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结核分支杆菌Ag85B分泌蛋白基因疫苗的构建和免疫原性的研究 被引量:22
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作者 范雄林 徐志凯 +3 位作者 李元 薛莹 李别虎 白光春 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期548-550,共3页
目的 构建编码结核分支杆菌 (MTB)Ag85B分泌蛋白的重组真核表达质粒 ,并研究其免疫原性。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)方法从结核分支杆菌H3 7Ra 基因组DNA中扩增出Ag85B分泌蛋白基因 ,用HindⅢ和EcoRⅠ消化后 ,与同样酶消化的pcDNA3... 目的 构建编码结核分支杆菌 (MTB)Ag85B分泌蛋白的重组真核表达质粒 ,并研究其免疫原性。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)方法从结核分支杆菌H3 7Ra 基因组DNA中扩增出Ag85B分泌蛋白基因 ,用HindⅢ和EcoRⅠ消化后 ,与同样酶消化的pcDNA3连接 ,转化大肠杆菌JM10 9,阳性克隆用酶切鉴定 ;重组表达质粒肌注免疫小鼠 4周后 ,分别用dotblotting和ELISA方法检测抗体的产生和滴度。结果 酶切鉴定重组表达质粒pTB30s构建成功 ;dotblotting检测免疫小鼠血清抗Ag85B特异性抗体阳性 ,ELISA检测抗体几何平均滴度为 1∶12 0。结论 应进一步研究pTB30s刺激机体的细胞免疫应答 ,以用于结核病 (TB) 展开更多
关键词 结核分支杆菌 基因疫苗 免疫原性 85B抗原 结核 免疫
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卡介苗免疫治疗对结核病人临床疗效和T淋巴细胞亚群的影响 被引量:15
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作者 雷建平 王继香 +2 位作者 傅颖媛 章润泉 苏刚 《实用临床医学(江西)》 CAS 2002年第A01期1-5,共5页
目的 :探讨卡介苗 (BCG)对肺结核病人T淋巴细胞亚群和临床疗效的影响。方法 :12 0例初治菌阳肺结核病人配对随机分为 2组 ,治疗组给予 2HRZ/ 2HR方案规则化疗 ,1个月后加用BCG免疫治疗 ,对照组给予 2HRZ/4HR方案单纯规则化疗。比较免疫... 目的 :探讨卡介苗 (BCG)对肺结核病人T淋巴细胞亚群和临床疗效的影响。方法 :12 0例初治菌阳肺结核病人配对随机分为 2组 ,治疗组给予 2HRZ/ 2HR方案规则化疗 ,1个月后加用BCG免疫治疗 ,对照组给予 2HRZ/4HR方案单纯规则化疗。比较免疫学参数变化情况和两组近期临床效果与 5年随访结果。结果 :2组病人疗程内痰菌阴转分别 98.3%和 96 .7% ,5年复发率分别为 1.7%和 6 .7% ,疗效相近 (P >0 .0 5 ) ;BCG对T细胞亚群有明显调节作用 ,表现为T3、T4细胞略有升高 ,T8细胞显著升高。结论 :BCG诱导初治短化肺结核病人的T8细胞百分率升高实际为T4细胞上T8受体同步开放的T细胞升高 ,这种改变可增强抗结核保护性细胞免疫反应 ,延长保护性反应高峰时限 ,把初治菌阳病人的短化疗程缩短到 展开更多
关键词 结核 卡介苗 免疫治疗
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结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白诱导的小鼠免疫应答及其保护力 被引量:12
3
作者 张海 师长宏 +3 位作者 薛莹 柏银兰 王丽梅 徐志凯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期443-446,共4页
目的:研究结核分枝杆菌(MTB)ESAT6-CFP10融合蛋白诱导的小鼠体液和细胞免疫应答以及对MTB感染小鼠的保护能力。方法:用预先转移到硝酸纤维素膜条的ES-AT6-CFP10融合蛋白采用皮下包埋的方法免疫小鼠。用MTB培养上清滤液蛋白(CFP)作为抗原... 目的:研究结核分枝杆菌(MTB)ESAT6-CFP10融合蛋白诱导的小鼠体液和细胞免疫应答以及对MTB感染小鼠的保护能力。方法:用预先转移到硝酸纤维素膜条的ES-AT6-CFP10融合蛋白采用皮下包埋的方法免疫小鼠。用MTB培养上清滤液蛋白(CFP)作为抗原,用ELISA法测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度。末次免疫后,取部分免疫小鼠脾淋巴细胞,体外用ESAT6-CFP10融合蛋白刺激后,以MTT比色法检测淋巴细胞增殖反应,同时检测免疫小鼠IFN-γ和IL-2水平及脾细胞杀伤效应。另一部分免疫的BALB/c小鼠经尾静脉感染MTB毒株H37Rv,4周后计数脾脏中的细菌数。结果:ESAT6-CFP10融合蛋白免疫小鼠血清特异性抗体的滴度为1∶6400。淋巴细胞刺激增殖指数为1.90±0.15,明显高于生理盐水组(0.90±0.15);IFN-γ和IL-2的含量分别为1.792±19ng/L和0.211±11ng/L,显著高于生理盐水对照组,但不及BCG免疫组;同时融合蛋白诱导的脾细胞杀伤率为36%。与生理盐水免疫组(细菌负荷6.51±0.13)相比较,融和蛋白免疫的BALB/c小鼠,对攻击感染后MTB在脾脏中增殖有显著作用(细菌负荷为5.24±0.15,P<0.05),但与BCG免疫组相比脾脏中细菌负荷减少甚微。结论:ESAT6-CFP10融合蛋白可作为新型结核疫苗的候选组分。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 疫苗 ESAT6 CFP10 重组融合蛋白
