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中华绒螯蟹病毒病病原的初步研究 被引量：10
1
作者 沈锦玉 钱冬 +5 位作者 刘问 尹文林 沈智华 曹铮 吴颖蕾 张念慈 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期487-489,共3页
关键词 中华绒螯蟹 病毒性疾病 病毒样颗粒 病原
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新冠肺炎病毒颗粒在空调大巴中的传播与乘客感染风险 被引量：10
2
作者 吴家麟 翁文国 《清华大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第2期89-95,共7页
新型冠状病毒肺炎(COVID-19)存在气溶胶传播的可能性。该文选择了一例发生在湖南省空调大巴中的新冠肺炎传染案例,建立数值模型开展计算,分析了含新冠肺炎病毒的液滴和气溶胶的扩散输运过程,研究了空调排风模式、颗粒粒径、传染源位置... 新型冠状病毒肺炎(COVID-19)存在气溶胶传播的可能性。该文选择了一例发生在湖南省空调大巴中的新冠肺炎传染案例,建立数值模型开展计算,分析了含新冠肺炎病毒的液滴和气溶胶的扩散输运过程,研究了空调排风模式、颗粒粒径、传染源位置等因素对于新冠肺炎病毒在空调大巴中传播规律的影响,并针对所有乘客的感染风险进行了定量评估,将结果与实际感染情况进行了对比。新冠肺炎感染者呼出的病毒颗粒有较高的比例沉积在大巴内部壁面与座椅表面。粒径和排风口位置会影响气溶胶扩散规律。小粒径含病毒气溶胶在空气中悬浮的时间长、扩散距离远,带给远处乘客的风险较高。基于研究结果,提出了降低空调大巴中新冠肺炎传播风险的建议。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎(COVID-19) 空调大巴 病毒颗粒 气溶胶 风险分析
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不同佐剂对含S+PreS1融合抗原的乙型肝炎病毒颗粒疫苗免疫原性的影响 被引量：8
3
作者 陈红 邓瑶 +5 位作者 谭文杰 王文 殷霄 管洁 王文玲 阮力 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期74-78,共5页
本研究在前期工作基础上，用CHO细胞表达的含PreSI＋S融合抗原的新型基因工程HBV颗粒疫苗（HBSS1）与AI（OH）3、CpG及CpG＋Al（OH）3等佐剂配伍，在Balb／C小鼠模型上研究不同佐剂对HBV颗粒疫苗肌肉注射后免疫应答的影响，主要包括抗... 本研究在前期工作基础上，用CHO细胞表达的含PreSI＋S融合抗原的新型基因工程HBV颗粒疫苗（HBSS1）与AI（OH）3、CpG及CpG＋Al（OH）3等佐剂配伍，在Balb／C小鼠模型上研究不同佐剂对HBV颗粒疫苗肌肉注射后免疫应答的影响，主要包括抗体滴度、抗体亚型分类及特异性细胞免疫（Y．IFNELISpot检测。结果表明：CpG佐剂结合HBSS1颗粒疫苗可快速诱导（单针免疫）高水平的抗PreS1及S抗体，IgG2a／IgG1比率〉1，同时可诱导较高抗原特异的细胞免疫应答；Al（OH）3＋CpG双佐剂组一次免疫后可诱导产生最高的抗S抗体滴度（1：105），其产生的抗体亚类包括IgG1、IgG2a与IgG2b；在S抗原N端（13～49aa）存在优势CTL表位。结论：CpG佐剂结合HBSS1颗粒疫苗应是发展新型治疗性乙肝疫苗的较佳选项。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 病毒颗粒 疫苗 CpG佐剂
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钙调磷酸酶B亚单位(CnB)作为佐剂对新型乙型肝炎病毒疫苗免疫效果的影响 被引量：1
4
作者 揣侠 陈红 +3 位作者 王文 邓瑶 阮力 谭文杰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期554-560,共7页
