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植物叶片蛋白质双向电泳技术的改进与优化 被引量：45
1
作者 何瑞锋 丁毅 +1 位作者 张剑锋 余金洪 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期319-321,共3页
通过对传统的双向电泳方法进行改进与优化，得到了一种适合于分析植物叶片蛋白质的双向电泳新方法。用改进后的方法对水稻不同时期成熟叶片蛋白质进行双向电泳分离，结果显示其稳定性和重复性好，分辨率较高,经考马斯亮蓝染色后可分辨出... 通过对传统的双向电泳方法进行改进与优化，得到了一种适合于分析植物叶片蛋白质的双向电泳新方法。用改进后的方法对水稻不同时期成熟叶片蛋白质进行双向电泳分离，结果显示其稳定性和重复性好，分辨率较高,经考马斯亮蓝染色后可分辨出300多个蛋白质（肽）点。它们的等电点和分子量主要分布于pI4.1-8.2和10-100kDa之间。本文还就实验过程中出现的一些技术问题进行了讨论。 展开更多
关键词 叶片蛋白质 双向电泳 植物 样品制备 电解质配比
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肾阳虚证候的人血清比较蛋白质组学分析 被引量：31
2
作者 刘希成 梁恒 +3 位作者 田真 刘颖 陈阳 张霖 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期592-599,共8页
利用双向电泳(2-DE)优化分离了除去高丰度蛋白(白蛋白和IgG)的老年体虚肾阳虚患者(以健康组为参照)的血清样本,对比分析pH4～7范围的2-DE谱图,肾阳虚患者和参照组的平均蛋白点分别为(393±32)和(455±19)个.其中肾阳虚证候表达... 利用双向电泳(2-DE)优化分离了除去高丰度蛋白(白蛋白和IgG)的老年体虚肾阳虚患者(以健康组为参照)的血清样本,对比分析pH4～7范围的2-DE谱图,肾阳虚患者和参照组的平均蛋白点分别为(393±32)和(455±19)个.其中肾阳虚证候表达量上调2倍(P<0.05)以上的蛋白点有26个,下调2倍以上的有33个.用质谱获得上述差异蛋白的肽质量指纹图谱,并经数据库检索共鉴定出了49种差异蛋白质,其中有10种在肾阳虚血清中特异表达,有6种在健康组血清中特异表达.蛋白功能分析发现,其中33种蛋白质的差异表达与肾阳虚证密切相关.蛋白质TCRβ及transthyretin的蛋白印迹实验验证了2-DE的结果.该研究结果为阐明中医肾阳虚证的机理提供了一条新途径. 展开更多
关键词 双向凝胶电泳 蛋白质组学 血清 肾阳虚证
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亚健康肾阴虚证的血浆蛋白质组学初步研究 被引量：26
3
作者 孙晓敏 李晓勇 +4 位作者 靳文 王云丹 魏敏 赵晓山 罗仁 《四川中医》 北大核心 2008年第4期7-9,共3页
目的:初步观察亚健康肾阴虚证患者血浆蛋白质组的变化与表达差异,为进一步探讨亚健康的发生机制奠定基础。方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离亚健康肾阴虚证患者与正常人血浆总蛋白,银染显色;PDQuest软件对凝胶图象进行定性定量差异... 目的:初步观察亚健康肾阴虚证患者血浆蛋白质组的变化与表达差异,为进一步探讨亚健康的发生机制奠定基础。方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离亚健康肾阴虚证患者与正常人血浆总蛋白,银染显色;PDQuest软件对凝胶图象进行定性定量差异表达分析;从中选取差异表达蛋白质斑点,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDL-TOF-MS)分析,获取肽质量指纹图谱(PMF);通过Mscot-Wizard软件进行数据库搜索,鉴定蛋白质。结果:获得了重复性和分辨性较好的血浆双向凝胶电泳图谱;在亚健康肾阴虚证血浆较正常人血浆表达量升高的蛋白质斑点11个,表达量降低的蛋白质斑点6个;选取其中表达量升高相差10倍以上的3个蛋白质斑点进行PMF鉴定,得到1个匹配精确的蛋白质(热休克蛋白27)。结论:亚健康肾阴虚证血浆与正常人血浆中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学技术有望对亚健康的发生机制进行阐释,并将促进中医证候研究的拓展和深入。 展开更多
