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重组DNA甲基化酶1表达质粒对结肠癌细胞相关基因表达的影响 被引量:9
1
作者 陆嵘 房静远 +3 位作者 朱红音 陈萦晅 程中华 李恩灵 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期67-70,共4页
目的 分析DNA甲基化酶 1(DNMT1)基因的真核表达质粒对人结肠癌细胞肿瘤相关基因的表达影响。方法 分别构建并转染含有人正义和反义DNMT1的真核表达质粒入结肠癌SW 1116细胞 ,PCR和限制性内切酶证实转染结果 ,以Western印迹法分析各组... 目的 分析DNA甲基化酶 1(DNMT1)基因的真核表达质粒对人结肠癌细胞肿瘤相关基因的表达影响。方法 分别构建并转染含有人正义和反义DNMT1的真核表达质粒入结肠癌SW 1116细胞 ,PCR和限制性内切酶证实转染结果 ,以Western印迹法分析各组细胞DNMT1蛋白的表达情况。定量PCR检测hMLH1、hMSH2及c myc、p16 INK4A 基因的表达。结果 经G4 18筛选得到稳定转染DNMT1基因的结肠癌细胞系 ,且分别在该转染有正义和反义质粒的细胞系中 ,DNMT1蛋白表达上调和下调。同时发现转染正义DNMT1的细胞中hMLH1、hMSH2及c myc的表达降低 ,而转染反义DNMT1的细胞中hMSH2的表达明显增强。各组细胞p16 INK4A基因的表达差异不明显。 展开更多
关键词 DNA甲基化酶1 基因重组 结肠癌细胞系 肿瘤相关基因 基因转染 WESTERN印迹法
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HER2参与的基因表达调控 被引量:2
2
作者 陈立勇 郭宁军 《生物技术通讯》 CAS 2006年第3期398-401,共4页
HER2与许多恶性肿瘤的发生、发展密切相关。HER2可通过信号转导途径间接调控许多肿瘤相关基因的表达,亦可作为转录因子直接调控某些基因的表达,而一些基因表达产物又进而增强HER2或其他基因的表达,这就构成了以HER2为中心的基因表达调... HER2与许多恶性肿瘤的发生、发展密切相关。HER2可通过信号转导途径间接调控许多肿瘤相关基因的表达,亦可作为转录因子直接调控某些基因的表达,而一些基因表达产物又进而增强HER2或其他基因的表达,这就构成了以HER2为中心的基因表达调控网络,这些基因表达产物和HER2可能共同成为肿瘤诊断和预后的标志物。阐明这个网络中各个分子间的相互作用关系,将为HER2过表达肿瘤的治疗提供新的药物设计靶标。 展开更多
关键词 HER2 肿瘤相关基因 表达调控
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人结肠癌细胞系中癌相关基因的表达及表型遗传修饰的影响 被引量:1
3
作者 陈萦晅 房静远 +7 位作者 陆娟 杨丽 朱红音 童菊芳 沈冠凤 罗鸿妤 邱德凯 萧树东 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期533-538,共6页
目的 观察DNA甲基化和组蛋白乙酰化对人结肠癌细胞系癌相关基因的表达和细胞周期的影响。方法 培养 2种结肠癌细胞系SW 1 1 1 6和Colo 32 0 ,分别以去甲基化制剂 5 氮脱氧胞苷 (5 aza 2′ deoxycytidine ,5 aza dC)和 (或 )组蛋白... 目的 观察DNA甲基化和组蛋白乙酰化对人结肠癌细胞系癌相关基因的表达和细胞周期的影响。方法 培养 2种结肠癌细胞系SW 1 1 1 6和Colo 32 0 ,分别以去甲基化制剂 5 氮脱氧胞苷 (5 aza 2′ deoxycytidine ,5 aza dC)和 (或 )组蛋白脱乙酰化酶 (histonedeacetylase ,HDAC)抑制剂trichostatinA(TSA)及丁酸盐干预细胞。提取细胞总RNA ,以RT PCR和定量RT PCR法研究抑癌基因p1 6 INK4A、APC、p2 1 WAF1 、p5 3和 p73以及癌基因c myc和c Ki ras、凋亡抑制基因survivinmRNA表达水平 ;并运用流式细胞术检测细胞周期变化。结果 正常情况下 ,SW 1 1 1 6和Colo 32 0细胞系中均有较弱的 p1 6 INK4A和APC表达 ;两种结肠癌细胞系 p2 1 WAF1 表达缺如 ,而 p5 3、p73和c myc、c Ki ras以及survivin均表达。以 5 aza dC干预后 ,p1 6 INK4A和APC表达增强 ,且不同的结肠癌细胞系表达增强最明显时 5 aza dC干预的时间与浓度不同。相反 p2 1 WAF1 仍无明显表达。值得注意的是这两个细胞系经TSA或丁酸盐处理后 ,p2 1 WAF1 转录水平显著上调。p5 3、p73、c myc、c Ki ras和survivin基因在干预前后表达无明显变化。另外 ,5 aza dC并不能改变细胞周期 ,而TSA或丁酸盐使细胞阻滞于G1 期。结论 两种人结肠癌细胞系中 ,p1 展开更多