比较不同佐剂配伍的效果,探讨常规剂量(5μg)钙调磷酸酶B亚单位(Calcineurin subunit B,CnB)佐剂对含PreS1+S融合抗原的乙型肝炎病毒新型疫苗(HBSS1)免疫效果的影响。采用Al(OH)3、常规剂量(5μg)CnB及CnB+Al(OH)3等佐剂与HBV颗粒疫苗... 比较不同佐剂配伍的效果,探讨常规剂量(5μg)钙调磷酸酶B亚单位(Calcineurin subunit B,CnB)佐剂对含PreS1+S融合抗原的乙型肝炎病毒新型疫苗(HBSS1)免疫效果的影响。采用Al(OH)3、常规剂量(5μg)CnB及CnB+Al(OH)3等佐剂与HBV颗粒疫苗配伍初次免疫,重组腺病毒载体疫苗加强免疫的策略,在C57BL/6小鼠模型上研究不同佐剂对HBV颗粒疫苗肌肉注射后免疫应答的影响,主要包括抗体滴度、抗体亚型分类及特异性细胞免疫(γ-IFN ELISpot检测)。研究结果显示Al(OH)3佐剂存在明显免疫增强作用,而单独加入5μg CnB佐剂或CnB与Al(OH)3佐剂联合应用对Anti-PreS1抗体无明显的增强作用,但可显著降低anti-HBs抗体水平;各免疫组在重组腺病毒载体疫苗加强后,其抗体亚类包括IgG1、IgG2a和IgG2b;并可诱导高水平的细胞免疫应答反应。因而常规剂量(5μg)CnB单独或联合Al(OH)3佐剂对新型HBV疫苗无明显的免疫增强作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 病毒颗粒 疫苗 钙调磷酸酶B亚单位
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宫颈湿疣的超微形态研究
5
作者 周良鸿 《中日友好医院学报》 1992年第2期98-99,130,共3页
取宫颈细胞涂片中见到挖空细胞的3例宫颈活体组织,经电子显微镜观察,3例均在鳞状上皮的中层和表层看到挖空细胞,其细胞核周围有缺乏细胞器的透明带。其中1例看到HPV颗粒。HPV颗粒为圆形或类圆形,直径约40～50nm,呈结晶样排列。
关键词 人乳头瘤病毒 湿疣 挖空细胞 病毒颗粒
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鱼类病毒性神经坏死病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及其特性 被引量：8
6
作者 罗卫 田飞焱 +6 位作者 刘荭 陈焕春 李惠芳 刘宗晓 王侃 蔡伊娜 吕建强 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期651-656,共6页
利用RT-PCR技术获得病毒性神经坏死病毒0603株的衣壳蛋白基因,将其插入到杆状病毒Bac-To-Bac表达系统的pFastBacⅠ质粒中,构建了pFastBac-cp质粒。转化DH10Bac大肠杆菌后获得重组穿梭载体Bacmid-cp,脂质体介导将其转染Sf9细胞产生有感... 利用RT-PCR技术获得病毒性神经坏死病毒0603株的衣壳蛋白基因,将其插入到杆状病毒Bac-To-Bac表达系统的pFastBacⅠ质粒中,构建了pFastBac-cp质粒。转化DH10Bac大肠杆菌后获得重组穿梭载体Bacmid-cp,脂质体介导将其转染Sf9细胞产生有感染性的重组杆状病毒AcNPV-cp。利用AcNPV-cp感染Sf9细胞后,SDS-PAGE分析可见大小约为37ku的特异性蛋白带,Western-blotting分析发现,其可以与病毒性神经坏死病毒阳性血清反应出现特异性的杂交带。试验结果表明,AcNPV-cp在Sf9细胞中成功地表达了病毒性神经坏死病毒的衣壳蛋白,其具有良好的免疫学活性。负染电镜观察发现,CP蛋白可自行装配成病毒样颗粒,其大小形态类似于病毒性神经坏死病毒。制备超薄切片后电镜观察发现,CP蛋白自行装配成的病毒样颗粒呈晶格状排列在细胞质中。为研制有效防控鱼类病毒性神经坏死病的新型颗粒性疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 病毒性神经坏死病毒 衣壳蛋白 病毒样颗粒
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牛病毒性腹泻病毒1型病毒样颗粒的制备及其对豚鼠的免疫原性分析 被引量：5
7
作者 高闪电 张忠辉 +4 位作者 田占成 王锦明 独军政 关贵全 殷宏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期130-138,共9页