关键词 亚健康肾阴虚证 血浆蛋白质组学 双向凝胶电泳 质谱分析
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蛋白质组学研究方法及其在生物医学中的应用 被引量：16
4
作者 罗元明 刘彦信 郑德先 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2003年第2期113-118,共6页
蛋白质组学方法发展迅速 ,并日见成熟。蛋白芯片技术、双向电泳 -质谱技术、多维液相色谱 -质谱技术等 ,已被广泛应用于寻找疾病相关的差异表达蛋白质、疾病相关的生物标记分子以及药物靶点用于临床诊断、药物设计、以及疾病发病机理的... 蛋白质组学方法发展迅速 ,并日见成熟。蛋白芯片技术、双向电泳 -质谱技术、多维液相色谱 -质谱技术等 ,已被广泛应用于寻找疾病相关的差异表达蛋白质、疾病相关的生物标记分子以及药物靶点用于临床诊断、药物设计、以及疾病发病机理的研究等。本文对上述研究进展作了简要综述。 展开更多
关键词 蛋白质组学 研究方法 生物医学 蛋白芯片 双向电泳-质谱技术 质谱 生物标记分子
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用双向电泳和质谱技术检测NGX6转染后人鼻咽癌细胞表达差异的蛋白质(英文) 被引量：20
5
作者 李江 谭琛 +7 位作者 向秋 张晓梅 马健 李伟芳 王洁如 阳剑波 梁宋平 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期573-578,共6页
NGX6是克隆的鼻咽癌相关基因 ,它的功能与作用机制目前尚不十分清楚 .通过脂质体转染把NGX6导入鼻咽癌细胞株中 ,采用双向凝胶电泳分离细胞内所有蛋白质 ,通过软件分析 ,找到与未处理细胞表达差异的蛋白质 ,通过质谱分析和生物信息学资... NGX6是克隆的鼻咽癌相关基因 ,它的功能与作用机制目前尚不十分清楚 .通过脂质体转染把NGX6导入鼻咽癌细胞株中 ,采用双向凝胶电泳分离细胞内所有蛋白质 ,通过软件分析 ,找到与未处理细胞表达差异的蛋白质 ,通过质谱分析和生物信息学资料处理 .鉴定出七种表达上调的蛋白质 ,其中包括Fas蛋白 ,锌指蛋白(ZNF) ,主要组织相容性抗原Ⅱ (MHCⅡ )等 .Fas蛋白参与细胞凋亡的信号传导途径 ,它的上调可以促进细胞凋亡 ;ZNF蛋白参与基因的转录调控 ,它的上调也可影响细胞异常增殖的信号传导通路 ;MHCⅡ可以促进机体对肿瘤细胞的免疫应答 .这些结果说明NGX6可能通过多种途径抑制鼻咽癌细胞的生长 ,为研究NGX6的作用机制提供了很好的实验资料 ,对鼻咽癌的基因治疗奠定了一定的研究基础 。 展开更多
关键词 双向电泳 细胞转染 基质辅助性激光解吸飞行时间质谱 鼻咽癌相关基因
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双向凝胶电泳中三种蛋白质检测方法的比较 被引量：11
6
作者 马增春 高月 +1 位作者 吕俊萍 王升启 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期551-556,共6页
