槲皮素对胶质瘤U87细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响 被引量：12

1

作者 苑召虎 胡子有 +3 位作者 张兰兰 颜晓慧 王惠丽 吴炳义 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期207-211,共5页

目的探讨黄酮类化合物槲皮素对人胶质瘤U87细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响。方法将U87细胞分成Q0、Q50、Q100和Q1504个组,Q0组加适量二甲亚砜(槲皮素溶剂)处理,Q50、Q100和Q150组槲皮素的浓度分别为50、100、150μmol/L。分别... 目的探讨黄酮类化合物槲皮素对人胶质瘤U87细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响。方法将U87细胞分成Q0、Q50、Q100和Q1504个组,Q0组加适量二甲亚砜(槲皮素溶剂)处理,Q50、Q100和Q150组槲皮素的浓度分别为50、100、150μmol/L。分别通过transwell体外侵袭实验、transwell体外迁移实验、Click-iT Edu test技术和流式细胞术检测槲皮素对其侵袭迁移能力,增殖能力及其细胞周期的影响。结果槲皮素处理36 h后,与对照组相比,Q50、Q100和Q150组的侵袭细胞比率分别为:52.08%、24.63%和13.13%,P均<0.05。槲皮素处理12 h后,与对照组相比,Q50、Q100和Q150的迁移细胞比率分别为:49.46%、26.78%和14.56%,P均<0.05。槲皮素处理24 h后,Q0、Q50、Q100和Q150组的增殖细胞百分比分别为25.21%、18.38%、16.74%和15.24%。G0/Gl期C6细胞所占比例分别为71.14%、72.71%、69.29%、66.47%,S期分别为25.32%、22.48%、21.96%、23.32%,G2/M期分别为3.53%、4.80%、8.75%、10.25%;Q100、Q150组的G2/M期细胞比例与Q0组比较,P均<0.05。结论槲皮素能明显降低胶质瘤细胞的侵袭迁移能力;并可通过阻断U87细胞的细胞周期进程来抑制其增殖。 展开更多

关键词 槲皮素 u87胶质瘤细胞 侵袭 迁移 增殖 细胞周期

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新候选肿瘤抑制基因溶质载体8号家族中的2号成员基因对胶质瘤细胞株U87的侵袭迁移能力和裸鼠致瘤性的影响 被引量：3

2

作者 余聚 屈鸣麒 +2 位作者 刘泓渊 兰青 步星耀 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1796-1799,共4页

目的 探讨溶质载体8号家族中的2号成员基因（SLC8A2）对胶质瘤细胞U87的迁移侵袭能力和裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.方法 构建稳定表达SLC8A2基因的U87-SLC8A2细胞株（实验组）和稳定表达GFP的U87-NC细胞株（阴性对照组）.Transwell... 目的 探讨溶质载体8号家族中的2号成员基因（SLC8A2）对胶质瘤细胞U87的迁移侵袭能力和裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.方法 构建稳定表达SLC8A2基因的U87-SLC8A2细胞株（实验组）和稳定表达GFP的U87-NC细胞株（阴性对照组）.Transwell小室及预铺50μl Matrigel基质胶的Transwell小室检测SLC8A2对U87细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染该基因后肿瘤细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9及MT1-MMP转录水平的变化,明胶酶谱法检测分泌至细胞培养基中MMP-2酶活性的变化；裸鼠皮下移植瘤实验（5只/组）检测SLC8A2对U87细胞致瘤性的影响.结果 U87-NC和U87-SLC8A2穿过Transwell小室基膜的细胞数分别为（279.70±17.50）个及（4.30±0.58）个,而穿过预铺Matrigel基质胶的Transwell小室基膜的细胞数分别为（274.0±21.3）个和（12.7±1.2）个,差异有统计学意义（P＜0.01）；与U87-NC比较,U87-SLC8A2细胞中MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MTl-MMP的转录水平分别下降了（55.4±3.2）％、（78.7±5.3）％、（79.7±4.6）％、（53.9±3.2）％及（70.9±4.4）％（P＜0.01）,且U87-SLC8A2细胞分泌的MMP-2酶活性较U87-NC下降了（93.2±5.1）％（P＜0.01）；接种U87-SLC8A2细胞的裸鼠全都不致瘤,而接种对照组细胞的裸鼠全部致瘤成功.结论 SLC8A2可下调MMP的活性而抑制胶质瘤细胞U87的侵袭迁移能力,并能显著抑制U87细胞在裸鼠体内的生长及增殖. 展开更多