为了获得预防牛病毒性腹泻病毒1型(bovine viral diarrhea virus 1,BVDV-1)感染的病毒样颗粒,扩增C-E^(rns)-E1-E2编码区段并克隆至pFastBacDaul载体,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞与Bacmid重组获得Bacmid-BVDV-1,转染至Sf9细胞,获得... 为了获得预防牛病毒性腹泻病毒1型(bovine viral diarrhea virus 1,BVDV-1)感染的病毒样颗粒,扩增C-E^(rns)-E1-E2编码区段并克隆至pFastBacDaul载体,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞与Bacmid重组获得Bacmid-BVDV-1,转染至Sf9细胞,获得重组杆状病毒Baculo-BVDV-1。利用免疫荧光试验、免疫印记、电镜观察确定目的蛋白表达和病毒样颗粒的组装。制备病毒样颗粒灭活抗原并辅以Montanide ISA-201佐剂免疫豚鼠,分别用中和抗体滴度测定和淋巴细胞增殖试验分析体液免疫和细胞免疫应答,然后用10^(6) TCID_(50) BVDV-1型AV69株攻毒,评价病毒样颗粒的免疫保护效果。结果表明,构建的重组杆状病毒Baculo-BVDV-1感染Sf9细胞可高效表达BVDV结构蛋白并形成病毒样颗粒。病毒样颗粒免疫诱导豚鼠产生较高滴度(1︰144)的中和抗体并激活细胞免疫,降低了BVDV感染豚鼠血液中的病毒RNA水平。文中以昆虫细胞表达系统制备BVDV病毒样颗粒并评价其免疫原性,为进一步研制BVD病毒样颗粒疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 杆状病毒 病毒样颗粒 免疫原性
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病毒性出血性败血症病毒N基因的病毒样颗粒制备及定值 被引量：2
8
作者 王群 姜帆 +4 位作者 岳志芹 孙涛 郑小龙 张晓文 房保海 《中国动物检疫》 CAS 2018年第1期100-103,共4页
为制备含有病毒性出血性败血症病毒(VHSV)N基因的RNA病毒样颗粒标准样品,通过RT-RCR扩增VHSV的N基因,将其克隆至含有组氨酸标签的pNH-MS_2his载体中,构建重组原核表达载体pNHMS_2his-N;将重组质粒pNH-MS_2his-N转化至表达菌株BL21(DE3),... 为制备含有病毒性出血性败血症病毒(VHSV)N基因的RNA病毒样颗粒标准样品,通过RT-RCR扩增VHSV的N基因,将其克隆至含有组氨酸标签的pNH-MS_2his载体中,构建重组原核表达载体pNHMS_2his-N;将重组质粒pNH-MS_2his-N转化至表达菌株BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG诱导表达、纯化;对病毒样颗粒进行鉴定及稳定性试验,使用数字PCR对病毒样颗粒进行定值。结果显示,该病毒样颗粒含VHSV N基因序列,并且稳定性良好,定值结果为8×10~6 copies/m L。结果表明,构建的病毒样颗粒可以作为RNA病毒检测时的标准品和质控品使用。 展开更多
关键词 病毒性出血性败血症病毒 病毒样颗粒 N基因 数字PCR
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铝佐剂对HBoV1 VP2 VLPs诱导小鼠免疫应答的影响 被引量：2
9
作者 邓中华 段招军 +3 位作者 谢志萍 谢乐云 张兵 曹友德 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期56-58,64,共4页