高通量双向电泳是蛋白质组学的核心 ,双向电泳凝胶上蛋白质点的检测方法应具有灵敏度高、线性范围宽和兼容质谱鉴定等优点 .采用差异凝胶电泳 (differencegelelectrophoresis ,DIGE)技术以Cy3(1 (5 carboxypentyl) 1′ propylindocar... 高通量双向电泳是蛋白质组学的核心 ,双向电泳凝胶上蛋白质点的检测方法应具有灵敏度高、线性范围宽和兼容质谱鉴定等优点 .采用差异凝胶电泳 (differencegelelectrophoresis ,DIGE)技术以Cy3(1 (5 carboxypentyl) 1′ propylindocarbocyaninehalideN hydroxysuccinimidylester)和Cy5 (1 (5 carboxypentyl) 1′ methylindodicarbocyaninehalideN hydroxysuccinimidylester)荧光分别标记正常和TNF α处理细胞的蛋白质 ,用Cy2 (3 (4 carboxymethyl)phenylmethyl) 3′ ethyloxacarbocyaninehalideN hydroxysuccinimidylester)荧光标记正常和TNF α处理细胞蛋白质的等量混合样品作为内标 ,混合 3种荧光标记的蛋白质后 ,在同一等电聚焦胶条进行聚焦 ,然后在聚丙烯酰胺凝胶上进行第二向电泳 ,用 3种波长的激光激发扫描得到凝胶图象 ,DIGE中多个样品在同一条件下电泳 ,因而匹配率高 ,且引入内标使蛋白质点的检测与定量更为准确 .DIGE技术与质谱相结合 ,实现了高通量和相对准确定量 .与硝酸银和考马斯亮蓝染色结果相比较 ,DIGE技术具有灵敏度高。 展开更多
关键词 荧光标记 双向电泳 图象分析 蛋白质组学
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蛋白质组分析中双向聚丙烯酰胺电泳技术的初步建立与优化 被引量：7
7
作者 万晶宏 钱小红 +4 位作者 郭尧君 邢桂春 胡志远 邱宗荫 贺福初 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1998年第4期297-300,共4页
目的：初步建立并优化用于蛋白质组分析的双向电泳技术，提高其分辨率及重复性。方法：以ＨｅｐＧ２细胞为例，对以固相ｐＨ梯度为第一向的双向电泳的关键因素与环节，如样品处理、电泳参数和凝胶浓度进行一系列的优化。结果与结论：本... 目的：初步建立并优化用于蛋白质组分析的双向电泳技术，提高其分辨率及重复性。方法：以ＨｅｐＧ２细胞为例，对以固相ｐＨ梯度为第一向的双向电泳的关键因素与环节，如样品处理、电泳参数和凝胶浓度进行一系列的优化。结果与结论：本研究采用增溶、排异的裂解法处理样品，选择适中的样品量，用预制固相ｐＨ梯度——ＩＰＧ胶条（ｐＨ＝３～１０）第进行第一向等电聚焦，并选用１２％～１４％的梯度胶进行第二向ＳＤＳ分离。 展开更多
关键词 蛋白质组 双向电泳 固相PH梯度 PAGE
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人精子膜蛋白的二维电泳实验研究 被引量：9
8
作者 王浩飞 向祖琼 王益鑫 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第7期504-506,共3页
目的 :利用二维电泳技术对人精子膜蛋白进行分离 ,为建立正常人精子膜蛋白的蛋白质图谱打下基础。　方法 :使用Percoll密度梯度离心筛选精子 ,用等电聚焦结合聚丙烯酰胺凝胶电泳对人精子膜蛋白进行二维电泳分析。　结果 :图像分析软件... 目的 :利用二维电泳技术对人精子膜蛋白进行分离 ,为建立正常人精子膜蛋白的蛋白质图谱打下基础。　方法 :使用Percoll密度梯度离心筛选精子 ,用等电聚焦结合聚丙烯酰胺凝胶电泳对人精子膜蛋白进行二维电泳分析。　结果 :图像分析软件共可识别出约 80 0个蛋白质斑点 ,绝大多数蛋白的相对分子质量为 2 0 0 0 0～ 10 0 0 0 0 ,等电点为 3.0～ 7.0。　结论 :精子膜上至少有 80 0种蛋白 。 展开更多
关键词 精子 膜蛋白 二维电泳
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蛋白质组学技术研究进展 被引量：10