关键词 溶质载体8号家族中的2号成员基因 u87胶质瘤细胞 侵袭 迁移 致瘤性

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异柠檬酸脱氢酶1基因突变增加胶质瘤细胞对替莫唑胺的敏感性 被引量：2

3

作者 王国良 赛克 +5 位作者 公方和 杨群英 高寒 王卓才 陈斌 陈芙蓉 《中国临床神经外科杂志》 2014年第2期95-98,共4页

目的探讨胶质瘤细胞异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)基因突变对替莫唑胺(TMZ)细胞毒性的影响。方法将培养的U87胶质瘤细胞分组转染含空载体(空载体组)、野生型IDH1基因(野生组)和R132H突变型IDH1基因(突变组;IDH1第132位的精氨酸被组氨酸所取代)... 目的探讨胶质瘤细胞异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)基因突变对替莫唑胺(TMZ)细胞毒性的影响。方法将培养的U87胶质瘤细胞分组转染含空载体(空载体组)、野生型IDH1基因(野生组)和R132H突变型IDH1基因(突变组;IDH1第132位的精氨酸被组氨酸所取代)质粒,利用液相色谱串联质谱法检测细胞上清液中2-羟基戊二酸(2-HG)水平、噻唑蓝法检测细胞增殖活性、实时荧光定量PCR法和免疫印迹法检测细胞caspase 3 mRNA和蛋白质表达;将含三种不同质粒的U87细胞接种大鼠建立荷瘤大鼠模型并观察大鼠经TMZ治疗后60 d存活率。结果与空载体组和野生组比较,突变组细胞上清液中2-HG水平、细胞caspase 3 mRNA和蛋白质表达水平均显著升高(P<0.05),而细胞增殖活性显著下降(P<0.05);TMZ治疗后60 d,突变组大鼠存活率显著升高(P<0.05);空载体组和野生组之间均无统计学差异(P<0.05)。结论 IDH1 R132H基因能够增加TMZ对神经胶质瘤细胞的细胞毒性作用并提高其治疗荷瘤大鼠的存活率。 展开更多

关键词 胶质瘤 u87胶质瘤细胞 异柠檬酸脱氢酶1 基因突变 替莫唑胺

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蛋白酶体抑制剂MG-132对体外人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2

4

作者 范军强 赵勇刚 +1 位作者 范波 李涛 《河南科技大学学报（医学版）》 2009年第3期161-163,共3页

目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对体外人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别以不同浓度（0、2.5、5、10和20μmol/L）的MG-132培养U87胶质瘤细胞,通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同培养时间（12、24、48、72 h）对U87胶质瘤细... 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对体外人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别以不同浓度（0、2.5、5、10和20μmol/L）的MG-132培养U87胶质瘤细胞,通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同培养时间（12、24、48、72 h）对U87胶质瘤细胞增殖的影响,流式细胞仪分析MG-132对U87胶质瘤细胞凋亡的影响,HE染色观察细胞形态学变化。结果通过与正常对照组比较,2.5-20μmol/L浓度的MG-132在12、24、48及72 h均可抑制U87细胞增殖并诱导其凋亡,并在一定范围内呈时间和剂量依赖性;各亚组与对照组差异具有统计学意义（P〈0.05）;形态学检查呈现凋亡细胞的特征。结论MG-132可抑制U87胶质瘤细胞增殖并诱导其凋亡,在一定范围内呈时间和剂量依赖性。 展开更多

关键词 蛋白酶体抑制剂MG-132 u87胶质瘤细胞 细胞凋亡

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miR-21在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖及迁移的影响 被引量：2

5

作者 曹英海 夏春义 +1 位作者 王刚 李纳新 《解剖科学进展》 2017年第1期65-67,共3页

目的探讨miR-21在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖迁移的影响。方法用实时荧光定量PCR方法检测39例胶质瘤组织及其对应癌旁组织miR-21的表达;利用Lipofectamine^(TM)2000将miR-21模拟物或抑制剂及其阴性对照转染至人U87胶质瘤细胞,分别... 目的探讨miR-21在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖迁移的影响。方法用实时荧光定量PCR方法检测39例胶质瘤组织及其对应癌旁组织miR-21的表达;利用Lipofectamine^(TM)2000将miR-21模拟物或抑制剂及其阴性对照转染至人U87胶质瘤细胞,分别应用CCK-8法和Transwell小室法检测人胶质瘤U87细胞的增殖及迁移能力。结果胶质瘤组织中miR-21的相对表达量为4.58±1.55,癌旁组织的miR-21相对表达量为1.87±0.59,胶质瘤组织中miR-21的表达显著高于癌旁组织(P<0.01)。与对照组相比,miR-21模拟物能够显著上调胶质瘤U87细胞系的增殖以及迁移能力(P<0.01);miR-21抑制剂则能够显著降低胶质瘤U87细胞系的增殖以及迁移能力(P<0.01)。结论 miR-21可能是治疗胶质瘤的潜在靶点。 展开更多