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细胞因子IL-2、IL-12及IL-18增强结核杆菌ESAT-6 DNA疫苗的免疫保护作用 被引量:15
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作者 尹芳 胡月圆 +1 位作者 郭琼 李贵南 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期954-959,共6页
目的探讨白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)以及白细胞介素-18(IL-18)对结核分枝杆菌ESAT-6DNA疫苗免疫保护作用的影响。方法50只雌性Balb/c小鼠随机分为IL-2-pcDNA-ESAT-6、IL-12-pcDNA-ESAT-6、IL-18-pcDNA-ESAT-6、pcDNA-ESA... 目的探讨白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)以及白细胞介素-18(IL-18)对结核分枝杆菌ESAT-6DNA疫苗免疫保护作用的影响。方法50只雌性Balb/c小鼠随机分为IL-2-pcDNA-ESAT-6、IL-12-pcDNA-ESAT-6、IL-18-pcDNA-ESAT-6、pcDNA-ESAT-6以及PBS对照组,分别于0、2、4周共免疫3次。末次免疫2周后各组处死5只小鼠,ELISA检测小鼠血清IgG、IgA,并分别检测0、2、4、6周小鼠阴道灌洗液中sIgA水平。CCK-8法检测免疫小鼠脾细胞的增殖情况,并测定脾细胞上清中细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-6、IL-10的分泌水平。末次免疫2周后,腹腔注射结核杆菌H37Rv感染小鼠,感染后4周取小鼠肺组织进行菌落培养计数;同时通过HE染色以及肺组织炎症因子检测评估其炎症情况。结果细胞因子IL-2、IL-12以及IL-18均能够显著增加小鼠血清IgG、IgA以及阴道灌洗液sIgA的分泌(P<0.05),并促进免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖(P<0.05);IL-2、IL-12及IL-18还能够显著增加脾细胞中IFN-γ、IL-2、TNF-α的分泌水平;此外,相较于ESAT-6真核疫苗组以及PBS对照组,IL-2、IL-12及IL-18均能够显著降低小鼠肺组织菌体载量以及炎性侵润,并减少炎性因子分泌。结论细胞因子IL-2、IL-12及IL-18均能不同程度的增强结核杆菌ESAT-6 DNA疫苗的体液以及细胞免疫应答水平,并显著提高其免疫保护效果。 展开更多
关键词 细胞因子 结核杆菌 ESAT-6 疫苗
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儿童感染性疾病研究进展 被引量:13
5
作者 万朝敏 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第5期347-349,共3页
一直以来,儿童感染性疾病严重危害儿童健康,是造成5岁以下儿童发病和死亡的最重要原因,经过长期不懈努力钻研和实践,特别是疫苗的应用和不断改进,儿童感染性疾病与传染性疾病得到了有效控制。如今一些新的感染性疾病及各种病原微... 一直以来,儿童感染性疾病严重危害儿童健康,是造成5岁以下儿童发病和死亡的最重要原因,经过长期不懈努力钻研和实践,特别是疫苗的应用和不断改进,儿童感染性疾病与传染性疾病得到了有效控制。如今一些新的感染性疾病及各种病原微生物的耐药问题成为儿童感染性疾病治疗中面临的日趋严重的问题。 展开更多
关键词 结核病 疫苗 预防 人偏肺病毒 人博卡病毒 禽流感病毒 百日咳 人类免疫缺陷病毒
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BCG—PPD与TB—PPD皮肤试验在大学生结核病筛查中的差异性分析 被引量:13
6
作者 孟炜丽 罗萍 +3 位作者 胡京坤 孙钊 李慧颖 连赫宇 《中国防痨杂志》 CAS 2014年第7期542-546,共5页