9
作者 刘军莲 李勇枝 +4 位作者 高建义 盖玉清 王静 薛春美 辛冰牧 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期151-156,共6页
随着现代科学技术的飞速发展,现代生物学技术已经发展到后基因组时代,包括人类在内的几十种生物体基因组测序已经完成,生命科学研究的重点从结构基因组研究转移到后基因组时代——功能基因组的研究,蛋白质组学研究是功能基因组一个重要... 随着现代科学技术的飞速发展,现代生物学技术已经发展到后基因组时代,包括人类在内的几十种生物体基因组测序已经完成,生命科学研究的重点从结构基因组研究转移到后基因组时代——功能基因组的研究,蛋白质组学研究是功能基因组一个重要的组成部分。因此,与之相适应,蛋白质组学研究技术也是日新月异,层出不穷,除了最经典的二维凝胶电泳技术,多维液相色谱技术,同位素标记亲和标签技术相继发展起来,蛋白质芯片技术及噬菌体展示技术也得到了较为广泛的应用。本文针对蛋白质组学研究上述关键技术进行了综述。 展开更多
关键词 蛋白质组学 二维凝胶电泳 多维液像色谱 同位素标记亲和标签技术 蛋白质芯片 噬菌体展示技术
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二维电泳和iTRAQ的实验比较 被引量：11
10
作者 潘三强 宿宝贵 吕来清 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期538-542,共5页
对蛋白组学中的二维电泳和iTRAQ两种技术进行比较研究,为神经科学的蛋白组学研究提供选择参考。取生后1～3d C57Bl/6小鼠背根神经节进行培养,对照组加DMSO,实验组加JNJ460。分别用二维电泳和iTRAQ两种技术检测背根神经节细胞蛋白的变化,... 对蛋白组学中的二维电泳和iTRAQ两种技术进行比较研究,为神经科学的蛋白组学研究提供选择参考。取生后1～3d C57Bl/6小鼠背根神经节进行培养,对照组加DMSO,实验组加JNJ460。分别用二维电泳和iTRAQ两种技术检测背根神经节细胞蛋白的变化,用4700 TOF/TOF串联飞行质谱仪检测变化蛋白的肽片段质量,用GPS软件检索Mascot蛋白质数据库,鉴定出匹配的蛋白。利用二维电泳技术观察到4种表达上调的蛋白,2种是结构蛋白,2种是信号转导蛋白。利用iTRAQ技术观察到22种表达上调的蛋白,其中10种是结构蛋白,3种是信号蛋白,2种是代谢蛋白,2种是降解蛋白化,2种是细胞基质蛋白及3种其它蛋白。利用二维电泳技术观察到发生表达变化的蛋白都位于胞浆内,而利用iTRAQ技术观察到的表达变化的蛋白有胞浆蛋白外,还有线粒体蛋白、膜蛋白和核蛋白。同时,利用二维电泳技术观察到的蛋白变化都在2倍以上,而利用iTRAQ技术计算出的蛋白变化在1.3至1.6倍之间。另,iTRAQ技术在鉴定大分子和小分子蛋白方面也有优势。结果表明iTRAQ技术比二维电泳技术能发现更多数量和更多种类的蛋白,但在比较胞浆蛋白的变化及蛋白量的变化方面二维电泳技术有一定的长处,对iTRAQ的实验结果有互补作用。 展开更多
关键词 二维电泳 ITRAQ 蛋白组学 背根神经节
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双向凝胶电泳图像分析方法的建立 被引量：3
11
作者 熊兴东 许丽艳 +5 位作者 沈忠英 蔡唯佳 韩溟 牛永东 韩雅莉 李恩民 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2002年第3期139-143,共5页