关键词 u87胶质瘤细胞 MIR-21 增殖 迁移

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miR-145在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖及侵袭的影响 被引量：2

6

作者 曹英海 夏春义 +1 位作者 王刚 李纳新 《解剖科学进展》 2016年第6期633-636,共4页

目的探讨miR-145在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖侵袭的影响。方法用实时荧光定量PCR方法检测39例胶质瘤组织及其对应癌旁组织miR-145的表达;利用LipofectA MINET M2000将miR-145模拟物或抑制剂及其阴性对照转染至人U87胶质瘤细胞,分... 目的探讨miR-145在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖侵袭的影响。方法用实时荧光定量PCR方法检测39例胶质瘤组织及其对应癌旁组织miR-145的表达;利用LipofectA MINET M2000将miR-145模拟物或抑制剂及其阴性对照转染至人U87胶质瘤细胞,分别应用CCK-8法和Transwell小室法检测人胶质瘤U87细胞的增殖及侵袭能力。结果胶质瘤组织中miR-145的相对表达量为17.26±6.05,癌旁组织的miR-145相对表达量为53.58±21.26,胶质瘤组织中miR-145的表达显著低于癌旁组织(P<0.01)。与对照组相比,miR-145模拟物能够显著抑制胶质瘤U87细胞系的增殖以及侵袭能力(P<0.01);miR-145抑制剂则能够显著上调胶质瘤U87细胞系的增殖以及侵袭能力(P<0.01)。结论miR-145在胶质瘤组织中是低表达的,在胶质瘤U87细胞中过表达miR-145能够抑制细胞的增殖及侵袭能力。 展开更多

关键词 u87胶质瘤细胞 MIR-145 增殖 侵袭

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miR-335在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖及侵袭的影响 被引量：1

7

作者 曹英海 夏春义 +1 位作者 王刚 李纳新 《解剖学研究》 CAS 2016年第6期448-451,共4页

目的探讨miR-335在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖侵袭的影响。方法用实时荧光定量PCR方法检测39例胶质瘤组织及其对应癌旁组织miR-335的表达;利用Lipofect AMINETM2000将miR-335模拟物或抑制剂及其阴性对照转染至人U87胶质瘤细胞,分... 目的探讨miR-335在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤增殖侵袭的影响。方法用实时荧光定量PCR方法检测39例胶质瘤组织及其对应癌旁组织miR-335的表达;利用Lipofect AMINETM2000将miR-335模拟物或抑制剂及其阴性对照转染至人U87胶质瘤细胞,分别应用CCK-8法和Transwell小室法检测人胶质瘤U87细胞的增殖及侵袭能力。结果胶质瘤组织中miR-335的相对表达量为0.93±0.09,癌旁组织的miR-335相对表达量为0.33±0.02,胶质瘤组织中miR-335的表达显著低于癌旁组织(P<0.01)。与对照组相比,miR-335模拟物能够显著抑制胶质瘤U87细胞系的增殖以及侵袭能力(P<0.01);miR-335抑制剂则能够显著上调胶质瘤U87细胞系的增殖以及侵袭能力(P<0.01)。结论 miR-335在胶质瘤组织中是低表达的,在胶质瘤U87细胞中过表达miR-335能够抑制细胞的增殖及侵袭能力。 展开更多

关键词 u87胶质瘤细胞 miR-335 增殖 侵袭

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藏红花素诱导人脑胶质瘤细胞U87凋亡的作用机制研究 被引量：1

