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FTA卡血样快速直接PCR扩增方法比较初探
被引量：
3
1
作者
刘琳
项林平
+7 位作者
胡志敏
董会
于书欣
姜伯玮
赵蕾
欧元
赵兴春
叶健
《中国法医学杂志》
CSCD
2014年第3期191-193,共3页
目的探索FTA卡血样快速直接PCR扩增方法,比较相关方法的应用价值。方法将DNA TyperTM19试剂盒分别与3种快速试剂(Roche、TaKaRa、Fermentas)组合,以FTA卡血样为模板构建扩增体系,按照经优化的循环参数进行快速直接扩增,并与Typer19试剂...
目的探索FTA卡血样快速直接PCR扩增方法,比较相关方法的应用价值。方法将DNA TyperTM19试剂盒分别与3种快速试剂(Roche、TaKaRa、Fermentas)组合,以FTA卡血样为模板构建扩增体系,按照经优化的循环参数进行快速直接扩增,并与Typer19试剂盒常规方法相比较,对方法进行评价。结果 Typer19试剂盒分别与3种快速PCR检验试剂进行组合,均可实现快速直接扩增,STR分型结果均与常规方法一致,扩增用时60min,较常规扩增所需的215min缩短了约70%,但Typer19试剂盒与Roche试剂组合基因座间峰高有部分不平衡;与TaKaRa试剂组合扩增个别基因座出现双肩锋;与Fermentas试剂组合扩增峰高明显不平衡,且个别基因座存在双肩峰。结论应用DNA TyperTM19试剂盒与快速试剂组合直接PCR扩增方法,可有效缩短扩增时间,可根据效果在相关实践中选择使用。
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关键词
法医物证学
DNA
typertm
19
试剂盒
STR
快速PCR
直接PCR
原文传递
快速PCR扩增体系的建立及法医学应用
被引量：
3
2
作者
刘琳
项林平
+7 位作者
胡志敏
董军磊
姜伯玮
白雪
赵蕾
欧元
赵兴春
叶健
《中国法医学杂志》
CSCD
2015年第1期32-35,共4页
目的建立快速PCR扩增体系,探讨其在法医实践中的应用价值。方法设置不同的缓冲液、酶浓度与Mg SO4浓度、热循环参数等,观察不同参数对扩增结果的影响,建立快速PCR扩增体系。使用该体系对常见检材进行STR分型,与常规方法扩增的结果比较,...
目的建立快速PCR扩增体系,探讨其在法医实践中的应用价值。方法设置不同的缓冲液、酶浓度与Mg SO4浓度、热循环参数等,观察不同参数对扩增结果的影响,建立快速PCR扩增体系。使用该体系对常见检材进行STR分型,与常规方法扩增的结果比较,考察其分型准确性与扩增用时。结果本文建立的快速PCR扩增体系含DNA TyperTM19试剂盒的Primer Mix(5×)2μL;Ta KaRa试剂的Fast BufferⅡ(10×)1μL,Speed STARTMHS DNA Polymerase(5U/μL)0.3μL,Mg SO4(50mmol/L)为0.1μL。扩增程序为95℃120s;95℃2s、61℃15s,27个循环;72℃60s。结论快速PCR扩增体系分型结果准确,用时仅19min,缩短了常规扩增用时,有较大的法医学应用价值。
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关键词
法医物证学
DNA
typertm
19
试剂盒
STR
快速PCR
原文传递
题名
FTA卡血样快速直接PCR扩增方法比较初探
被引量：
3
1
作者
刘琳
项林平
胡志敏
董会
于书欣
姜伯玮
赵蕾
欧元
赵兴春
叶健
机构
厦门市公安局
中国人民公安大学
重庆市公安局巴南区分局刑警支队
法庭科学生物芯片工程实验室
公安部第一研究所
公安部物证鉴定中心
出处
《中国法医学杂志》
CSCD
2014年第3期191-193,共3页
基金
国家科技支撑计划课题(2012BAK02B04-1)
国家自然科学基金委员会资助项目(81202384)
公安部科技强警基础工作专项(2011GABJC028)
文摘
目的探索FTA卡血样快速直接PCR扩增方法,比较相关方法的应用价值。方法将DNA TyperTM19试剂盒分别与3种快速试剂(Roche、TaKaRa、Fermentas)组合,以FTA卡血样为模板构建扩增体系,按照经优化的循环参数进行快速直接扩增,并与Typer19试剂盒常规方法相比较,对方法进行评价。结果 Typer19试剂盒分别与3种快速PCR检验试剂进行组合,均可实现快速直接扩增,STR分型结果均与常规方法一致,扩增用时60min,较常规扩增所需的215min缩短了约70%,但Typer19试剂盒与Roche试剂组合基因座间峰高有部分不平衡;与TaKaRa试剂组合扩增个别基因座出现双肩锋;与Fermentas试剂组合扩增峰高明显不平衡,且个别基因座存在双肩峰。结论应用DNA TyperTM19试剂盒与快速试剂组合直接PCR扩增方法,可有效缩短扩增时间,可根据效果在相关实践中选择使用。
关键词
法医物证学
DNA
typertm
19
试剂盒
STR
快速PCR
直接PCR
Keywords
forensic biological evidence
DNA
typertm
19
Kit
STR
rapid PCR
direct PCR
分类号
D919 [医药卫生—法医学]
原文传递
题名
快速PCR扩增体系的建立及法医学应用
被引量：
3
2
作者
刘琳
项林平
胡志敏
董军磊
姜伯玮
白雪
赵蕾
欧元
赵兴春
叶健
机构
厦门市公安局思明分局
中国人民公安大学
重庆市公安局巴南区分局
天津市公安局西青分局
公安部第一研究所
公安部物证鉴定中心
出处
《中国法医学杂志》
CSCD
2015年第1期32-35,共4页
基金
国家科技支撑计划课题(2012BAK02B04-1)
国家自然科学基金资助项目(81202384)
公共安全生物物证检验系列试剂研制与示范应用(Z131100004513007)
文摘
目的建立快速PCR扩增体系,探讨其在法医实践中的应用价值。方法设置不同的缓冲液、酶浓度与Mg SO4浓度、热循环参数等,观察不同参数对扩增结果的影响,建立快速PCR扩增体系。使用该体系对常见检材进行STR分型,与常规方法扩增的结果比较,考察其分型准确性与扩增用时。结果本文建立的快速PCR扩增体系含DNA TyperTM19试剂盒的Primer Mix(5×)2μL;Ta KaRa试剂的Fast BufferⅡ(10×)1μL,Speed STARTMHS DNA Polymerase(5U/μL)0.3μL,Mg SO4(50mmol/L)为0.1μL。扩增程序为95℃120s;95℃2s、61℃15s,27个循环;72℃60s。结论快速PCR扩增体系分型结果准确,用时仅19min,缩短了常规扩增用时,有较大的法医学应用价值。
关键词
法医物证学
DNA
typertm
19
试剂盒
STR
快速PCR
Keywords
forensic biological evidence
DNA Typer^TM
19
kit
STR
rapid PCR
分类号
D919 [医药卫生—法医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
FTA卡血样快速直接PCR扩增方法比较初探
刘琳
项林平
胡志敏
董会
于书欣
姜伯玮
赵蕾
欧元
赵兴春
叶健
《中国法医学杂志》
CSCD
2014
3
原文传递
2
快速PCR扩增体系的建立及法医学应用
刘琳
项林平
胡志敏
董军磊
姜伯玮
白雪
赵蕾
欧元
赵兴春
叶健
《中国法医学杂志》
CSCD
2015
3
原文传递
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