关键词 人结肠癌细胞系 相关基因 基因表达 表型遗传修饰 细胞周期
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六个人肾癌细胞系的建立及生物学特性的研究 被引量:1
4
作者 万云霞 马建辉 +5 位作者 陈毓仙 李艳芬 张学斌 石卫 李秀琴 储大同 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期521-523,共3页
目的 建立人肾癌细胞系 ,研究肾癌细胞表型及其肿瘤相关抗原的表达。 方法 病理证实的 6例肾癌原始新鲜肿瘤组织经体外原代和传代培养至稳定生长 ,检测癌细胞集落形成、染色体及裸鼠体内移植瘤生长 ;免疫荧光染色和流式细胞仪分析细... 目的 建立人肾癌细胞系 ,研究肾癌细胞表型及其肿瘤相关抗原的表达。 方法 病理证实的 6例肾癌原始新鲜肿瘤组织经体外原代和传代培养至稳定生长 ,检测癌细胞集落形成、染色体及裸鼠体内移植瘤生长 ;免疫荧光染色和流式细胞仪分析细胞系细胞表型 ;RT PCR检测MN/CA9基因表达。 结果 建立的 6个细胞系包括透明细胞型 4个 ,透明 嗜色细胞混合型 1个和乳头状腺癌 1个。 6个细胞系均表现恶性肿瘤细胞的生物学特性。 6个细胞系均高表达HLA ClassⅠ和HER2 /neu分子 ;2个弱表达HLA ClassⅡ ;1个高表达CD86 ;均不表达CD80。 3个细胞系表达MN/CA9基因。 结论 新建立的肾癌细胞系可作为研究人肾癌细胞的生物学特性、肿瘤相关抗原。 展开更多
关键词 肾癌细胞系 细胞表型 肿瘤相关抗原 免疫荧光染色 流式细胞仪 生物学特性
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HER-2癌基因信号转导与肿瘤发生之间的关系 被引量:1
5
作者 姜尧 任德莲 《医学综述》 2008年第11期1652-1654,共3页
HER-2与许多恶性肿瘤的发生、发展密切相关。HER-2可通过信号转导途径间接调控许多肿瘤相关基因的表达,亦可作为转录因子直接调控某些基因的表达,而一些基因表达产物又进而增强HER-2或其他基因的表达,这就构成了以HER-2为中心的基因表... HER-2与许多恶性肿瘤的发生、发展密切相关。HER-2可通过信号转导途径间接调控许多肿瘤相关基因的表达,亦可作为转录因子直接调控某些基因的表达,而一些基因表达产物又进而增强HER-2或其他基因的表达,这就构成了以HER-2为中心的基因表达调控网络,这些基因表达产物和HER-2可能共同成为肿瘤诊断和预后的标志物。阐明这个网络中各个分子间的相互作用关系,将为HER-2过表达肿瘤的治疗提供新的药物设计靶标。 展开更多
关键词 肿瘤 人表皮生长因子受体2 肿瘤相关基因 表达调控
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MUC1及同种型MUC1/Y基因mRNA在膀胱癌中的表达及临床意义 被引量:1
6
作者 罗刚 周四维 +4 位作者 叶章群 李志坚 黎卫 周华扩 高新 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第19期1089-1091,1096,共4页
目的:探讨肿瘤相关抗原MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因在膀胱癌中mRNA的表达及其临床意义。方法:22例膀胱癌的组织样本(实验组)和10例正常膀胱组织样本(对照组)中提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测两组样本中MUC1及同种... 目的:探讨肿瘤相关抗原MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因在膀胱癌中mRNA的表达及其临床意义。方法:22例膀胱癌的组织样本(实验组)和10例正常膀胱组织样本(对照组)中提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测两组样本中MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因mRNA表达水平。结果:膀胱癌组织的MUC1mRNA水平较正常膀胱组织显著增高(P<0.01);Ⅲ-Ⅳ期膀胱癌组织的MUC1/YmRNA水平较Ⅰ-Ⅱ期膀胱癌组织显著增高(P<0.01)。结论:MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因mRNA表达水平与膀胱癌有关,对膀胱癌的诊断和治疗有临床意义。 展开更多