目的 比较卡介菌纯蛋白衍生物(purified protein derivative of BCG,BCG-PPD)与结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative of tuberculin,TB-PPD)在大学生结核病筛查中的差异。 方法 回顾性分析2012—2013年北京市西城区... 目的 比较卡介菌纯蛋白衍生物(purified protein derivative of BCG,BCG-PPD)与结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative of tuberculin,TB-PPD)在大学生结核病筛查中的差异。 方法 回顾性分析2012—2013年北京市西城区3所大学2821名学生的结核病筛查数据。根据使用的PPD试剂种类进行分组,BCG-PPD组学生1386名;TB-PPD组学生1435名。对两组观察者分别进行结核菌素试验,72 h查验硬结平均直径,对强阳性者进行胸部X线检查。采用SPSS 11.5软件进行统计分析,用秩和检验对两组硬结平均直径进行比较,用χ^2检验对组间PPD结果分布频度及结核病筛查结果进行比较,当理论值<1时,采用Fisher确切概率法,卡痕与PPD阳性结果间相关性分析采用logistic回归,P〈0.05为差异有统计学意义。结果 中位硬结平均直径BCG-PPD组(6 mm)大于TB-PPD组(0 mm),差异有统计学意义(Z=-10.034, P〈0.05)。BCG-PPD组的阳性率(54.8%, 759/1386)明显高于TB-PPD组(32.7%,469/1435)(χ^2=139.818,P〈0.05);PPD强阳性率BCG-PPD组为6.6%(92/1386),高于TB-PPD组的3.4%(49/1435)(χ^2=15.425,P〈0.05);BCG-PPD组的异常反应发生率为1.9%(27/1386),高于TB-PPD组的0.4%(6/1435),差异有统计学意义(χ^2=14.274,P〈0.05)。卡痕与PPD阳性结果相关,有卡痕者更容易出现PPD阳性结果(OR=2.046,95%CI=1.630~2.569,P〈0.05)。 结论 TB-PPD和BCG-PPD皮肤试验在大学生结核病筛查中的强阳性率和异常反应发生率上存在差别,有进一步探讨的必要。 展开更多
关键词 结核 预防和控制 卡介菌 结核菌素试验 皮肤试验 学生 普查
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化疗加用卡介苗免疫治疗预防耐多药结核病的研究 被引量:12
7
作者 雷建平 熊国亮 +4 位作者 胡群芳 李瑶 宗佩兰 涂少华 涂荣耀 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期86-89,共4页
目的探讨卡介苗(BCG)免疫治疗对结核病化疗效果的影响及预防耐多药结核病形成的可能性能。方法初治菌阳肺结核病志愿者360例,按年龄、性别、病灶范围、空洞和初始耐药等情况相近的原则,配对数字表法随机分成加用BCG的4个月短程化疗... 目的探讨卡介苗(BCG)免疫治疗对结核病化疗效果的影响及预防耐多药结核病形成的可能性能。方法初治菌阳肺结核病志愿者360例,按年龄、性别、病灶范围、空洞和初始耐药等情况相近的原则,配对数字表法随机分成加用BCG的4个月短程化疗组、6个月单纯化疗组。比较两组的细菌学、影像学等临床疗效,以及对继发耐药病例形成的影响。结果(1)两组结束疗程时痰菌阴转率分别是98.3%(177/180)和97.2%(175/180),x^2=0.1278,P〉0.05。(2)5年随访痰菌复阳率BCG免疫治疗组2.3%(4/177),对照组6.9%(12/175),x^2=4.2864,P〈0.05。5年细菌学总成功率BCG免疫治疗组高出对照组5.5%,差异有统计学意义(96.1%,173/180;90.6%,163/180,x^2=4.4643,P〈0.05)。(3)5年随访期内,两组病例影像学改变与细菌学结果相一致。(4)BCG免疫组继发性耐多药发生率2.3%(4/177),6个月单纯短化组病人中继发性耐多药发生率7.3%(13/178),两组差异有统计学意义,x^2=4.9513,P〈0.05。结论化疗1个月后加用BCG免疫治疗可提高化疗效果和减少耐多药病例发生率。 展开更多
关键词 结核 卡介苗 免疫接种 加强
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人IL-12与结核分枝杆菌抗原ESAT-6联合基因疫苗的免疫效果观察 被引量:10
8
作者 郝牧 鲍朗 高蕾 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期477-481,共5页
人白细胞介素12(IL-12)与结核分枝杆菌免疫优势抗原ESAT-6真核表达质粒联合基因免疫,诱导免疫应答效果观察.近交系BALB/c小鼠,随机分组:A组(生理盐水对照)、B组(pcDNA3.1空质粒对照)、C组(BCG对照)、D组(pcESAT-6)和E组(pcI... 人白细胞介素12(IL-12)与结核分枝杆菌免疫优势抗原ESAT-6真核表达质粒联合基因免疫,诱导免疫应答效果观察.近交系BALB/c小鼠,随机分组:A组(生理盐水对照)、B组(pcDNA3.1空质粒对照)、C组(BCG对照)、D组(pcESAT-6)和E组(pcIL-12+pcESAT-6).B、D、E质粒免疫组小鼠分别于胫前肌肌肉注射布比卡因(7.5g/L)和质粒的混和物(1:4,100μL,含质粒70μg/次),A组小鼠肌肉注射生理盐水和布比卡因的混和物(1:4,100μL),均间隔2周免疫一次,共免疫3次;末次免疫时,C组小鼠皮下注射BCG菌液,0.3mL/只,含10^6CFU/mL.