8

作者 边寰 张磊 +4 位作者 王蓉 校鑫 李娟 王西玲 费舟 《中国医药导报》 CAS 2013年第27期11-13,共3页

目的探讨藏红花素促进人脑胶质瘤细胞U87凋亡的作用及其机制。方法培养U87细胞系,随机分为二甲基亚砜对照组(对照组)和藏红花素治疗组(藏红花素组)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同剂量藏红花素(低浓度组、中浓度组、高浓度组)对人... 目的探讨藏红花素促进人脑胶质瘤细胞U87凋亡的作用及其机制。方法培养U87细胞系,随机分为二甲基亚砜对照组(对照组)和藏红花素治疗组(藏红花素组)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同剂量藏红花素(低浓度组、中浓度组、高浓度组)对人胶质瘤细胞U87增殖的影响;流式细胞仪观察细胞凋亡情况。Western-blot检测ERK1/2,p-ERK1/2的表达变化。结果与对照组比较,藏红花素组U87细胞的生存率明显降低;随着藏红花素浓度增加,U87细胞的凋亡率显著上升(18.92%→51.68%→70.12%),组间差异有统计学意义(χ2=14.102,P<0.05);Western-blot结果显示,与对照组比较,藏红花素组的p-ERK1/2表达降低,而高浓度藏红花素组p-ERK1/2表达降低最显著,不同组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论藏红花素可能呈剂量依赖性的通过抑制p-ERK1/2促进U87细胞凋亡,发挥重要的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 藏红花素 u87胶质瘤细胞 凋亡 剂量依赖性 p—ERK1 2

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U87胶质瘤细胞p53基因全场cDNA克隆及序列分析

9

作者 章倩倩 丁一 +3 位作者 亓翠玲 兰天 李江超 王丽京 《临床合理用药杂志》 2013年第17期1-3,共3页

目的克隆U87胶质瘤细胞p53基因编码序列,并对其序列进行分析。方法根据NCBI GenBank中p53 cDNA序列设计引物,利用RT-PCR技术从U87胶质瘤细胞总RNA中对p53基因编码序列进行克隆;并通过DNAMAN软件将克隆序列与NCBI GenBank中序列进行比对... 目的克隆U87胶质瘤细胞p53基因编码序列,并对其序列进行分析。方法根据NCBI GenBank中p53 cDNA序列设计引物,利用RT-PCR技术从U87胶质瘤细胞总RNA中对p53基因编码序列进行克隆;并通过DNAMAN软件将克隆序列与NCBI GenBank中序列进行比对,分析U87细胞中p53基因编码序列特点。结果经测序验证,成功克隆了p53基因编码序列,通过序列比对发现U87细胞中p53基因72位密码子为精氨酸残基。结论成功克隆了U87细胞中p53基因编码序列,分析发现U87细胞中p53基因表达产生的是72位密码子为含精氨酸残基的p53野生型蛋白,为进一步研究U87细胞中p53基因功能特性及其与胶质瘤的相关性奠定了基础。 展开更多

关键词 u87胶质瘤细胞 P53基因 克隆技术

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人参皂甙Rg3-聚乳酸纳米粒诱导U87-MG凋亡和Caspase-3的表达

10

作者 别黎 毕春华 +1 位作者 王新 刘兴吉 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1002-1004,共3页

目的研究人参皂甙Rg3-聚乳酸纳米粒对U87胶质瘤细胞的作用。方法采用modified-SESD法制备人参皂甙Rg3-聚乳酸(PLA)纳米粒,采用四甲偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT),流式细胞技术(FCM)和Western blot研究人参皂甙Rg3-聚乳酸纳米粒对U87胶... 目的研究人参皂甙Rg3-聚乳酸纳米粒对U87胶质瘤细胞的作用。方法采用modified-SESD法制备人参皂甙Rg3-聚乳酸(PLA)纳米粒,采用四甲偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT),流式细胞技术(FCM)和Western blot研究人参皂甙Rg3-聚乳酸纳米粒对U87胶质瘤细胞周期和凋亡的影响。结果 Rg3-聚乳酸纳米粒抗肿瘤增殖作用呈剂量依赖性,人参皂甙Rg3-聚乳酸纳米粒通过与细胞核中DNA作用改变细胞生长的周期,造成在G0-G1期阻滞,引起细胞凋亡。结论表明人参皂甙Rg3-聚乳酸纳米粒在胶质瘤的综合治疗方面有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 人参皂甙Rg3-聚乳酸纳米粒 u87胶质瘤细胞 凋亡

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^(131)I-Anti-EGFRv Ⅲ的制备及对U87胶质瘤细胞的放射免疫效应

11

作者 魏大年 张冠华 +4 位作者 黄凯 安雷 刘铁坚 朱永晖 刘承勇 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第z2期1-4,共4页