关键词 肿瘤相关抗原 MUC1 MUC1/Y基因表达膀胱癌
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肝癌染色体高频缺失区肿瘤相关基因cSNP在HBV患者和正常人群中的多态分布研究 被引量:1
7
作者 王娟 倪虹 +2 位作者 陈力 陈成彬 宋文芹 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期1-5,共5页
从定位于肝癌高频缺失区的肿瘤相关基因入手,查询单核苷酸多态性(SNP)数据库信息,获得编码区SNP(cSNP)序列,设计引物,根据SNP位点设计寡核苷酸探针,构建SNP芯片.分别从正常人和HBV患者血样中提取基因组DNA,PCR扩增标记含SNP位点的序列... 从定位于肝癌高频缺失区的肿瘤相关基因入手,查询单核苷酸多态性(SNP)数据库信息,获得编码区SNP(cSNP)序列,设计引物,根据SNP位点设计寡核苷酸探针,构建SNP芯片.分别从正常人和HBV患者血样中提取基因组DNA,PCR扩增标记含SNP位点的序列,将地高辛标记的PCR产物与SNP芯片杂交.结果表明,正常人基因组与HBV患者基因组肿瘤相关基因SNP之间存在差异,检测到EGFL3(rs947 345),Gas- pase9(rs2 308 950),E2F2(rs3 218 171)三个cSNP位点的基因频率在两组人群中差异显著.HBV患者中存在的高频多态位点可能与其肝癌易感性相关. 展开更多
关键词 肿瘤相关基因 乙型肝炎病毒 单核苷酸多态性 易感性
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检测胃癌患者血清肿瘤相关基因超甲基化的可行性及其意义分析
8
作者 李明红 刘秀芳 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第B22期40-41,54,共3页
目的观察和分析对胃癌患者血清中肿瘤相关基因超甲基化进行检测的可行性与临床意义。方法收集2014—03—2015-02我院原发性胃癌患者40例进行临床研究,并将其作为研究组。同时选同期我院健康体检的40例健康人群作为对照组。采用甲基化... 目的观察和分析对胃癌患者血清中肿瘤相关基因超甲基化进行检测的可行性与临床意义。方法收集2014—03—2015-02我院原发性胃癌患者40例进行临床研究,并将其作为研究组。同时选同期我院健康体检的40例健康人群作为对照组。采用甲基化特异性PCR(MSP)检测方法对两组患者的E—cadherin、GSTP1、hMLH1、p15和p16等基因的启动子超甲基化进行检测,并进行比较分析。结果E-cadherin、GSTP1、hMLHI、p15和p16等基因在胃癌组织中的超甲基化率依次为77.5%、22.5%、30.0%、60.0%和70.0%,血清中依次为37.5%、15.0%、12.5%、25.0%和30.0%。34例患者的血清中可检测到异常甲基化。结论胃癌患者的血清中能够同时检测到多个基因的异常甲基化,血清肿瘤相关基因的超甲基化检测存在较高的敏感度和特异性,具有良好的临床检测意义。 展开更多
关键词 胃癌 肿瘤相关基因 超甲基化 可行性 临床价值
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人肝癌细胞系中肿瘤相关基因MAGE的克隆 被引量:10
9
作者 武文 隋延仿 +5 位作者 叶菁 李增山 郭爱林 杨欣伟 曲萍 张秀敏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期270-273,共4页
目的 克隆人肝癌细胞系HHCC中的肿瘤相关基因MAGE 1的全长cDNA。方法 根据GenBank中MAGE 1基因编码区 ,设计PCR引物 ,用RT PCR方法 ,从人肝癌细胞系HHCC中获得MAGE 1全长cDNA ,双酶切后连接入质粒 pUC19中 ,转化入大肠杆菌DH5α。挑... 目的 克隆人肝癌细胞系HHCC中的肿瘤相关基因MAGE 1的全长cDNA。方法 根据GenBank中MAGE 1基因编码区 ,设计PCR引物 ,用RT PCR方法 ,从人肝癌细胞系HHCC中获得MAGE 1全长cDNA ,双酶切后连接入质粒 pUC19中 ,转化入大肠杆菌DH5α。挑选阳性克隆提取质粒 ,进行DNA序列分析 ,并将测得的核苷酸序列与GenBank中的DNA序列进行BLAST同源性分析。结果 获得MAGE 1全长cDNA、MAGE 6基因 4 6 3bp片段 ,以及 1个与MAGE 6基因编码区有 93%同源性的片段 ,可能为MAGE家族中的新成员。结论 人肝癌细胞系HHCC可表达多种MAGE基因 ,可能有新的MAGE基因出现 ,为研究MAGE基因在HCC中的表达模式及其在HCC免疫治疗中的靶点提供了新的资料。 展开更多