末次免疫后14d和28d,各组小鼠分别取血分离血清用于总IgG测定,同时分离脾细胞,经TB-PPD刺激后检测脾细胞增殖(XTT比色法)活性和脾细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)分泌水平.pcESAT-6质粒DNA单独免疫(D组)或与pcIL-12质粒DNA联合免疫(E组),均能诱导小鼠产生特异性抗体,且抗体水平在末次加强免疫后14~28d逐渐增加;但pcIL-12与pcESAT-6联合免疫后,特异性抗体水平较pcESAT-6单独免疫增加不明显(P<0.05).c、D、E组免疫小鼠脾细胞体外经TB-PPD刺激后,E组小鼠特异性淋巴细胞增殖活性和IFN-γ分泌水平明显强于C组和D组(P<0.05),而IL-4分泌水平相互间未发现明显差异.末次加强免疫后14~28d,E组小鼠脾细胞增殖活性维持在较高水平,而C组小鼠脾细胞增殖活性先低后高,D组则先高后低;IFN-γ诱生水平,E组最高,C组次之,D组最低.pcIL-12与pcESAT-6质粒DNA联合免疫后能刺激机体产生强烈的细胞免疫和稳定的体液免疫,在动物体内诱发的细胞免疫较ESAT-6或BCG单独免疫时均有明显增加并维持较长时间,此外联合免疫后诱导的体液免疫也较BCG免疫有明显增加. 展开更多
关键词 白细胞介素12 结核分枝杆菌 ESAT-6 DNA疫苗
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中国儿童结核病诊疗现状及面临的挑战 被引量:11
9
作者 黄威 卢水华 《上海预防医学》 CAS 2018年第3期184-187,共4页
据世界卫生组织最新报道,全球每年至少有100万儿童患结核病,其中25.3万患儿死于结核病。儿童结核病是一个严重的公共卫生问题,因临床表现缺乏特异性,痰含菌量少等使儿童结核病诊断非常困难。儿童感染结核分枝杆菌后较成人更易进展为结核... 据世界卫生组织最新报道,全球每年至少有100万儿童患结核病,其中25.3万患儿死于结核病。儿童结核病是一个严重的公共卫生问题,因临床表现缺乏特异性,痰含菌量少等使儿童结核病诊断非常困难。儿童感染结核分枝杆菌后较成人更易进展为结核病,且年龄越小越易重症化。卡介苗仍是目前唯一用于预防结核的疫苗,但有其缺陷。结核分枝杆菌耐药通常也是导致儿童结核病死亡的主要原因之一。目前我国儿童耐药结核病化学治疗的原则与成人相同,用药也基本相似,新型短程耐药化疗方案能否运用于我国耐药儿童结核病还有待商榷。随着基因测序技术的革新,生物医学分析技术的进步,大数据下的精准医疗将为儿童结核病的防治提供一场新的变革。 展开更多
关键词 儿童结核病 诊断 疫苗 耐药 治疗
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结核分枝杆菌Ag85B基因疫苗免疫保护作用的初步研究 被引量:8
10
作者 范雄林 徐志凯 +5 位作者 李元 李别虎 薛莹 柏银兰 白光春 贾向志 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期90-92,共3页
目的:研究编码结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B的基因疫苗pTB30m和pTB30s对免疫动物的保护作用。方法:以基因疫苗pTB30m和pTB30s肌注免疫BALB/c小鼠。免疫完成6 wk后,用5×105 CFU的MTB H37Rv毒株经小鼠尾静脉攻击感染。同时用尼龙毛柱... 目的:研究编码结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B的基因疫苗pTB30m和pTB30s对免疫动物的保护作用。方法:以基因疫苗pTB30m和pTB30s肌注免疫BALB/c小鼠。免疫完成6 wk后,用5×105 CFU的MTB H37Rv毒株经小鼠尾静脉攻击感染。同时用尼龙毛柱分离基因免疫BALB/c小鼠的T细胞,并以5×106 T细胞/只小鼠过继免疫正常BALB/c小鼠,立即用105 CFU的MTB毒株经小鼠尾静脉攻击感染。4 wk后分别计数脾脏中的细菌负荷。结果:与生理盐水对照组相比较,pTB30m及pTB30s质粒免疫组BALB/c小鼠脾脏中的细菌负荷均减少,分别为0.645(log10 CFU,P<0.01)和0.839(log10CFU,P<0.001);而空质粒对照组小鼠脾脏中的细菌负荷减少较少。经质粒pTB30m和pTB30s免疫的BALB/c小鼠的T细胞,过继免疫的正常BALB/c小鼠,对攻击感染的MTB H37Rv毒株在脾脏中的增殖具有部分抑制作用。结论:pTB30s免疫的BALB/c小鼠,对MTB H37 Rv毒株攻击的保护作用优于pTB30m质粒免疫,有望进一步用于结核病的防治研究。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 AG85B 基因疫苗 免疫保护作用
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结核杆菌保护性抗原-遍在蛋白质系统的建立 被引量:10
11
作者 王庆敏 胡振林 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期61-63,共3页