目的研究放射性核素碘(^(131)I)标记表皮生长因子受体Ⅲ型突变体单克隆抗体IgG(Anti-EGFRvⅢ)的方法及放射免疫活性,观察标记产物^(131)I-Anti-EGFRvⅢ对U87胶质瘤细胞的生物学效应。方法利用Iodogen法标记^(131)I至Anti-EGFRvⅢ,测定... 目的研究放射性核素碘(^(131)I)标记表皮生长因子受体Ⅲ型突变体单克隆抗体IgG(Anti-EGFRvⅢ)的方法及放射免疫活性,观察标记产物^(131)I-Anti-EGFRvⅢ对U87胶质瘤细胞的生物学效应。方法利用Iodogen法标记^(131)I至Anti-EGFRvⅢ,测定放化纯度、标记率、比活度、稳定性。经体外细胞结合试验分析^(131)I-Anti-EGFRvⅢ的免疫活性,通过MTT法检测放射免疫效应。结果^(131)I-Anti-EGFRvⅢ放射化学纯度>90%,24、48、72 h放射性化学纯度依次为91.25%、90.74%和89.88%。标记率为64.56%,比活度为0.56 MBq/μg。^(131)I-AntiEGFRvⅢ与U87细胞结合率为41.69%,1.110 MBq^(131)I-Anti-EGFRvⅢ即有最大抑制细胞生长效应,随着时间延长,抑制效应更加明显。结论 Iodogen法标记^(131)I-Anti-EGFRvⅢ具有较好的放射免疫活性,体外能够有效抑制U87胶质瘤生长。 展开更多

关键词 放射免疫治疗 u87胶质瘤细胞 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体 131I

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EMAP-Ⅱ上调miR-429表达抑制人U87胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力 被引量：4

12

作者 陈亮宇 刘丽波 +2 位作者 郑健 薛一雪 刘云会 《解剖科学进展》 CAS 2015年第2期166-170,共5页

目的探讨内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ(EMAP-Ⅱ)对人U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及可能的机制。方法培养人U87胶质瘤细胞,给予EMAP-Ⅱ处理不同时间后,采用CCK-8检测细胞活力的变化;应用real-time PCR方法检测mi R-429在人U87胶... 目的探讨内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ(EMAP-Ⅱ)对人U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及可能的机制。方法培养人U87胶质瘤细胞,给予EMAP-Ⅱ处理不同时间后,采用CCK-8检测细胞活力的变化;应用real-time PCR方法检测mi R-429在人U87胶质瘤细胞中的表达变化;利用Lipofect AMINETM2000将antimi R-429及其阴性对照转染至人U87胶质瘤细胞,再给予EMAP-Ⅱ,分别应用CCK-8法和Transwell小室法检测人胶质瘤U87细胞的增殖、迁移及侵袭能力。结果与对照组相比,EMAP-Ⅱ显著抑制了人U87胶质瘤细胞的活力,上调mi R-429在人U87胶质瘤细胞的表达水平,上述变化在EMAP-Ⅱ作用0.5 h时效果最显著;与EMAP-II作用0.5 h组相比,转染anti-mi R-429后,EMAP-Ⅱ的作用被阻断,人胶质瘤U87细胞的细胞活力,以及迁移和侵袭能力基本恢复。结论 mi R-429参与了EMAP-Ⅱ抑制人U87胶质瘤细胞的增殖,迁移和侵袭的调控。 展开更多

关键词 内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ 人u87胶质瘤细胞 miR-429 迁移 侵袭

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MiR-429对人U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制 被引量：3

13

作者 陈亮宇 刘丽波 +6 位作者 李新星 喻博 洪杨 郑健 于奇 薛一雪 刘云会 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期769-774,共6页

目的研究miR-429对人U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法培养人U87胶质瘤细胞,应用Lipofectamine LTX试剂将pre-mi R-429质粒以及anti-miR-429质粒(sh RNA质粒载体)稳定转染人U87胶质瘤细胞,real-time PCR验证转染... 目的研究miR-429对人U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法培养人U87胶质瘤细胞,应用Lipofectamine LTX试剂将pre-mi R-429质粒以及anti-miR-429质粒(sh RNA质粒载体)稳定转染人U87胶质瘤细胞,real-time PCR验证转染效率后,应用CCK-8检测增殖能力的变化;使用Transwell小室法检测人U87胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的变化;应用real-time PCR和Western blot检测E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)m RNA和蛋白表达含量变化;将ZEB1分别转染至U87胶质瘤细胞或miR-429过表达的U87胶质瘤细胞,应用Transwell小室检测mi RNA-429和ZEB1分别过表达或二者双过表达对人U87胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。结果与对照组比较,miR-429过表达显著抑制了人U87胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力;显著降低了ZEB1在人U87胶质瘤细胞的m RNA和蛋白表达水平;ZEB1过表达显著增强了人U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力;并且ZEB1过表达有效阻断了mi R-429抑制U87胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用。结论 mi R-429能够通过抑制ZEB1降低人U87胶质瘤细胞的增殖,迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 miR-429 E盒结合锌指蛋白1 人u87胶质瘤细胞 增殖 迁移 侵袭

