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金鱼Vsx1基因结构及其内含子多态性分析 被引量:7
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作者 童英 李冰霞 +3 位作者 陈金辉 刘正华 郑康 罗琛 《激光生物学报》 CAS CSCD 2007年第4期418-423,共6页
Vsx1是第一个在金鱼中发现的编码含有同源异型框(homeodomain)和CVC结构域蛋白的基因。该基因在胚胎发育的不同阶段在胚胎的不同区域和不同组织中表达,并已经证明它在视网膜视锥双极细胞的分化和正常功能的维持中具有重要作用。为了进... Vsx1是第一个在金鱼中发现的编码含有同源异型框(homeodomain)和CVC结构域蛋白的基因。该基因在胚胎发育的不同阶段在胚胎的不同区域和不同组织中表达,并已经证明它在视网膜视锥双极细胞的分化和正常功能的维持中具有重要作用。为了进一步研究该基因在不同发育阶段组织特异性表达的调节机制,实验用PCR方法分析了金鱼Vsx1的基因组结构和内含子多态性。结果表明:金鱼Vsx1基因由5个外显子和4个内含子组成,与斑马鱼、人、小鼠的Vsx1基因结构相同。4个内含子中,第一内含子有两种序列差异明显的类型,但第二、三、四内含子无明显差异。第一内含子的一种类型比另外一种类型多39个碱基,这39个碱基中包括了真核生物增强子的核心序列。这一观测结果提示金鱼Vsx1第一内含子可能与该基因的发育阶段特异性和组织特异性表达调节有关。同时,第一内含子序列的明显差异也为分析Vsx1不同等位基因或基因拷贝的表达活性,以及组织特异性表达调节方式提供了合适的探针序列。 展开更多
关键词 金鱼 vsx1 基因结构 内含子 多态性
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沉默Vsx1基因后金鱼胚胎的差异蛋白质组学研究 被引量:2
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作者 喻小燕 陈妍 +1 位作者 曹晶 谢锦云 《湖南科技大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2009年第2期116-121,共6页
Vsx1基因是与金鱼眼睛空间模式形成相关的调控基因和二倍体依赖型机制的侯选目标基因.为进一步探究Vsx1在金鱼胚胎发育过程中的功能及其调控方式,采用反义寡核苷酸技术抑制Vsx1的表达,应用双向凝胶电泳(2-DE)进行蛋白分离,经PDQuest软... Vsx1基因是与金鱼眼睛空间模式形成相关的调控基因和二倍体依赖型机制的侯选目标基因.为进一步探究Vsx1在金鱼胚胎发育过程中的功能及其调控方式,采用反义寡核苷酸技术抑制Vsx1的表达,应用双向凝胶电泳(2-DE)进行蛋白分离,经PDQuest软件图谱分析,质谱分析初步鉴定,获得了Vsx1沉默引起的13个差异蛋白质,如Prohibitin-2(PHB2)、Nme2 protein等,并对这些差异蛋白质可能直接或间接地受到Vsx1的调控机理和Vsx1在金鱼胚胎发育过程中的功能进行了初步的理论分析,为进一步阐明Vsx1的功能和调控机制奠定了良好的基础. 展开更多
关键词 vsx1 反义寡核苷酸 金鱼胚胎 蛋白质组 双向凝胶电泳
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金鱼中vsx1基因抑制脊索中胚层发育调节基因ntl的表达 被引量:1
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作者 刘正华 陈金辉 +2 位作者 马珊珊 童英 罗琛 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期747-755,共9页
vsx1是最先在金鱼中发现,在神经视网膜双极细胞的增殖、分化和正常生理功能维持中具有重要作用的转录因子基因.在已经检测的脊椎动物物种中,该基因都在胚胎发育的早期即开始表达,而且其在不同物种中的时空表达模式相似,提示该基因在胚... vsx1是最先在金鱼中发现,在神经视网膜双极细胞的增殖、分化和正常生理功能维持中具有重要作用的转录因子基因.在已经检测的脊椎动物物种中,该基因都在胚胎发育的早期即开始表达,而且其在不同物种中的时空表达模式相似,提示该基因在胚胎发育早期可能具有重要的调节功能.但vsx1在眼睛发育之外的发育调节功能研究尚无报道.本研究对金鱼vsx1过表达和功能抑制对胚胎形体模式形成的影响进行了分析,发现抑制vsx1的功能及其过表达都能严重干扰胚胎背中线脊索结构的发育.基因表达原位杂交分析表明,vsx1过表达能显著抑制脊索中胚层发育关键调节基因ntl在背中线的表达,而vsx1被抑制则ntl在背中线的表达范围显著扩展.凝胶阻滞分析证明VSX1蛋白作为转录因子可与ntl启动子的特定序列直接结合.基因表达分析证明,vsx1能有效抑制ntl启动子控制的报告基因GFP转录.这些结果都证明,vsx1能直接抑制脊索中胚层发育关键调控基因ntl的表达,提示vsx1在胚胎发育早期的主要功能之一可能是抑制脊索中胚层基因在神经管中异位表达,以保障中枢神经系统按正确的模式发育. 展开更多
关键词 金鱼 vsx1 过表达 功能抑制 ntl 发育
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金鱼β-catenin以细胞自主性方式抑制神经发育早期调节基因vsx1的表达
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作者 张琼宇 郑康 +2 位作者 马珊珊 童英 罗琛 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第22期3455-3463,共9页
β-catenin基因是脊椎动物背部中轴结构形成的必需基因.近年的研究发现,在斑马鱼和爪蟾中,β-catenin还具有抑制神经外胚层形成的作用.为深入了解β-catenin是如何抑制神经外胚层形成以及这种抑制在正常发育过程中的功能,我们研究了金... β-catenin基因是脊椎动物背部中轴结构形成的必需基因.近年的研究发现,在斑马鱼和爪蟾中,β-catenin还具有抑制神经外胚层形成的作用.为深入了解β-catenin是如何抑制神经外胚层形成以及这种抑制在正常发育过程中的功能,我们研究了金鱼胚胎发育过程中β-catenin对神经外胚层发育早期调节基因vsx1表达的抑制作用.实验结果表明,用反义morpholino oligonucleotides(MO)抑制内源β-catenin的功能可导致胚胎发育早期vsx1的广泛表达;β-catenin可抑制vsx1基因启动子所控制的绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的表达.进一步的分析证明,β-catenin所直接启动的下游靶基因boz可以通过vsx1基因启动子中的特定结合位点抑制vsx1基因启动子所控制的GFP报告基因的表达.这些结果表明,β-catenin在脊索中胚层前体细胞中启动与脊索中胚层发育调节相关基因表达的同时,还能以细胞自主性方式抑制神经发育早期调节基因vsx1在这些细胞中表达,提示β-catenin在脊索中胚层前体细胞中抑制vsx1基因的异位表达与启动脊索中胚层调节基因的表达都是保障脊索正常发育所必需的. 展开更多
关键词 Β-CATENIN vsx1 boz 脊索中胚层 发育
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