关键词 抗原肽 肝癌 免疫治疗
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人肺癌相关抗原的基因克隆 被引量:4
10
作者 曹志敏 范慕贞 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期122-124,共3页
目的克隆人肺癌相关抗原的基因。方法用λgt11Sfi-Not定向克隆载体构建人肺鳞癌细胞系L-78的cDNA文库,并以抗人肺癌单抗ALT-04为探针进行了筛选。对名为hlc-14的cD-NA克隆作了测序分析与进一步研... 目的克隆人肺癌相关抗原的基因。方法用λgt11Sfi-Not定向克隆载体构建人肺鳞癌细胞系L-78的cDNA文库,并以抗人肺癌单抗ALT-04为探针进行了筛选。对名为hlc-14的cD-NA克隆作了测序分析与进一步研究。用重组的pXJ41-hlc14质粒转染NIH3T3细胞,通过免疫组化法对克隆基因进行了表达检测与鉴定,还观察了转染细胞的软琼脂集落形成能力。结果建成1.4×106pfu/ml人肺癌cDNA文库,经过四轮免疫学筛选获得6个cDNA克隆,最大的cDNA克隆为hlc-14,长954bp。对该克隆的测序结果与基因库资料比较,未发现同源序列。hlc-14cDNA转染的NIH3T3细胞有明显的肺癌相关抗原表达,并且在软琼脂中的集落形成能力增强。结论hlc-14是一个新的肺癌相关抗原的cDNA序列。这一序列的发现为阐明肺癌的发病机理。 展开更多
关键词 肺肿瘤 肿瘤相关抗原 CDNA文库 基因克隆
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肿瘤抗原基因OVA66对肿瘤细胞生物学特征的影响 被引量:8
11
作者 李美星 王树军 +4 位作者 王颖 张惠珍 尤强 周光炎 葛海良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期185-188,共4页
目的:探讨肿瘤抗原基因OVA66对肿瘤细胞生物学特征的影响。方法:采用脂质体法,以重组真核表达载体pcDNA3.1-OVA66转染肝癌细胞系SMMC-7721,经G418稳定筛选、克隆及扩增,采用RT-PCR、Westernblot和免疫细胞化学(ICC)染色法,检测目的基因... 目的:探讨肿瘤抗原基因OVA66对肿瘤细胞生物学特征的影响。方法:采用脂质体法,以重组真核表达载体pcDNA3.1-OVA66转染肝癌细胞系SMMC-7721,经G418稳定筛选、克隆及扩增,采用RT-PCR、Westernblot和免疫细胞化学(ICC)染色法,检测目的基因及其蛋白的表达。用FACS检测细胞周期的变化;电镜技术观察细胞的超微结构;体外运动、侵袭实验检测细胞运动及侵袭能力;并应用基因芯片技术检测相关基因的差异表达。结果:RT-PCR检测显示,转染pcDNA3.1-OVA66的细胞中OVA66基因呈高表达。Westernblot显示,在OVA66蛋白处出现明显的条带。电镜和FACS检测表明,该基因可增强肿瘤细胞的增殖能力。体外运动、侵袭实验证实,该基因可促进肿瘤细胞的迁移、侵袭。基因芯片显示,该基因的高表达可促进Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)等基因的表达,影响肿瘤的侵袭和转移。结论:OVA66基因及其蛋白可促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等一系列生物学功能。 展开更多
关键词 OVA66 肿瘤相关基因 基因芯片 侵袭
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人胃癌组织DNA甲基化酶、去甲基化酶与肿瘤相关基因的表达 被引量:7
12
作者 程中华 房静远 +5 位作者 杨丽 陈萦晅 陆嵘 陆娟 朱红音 顾伟齐 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期203-206,共4页
目的 探讨胃癌组织中甲基化酶、去甲基化酶基因与肿瘤相关癌基因和抑癌基因的关系。方法 取 2 8例胃癌手术标本的癌区、癌旁、正常组织 ,分别以RT PCR法和定量RT PCR法检测DNA甲基化酶 1(DNMT1)、去甲基化酶mbd2、甲基化结合蛋白MeCP2... 目的 探讨胃癌组织中甲基化酶、去甲基化酶基因与肿瘤相关癌基因和抑癌基因的关系。方法 取 2 8例胃癌手术标本的癌区、癌旁、正常组织 ,分别以RT PCR法和定量RT PCR法检测DNA甲基化酶 1(DNMT1)、去甲基化酶mbd2、甲基化结合蛋白MeCP2和 p16 INK4A、c myc等基因的转录水平 ,以相关分析等统计学处理研究各基因表达之间及分别与病理组织学之间的关系。结果 癌组织平均DNMT1和mbd2mRNA分别明显高于和低于正常组织。胃癌组织中c myc的表达增强 ,而MeCP2和 p16 INK4A无明显变化。在正常组织中 ,MeCP2与mbd2 ,p16 INK4A与MeCP2、mbd2 ,c myc与MeCP2的转录水平表现出一定的相关性 ,而当肿瘤发生后仅发现c myc与mbd2的表达呈负相关。以上各基因与肿瘤生物学行为均无相关性。结论 肿瘤相关基因mRNA的表达与甲基化酶DNMT1无关 ,而与甲基结合蛋白有关。 展开更多
