UHRF2 is a ubiquitin-protein ligase E3 that regulates cell cycle, genomic stability and epigenetics, We conducted a co-immunoprecipitation assay and found that TIP60 and HDAC1 interact with UHRF2. We previously demons...UHRF2 is a ubiquitin-protein ligase E3 that regulates cell cycle, genomic stability and epigenetics, We conducted a co-immunoprecipitation assay and found that TIP60 and HDAC1 interact with UHRF2. We previously demonstrated that UHRF2 regulated H3K9ac and H3K14ac differentially in normal and cancer cells. However, the accurate signal transduction mechanisms were not clear. In this study, we found that TIP60 acted downstream of UHRF2 to regulate H3K9ac and H3K14ac expression. TIP60 is stabilized in normal cells by UHRF2 ubiquitination. However, TIP60 is destabilized in cancer cells. Depletion or inhibition of TIP60 disrupts the reg- ulatory relationship between UHRF2, H3K9ac and H3K14ac. In summary, the findings suggest that UHRF2 mediated the post-translational modification of histones and the initiation and progression of cancer.展开更多
目的探讨泛素样含PHD和环指域蛋白2(ubiquitin-like with PHD and RING finger domains 2,UHRF2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)增殖和转移中的作用及其机制。方法检索TCGA数据库中HCC的基因表达谱数据和患者的临床数据,分析...目的探讨泛素样含PHD和环指域蛋白2(ubiquitin-like with PHD and RING finger domains 2,UHRF2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)增殖和转移中的作用及其机制。方法检索TCGA数据库中HCC的基因表达谱数据和患者的临床数据,分析UHRF2的表达差异与HCC患者的预后情况,采用Cox比例风险模型探索UHRF2对HCC患者预后的独立作用;收集2018年7月至2019年12月在重庆医科大学附属第一医院确诊的20例肝癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,采用免疫组化检测UHRF2蛋白的表达,分析蛋白的表达与患者临床病理参数的关系;构建UHRF2表达质粒,通过RT-qPCR和Western blot检测转染效率,在HCC细胞系中过表达UHRF2进行划痕及平板克隆实验检测肝细胞癌细胞的迁移和增殖情况;基因富集分析探讨UHRF2与PI3K/Akt通路活化的关系,Western blot检测Akt、PI3K、p-Akt、p-PI3K的表达。结果 TCGA数据库分析显示UHRF2 mRNA在HCC组织中表达明显升高并提示预后不良;Cox多因素回归分析发现UHRF2的表达是影响患者预后的独立危险因素。免疫组化检测结果显示UHRF2蛋白在HCC中的表达明显高于癌旁组织。UHRF2的高表达与肿瘤大小(P=0.002)、肿瘤转移(P=0.002)密切相关。在迁移实验和平板克隆实验中,UHRF2过表达组的划痕愈合能力及增殖能力较对照组显著增强(P<0.01);PI3K/Akt通路在UHRF2高表达HCC患者中显著富集;Western blot检测结果显示,UHRF2过表达组的p-Akt、p-PI3K的表达水平明显上调(P<0.05)。结论 UHRF2的表达水平与HCC的预后密切相关,是影响患者预后的独立危险因素;过表达UHRF2通过PI3K/Akt信号通路促进HCC细胞的增殖和转移。展开更多
UHRF2(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 2)是新近发现的具有多个结构域的核蛋白,在细胞周期调控和表观遗传学中发挥重要作用.近期研究提示,UHRF2是肿瘤抑制蛋白p53的1个E3连接酶,在体内外能与p53相互结合并促进其泛素...UHRF2(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 2)是新近发现的具有多个结构域的核蛋白,在细胞周期调控和表观遗传学中发挥重要作用.近期研究提示,UHRF2是肿瘤抑制蛋白p53的1个E3连接酶,在体内外能与p53相互结合并促进其泛素化,过表达UHRF2能使细胞周期停滞于G1期.然而,UHRF2介导的G1期阻滞及其与p53联系尚不清楚.通过共转染UHRF2质粒及p53特异性小干扰RNA(siRNAs)到HEK293细胞构建细胞模型,探索UHRF2引起细胞周期停滞与p53之间的关系.结果显示,UHRF2能促进HEK293细胞中p53的稳定,从而引起p21(CIP1/WAF1)基因表达,并使细胞周期停滞于G1期;但在siRNA抑制p53的表达后p21(CIP1/WAF1)表达降低,UHRF2引起的细胞周期阻滞消除.研究结果提示,UHRF2可通过稳定p53,上调p21的表达,从而介导细胞周期阻滞于G1期;同时UHRF2可能参与细胞周期调控及DNA损伤反应(DNA damage response,DDR).UHRF2稳定p53的具体分子机制及其在DDR中的作用有待进一步研究证明.展开更多
文摘UHRF2 is a ubiquitin-protein ligase E3 that regulates cell cycle, genomic stability and epigenetics, We conducted a co-immunoprecipitation assay and found that TIP60 and HDAC1 interact with UHRF2. We previously demonstrated that UHRF2 regulated H3K9ac and H3K14ac differentially in normal and cancer cells. However, the accurate signal transduction mechanisms were not clear. In this study, we found that TIP60 acted downstream of UHRF2 to regulate H3K9ac and H3K14ac expression. TIP60 is stabilized in normal cells by UHRF2 ubiquitination. However, TIP60 is destabilized in cancer cells. Depletion or inhibition of TIP60 disrupts the reg- ulatory relationship between UHRF2, H3K9ac and H3K14ac. In summary, the findings suggest that UHRF2 mediated the post-translational modification of histones and the initiation and progression of cancer.