目的 :将结核杆菌 4种保护性抗原基因与小鼠遍在蛋白质 (泛素 )基因融合 ,建立抗原 -遍在蛋白质系统。方法 :通过RT- PCR技术从小鼠睾丸组织中克隆遍在蛋白质 c DNA,同时培养结核杆菌并从基因组中克隆出 4种保护性抗原编码区 ,然后通过... 目的 :将结核杆菌 4种保护性抗原基因与小鼠遍在蛋白质 (泛素 )基因融合 ,建立抗原 -遍在蛋白质系统。方法 :通过RT- PCR技术从小鼠睾丸组织中克隆遍在蛋白质 c DNA,同时培养结核杆菌并从基因组中克隆出 4种保护性抗原编码区 ,然后通过柔性接头将遍在蛋白质与 4种抗原的基因分别融合在一起 ,并插入到 p VAX质粒中。结果 :扩增出来的 4种抗原基因大小分别约为 0 .3、0 .7、1.0、1.6 5 kb,遍在蛋白质 PCR产物约为 0 .2 kb,均与 Gen Bank中登录的相符 ;p VAX重组质粒酶切结果显示融合基因正确地插入到 p VAX载体中 ,全自动测序显示抗原基因和遍在蛋白质基因均为所需基因 ,柔性接头序列也完全正确。 结论 :成功地构建了中国株结核杆菌的 4种保护性抗原基因 -遍在蛋白质融合系统 。 展开更多
关键词 结核杆菌 遍在蛋白质 DNA疫苗 结核病
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结核分枝杆菌MPT64-ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及其保护力 被引量:8
12
作者 师长宏 安家泽 +4 位作者 唐小凤 王晓武 张海 柏银兰 徐志凯 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第9期769-771,共3页
目的:测定MPT64与ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力.方法:将MPT64与ESAT6的融合蛋白皮下免疫小鼠3次,每次间隔2wk,ELISA测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度.最后一次免疫完成后4wk,分离部分免疫小鼠脾淋巴细胞,MTT法检测... 目的:测定MPT64与ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力.方法:将MPT64与ESAT6的融合蛋白皮下免疫小鼠3次,每次间隔2wk,ELISA测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度.最后一次免疫完成后4wk,分离部分免疫小鼠脾淋巴细胞,MTT法检测淋巴细胞刺激指数,ELISA检测悬液中IFNγ水平.另一部分免疫的BALB/c小鼠经尾静脉感染MTB毒株H37Rv,4wk后计数脾脏细菌负荷数.结果:MPT64ESAT6融合蛋白免疫小鼠血清特异性抗体滴度1∶1500,免疫小鼠后淋巴细胞刺激增殖指数为2.23,而生理盐水免疫组只有0.88;脾淋巴细胞悬液中诱发的IFNγ为(4.28±0.27)μg/L,显著高于生理盐水免疫组[(0.48±0.17)μg/L,P<0.05],但不及BCG免疫组[(5.18±0.31)μg/L].与生理盐水免疫组(细菌负荷6.45±0.17)相比较,融合蛋白免疫的小鼠,对攻击感染后抗MTB在脾脏中增殖有显著作用,细菌负荷为5.04±0.11,但与BCG免疫组相比脾脏细菌负荷减少甚微(细菌负荷4.38±0.22).结论:MPT64与ESAT6融合蛋白可作为新型结核疫苗的候选组分. 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 疫苗 MPT64 ESAT6 融合表达
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儿童结核病现状 被引量:10
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作者 田建岭 吴喜蓉 申阿东 《标记免疫分析与临床》 CAS 2013年第6期458-462,共5页
全球有1/3人群感染结核分枝杆菌,结核病已是继艾滋病之后导致人类死亡的第二大传染病。儿童结核病由于自身的特点致使其在公共卫生中并未受到重视,而且在诊断和治疗的研究中均落后于成人。儿童结核病一定程度上反映了未来成人的结核病水... 全球有1/3人群感染结核分枝杆菌,结核病已是继艾滋病之后导致人类死亡的第二大传染病。儿童结核病由于自身的特点致使其在公共卫生中并未受到重视,而且在诊断和治疗的研究中均落后于成人。儿童结核病一定程度上反映了未来成人的结核病水平,重视儿童结核病对结核病控制具有重要意义。本文就目前儿童结核病流行病学、诊断、治疗等方面进行了概述。 展开更多
关键词 儿童结核病 流行病学 耐药 疫苗 诊断 治疗
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2009年驻京部队入伍新兵结核感染及随访情况分析 被引量:10
14
作者 王兰 梁艳 +6 位作者 吴雪琼 张翠英 王志耘 阳幼荣 张俊仙 侯英 赵文娟 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期827-832,共6页