关键词 胃癌组织 DNA甲基化酶 去甲基化酶 肿瘤 基因表达 RT-PCR法
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G250基因siRNA表达载体的构建与鉴定 被引量:5
13
作者 赵俊峰 郑少斌 +2 位作者 姜耀东 赵善超 张香梅 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第6期23-25,共3页
目的构建肾癌相关抗原G250小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,通过抑制G250基因的表达,探索肾癌基因治疗的新途径。方法根据基因库上的肾癌相关抗原G250 mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的75个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4... 目的构建肾癌相关抗原G250小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,通过抑制G250基因的表达,探索肾癌基因治疗的新途径。方法根据基因库上的肾癌相关抗原G250 mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的75个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接至线性化的质粒pRNAT-U6.1/Neo中,构建成重组质粒(命名为pshRNA-G250 a,pshRNA-G250b),进行酶切及序列鉴定。结果pshRNA-G250表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA序列一致。结论成功构建pshRNA-G250表达载体,为进一步的研究及探索肾癌基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤相关抗原 G250基因 干扰RNA 遗传载体 基因疗法 肾肿瘤
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基于温里药抑制肺癌的药物筛选及对肿瘤相关巨噬细胞的影响 被引量:6
14
作者 李洪霖 吴建春 +1 位作者 崔亚静 李雁 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第6期1359-1362,I0019-I0022,共8页
目的:根据《中药学》第7版,将温里药附子、肉桂、干姜、高良姜、丁香、小茴香、花椒、吴茱萸、胡椒、荜茇、荜澄茄进行筛选,选出温里药中对Lewis小鼠具有抑瘤作用的温里药,并通过数据库筛选出肿瘤的有效成分,为下一步温里药组方奠... 目的:根据《中药学》第7版,将温里药附子、肉桂、干姜、高良姜、丁香、小茴香、花椒、吴茱萸、胡椒、荜茇、荜澄茄进行筛选,选出温里药中对Lewis小鼠具有抑瘤作用的温里药,并通过数据库筛选出肿瘤的有效成分,为下一步温里药组方奠定基础。方法:构建Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤模型,将附子、干姜、高良姜、丁香、小茴香、花椒、吴莱萸、胡椒、荜茇、荜澄茄灌胃21d后,观察其抑瘤效果。结果:附子、吴茱萸、荜茇对肿瘤具有抑制作用,与对照组相比,附子、吴莱萸、荜茇对肿瘤具有抑制效果,可以抑制Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤的生长,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:温里药中的附子、吴茱萸、荜茇对Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤有抑制作用,荜茇可抑制肿瘤组织中CD206的表达。 展开更多
关键词 温里药 肺癌 LEWIS肺癌小鼠 肿瘤相关巨噬细胞 基因/蛋白网络分析
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Correlation analysis of liver tumor-associated genes with liver regeneration 被引量:4