文摘目的探讨泛素样含PHD和环指域蛋白2(ubiquitin-like with PHD and RING finger domains 2,UHRF2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)增殖和转移中的作用及其机制。方法检索TCGA数据库中HCC的基因表达谱数据和患者的临床数据,分析UHRF2的表达差异与HCC患者的预后情况,采用Cox比例风险模型探索UHRF2对HCC患者预后的独立作用;收集2018年7月至2019年12月在重庆医科大学附属第一医院确诊的20例肝癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,采用免疫组化检测UHRF2蛋白的表达,分析蛋白的表达与患者临床病理参数的关系;构建UHRF2表达质粒,通过RT-qPCR和Western blot检测转染效率,在HCC细胞系中过表达UHRF2进行划痕及平板克隆实验检测肝细胞癌细胞的迁移和增殖情况;基因富集分析探讨UHRF2与PI3K/Akt通路活化的关系,Western blot检测Akt、PI3K、p-Akt、p-PI3K的表达。结果 TCGA数据库分析显示UHRF2 mRNA在HCC组织中表达明显升高并提示预后不良;Cox多因素回归分析发现UHRF2的表达是影响患者预后的独立危险因素。免疫组化检测结果显示UHRF2蛋白在HCC中的表达明显高于癌旁组织。UHRF2的高表达与肿瘤大小(P=0.002)、肿瘤转移(P=0.002)密切相关。在迁移实验和平板克隆实验中,UHRF2过表达组的划痕愈合能力及增殖能力较对照组显著增强(P<0.01);PI3K/Akt通路在UHRF2高表达HCC患者中显著富集;Western blot检测结果显示,UHRF2过表达组的p-Akt、p-PI3K的表达水平明显上调(P<0.05)。结论 UHRF2的表达水平与HCC的预后密切相关,是影响患者预后的独立危险因素;过表达UHRF2通过PI3K/Akt信号通路促进HCC细胞的增殖和转移。
文摘UHRF2(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 2)是新近发现的具有多个结构域的核蛋白,在细胞周期调控和表观遗传学中发挥重要作用.近期研究提示,UHRF2是肿瘤抑制蛋白p53的1个E3连接酶,在体内外能与p53相互结合并促进其泛素化,过表达UHRF2能使细胞周期停滞于G1期.然而,UHRF2介导的G1期阻滞及其与p53联系尚不清楚.通过共转染UHRF2质粒及p53特异性小干扰RNA(siRNAs)到HEK293细胞构建细胞模型,探索UHRF2引起细胞周期停滞与p53之间的关系.结果显示,UHRF2能促进HEK293细胞中p53的稳定,从而引起p21(CIP1/WAF1)基因表达,并使细胞周期停滞于G1期;但在siRNA抑制p53的表达后p21(CIP1/WAF1)表达降低,UHRF2引起的细胞周期阻滞消除.研究结果提示,UHRF2可通过稳定p53,上调p21的表达,从而介导细胞周期阻滞于G1期;同时UHRF2可能参与细胞周期调控及DNA损伤反应(DNA damage response,DDR).UHRF2稳定p53的具体分子机制及其在DDR中的作用有待进一步研究证明.