目的了解2009年驻京部队入伍新兵结核感染及发病情况,评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在检测结核分枝杆菌感染中的应用价值。方法 2009年907例驻京部队入伍新兵,行胸部X线检查、PPD皮肤试验和ELISPOT检测。PPD皮肤试验阴性者,接种卡介苗... 目的了解2009年驻京部队入伍新兵结核感染及发病情况,评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在检测结核分枝杆菌感染中的应用价值。方法 2009年907例驻京部队入伍新兵,行胸部X线检查、PPD皮肤试验和ELISPOT检测。PPD皮肤试验阴性者,接种卡介苗7个月后抽查110例,再进行PPD皮肤试验和ELISPOT检测。随访18个月了解结核病发病情况。结果 907例入伍新兵中,PPD皮肤试验和ELISPOT的阳性率分别为50.2%和30.7%。452例PPD阴性和455例PPD阳性者中,分别有132例(29.2%)和146例(32.1%)ELISPOT阳性,两者的一致率为51.4%(466/907)。65.6%的PPD阳性者和27.8%的ELISPOT阳性者[斑点形成细胞(SFC)12.2±21.2]有卡介苗接种;21.3%的PPD阳性者和35.9%的ELISPOT阳性者(SFC 18.3±34.6)没有卡介苗接种。PPD皮肤试验阴性的新兵接种卡介苗7个月后抽查的110例中,85例(77.3%)PPD皮肤试验阳性、21例(19.1%)强阳性,21例(19.1%)ELISPOT阳性、13例(11.8%)强阳性;两者的一致率为38.2%(42/110)。12例新兵发现胸片异常,其中12例(100%)PPD皮肤试验阳性,6例(50%)ELISPOT阳性。随访18个月,均未发现发展为结核病。结论驻京部队入伍新兵的结核感染率低于既往报道,提示卡介苗接种能部分保护人群抵抗结核感染,ELISPOT技术能够更有效地筛查结核感染。 展开更多
关键词 结核 卡介苗 结核菌素试验 军事人员
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结核杆菌多价核酸疫苗的构建及其免疫原性的初步研究 被引量:8
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作者 谢勇恩 《川北医学院学报》 CAS 2007年第1期7-10,共4页
目的构建包含结核杆菌3种抗原蛋白Ag85A、ESAT-6和CFP-10真核表达质粒的多价DNA疫苗,并对其在小鼠体内的免疫原性进行初步分析。方法PCR扩增获得结核杆菌ag85 a、esat-6和cfp-10基因片段,分别克隆入真核表达质粒VR1020的BamHⅠ位点构建... 目的构建包含结核杆菌3种抗原蛋白Ag85A、ESAT-6和CFP-10真核表达质粒的多价DNA疫苗,并对其在小鼠体内的免疫原性进行初步分析。方法PCR扩增获得结核杆菌ag85 a、esat-6和cfp-10基因片段,分别克隆入真核表达质粒VR1020的BamHⅠ位点构建DNA疫苗,以此多价DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测小鼠体内的特异性抗体应答和细胞免疫反应,并与BCG免疫组、质粒VR1020免疫组和生理盐水对照组相比较。结果多价DNA疫苗免疫小鼠后能产生特异性的细胞和体液免疫应答,DNA疫苗免疫组小鼠脾细胞IFN-γ的表达量显著高于BCG免疫组,而DNA疫苗免疫组小鼠所产生的特异性抗体水平低于BCG免疫组。结论成功构建了结核杆菌多价DNA疫苗,免疫小鼠后检测到特异性细胞和体液免疫应答。 展开更多
关键词 结核杆菌 多价核酸疫苗 免疫原性
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结核分枝杆菌Ag85B-MPT64融合基因疫苗的免疫效果观察 被引量:5
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作者 骆旭东 朱道银 +2 位作者 陈全 蒋英 江山 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期592-594,共3页
目的:研究并比较结核分枝杆菌(H37Rv)Ag85B、MPT64DNA.以及两者的融合基因(AM)的免疫原性。方法:雌性C57BL/6小鼠25只,随机分为5组,即A组(PBS)、B组(peDNA3.1)、C组(pcDNA/Ag85B)、D组(pcDNA/MPT64)和E组(pcDNA/AM)。分别于胫前肌注射7.... 目的:研究并比较结核分枝杆菌(H37Rv)Ag85B、MPT64DNA.以及两者的融合基因(AM)的免疫原性。方法:雌性C57BL/6小鼠25只,随机分为5组,即A组(PBS)、B组(peDNA3.1)、C组(pcDNA/Ag85B)、D组(pcDNA/MPT64)和E组(pcDNA/AM)。分别于胫前肌注射7.5 g/L利多卡因和质粒混合物(1:4,100μL,含质粒70μg/次),间隔2 wk免疫 1次,共3次。末次免疫后4 wk取血分离血清测定总IgG,同时分离脾淋巴细胞,用PPD刺激后分别做脾淋巴细胞增殖实验(MTT比色法)和测定脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ的水平。结果:Ag85B、MPT64和AM质粒DNA,均能诱导小鼠产生较高水平的PPD特异性IgG。免疫小鼠脾淋巴细胞体外经PPD刺激后,能产生特异性淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ。peDNA/AM组IFN-γ的分泌水平明显高于pcDNA/Ag85B和pcDNA/MPT64免疫组(P<0.05)。结论:结核分枝杆菌Ag85B-MPT64融合基因疫苗,能在小鼠体内诱导特异性细胞和体液免疫。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 AG85B MPT64 融合基因 DNA疫苗