目的:探讨铝佐剂对HBoV1 VP2 VLPs诱导小鼠免疫应答的影响。方法:BABL/c小鼠随机分为VLPs实验组、明矾佐剂实验组、PBS对照组和明矾佐剂对照组。实验组小鼠分别采用HBoV1 VP2 VLPs和HBoV1 VP2 VLPs加明矾佐剂肌肉注射免疫,对照组小鼠同... 目的:探讨铝佐剂对HBoV1 VP2 VLPs诱导小鼠免疫应答的影响。方法:BABL/c小鼠随机分为VLPs实验组、明矾佐剂实验组、PBS对照组和明矾佐剂对照组。实验组小鼠分别采用HBoV1 VP2 VLPs和HBoV1 VP2 VLPs加明矾佐剂肌肉注射免疫,对照组小鼠同期注射等量明矾佐剂或PBS缓冲液;实验8周后ELISA检测两实验组特异性Ig G抗体效价和活性,ELIspot检测两实验组特异性细胞免疫反应强度,从细胞免疫和体液免疫强度探讨铝佐剂对HBoV1 VP2 VLPs诱导小鼠免疫应答的影响。结果:明矾佐剂降低HBoV1 VP2 VLPs诱导细胞免疫反应强度(P<0.001),增强HBoV1 VP2 VLPs诱导的血清Ig G效价(P<0.01)和Ig G活性(P<0.05)。结论:明矾佐剂使HBoV1 VP2 VLPs诱导的体液免疫反应增强而细胞免疫反应减弱。HBoV1 VP2 VLPs作为预防性疫苗使用时应添加明矾佐剂,作为治疗性疫苗使用时应不加明矾佐剂。 展开更多
关键词 铝佐剂 人博卡病毒1(HBoV1) 病毒蛋白2(VP2) 病毒样颗粒(VLPs)
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基于E2蛋白BVDV-1病毒样颗粒的构建及对小鼠的免疫效力评估
10
作者 张家祺 贾浠宁 +4 位作者 周群 宋鑫 朱晨曦 李格格 张斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5143-5153,共11页
本研究利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统构建牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)E2病毒样颗粒(VLPs),并测定其对小鼠的免疫效力。选用BVDV-1 SWU-Z6株的E 2基因序列为模板,针对昆虫细胞密码子偏嗜性优化合成E 2基因,利用昆虫细胞-杆状病毒表达... 本研究利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统构建牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)E2病毒样颗粒(VLPs),并测定其对小鼠的免疫效力。选用BVDV-1 SWU-Z6株的E 2基因序列为模板,针对昆虫细胞密码子偏嗜性优化合成E 2基因,利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备BVDV-1 E2 VLPs。采用间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot验证E2蛋白在SF9细胞中的表达,通过电镜鉴定BVDV-1 E2 VLPs的组装。对获得的VLPs进行超离纯化,使用不同剂量的VLPs添加MF59佐剂和CpG-ODN免疫增强剂肌注免疫小鼠,同时设立BVDV商业灭活苗组和PBS空白对照组。二免4周后选用BVDV-1 SWU-Z6毒株以灌胃途径对小鼠进行攻毒,通过小鼠体重变化以及粪便中的病毒载量来评估BVDV-1 E2 VLPs的免疫保护效果。经酶切鉴定和测序验证表明,优化后的E 2基因已正确克隆至杆状病毒穿梭载体pFast Dual中,并获得重组质粒pFast Dual BVDV-1 E2,将重组质粒转化到DH10.Bac感受态细胞经过蓝白斑筛选获得重组杆粒Bacmid-BVDV-1 E2,将重组杆粒转染至SF9细胞,获得重组杆状病毒Baculo-BVDV-1 E2。电镜下观察可见大量直径在80~100 nm的BVDV病毒样颗粒,IFA和Western blot结果证实重组杆状病毒能够正确表达E2蛋白,并具有良好的生物学活性。BVDV-1 E2 VLPs 50μg组小鼠首免2周时ELSIA抗体效价约为1∶10000,加强免疫2周后抗体效价达到1∶100000。攻毒保护试验结果表明,免疫组小鼠在攻毒后第7天表现出体重下降,而后开始回升;在攻毒后第10天采集粪便没有检测到病毒拷贝。与非免疫组小鼠相对比,BVDV-1 E2 VLPs 50μg剂量两次免疫后阻止了因病毒感染而导致体重下降以及消化道内病毒的复制。研究中成功制备了BVDV-1 E2 VLPs,能诱导机体产生较强的体液免疫反应,可使小鼠获得抵抗BVDV-1 SWU-Z6毒株感染的免疫保护力。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 杆状病毒 病毒样颗粒 免疫原性
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