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MiR-429通过CRKL靶向作用对U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

14

作者 陈亮宇 刘丽波 +6 位作者 李新星 喻博 洪杨 郑健 于奇 薛一雪 刘云会 《解剖科学进展》 CAS 2015年第5期493-497,共5页

目的研究miR-429对人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法培养人U87胶质瘤细胞,应用LipofectamineLTX试剂将pre-miR-429质粒载体以及anti-miR-429质粒载体分别稳定转染人U87胶质瘤细胞;应用Real-time-PCR验证转染效率;应用... 目的研究miR-429对人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法培养人U87胶质瘤细胞,应用LipofectamineLTX试剂将pre-miR-429质粒载体以及anti-miR-429质粒载体分别稳定转染人U87胶质瘤细胞;应用Real-time-PCR验证转染效率;应用CCK-8试剂盒检测miR-429对人U87胶质瘤细胞增殖能力的影响;应用Real-time PCR和Western blot检测人U87胶质瘤细胞中接头蛋白CRKL(v-crk avian sarcoma virus CT10oncogene homolog-like,CRKL)的mRNA和蛋白表达含量变化;将CRKL分别转染至U87胶质瘤细胞和miR-429过表达的U87胶质瘤细胞,应用CCK-8试剂盒检测人U87胶质瘤细胞增殖,应用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,应用Western blot法检测凋亡相关蛋白caspase-3和Bcl-2的蛋白表达变化。结果与对照组相比,miR-429过表达显著抑制了人U87胶质瘤细胞增殖,明显诱导了凋亡发生,显著降低了CRKLmRNA和蛋白在人U87胶质瘤细胞的表达水平,caspase-3的表达水平显著上调,Bcl-2的表达水平显著降低。CRKL过表达显著增强了人U87胶质瘤细胞增殖能力并且抑制了细胞凋亡,caspase-3的表达水平显著下调,Bcl-2的表达水平显著增强;CRKL过表达有效阻断了miR-429上调caspase-3、降低Bcl-2的作用,有效阻断了miR-429抑制U87胶质瘤细胞增殖和诱导凋亡的作用。结论 MiR-429抑制CRKL从而降低人U87胶质瘤细胞的增殖能力,诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 人u87胶质瘤细胞 miR-429 CRKL 增殖 凋亡

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白消安对U87胶质瘤干细胞增殖和自我更新的影响 被引量：1

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作者 赵舰 张良龙 +2 位作者 金亮 张维 兰伟途 《安徽医药》 CAS 2020年第9期1787-1790,共4页