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结核病免疫机制及疫苗研究进展 被引量:9
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作者 达泽蛟 祝秉东 张颖 《微生物与感染》 2011年第3期169-178,共10页
结核病是一种棘手的重大传染病。虽然存在一些有一定疗效的治疗药物,亦有预防性疫苗———卡介苗(BCG);但结核病仍在世界范围流行,且发病率和病死率居高不下。结核病的免疫病理机制及疫苗研究近年来取得了一定的进展。结核分枝杆菌通过T... 结核病是一种棘手的重大传染病。虽然存在一些有一定疗效的治疗药物,亦有预防性疫苗———卡介苗(BCG);但结核病仍在世界范围流行,且发病率和病死率居高不下。结核病的免疫病理机制及疫苗研究近年来取得了一定的进展。结核分枝杆菌通过Toll样受体(TLR)等模式识别受体,激活巨噬细胞的天然免疫反应,清除细菌和调节获得性免疫反应。包括主要组织相容性复合物(MHC)限制的CD4+和CD8+T细胞,以及CD1限制的T细胞和γδT细胞参与抗结核获得性免疫反应,其中记忆性T细胞与调节性T细胞具有重要的免疫调节作用。但是,人们对结核病发生机制的认识仍然不足,限制了对结核病治疗药物和新型疫苗的研发。由于BCG对成人缺乏有效的保护力,故研制新型的结核疫苗是预防结核病的当务之急。当前处于实验阶段的候选疫苗包括重组BCG、减毒结核分枝杆菌和可用于加强BCG的亚单位疫苗,后者又包括痘苗病毒载体疫苗、核酸疫苗、新型佐剂辅助的蛋白疫苗。目前可行的疫苗免疫策略主要是使用BCG或其他疫苗初次免疫,然后选择亚单位疫苗加强免疫。然而,疫苗的免疫策略、免疫剂量、免疫途径、强化免疫次数和免疫时机都有待研究。反映疫苗保护力的免疫指标不明确、很难确定哪类疫苗进入临床试验、缺乏临床试验场地、疫苗效果评价需要很长时间及耗资巨大,增加了结核疫苗研究的难度和风险。 展开更多
关键词 结核病 免疫学 疫苗
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结核分枝杆菌esat-6基因疫苗的构建和免疫原性的研究 被引量:7
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作者 王丽梅 范雄林 +4 位作者 师长宏 李元 柏银兰 薛莹 徐志凯 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期369-370,378,共3页
目的 构建以结核分枝杆菌H3 7Rvesat - 6基因为基础的基因疫苗 ,并研究其免疫原性。方法 采用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切含有esat- 6目的基因的质粒pGEM -Teasy -esat6 ,10 g L-1琼脂糖凝胶电泳回收约 30 0bp大小片段 ,以亚克隆法构建于真... 目的 构建以结核分枝杆菌H3 7Rvesat - 6基因为基础的基因疫苗 ,并研究其免疫原性。方法 采用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切含有esat- 6目的基因的质粒pGEM -Teasy -esat6 ,10 g L-1琼脂糖凝胶电泳回收约 30 0bp大小片段 ,以亚克隆法构建于真核表达载体 pcDNA3 1的相应酶切位点阳性克隆经酶切鉴定证实。重组表达质粒肌注免疫BALB/c小鼠三次 ,每次间隔 2周 ,ELISA检测小鼠血清中产生抗体的水平。结果 用BamHⅠ和EcoRⅠ酶切鉴定证实目的基因正确插入载体 ,命名为pcDE6 ,重组质粒免疫小鼠体内产生特异性抗体。结论 所构建的重组真核表达质粒pcDE6能引起免疫动物的特异性体液免疫反应 ,应进一步研究其刺激机体的细胞免疫应答 ,以用于结核病 (TB) 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 基因疫苗 免疫原性 ESAT-6
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新型结核病疫苗菌株对T淋巴细胞免疫记忆及增殖能力的影响研究 被引量:8
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作者 邵萌 吴芳 +6 位作者 张杰 董江涛 柳小玲 吴江东 章乐 赵海军 张万江 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2021年第11期1376-1382,共7页