15
作者 Cun-Shuan Xu Shou-Bing Zhang +1 位作者 Xiao-Guang Chen Salman Rahman 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2007年第24期3323-3332,共10页
AIM: To study at transcriptional level the similarities and differences of the physiological and biochemical activities between liver tumor (LT) and regenerating liver cells. METHODS: LT-associated genes and their exp... AIM: To study at transcriptional level the similarities and differences of the physiological and biochemical activities between liver tumor (LT) and regenerating liver cells. METHODS: LT-associated genes and their expression changes in LT were obtained from databases and scientific articles, and their expression profiles in rat liver regeneration (LR) were detected using Rat Genome 230 2.0 array. Subsequently their expression changes in LT and LR were compared and analyzed. RESULTS: One hundred and twenty one LT-associated genes were found to be LR-associated. Thirty four genes were up-regulated, and 14 genes were down-regulated in both LT and regenerating liver; 20 genes up-regulated in LT were down-regulated in regenerating liver; 21 up-regulated genes and 16 down-regulated genes in LT were up-regulated at some time points and down-regulated at others during LR. CONCLUSION: Results suggested that apoptosis activity suppressed in LT was still active in regenerating liver, and there are lots of similarities and differences between the LT and regenerating liver at the aspects of cell growth, proliferation, differentiation, migration and angiogenesis. 展开更多
关键词 Partial hepatectomy Rat Genome 230 2.0Array APOPTOSIS Liver regeneration-associated gene Liver tumor-associated gene
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血浆SEPT9基因甲基化联合血清癌胚抗原、糖类抗原724对结直肠癌的诊断价值 被引量:4
16
作者 高海锋 薛挺 穆建强 《肿瘤研究与临床》 CAS 2022年第5期370-374,共5页
