途径,最后发挥预防和治疗COVID-19的药效作用。 展开更多
关键词 化湿败毒方 新型冠状病毒肺炎 网络药理学 分子对接 富集分析
下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部