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重组枯草芽孢杆菌全细胞催化合成钙二醇的初步研究 被引量:2
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作者 李雨虹 耿鹏 +4 位作者 刘建民 时祎 辛瑜 石贵阳 张梁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期17-22,共6页
钙二醇(25-hydroxy vitamin D_(3),25-OH V_(D3))是一种具有广泛生理活性及药用价值的物质。该文旨在通过分子生物学手段构建1株异源表达V_(D3)羟化酶(V_(D3)hydroxylase,Vdh)的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600/pMA5-vdh,使其... 钙二醇(25-hydroxy vitamin D_(3),25-OH V_(D3))是一种具有广泛生理活性及药用价值的物质。该文旨在通过分子生物学手段构建1株异源表达V_(D3)羟化酶(V_(D3)hydroxylase,Vdh)的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600/pMA5-vdh,使其可以利用细胞催化系统合成25-OH V_(D3)。该重组菌株经诱导表达后,首先利用CO差光谱法评价Vdh的体外活性,并将其用作全细胞催化剂合成25-OH V_(D3),随后通过优化温度、时间、转速及pH等全细胞转化条件,提高其转化合成25-OH V_(D3)的产量。结果表明,37℃下培养24 h后,重组枯草芽孢杆菌B.subtilis WB600/pMA5-vdh的菌体裂解物酶活力达0.56 nmol/g;并且在底物质量浓度为0.1 g/L、外加18 g/L葡萄糖和22.5 g/L的2-羟丙基-β-环糊精的条件下,控制初始pH为7、反应温度30℃、转速200 r/min时进行全细胞转化反应48 h,得到25-OH V_(D3)的转化率为10.36%,以上研究结果为制备和生产食品级25-OH V_(D3)提供了新的思路。 展开更多
关键词 钙二醇(25-hydroxy vitamin D_(3) 25-OH v_(D3)) 枯草芽孢杆菌 v_(D3)羟化酶 异源表达 全细胞催化
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