目的 :建立一套双向凝胶电泳图像分析方法 ,为下一步差别蛋白的鉴定提供依据。方法 :采用一步法分别提取人永生化食管上皮细胞系SHEE和由SHEE转化而来的食管癌细胞系SHEEC的可溶性总蛋白。经双向凝胶电泳分离后 ,应用Bio Rad公司的双向... 目的 :建立一套双向凝胶电泳图像分析方法 ,为下一步差别蛋白的鉴定提供依据。方法 :采用一步法分别提取人永生化食管上皮细胞系SHEE和由SHEE转化而来的食管癌细胞系SHEEC的可溶性总蛋白。经双向凝胶电泳分离后 ,应用Bio Rad公司的双向电泳凝胶图像分析软件PDQuest 6 .2分析SHEE与SHEEC之间可溶性总蛋白的差异表达情况。结果 :SHEE和SHEEC细胞的双向电泳图谱经背景消减、点检测和匹配后 ,获得了各自的差异蛋白点。其中有 7个蛋白点只出现在SHEE细胞中 ,有 2个蛋白点只出现在SHEEC细胞中。结论 :利用PDQuest 6 .2凝胶图像分析软件可快速有效地对两个密切相关的生物系统之间蛋白质样品双向凝胶电泳结果的差别进行分析处理。 展开更多
关键词 双向凝胶电泳 凝胶图像分析 蛋白质组 PDQuest软件 蛋白鉴定
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胰腺癌血浆蛋白质组学研究 被引量：9
12
作者 邓瑞雪 卢朝辉 +2 位作者 陈原稼 周璐 陆星华 《中国消化内镜》 2007年第7期39-47,共9页
目的利用双向电泳(2-DE)的方法进行胰腺癌的比较蛋白质组学研究,寻找和鉴定与胰腺癌相关或特异的生物标志分子。方法选择12例胰腺癌患者以及与之性别年龄匹配的12例正常人和10例慢性胰腺炎患者的血浆标本进行研究。对去除ALB和IgG等预... 目的利用双向电泳(2-DE)的方法进行胰腺癌的比较蛋白质组学研究,寻找和鉴定与胰腺癌相关或特异的生物标志分子。方法选择12例胰腺癌患者以及与之性别年龄匹配的12例正常人和10例慢性胰腺炎患者的血浆标本进行研究。对去除ALB和IgG等预分离方法进行探索,确定最佳的血浆2-DE方案。通过比较胰腺癌(术前、术后)、正常人和慢性胰腺炎患者的血浆2-DE图谱,寻找差异蛋白并进行质谱鉴定。结果去除ALB和IgG以及超滤的预处理仅使血浆2-DE图谱的局部分辨率提高。共发现并鉴定了5种与胰腺癌或慢性胰腺炎相关的差异蛋白:Haptoglobin(Hp),Hemoglobin(Hb),α1-antitrypsin(α1AT),Immunoglobin J chain(Ig J) and Leucine-rich α2-glycoprotein(LRG)。Hp β链在胰腺癌患者中轻度升高,胰腺癌患者的Hp2-2表型的比例高于正常人,而缺少Hp1-1表型。胰腺癌和慢性胰腺炎患者的血浆Hb高于正常人。α1AT的变化趋势为慢性胰腺炎>胰腺癌>正常人。慢性胰腺炎患者的IgJ链高于胰腺癌患者和正常人,可能来源于血分泌型IgA(sIgA)。胰腺癌患者的LRG水平较正常人和慢性胰腺炎轻度升高。术后Hp、α1AT和LRG均明显升高,未发现术后明显下降的蛋白。结论去除ALB和IgG以及超滤去除大分子的预处理方法对于血浆蛋白的差异比较并无太大优势,但在质谱鉴定方面可以与未处理的方法互相补充。在发现的5种差异蛋白中,Hp的表型、Hb、IgJ链和LRG与胰腺癌或慢性胰腺炎的关系在以往的文献中未见报道,这些差异蛋白对于胰腺癌或慢性胰腺炎的意义及诊断价值还需要进一步的验证。 展开更多
关键词 Pancreatic cancer Protein profile PLASMA Chronic pancreatitis two dimensional gel electrophoresis
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脾阴虚证大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳的研究 被引量：10
13
作者 战丽彬 刘莉 +1 位作者 路小光 宫晓洋 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期149-152,共4页