目的探究白消安对U87胶质瘤干细胞增殖和自我更新的影响。方法培养U87胶质瘤干细胞,分为四组,A组加入200μL含5%胎牛血清的DMEM/F12培养基,B、C、D三组分别加入200μL含20、50、100μmol/L白消安的DMEM/F12培养基。比较四组细胞增殖情况... 目的探究白消安对U87胶质瘤干细胞增殖和自我更新的影响。方法培养U87胶质瘤干细胞,分为四组,A组加入200μL含5%胎牛血清的DMEM/F12培养基,B、C、D三组分别加入200μL含20、50、100μmol/L白消安的DMEM/F12培养基。比较四组细胞增殖情况[四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)]、细胞凋亡情况[即B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达水平],以及细胞周期。结果培养24 h后,四组U87胶质瘤干细胞吸光度比较差异无统计学意义(P>0.05);培养48 h、72 h后,B、C、D组U87胶质瘤干细胞吸光度低于A组(P<0.05);培养48 h、72 h后,B、C、D组U87胶质瘤干细胞吸光度比较差异无统计学意义(P>0.05)。C组U87胶质瘤干细胞Bax、Caspase-3、Bax/Bcl-2的吸光度值、阳性细胞表达率高于A、B组,比较差异有统计学意义[吸光度值:C_(Bax)(0.38±0.01)比A_(Bax)(0.46±0.04)、B_(Bax)(0.41±0.01);C_(Caspase-3)(0.45±0.02)比A_(Caspase-3)(0.54±0.01)、B_(Caspase-3)(0.47±0.02);C_(Bax/Bcl-2)(1.19±0.04)比A_(Bax/Bcl-2)(1.36±0.01)、B_(Bax/Bcl-2)(1.22±0.04);阳性细胞表达率:C_(Bax)(47.53±1.34)%比A_(Bax)(39.81±4.02)%、B_(Bax)(39.51±1.37)%;C_(Caspase-3)(65.17±2.34)%比A_(Caspase-3)(54.42±1.34)%、B_(Caspase-3)(49.16±2.31)%;C_(Bax/Bcl-2)(60.24±4.10)%比A_(Bax/Bcl-2)(35.47±1.20)%、B_(Bax/Bcl-2)(37.41±4.12)%;P<0.05];D组U87胶质瘤干细胞Caspase-3、Bax/Bcl-2的吸光度值、阳性细胞表达率高于A、B组,比较差异有统计学意义[吸光度值:D_(Bax)(0.37±0.01)比A_(Bax)(0.46±0.04)、B_(Bax)(0.41±0.01);D_(Caspase-3)(0.28±0.01)比A_(Caspase-3)(0.54±0.01)、B_(Caspase-3)(0.47±0.02);D_(Bax/Bcl-2)(0.97±0.02)此A_(Bax/Bcl-2)(1.36±0.01)、B_(Bax/Bcl-2)(1.22±0.04);阳性细胞表达率:D_(Caspase-3)(68.06±1.09)%比A_(Caspase-3)(54.42±1.34)%、B_(Caspase-3)(49.16±2.31)%;D_(Bax/Bcl-2)(65.10±2.15)%比A_(Bax/Bcl-2)(35.47±1.20)%、B_(Bax/Bcl-2)(37.41±4.12)%;P<0.05]。A组、D组� 展开更多

关键词 神经胶质瘤 细胞分裂 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 BCL-2相关X蛋白质 细胞增殖 白消安 u87胶质瘤干细胞

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高表达Per2基因的胶质瘤干细胞下调其基质金属蛋白酶2的研究 被引量：1

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作者 古禹 梁彦斌 +3 位作者 刘文斌 张静远 姚健 夏鹤春 《宁夏医科大学学报》 2019年第4期332-335,共4页

目的构建Period2(Per2)基因过表达的U87胶质瘤干细胞,检测Per2基因过表达U87胶质瘤干细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)的mRNA及蛋白的表达变化。方法以Per2基因过表达慢病毒转染U87胶质瘤干细胞,然后对U87胶质瘤干细胞进行转染,通过嘌呤霉... 目的构建Period2(Per2)基因过表达的U87胶质瘤干细胞,检测Per2基因过表达U87胶质瘤干细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)的mRNA及蛋白的表达变化。方法以Per2基因过表达慢病毒转染U87胶质瘤干细胞,然后对U87胶质瘤干细胞进行转染,通过嘌呤霉素筛选,用real-timePCR和Westernblot技术鉴定得到Per2基因过表达的U87胶质瘤干细胞,空载体转染的U87胶质瘤干细胞和U87胶质瘤干细胞未转染组作为对照。结果此次转染成功构建Per2基因过表达U87胶质瘤干细胞系,过表达组细胞内Per2基因的mRNA和蛋白表达量明显高于其他两组细胞,MMP-2mRNA及蛋白表达量在Per2基因过表达U87胶质瘤干细胞内明显降低。结论U87胶质瘤干细胞高表达Per2基因能够下调其MMP-2。 展开更多

关键词 Priod2基因 u87胶质瘤干细胞 基质金属蛋白酶2因子 慢病毒

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雷氏大疣蛛毒素对神经胶质瘤U87的抑制作用

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作者 杜杰杰 宋利超 +3 位作者 刘晓鹏 辛欣 闫丹丹 高莉 《延安大学学报（自然科学版）》 2016年第2期59-63,共5页

