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一种大量快速分离脐带间充质干细胞的新方法 被引量：5
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作者 祝加学 沈尊理 +4 位作者 秦金保 张涛 孙恒赟 金羽青 周广东 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第6期1164-1169,共6页
目的：探讨体外快速大量分离脐带间充质千细胞的新方法。方法：采用复合胶原NB4、dispasell、透明质酸酶三种酶消化3h，加入PBSA溶液稀释，离心获得脐带间充质干细胞，培养；用流式细胞仪对P3代细胞进行表面标记的鉴定，用化学诱导的方... 目的：探讨体外快速大量分离脐带间充质千细胞的新方法。方法：采用复合胶原NB4、dispasell、透明质酸酶三种酶消化3h，加入PBSA溶液稀释，离心获得脐带间充质干细胞，培养；用流式细胞仪对P3代细胞进行表面标记的鉴定，用化学诱导的方法使第3代细胞向脂肪、骨、软骨细胞分化，2～4周后，分别行oil red、Safranin’O和茜素红染色，倒置显微镜下观察诱导结果。结果：经3种酶消化和PBSA稀释，短时间内从脐带中获得了大量间充质干细胞；伴随着细胞的传代，形态逐渐均一，传至第3代，细胞的形态已基本相似；流式细胞仪鉴定，细胞强表达间充质细胞的特异性标记CD90，CD73，CD105，而不表达造血系或内皮系细胞的标记CD45、CD14、CD11、CD34、CD19，也不表达主要组织相容性抗原HLA—DR；向脂肪细胞诱导后第4周，oilred染色见细胞内大量红染的脂滴；向软骨细胞诱导后第4周，Safranin’O染色见多数切片呈阳性，细胞团块中存在大量软骨特异性的陷窝样结构；向骨细胞诱导后第4周，茜素红染色发现肉眼可见的广泛散在的红色阳性钙结节．结论：本研究所采用的3种酶消化结合PBSA稀释的方法可以快速获得脐带间充质干细胞： 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 三种酶消化法 多向分化
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