目的:应用双向凝胶电泳方法初步分析脾阴虚证大鼠海马蛋白质组的表达,为进一步探讨脾阴虚所致脑损伤的分子机制提供依据。方法:采用饮食不节、劳倦过度联合耗伤阴液法建立脾阴虚证大鼠模型,对脾阴虚组和空白对照组海马蛋白质组表达进行... 目的:应用双向凝胶电泳方法初步分析脾阴虚证大鼠海马蛋白质组的表达,为进一步探讨脾阴虚所致脑损伤的分子机制提供依据。方法:采用饮食不节、劳倦过度联合耗伤阴液法建立脾阴虚证大鼠模型,对脾阴虚组和空白对照组海马蛋白质组表达进行比较,观察分析其差异。结果:脾阴虚组出现易激惹、咬斗,肛温升高,饮水量增加等脾阴虚表现(P<0.05)。通过双向凝胶电泳图谱比较发现脾阴虚组海马蛋白质组中有6个蛋白点表达发生明显改变,其中5个蛋白点表达明显下调,1个表达显著上调。结论:应用双向凝胶电泳方法初步筛选出脾阴虚大鼠海马蛋白质组的差异表达,推测与学习记忆相关。 展开更多
关键词 脾阴虚 海马 学习记忆 蛋白质组 双向凝胶电泳
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蛋白质组学研究技术与展望 被引量：8
14
作者 杨礼富 《热带农业科学》 2007年第2期58-62,共5页
蛋白质组学是继基因组学之后兴起的一门前沿学科。本文简要介绍蛋白质组学的概念和研究意义,以及蛋白质组学的主要研究技术,并展望蛋白质组学的技术前景。
关键词 蛋白质组学 双向凝胶电泳 质谱 酵母双杂交 同位素亲和标签
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肾移植急性排斥反应早期诊断尿液蛋白质组学研究 被引量：7
15
作者 贾雄飞 贺伟峰 +9 位作者 罗高兴 甘成军 黄正根 袁顺宗 王小娟 彭旭 程文广 谭江琳 胡婕 吴军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期2267-2271,共5页
目的利用二维凝胶电泳和生物信息学技术,从严格筛选的2例肾移植术后发生急性排斥反应患者尿液标本中,寻找急性排斥反应早期标志物。方法在pH值为4～7范围,采用Sypro-Ruby染色,对发生急性排斥反应过程的不同时间点(-3,-2,-1,7,14,21d)的... 目的利用二维凝胶电泳和生物信息学技术,从严格筛选的2例肾移植术后发生急性排斥反应患者尿液标本中,寻找急性排斥反应早期标志物。方法在pH值为4～7范围,采用Sypro-Ruby染色,对发生急性排斥反应过程的不同时间点(-3,-2,-1,7,14,21d)的患者尿液二维凝胶电泳(Two-dimensional Gel Electrophoresis,2-DE)图谱进行比较,挑选了30个有上调或者下调趋势的蛋白点。将这些蛋白点进行切胶、胰酶消化后用MALDI-TOF-MS/MS分析。结果得到了重复性好、分辨率高的肾移植术后尿蛋白2-DE图谱。30个差异蛋白点经质谱分析和数据库检索,鉴定了16个蛋白点,对应13种蛋白质。根据蛋白功能查询结果,发现了3个蛋白含量变化趋势与排斥反应密切相关的蛋白,分别是α-1抗胰凝乳蛋白酶(alpha-1-antichymotrypsin,AACT)、肿瘤排斥抗原gp96(tumor rejection antigen gp96)和锌-α2糖蛋白(Zn-Al-pha-2-Glycoprotein)。结论肾移植术后发生急性排斥反应患者的不同时间点尿液2-DE图谱存在明显差异。AACT、肿瘤排斥抗原gp96和锌-α2糖蛋白可能作为临床诊断肾移植术后急性排斥反应的标志物候选蛋白。 展开更多
关键词 肾移植 急性排斥反应 二维电泳 质谱
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不同生长时期梅花鹿鹿茸差异蛋白质组学分析 被引量：7
16
作者 张然然 刘华淼 +4 位作者 邵元臣 周盼伊 苏莹 王磊 邢秀梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期493-501,共9页