目的探讨血浆SEPT9基因甲基化联合血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原724(CA724)检测在结直肠癌诊断中的临床应用价值。方法选取2018年5月至2021年10月陕西省宝鸡市中心医院和云南省新昆华医院收治的219例结直肠病变患者,包括病理诊断结直肠癌... 目的探讨血浆SEPT9基因甲基化联合血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原724(CA724)检测在结直肠癌诊断中的临床应用价值。方法选取2018年5月至2021年10月陕西省宝鸡市中心医院和云南省新昆华医院收治的219例结直肠病变患者,包括病理诊断结直肠癌149例、结直肠息肉70例,选择同期体检健康者100名作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定血浆SEPT9基因甲基化状态,电化学发光法测定血清CEA和CA724的水平。比较各组3项指标表达情况,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析3项指标单独及联合诊断结直肠癌的效果。结果结直肠癌组SEPT9基因甲基化阳性率(74.50%,111/149)高于结直肠息肉组(22.86%,16/70)和健康对照组(1.00%,1/100),差异有统计学意义(P<0.001);结直肠癌组CEA阳性率(46.98%,70/149)高于结直肠息肉组(40.00%,28/70)和健康对照组(3.00%,3/100),差异有统计学意义(P<0.001);结直肠癌组CA724阳性率(38.93%,58/149)高于结直肠息肉组(32.86%,23/70)和健康对照组(2.00%,2/100),差异有统计学意义(P<0.001)。SEPT9基因甲基化、CEA和CA724单独诊断结直肠癌的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.823(95%CI 0.753~0.891)、0.788(95%CI 0.725~0.852)、0.689(95%CI 0.624~0.754)。SEPT9基因甲基化诊断结直肠癌的最佳临界Ct值为36.5,灵敏度为90.30%,阳性预测值为84.68%,均高于CEA和CA724;CEA诊断结直肠癌的最佳临界值为8.80 ng/ml,特异度(77.50%)和阴性预测值(78.48%)均高于SEPT9基因甲基化和CA724;3项指标联合检测的临界值取3项指标单项最佳临界值时的灵敏度(97.66%)、阳性预测值(93.98%)、阴性预测值(81.25%)、AUC(0.846,95%CI 0.749~0.944)均较单项指标高。结论血浆SEPT9基因甲基化、血清CEA和CA724联合检测诊断结直肠癌,灵敏度和准确度高,三者可以优势互补,提高诊断效率,对于结直肠癌的诊断具有较高的临床价值。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 癌胚抗原 抗原 肿瘤相关 碳水化合物 DNA甲基化 糖类抗原724 SEPT9基因
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肿瘤相关基因表达检测寡核苷酸芯片的制备及其初步应用 被引量:2
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作者 黄坚 杜清友 +1 位作者 丁雨 王升启 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期900-905,共6页
为研制肿瘤相关寡核苷酸芯片 ,并实现其在抗肿瘤反义核酸“癌泰得”作用机理研究方面的初步应用 ,制备了包含近 450种肿瘤相关基因特异寡核苷酸探针的寡核苷酸芯片 ,建立了相应的质控标准 .“癌泰得”用脂质体转染HepG2肿瘤细胞 ,提取... 为研制肿瘤相关寡核苷酸芯片 ,并实现其在抗肿瘤反义核酸“癌泰得”作用机理研究方面的初步应用 ,制备了包含近 450种肿瘤相关基因特异寡核苷酸探针的寡核苷酸芯片 ,建立了相应的质控标准 .“癌泰得”用脂质体转染HepG2肿瘤细胞 ,提取细胞总RNA反转录并荧光标记cDNA ,用制备的寡核苷酸芯片检测肝癌细胞HepG2的肿瘤相关基因表达水平 ,用软件分析获得其差异基因表达谱 .0 4μmol/L的反义核酸“癌泰得”作用于HepG2细胞 15h后 ,MDNCF、DHS等基因mRNA表达下调 ,MUC2、MPP11、LAT、HRIF B、JNK3A1等mRNA基因表达上调 ,初步检测到了“癌泰得”的抗肿瘤作用可能的相关基因 ,为进一步的分子作用机理的探讨奠定基础 .结果表明 ,制备的肿瘤相关芯片敏感度高、特异性高、重复性均较好 ,可用于检测肿瘤相关基因的表达谱 。 展开更多
关键词 肿瘤相关基因 寡核苷酸芯片 癌泰得 表达谱
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C-erbB-2、nm23与胃癌生物学特性的关系研究 被引量:2
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作者 周丹秋 李敏 吕元 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期28-30,共3页
