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肠道病毒A71型VP1-E98K突变对hSCARB2-KI小鼠致病性的影响
被引量:
1
1
作者
张鹏
邹文佳
+3 位作者
熊芮
吴勇
范昌发
彭宜红
《微生物学免疫学进展》
CAS
2023年第2期1-9,共9页
目的 探究肠道病毒A71型(enterovirus A71, EV-A71)VP1-E98K突变对人清道夫受体B2敲入(human scavenger receptor class B member 2 knock-in, hSCARB2-KI)小鼠致病性的影响。方法 利用pSVA-EV-A71-Isehara感染性克隆重组质粒获取拯救的...
目的 探究肠道病毒A71型(enterovirus A71, EV-A71)VP1-E98K突变对人清道夫受体B2敲入(human scavenger receptor class B member 2 knock-in, hSCARB2-KI)小鼠致病性的影响。方法 利用pSVA-EV-A71-Isehara感染性克隆重组质粒获取拯救的EV-A71 Isehara株,分别在人恶性胚胎横纹肌瘤(human rhabdomyosarcoma, RD)细胞和转染hSCARB2的RD细胞(RD-hSCARB2)中传代并收获病毒,感染小鼠后建立hSCARB2-KI小鼠感染模型。研究中还采用了感染小鼠的临床评分指标、RT-qPCR、HE染色和免疫荧光技术、ELISA、病毒滴定等方法研究病毒的致病性。结果 用RD细胞中连续传代获得的EV-A71 Isehara株攻击hSCARB2-KI小鼠,未观察到预期的体质量减少、行动迟缓、肢体瘫痪等临床表现;经测序确定该病毒株衣壳蛋白发生了VP1-E98K突变,故称之为VP1-98K突变株。而野毒型EV-A71 Isehara株(VP1-98E野毒株)感染的hSCARB2-KI小鼠,其大脑、肺脏、骨骼肌组织中病毒载量、组织病理改变、血清中IL-1α、IL-1β、IL-2等水平均高于VP1-98K组,差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞学实验发现,经RD细胞传代收获的第5代病毒均检测到VP1-E98K突变,而RD-hSCARB2细胞传代的同代次病毒中则未检测到相应突变,仍为VP1-98E野毒株。结论 VP1-E98K突变显著减弱了EV-A71对小鼠的致病性。此外,能高表达hSCARB2受体的RD细胞有助于EV-A71 Isehara株的稳定传代增殖,并减少病毒突变机率。
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关键词
肠道病毒A7
1
型
vp
1-
98
hSCARB2敲入小鼠
致病性
毒力
衰减
适应性突变
疫苗
原文传递
国内C4基因型EV-A71结构蛋白VP1区第98和145位点分子进化特征的分析
2
作者
王浩
韦欢欢
+2 位作者
陈飞
黄京京
朱俊萍
《微生物学免疫学进展》
CAS
2023年第5期1-10,共10页
目的 分析国内C4基因型肠道病毒A71型(enterovirus A71,EV-A71)结构蛋白VP1区第98和145位点的分子进化特征。方法 构建国内C4型EV-A71 VP1序列数据库,采用选择压力位点分析、易突变位点熵值分析、氨基酸多样性分析3种方法分析国内C4基因...
目的 分析国内C4基因型肠道病毒A71型(enterovirus A71,EV-A71)结构蛋白VP1区第98和145位点的分子进化特征。方法 构建国内C4型EV-A71 VP1序列数据库,采用选择压力位点分析、易突变位点熵值分析、氨基酸多样性分析3种方法分析国内C4基因型EV-A71不同进化分支的结构蛋白VP1区第98和145位点分子进化的特征,并结合手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)暴发前后及临床轻重症信息进行分析。结果 国内C4基因型EV-A71流行进化过程,发生了从C4b到C4a-1,再到C4a-2三个进化分支的优势替换,且不同进化分支VP1的选择压力位点不同。VP1区第98和145位点是国内C4型EV-A71进化过程中发生改变的关键氨基酸位点,与病毒毒力和传播特征紧密相关。VP1区第98和145位点氨基酸组合类型主要包括98E145E(EE)占89.24%、98K145E(KE)占6.78%、98E145G(EG)占1.76%、98E145Q(EQ)占1.66%。其中,EE为最常见类型,而KE型与临床重症发生显著相关(P<0.001)。结论 国内EV-A71优势流行毒株仍为C4a-2基因型,结构蛋白VP1区第98和145位点可能是重要的病毒毒力相关位点。
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关键词
手足口病
肠道病毒A7
1
型
结构蛋白
vp
1区第
98
和145位点
分子进化
病毒毒力相关位点
氨基酸多样性
原文传递
题名
肠道病毒A71型VP1-E98K突变对hSCARB2-KI小鼠致病性的影响
被引量:
1
1
作者
张鹏
邹文佳
熊芮
吴勇
范昌发
彭宜红
机构
北京大学医学部基础医学院病原生物学系
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所模式动物研究室
出处