旨在从分子水平认识鹿茸生长机制,本研究以10、40、60与130d的梅花鹿鹿茸为试验材料,运用双向凝胶电泳(2-DE)、质谱鉴定技术与生物信息学方法对梅花鹿鹿茸生长过程中差异表达蛋白质进行研究。结果显示,有46种蛋白质差异性表达,且主要参... 旨在从分子水平认识鹿茸生长机制,本研究以10、40、60与130d的梅花鹿鹿茸为试验材料,运用双向凝胶电泳(2-DE)、质谱鉴定技术与生物信息学方法对梅花鹿鹿茸生长过程中差异表达蛋白质进行研究。结果显示,有46种蛋白质差异性表达,且主要参与细胞骨架、转运过程、信号转导、细胞凋亡、骨发育、蛋白质合成、核酸代谢、免疫、能量代谢、细胞增殖、抗氧化、蛋白质折叠等生物学过程。结合鹿茸的快速生长与快速骨化的独特生长过程,对差异表达蛋白质中的骨发育相关蛋白、抗氧化蛋白、细胞凋亡相关蛋白做进一步分析,发现P4HB、SPARC、过氧化物还原酶2、过氧化物还原酶4、半乳糖凝集素1、视黄酸结合蛋白1等6种蛋白质在鹿茸快速生长与快速骨化过程中起着重要的作用,为鹿茸生长与骨化机制的进一步研究奠定基础。 展开更多
关键词 梅花鹿 鹿茸 不同生长时期 双向凝胶电泳 蛋白质组学
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用双向电泳分析日本血吸虫雌虫和雄虫抗原 被引量：6
17
作者 高兴政 谭荣安 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第2期65-68,共4页
目的　研究日本血吸虫雌虫和雄虫的可溶性抗原。方法　用 SDS- PAGE和双向电泳方法 ,对日本血吸虫两性成虫全虫可溶性抗原进行分析。结果　用 SDS- PAGE分析日本血吸虫雌虫和雄虫分别有 10条和 17条蛋白带 ,其中有 9条相同蛋白带 ;用双... 目的　研究日本血吸虫雌虫和雄虫的可溶性抗原。方法　用 SDS- PAGE和双向电泳方法 ,对日本血吸虫两性成虫全虫可溶性抗原进行分析。结果　用 SDS- PAGE分析日本血吸虫雌虫和雄虫分别有 10条和 17条蛋白带 ,其中有 9条相同蛋白带 ;用双向电泳分析雌雄虫体多肽斑点分别有 111个 (主多肽斑点有 19个 )和 132个 (主多肽斑点有 2 8个 ) ,分子量范围在 2 7k D～ >10 0 k D,而p I范围为 3.2 0～ 8.15 ,两性有 35个相同多肽点 ,但其多肽含量略有差异。结论　日本血吸虫雌、雄成虫存在许多共同蛋白带和多肽斑点 (其中有些蛋白和多肽含量差异明显 ) 。 展开更多
关键词 双向电泳分析 日本血吸虫 雌虫 雄虫 可溶性抗原
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镉胁迫下三个萝卜栽培种蛋白质变化的双向电泳比较研究(英文) 被引量：4
18
作者 范宝莉 王振英 彭永康 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期298-303,共6页
在0.5mmol·L-1Cd2+处理时,小五缨(XWY)的发芽率下降至92%,并且随着Cd2+浓度的增加,发芽率逐渐降低,在1和5mmol·L-1Cd2+浓度处理时,发芽率分别降至83%和67%。象牙白(XYB)则在5mmol·L-1Cd2+浓度时,发芽率下降。卫青(WQ)在0... 在0.5mmol·L-1Cd2+处理时,小五缨(XWY)的发芽率下降至92%,并且随着Cd2+浓度的增加,发芽率逐渐降低,在1和5mmol·L-1Cd2+浓度处理时,发芽率分别降至83%和67%。象牙白(XYB)则在5mmol·L-1Cd2+浓度时,发芽率下降。卫青(WQ)在0.05mmol·L-1Cd2+浓度时,发芽率已降至83%,1和5mmol·L-1时则下降至58%。幼苗生长也明显受Cd2+处理影响,在0.05mmol·L-1Cd2+处理时,3种栽培萝卜的幼苗生长均受到明显影响,并且随Cd2+浓度的增加,生长受抑加重。从发芽率和幼苗生长两种实验结果看,卫青对Cd2+最为敏感。双向电泳结果表明,Cd2+处理后3种栽培萝卜幼苗中蛋白质组分有明显变化。小五缨中,0.1mmol·L-1Cd2+处理后,有5个蛋白质点消失,15个新的蛋白质点被诱导产生。象牙白中,2个蛋白质点消失,1个蛋白质点含量减少,13个新的蛋白质点被诱导产生。卫青中,12个新的蛋白质点诱导产生,但没有发现蛋白质点消失现象。Cd2+处理后,3种栽培萝卜中,蛋白质合成的变化与幼苗生长受抑存在明显相关性,这一实验结果对于探讨萝卜Cd2+害的生化机理是有重要意义的。 展开更多