目的 通过检测胃癌组织中C erbB 2和nm2 3mRNA的表达水平 ,分析其与胃癌淋巴结转移、浸润深度以及临床分期的关系。方法 用RT PCR检测了 6 3例胃癌患者C erbB 2和nm2 3mRNA的表达水平。结果 C erbB 2RNA的表达量在胃癌浸润程度较深... 目的 通过检测胃癌组织中C erbB 2和nm2 3mRNA的表达水平 ,分析其与胃癌淋巴结转移、浸润深度以及临床分期的关系。方法 用RT PCR检测了 6 3例胃癌患者C erbB 2和nm2 3mRNA的表达水平。结果 C erbB 2RNA的表达量在胃癌浸润程度较深组、有淋巴结转移组以及在胃癌Ⅲ、Ⅳ期组中显著增高 ,而nm2 3则呈相反的趋势。结论 C erbB 2对胃癌的生物学特性有促进作用 ,nm2 展开更多
关键词 胃癌组织 癌生物学 NM23 C-ERBB-2 关系研究 肿瘤相关基因 表达 RNA 分子生物学技术 RT-PCR
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肿瘤相关抗原基因OVA66特异的RNA干扰对肿瘤细胞生物学特性的影响 被引量:3
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作者 李美星 王颖 +4 位作者 王树军 张惠珍 周光炎 尤强 葛海良 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期450-455,共6页
构建OVA66基因的特异小干扰RNA表达载体,转染HeLa细胞,分析对该基因表达和肿瘤生物学特性的影响。以RT-PCR、Westernblot方法检测OVA66基因在多种肿瘤细胞系的表达谱。利用计算机辅助设计和合成针对OVA66的特异小干扰RNA的DNA片段,定向... 构建OVA66基因的特异小干扰RNA表达载体,转染HeLa细胞,分析对该基因表达和肿瘤生物学特性的影响。以RT-PCR、Westernblot方法检测OVA66基因在多种肿瘤细胞系的表达谱。利用计算机辅助设计和合成针对OVA66的特异小干扰RNA的DNA片段,定向克隆于特定的干扰载体(pSUPER)。利用脂质体法将重组载体转染于OVA66高表达细胞系HeLa,筛选得到shRNA-OVA66稳定表达细胞。采用Real-timePCR检测目的基因的表达;FACS、Westernblot方法分析目的蛋白的表达。MTT、3H-TdR掺入等方法检测干扰OVA66基因表达后对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。双酶切鉴定得到针对OVA66基因特异的shRNA表达载体(pSUPER-shRNA-OVA66),并经序列分析证实。经检测pSUPER-shRNA-OVA66稳定表达的HeLa细胞(shRNA-OVA66)中目的基因mRNA水平降低;OVA66蛋白表达受到抑制,表明设计的靶片段对目的基因有显著的抑制效果。并显示shRNA-OVA66细胞DNA合成下降;细胞周期分析表明阻断OVA66基因表达可抑制shRNA-OVA66细胞增殖能力,并引发细胞凋亡。OVA66特异的shRNA表达载体构建成功,阻断OVA66基因表达可抑制细胞增殖,促使细胞凋亡,为OVA66蛋白肿瘤生物学功能与肿瘤发生、发展的研究奠定基础。 展开更多
关键词 OVA66 肿瘤相关基因 干扰shRNA 凋亡 增殖
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多发性骨髓瘤恶性相关基因快速表达克隆法的建立 被引量:1
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作者 田菁燕 胡维新 钟慧 《生命科学研究》 CAS CSCD 2003年第1期42-47,共6页
为从多发性骨髓瘤细胞中克隆与鉴定恶性相关基因并试图阐明其发病分子机制,建立了一种改进的快速表达克隆法,简单、快捷、直接从多发性骨髓瘤细胞株ARH 77cDNA文库中克隆恶性相关基因.其特点是常用的表达克隆法与经典的DNA介导的NIH 3T... 为从多发性骨髓瘤细胞中克隆与鉴定恶性相关基因并试图阐明其发病分子机制,建立了一种改进的快速表达克隆法,简单、快捷、直接从多发性骨髓瘤细胞株ARH 77cDNA文库中克隆恶性相关基因.其特点是常用的表达克隆法与经典的DNA介导的NIH 3T3转染实验相结合,直接从cDNA表达文库中克隆恶性相关基因.首先建立高质量的cDNA表达文库,将cDNA表达文库分成几个基因池,转染NIH 3T3细胞;将转化活性最强的基因池再分成几个亚基因池,转染NIH 3T3细胞;将转化活性最强的亚基因池再分成次级亚基因池,直到获得有明显转化活性的单个cDNA克隆.该技术亦可用于从其他肿瘤细胞中克隆恶性相关基因. 展开更多
关键词 基因克隆 表达克隆法 恶性相关基因 多发性骨髓瘤
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