《微生物学免疫学进展》
CAS
2023年第2期1-9,共9页
基金
国家自然科学基金(81974310)
国家重点研发计划项目(2021YFC2301701)。
文摘
目的 探究肠道病毒A71型(enterovirus A71, EV-A71)VP1-E98K突变对人清道夫受体B2敲入(human scavenger receptor class B member 2 knock-in, hSCARB2-KI)小鼠致病性的影响。方法 利用pSVA-EV-A71-Isehara感染性克隆重组质粒获取拯救的EV-A71 Isehara株,分别在人恶性胚胎横纹肌瘤(human rhabdomyosarcoma, RD)细胞和转染hSCARB2的RD细胞(RD-hSCARB2)中传代并收获病毒,感染小鼠后建立hSCARB2-KI小鼠感染模型。研究中还采用了感染小鼠的临床评分指标、RT-qPCR、HE染色和免疫荧光技术、ELISA、病毒滴定等方法研究病毒的致病性。结果 用RD细胞中连续传代获得的EV-A71 Isehara株攻击hSCARB2-KI小鼠,未观察到预期的体质量减少、行动迟缓、肢体瘫痪等临床表现;经测序确定该病毒株衣壳蛋白发生了VP1-E98K突变,故称之为VP1-98K突变株。而野毒型EV-A71 Isehara株(VP1-98E野毒株)感染的hSCARB2-KI小鼠,其大脑、肺脏、骨骼肌组织中病毒载量、组织病理改变、血清中IL-1α、IL-1β、IL-2等水平均高于VP1-98K组,差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞学实验发现,经RD细胞传代收获的第5代病毒均检测到VP1-E98K突变,而RD-hSCARB2细胞传代的同代次病毒中则未检测到相应突变,仍为VP1-98E野毒株。结论 VP1-E98K突变显著减弱了EV-A71对小鼠的致病性。此外,能高表达hSCARB2受体的RD细胞有助于EV-A71 Isehara株的稳定传代增殖,并减少病毒突变机率。
关键词
肠道病毒A7
1
型
vp
1-
98
hSCARB2敲入小鼠
致病性
毒力
衰减
适应性突变
疫苗
Keywords
Enterovirus A7
1
vp
1-
98
hSCARB2 knock-in mice
Pathogenicity
Virulence
Attenuation
Adaptive muta-tion
Vaccine
分类号
R373.2 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
国内C4基因型EV-A71结构蛋白VP1区第98和145位点分子进化特征的分析
2
作者
王浩
韦欢欢
陈飞
黄京京
朱俊萍
机构
首都医科大学基础医学院病原生物学系
出处
《微生物学免疫学进展》
CAS
2023年第5期1-10,共10页
文摘
目的 分析国内C4基因型肠道病毒A71型(enterovirus A71,EV-A71)结构蛋白VP1区第98和145位点的分子进化特征。方法 构建国内C4型EV-A71 VP1序列数据库,采用选择压力位点分析、易突变位点熵值分析、氨基酸多样性分析3种方法分析国内C4基因型EV-A71不同进化分支的结构蛋白VP1区第98和145位点分子进化的特征,并结合手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)暴发前后及临床轻重症信息进行分析。结果 国内C4基因型EV-A71流行进化过程,发生了从C4b到C4a-1,再到C4a-2三个进化分支的优势替换,且不同进化分支VP1的选择压力位点不同。VP1区第98和145位点是国内C4型EV-A71进化过程中发生改变的关键氨基酸位点,与病毒毒力和传播特征紧密相关。VP1区第98和145位点氨基酸组合类型主要包括98E145E(EE)占89.24%、98K145E(KE)占6.78%、98E145G(EG)占1.76%、98E145Q(EQ)占1.66%。其中,EE为最常见类型,而KE型与临床重症发生显著相关(P<0.001)。结论 国内EV-A71优势流行毒株仍为C4a-2基因型,结构蛋白VP1区第98和145位点可能是重要的病毒毒力相关位点。
关键词
手足口病
肠道病毒A7
1
型
结构蛋白
vp
1区第
98
和145位点
分子进化
病毒毒力相关位点
氨基酸多样性
Keywords
Hand,foot and mouth disease
Enterovirus A7
1
Sites
98
and 145 in structural protein
vp
1 region
Molecular evolution
Virulence related sites
Amino acid diversity
分类号
R37 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肠道病毒A71型VP1-E98K突变对hSCARB2-KI小鼠致病性的影响
张鹏
邹文佳
熊芮
吴勇
范昌发
彭宜红
《微生物学免疫学进展》
CAS
2023
1
原文传递
2
国内C4基因型EV-A71结构蛋白VP1区第98和145位点分子进化特征的分析
王浩
韦欢欢
陈飞
黄京京
朱俊萍
《微生物学免疫学进展》
CAS
2023
0
原文传递
已选择
0
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