背景结核病是世界范围内单一致病菌感染导致死亡率最高的慢性感染性疾病,目前缺乏安全有效的疫苗预防成人结核病。而预防接种主要是利用机体具有免疫记忆的特征以阻止病原体的再次入侵,因此,研究T淋巴细胞的免疫记忆及增殖能力对新型结... 背景结核病是世界范围内单一致病菌感染导致死亡率最高的慢性感染性疾病,目前缺乏安全有效的疫苗预防成人结核病。而预防接种主要是利用机体具有免疫记忆的特征以阻止病原体的再次入侵,因此,研究T淋巴细胞的免疫记忆及增殖能力对新型结核病疫苗的设计至关重要。目的探讨新型结核病疫苗菌株(简称B/R菌株)对T淋巴细胞免疫记忆及增殖能力的影响。方法2019年1月,选取6~8周龄、SPF级雌性C57BL/6小鼠48只,随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、卡介苗(BCG)组、结核分枝杆菌国际标准毒株(H37Ra)组和新型结核病疫苗(B/R)菌株组,各12只。PBS组、BCG组、H37Ra组和B/R菌株组分别皮下接种PBS、BCG、H37Ra和B/R菌株。4组分别于免疫后8周、12周、16周各取3只小鼠提取脾淋巴细胞体外刺激培养,利用流式细胞技术检测中央型记忆性淋巴细胞(TCM)及效应型记忆性淋巴细胞(TEM),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脾淋巴细胞分泌的抗原特异性Th1/Th2型细胞因子[白介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)]水平;羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记法检测CD4+T淋巴细胞增殖率、CD8+T淋巴细胞增殖率。结果免疫后8、12、16周BCG组、H37Ra组、B/R菌株组CD4+的TCM和TEM高于PBS组(P<0.05);免疫后8周B/R菌株组CD4+的TEM低于H37Ra组(P<0.05);免疫后16周B/R菌株组CD4+的TCM高于H37Ra组和BCG组(P<0.05);免疫后16周B/R菌株组CD4+的TEM高于BCG组(P<0.05)。免疫后8、12、16周BCG组、H37Ra组、B/R菌株组CD8+的TCM和TEM高于PBS对照组(P<0.05);免疫后12周B/R菌株组CD8+的TEM高于H37Ra组和BCG组(P<0.05);免疫后16周,B/R菌株组CD8+的TCM和TEM高于BCG组(P<0.05)。免疫后8、12、16周PBS组IL-2和IFN-γ低于BCG组、H37Ra组、B/R菌株组(P<0.05);免疫后12周,B/R菌株组IFN-γ高于BCG组(P<0.05);免疫后16周,B/R菌株组IFN-γ和IL-2高于BCG组和H37Ra组(P<0.05)。BCG组、H37Ra组和B/R菌株组CD4+T淋� 展开更多
关键词 结核 疫苗 结核菌苗 卡介苗 T淋巴细胞 免疫 细胞
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结核分枝杆菌潜伏感染豚鼠模型的建立和验证 被引量:8
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作者 卢锦标 邓海清 +6 位作者 陈保文 都伟欣 杨蕾 沈小兵 苏城 徐苗 王国治 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期900-905,共6页
目的:建立结核分枝杆菌(M ycobacterium tuberclu osis,Mtb)潜伏感染治疗用疫苗的豚鼠评价模型。方法豚鼠皮下攻毒5.0×103 CFU Mtb,于不同时间点用0.5μg重组结核杆菌ESAT6-CFP10蛋白对豚鼠皮试,观察皮试阳转情况。攻毒2... 目的:建立结核分枝杆菌(M ycobacterium tuberclu osis,Mtb)潜伏感染治疗用疫苗的豚鼠评价模型。方法豚鼠皮下攻毒5.0×103 CFU Mtb,于不同时间点用0.5μg重组结核杆菌ESAT6-CFP10蛋白对豚鼠皮试,观察皮试阳转情况。攻毒2周后,模型组豚鼠采用5 mg异烟肼灌胃治疗,每周3次,持续4周;对照组豚鼠不做化疗。在Mtb感染后的第6周,分别取未经异烟肼治疗的豚鼠和经异烟肼治疗的豚鼠解剖,比较豚鼠的肝、脾和肺的脏器综合病变指数以及脾活菌数( log10 CFU)。根据上述结果建立豚鼠的潜伏感染模型,并用两个参考疫苗对该模型进行验证。结果豚鼠攻毒Mtb 2周后,EC皮试反应全部转阳,皮试反应大小为(19.9±3.0) mm。模型组豚鼠经4周异烟肼治疗后,脏器综合病变指数为0,脾未分离出活菌数。对照组豚鼠不经化疗,脏器综合病变指数为38.8±16.5,脾活菌数为(5.1±0.3)log10 CFU。停药后,模型组豚鼠结核病自然复发,在两次参考疫苗的验证中,脏器综合病变指数分别为48.5±23.9和51.30±23.41,脾活菌数分别为(4.5±1.3)和(4.2±1.1) log10 CFU,肺部活菌数分别为(4.1±1.2)和(3.4±1.3) log10 CFU。结论 Mtb攻毒豚鼠后,异烟肼化疗可抑制Mtb增殖,成功建立豚鼠的Mtb潜伏感染模型。该模型重复性好,可用于潜伏感染治疗用疫苗的评价。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 潜伏感染 动物模型 豚鼠 结核疫苗
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