关键词 发芽率 双向电泳 蛋白质斑点 镉 萝卜 蛋白质变化 栽培种 Cd^2+处理 比较研究 镉胁迫
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基于胃液动态消化模型下SPI乳液酶解产物特性的研究 被引量：6
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作者 付笑飞 管军军 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2017年第7期56-62,共7页
本研究利用胃液动态消化模型,探讨了大豆分离蛋白(SPI)乳液(O/W型和W/O型)在胃液酶解消化过程中酶解产物的特性。显微镜检和粒径测定发现,经酶解消化后,乳液液滴逐渐发生分离、絮凝和结合现象,O/W型液滴趋于逐渐变大,而W/O型液滴趋于逐... 本研究利用胃液动态消化模型,探讨了大豆分离蛋白(SPI)乳液(O/W型和W/O型)在胃液酶解消化过程中酶解产物的特性。显微镜检和粒径测定发现,经酶解消化后,乳液液滴逐渐发生分离、絮凝和结合现象,O/W型液滴趋于逐渐变大,而W/O型液滴趋于逐渐变小。乳液经胃液酶解消化后,电位值均由胃液酶解前的负值变成正值,且O/W型电位值逐渐降低,W/O型电位值逐渐升高。说明强酸环境使乳液界面蛋白带电电荷残基发生变化,导致了乳液表面电荷的稳定失衡。两者的游离氨基酸含量都呈先升高后降低的趋势,小肽含量则是O/W型乳液先降低后升高,而W/O型乳液始终呈升高趋势,可推断,O/W型乳液在酶解消化过程中存在二次乳化现象,W/O型乳液没有。聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)和双向电泳分析乳液蛋白组分变化均表明,在胃液的酶解消化过程中,11S蛋白比7S蛋白更易酶解,且其在W/O型乳液中比O/W型乳液中酶解更快,β亚基不易酶解。双向电泳还表明,7S蛋白中偏碱性的亚基易酶解,11S蛋白中偏酸性的亚基易酶解。 展开更多
关键词 大豆分离蛋白 乳液 胃液动态消化模型 胃蛋白酶 SDS-PAGE 双向电泳
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河南食管癌高发区同一患者食管癌手术前后血清蛋白质组变化分析 被引量：3
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作者 安继业 秦艳茹 +4 位作者 庄则豪 范宗民 高姗姗 李吉林 王立东 《中国综合临床》 北大核心 2006年第11期1026-1028,共3页
目的应用双向电泳和质谱技术分析食管癌患者手术前后血清中蛋白质变化情况,寻找用于食管癌早期诊断的特异标志物。方法双向电泳分离正常人及食管癌患者手术前后血清总蛋白,银染显色;ImageMaster2-DE软件分析得到其蛋白表达谱。结果正常... 目的应用双向电泳和质谱技术分析食管癌患者手术前后血清中蛋白质变化情况,寻找用于食管癌早期诊断的特异标志物。方法双向电泳分离正常人及食管癌患者手术前后血清总蛋白,银染显色;ImageMaster2-DE软件分析得到其蛋白表达谱。结果正常人及食管癌患者手术前后血清电泳平均筛选出的蛋白点数目分别为655、662、677;术前组与正常对照组蛋白点的密度和分布差异不明显,术后组与术前及正常组比较发现7个蛋白点存在明显差异:6个蛋白点表达上调,1个蛋白点表达下调。选取其中3个蛋白点进行MALDI-TOF-MS鉴定,结果显示此3个点的蛋白分别为血清淀粉样蛋白-A、血清淀粉样蛋白和触珠蛋白。结论血清淀粉样蛋白-A、触珠蛋白等可能与食管癌变和/或肿瘤手术本身有一定的相关性,它们与食管癌变的关系尚需更多的研究来证实;本研究为食管癌血清蛋白质组图谱的建立提供了有益的信息资料。 展开更多
关键词 食管癌 双向电泳 蛋白质组
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