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资源昆虫双叉犀金龟研究进展 被引量:2
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作者 魏茂 郭建军 《山地农业生物学报》 2022年第1期49-55,共7页
资源昆虫双叉犀金龟Trypoxylus dichotomus(Linnaeus,1771)属于鞘翅目金龟子科,是中国的传统药用昆虫,也是日本、韩国重要的观赏和食用昆虫,同时又可应用于农业废弃物资源化处理,因而极具商业开发前景。为了进一步明确其价值,深化对其... 资源昆虫双叉犀金龟Trypoxylus dichotomus(Linnaeus,1771)属于鞘翅目金龟子科,是中国的传统药用昆虫,也是日本、韩国重要的观赏和食用昆虫,同时又可应用于农业废弃物资源化处理,因而极具商业开发前景。为了进一步明确其价值,深化对其价值的开发利用,该文系统地阐述了双叉犀金龟的应用研究进展,并展望了双叉犀金龟的发展前景。 展开更多
关键词 资源昆虫 双叉犀金龟 利用价值 综述
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双叉犀金龟表皮蛋白TdCPR12611与TdCPR7854的表达纯化及特性分析 被引量:3
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作者 叶长青 包涵 +1 位作者 刘田 杨青 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期19-29,共11页
【目的】探析双叉犀金龟Trypoxylus dichotomus表皮蛋白的序列特征及生化性质。【方法】利用RT-PCR克隆双叉犀金龟表皮蛋白基因,利用生物信息学方法分析表皮蛋白的结构特征及系统发育;采用大肠杆菌Escherichia coli表达系统对双叉犀金... 【目的】探析双叉犀金龟Trypoxylus dichotomus表皮蛋白的序列特征及生化性质。【方法】利用RT-PCR克隆双叉犀金龟表皮蛋白基因,利用生物信息学方法分析表皮蛋白的结构特征及系统发育;采用大肠杆菌Escherichia coli表达系统对双叉犀金龟表皮蛋白进行重组表达,并通过金属离子鳌合层析的方法对重组蛋白进行纯化;采用体外结合实验检测双叉犀金龟表皮蛋白与α-几丁质(α-chitin)、β-几丁质(β-chitin)、壳聚糖(chitosan)和胶体几丁质(colloidal chitin)的结合能力;观察确定蛋白液液相分离(liquid-liquid phase separation,LLPS)性质。【结果】克隆获得双叉犀金龟表皮蛋白基因TdCPR 12611(GenBank登录号:MT813021)和TdCPR 7854(GenBank登录号:MT813022)。系统进化分析结果表明,TdCPR12611与食粪金龟Onthophagus taurus OtCP-1的亲缘关系最近;TdCPR7854与食粪金龟的OtCP-acp20-1,OtCP-acp20-2和OtCP-acp20-3的亲缘关系最为接近,它们均属于CPR_RR-2家族。原核表达和纯化获得重组表皮蛋白TdCPR12611和TdCPR7854。两重组表皮蛋白与4种类型的几丁质具有不同结合能力,其中有41.4%的TdCPR12611与壳聚糖结合,而有62.3%的TdCPR7854与β-几丁质结合。TdCPR12611具有内部较为无序的结构,并能够在室温条件下自发团聚形成液液相分离现象,而TdCPR7854不能。【结论】本研究测定分析了双叉犀金龟CPR_RR-2家族表皮蛋白TdCPR12611与TdCPR7854的序列特征和与几丁质的结合特性。研究结果有利于加深人们对于昆虫表皮装配机制的了解,为蛋白仿生材料开发提供思路。 展开更多
关键词 双叉犀金龟 表皮蛋白 CPR蛋白 RR-2家族 几丁质结合 液液相分离 仿生材料
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双叉犀金龟表皮蛋白Td14144表达纯化及性质研究 被引量:1
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作者 刘晶 包涵 +3 位作者 陈磊 刘源涛 刘田 杨青 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2022年第2期513-520,共8页
表皮蛋白是昆虫表皮的重要组成成份,在昆虫的生长发育过程中起着重要作用,有可能成为农业害虫的防治靶标。双叉犀金龟Trypoxylus dichotomus是铁皮石斛的一种重要害虫,且对其表皮蛋白的研究较少。本文通过研究双叉犀金龟表皮蛋白Td1414... 表皮蛋白是昆虫表皮的重要组成成份,在昆虫的生长发育过程中起着重要作用,有可能成为农业害虫的防治靶标。双叉犀金龟Trypoxylus dichotomus是铁皮石斛的一种重要害虫,且对其表皮蛋白的研究较少。本文通过研究双叉犀金龟表皮蛋白Td14144的表达纯化及与几丁质结合的相关性质明确Td14144功能的重要性。根据双叉犀金龟转录组测序数据,利用RT-PCR获得表皮蛋白Td14144基因(GenBank登录号:MZ463195),并对其进行生物信息学分析。序列分析表明表皮蛋白Td14144属于CPR家族中RR-2亚族,含有R&R保守结构域;系统进化分析结果表明,Td14144与光肩星天牛Anoplophora glabripennis的AgCP的亲缘关系最近。随后将基因片段与pET-28a载体同源重组构建表达载体pET28a-14144,在大肠杆菌Escherichia coli BL21中原核表达,并使用金属螯合层析进行分离纯化,SDS-PAGE及Western blot验证重组蛋白的表达纯化,成功获得95%以上纯度的Td14144蛋白。利用几丁质结合试验评估Td14144与不同类型几丁质结合的能力,发现Td14144可以与壳聚糖、α-几丁质、β-几丁质和胶体几丁质结合,其中对壳聚糖和α-几丁质的结合能力最强。 展开更多
关键词 双叉犀金龟 表皮蛋白 几丁质结合蛋白
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