直观的观察雷氏大疣蛛毒素促进神经胶质瘤U87凋亡的形态学变化。首先用蛋白印迹法检测合适的雷氏大疣蛛毒素浓度处理U87细胞,再用该浓度毒素处理U87细胞不同时间;用100pg/m L的雷氏大疣蛛毒素作用48 h诱导神经胶质瘤U87细胞凋亡,然后用... 直观的观察雷氏大疣蛛毒素促进神经胶质瘤U87凋亡的形态学变化。首先用蛋白印迹法检测合适的雷氏大疣蛛毒素浓度处理U87细胞,再用该浓度毒素处理U87细胞不同时间;用100pg/m L的雷氏大疣蛛毒素作用48 h诱导神经胶质瘤U87细胞凋亡,然后用倒置相差显微镜,Gimsa染色法,吖啶橙/嗅化乙锭(AO/EB)双重荧光染色法以及流式细胞法,从最直观的形态学上观察雷氏大疣蛛毒素促进神经胶质瘤U87凋亡的形态学变化。实验组的细胞出现很明显的凋亡小体,细胞膜不会破裂,细胞质不会流出,细胞核含有固缩核片段等细胞凋亡的形态学上的特征。雷氏大疣蛛毒素作用神经胶质瘤U87细胞后的形态学的变化,基本包括了细胞凋亡的主要的形态学特征。说明雷氏大疣蛛毒素是通过促进神经胶质瘤U87细胞凋亡从而抑制细胞的增殖。 展开更多

关键词 雷氏大疣蛛毒素 u87神经胶质瘤细胞 细胞凋亡 形态学

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双特异性CAR-T细胞对EGFRvⅢ^(+)/CD133^(+)胶质瘤干细胞的靶向杀伤 被引量：6

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作者 刘亚丹 谢甲贝 +3 位作者 朱琼琼 卢文杰 丁辉 韩双印 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期296-301,共6页

目的:制备双特异性CAR-T(bs CAR-T)细胞,观察其对表达表皮生长因子Ⅲ型突变阳性(EGFRvⅢ^(+),简称vⅢ^(+))和CD133^(+)胶质瘤干细胞的靶向杀伤作用。方法:基于前期研制的vⅢ/CD133双特异性微抗体和二代CAR构建的双特异性CAR(bs CAR),制... 目的:制备双特异性CAR-T(bs CAR-T)细胞,观察其对表达表皮生长因子Ⅲ型突变阳性(EGFRvⅢ^(+),简称vⅢ^(+))和CD133^(+)胶质瘤干细胞的靶向杀伤作用。方法:基于前期研制的vⅢ/CD133双特异性微抗体和二代CAR构建的双特异性CAR(bs CAR),制备慢病毒载体转染人外周血T细胞,FCM和WB法检测bs CAR转染效率和表达水平。bs CAR-T细胞和vⅢ^(+)/CD133^(+)U87胶质瘤干细胞共培养,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验、IFN-γ分泌实验检测其特异性杀伤作用和对IFN-γ分泌的促进作用。制备裸鼠vⅢ^(+)/CD133^(+)U87干细胞移植瘤模型检测bs CAR-T细胞对移植瘤生长的抑制作用。结果:vⅢsc Fv和CD133sc Fv通过重叠PCR无缝连接入二代CAR表达框(S-vⅢscFv/CD133scFv-Hinge-TM-CD137-CD3ζ)中,然后克隆入p CDH-MSCV-MCS-EF1-copGFP载体的Eco RⅠ和Bam HⅠ位点(pbs CAR)。3种质粒(p VSV-G、p CMV-d R8.9和pbs CAR)共转染HEK293T细胞制备慢病毒载体,转染外周血T细胞,FCM检测bs CAR表达率为71.1%,WB法结果显示bs CAR表达正确。bs CAR-T细胞和vⅢ^(+)/CD133^(+)U87干细胞共培养检测结果显示,bs CAR-T细胞对胶质瘤干细胞具有特异性杀伤作用,与效靶比呈正比;IFN-γ分泌量为(2350.6±92)pg·m L^(-1),明显高于对照组(P<0.01)。裸鼠移植瘤动物模型显示,bs CAR-T细胞在体内具有明显的移植瘤抑制作用(P<0.01)。结论:bs CAR-T细胞能够特异性靶向杀伤vⅢ^(+)/CD133^(+)胶质瘤干细胞,实验结果为促进实体瘤的细胞免疫治疗提供了实验依据。 展开更多

关键词 表皮生长因子Ⅲ型突变体 CD133 双特异性CAR vⅢ^(%PLuS%)/CD133^(%PLuS%)u87胶质瘤干细胞 肿瘤干细胞

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