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TrkB-shiRNA质粒转染心脏微血管内皮细胞 被引量:1
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作者 陈斯韵 曹亮 +4 位作者 李震 沈晓涛 郑馨 梁永佳 蔡冬青 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期3655-3659,共5页
背景:脑源性神经营养因子与其受体TrkB在心脏与骨骼肌内皮细胞存在表达,在心脏血管系统的发育中及骨骼肌缺血时能有效促进血管新生,但其促血管新生的细胞与分子机制尚不清楚。目的:应用针对脑源性神经营养因子受体TrkB的shiRNA质粒对心... 背景:脑源性神经营养因子与其受体TrkB在心脏与骨骼肌内皮细胞存在表达,在心脏血管系统的发育中及骨骼肌缺血时能有效促进血管新生,但其促血管新生的细胞与分子机制尚不清楚。目的:应用针对脑源性神经营养因子受体TrkB的shiRNA质粒对心脏微血管内皮细胞进行转染,观察TrkB 3种亚型的表达及心脏微血管内皮细胞的生长状况和形态,初步探讨脑源性神经营养因子-TrkB通路在心脏微血管内皮细胞中的调控作用。方法:使用TrkB-shiRNA质粒转染大鼠心脏微血管内皮细胞,应用荧光实时定量PCR检测TrkB的3个亚型,TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2 mRNA的表达,并观察经转染的心脏微血管内皮细胞的增殖情况。结果与结论:应用TrkB-shiRNA质粒转染心脏微血管内皮细胞后,TrkB 3种亚型在转染后的4d内mRNA表达均下降(P<0.05或P<0.01),且经转染的心脏微血管内皮细胞的生长变慢。说明TrkB-shiRNA质粒可沉默心脏微血管内皮细胞的TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2的表达,且TrkB表达被抑制可能会影响心脏微血管内皮细胞的增殖。 展开更多
关键词 心脏微血管内皮细胞 脑源性神经营养因子 trkb shiRNA trkb-FL trkb-T1 trkb-T2 细胞增殖
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The role of the TrkB-T1 receptor in the neurotrophin-4/5 antagonism of brain-derived neurotrophic factor on corticostriatal synaptic transmission 被引量:2
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作者 Elizabeth Hernandez-Echeagaray 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第11期1973-1976,共4页
This manuscript reviews the function and fundamental characteristics of the neurotrophins and their receptors to introduce the reader to the differential effects exhibited by the neurotrophins;brain-derived neurotroph... This manuscript reviews the function and fundamental characteristics of the neurotrophins and their receptors to introduce the reader to the differential effects exhibited by the neurotrophins;brain-derived neurotrophic factor and neurotrophin 4/5 when acted together after sequential presentation.The neurotrophin 4/5 exhibits an inhibitory action on the modulatory effect of brain-derived neurotrophic factor in corticostriatal synapses when they are administered sequentially(brain-derived neurotrophic factor to neurotrophin 4/5).This inhibitory effect has not been previously documented and is relevant for these neurotrophins as both of them stimulate the TrkB receptor.The additive effect of these neurotrophins is also discussed and occurs when neurotrophin 4/5 exposure is followed by brain-derived neurotrophic factor in a mouse model of striatal degeneration.Occlusive and additive effects of both neurotrophins are accompanied by changes in the expression of the TrkB receptor isoforms,specifically TrkB-T1 and TrkB-FL,as well as differences in phosphorylation levels of the TrkB receptor.The results of the experiments described raise several questions to inquire about the role that TrkB-T1 receptor plays in striatal physiology,as well as the functional relevance of the interaction of brain-derived neurotrophic factor and neurotrophin 4/5 in the brain and more specifically at the striatal circuits in normal as well as pathological conditions. 展开更多
关键词 BRAIN-DERIVED NEUROTROPHIC factor NEUROTROPHIN 4/5 occlusive striatum synergic trkb-FL trkb-T1
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miR-186-5p靶向TrkB-T1抑制食管癌细胞迁移、侵袭的机制研究
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作者 王捷 张亚楠 +1 位作者 张瑜 高旭辉 《河北医药》 CAS 2021年第2期201-204,209,共5页
目的研究miR-186-5p对食管癌细胞迁移侵袭的影响,并探讨其机制。方法采用qRT-PCR法检测人正常食管上皮细胞HEEC、食管癌细胞ECA109、TE1、KYSE150中miR-186-5p、TrkB-T1的mRNA的表达;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-186-5p组(转染miR-186-... 目的研究miR-186-5p对食管癌细胞迁移侵袭的影响,并探讨其机制。方法采用qRT-PCR法检测人正常食管上皮细胞HEEC、食管癌细胞ECA109、TE1、KYSE150中miR-186-5p、TrkB-T1的mRNA的表达;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-186-5p组(转染miR-186-5p mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-TrkB-T1组(转染si-TrkB-T1)、miR-186-5p+pcDNA组(共转染miR-186-5p mimics和pcDNA)、miR-186-5p+pcDNA-TrkB-T1组(共转染miR-186-5p mimics和pcDNA-TrkB-T1),均用脂质体法转染至ECA109细胞;Transwell小室法检测细胞的迁移侵袭;Western blot检测细胞中TrkB-T1、Twist、N-cadherin、E-cadherin的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果与人正常食管上皮细胞HEEC比较,食管癌细胞ECA109、TE1、KYSE150中miR-186-5p的表达显著降低,TrkB-T1的表达显著升高(P<0.05);过表达miR-186-5p、敲减TrkB-T1均可抑制ECA109细胞的迁移侵袭,下调Twist、N-cadherin蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达;miR-186-5p可抑制野生型TrkB-T1细胞的荧光活性,并负向调控TrkB-T1表达;过表达TrkB-T1可逆转miR-186-5p对ECA109细胞的迁移侵袭抑制和EMT抑制作用。结论miR-186-5p可抑制食管癌细胞的迁移侵袭及EMT,其机制与靶向负调控TrkB-T1有关,将可为食管癌的治疗提供新的作用靶点。 展开更多
关键词 miR-186-5p trkb-T1 食管癌 EMT
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基于BDNF/TrkB/AMPK/SIRT1信号通路探讨耳电针刺激对癫痫大鼠记忆力和癫痫发作的影响
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作者 陈敏 朱慧艳 +1 位作者 徐奕鹏 陶静 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第13期1776-1781,共6页
目的基于脑源性神经营养因子(BDNF)/原肌球蛋白相关激酶B(TrkB)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路,探讨耳电针刺激对癫痫大鼠记忆力、癫痫发作的影响及其分子机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为正常4周组、... 目的基于脑源性神经营养因子(BDNF)/原肌球蛋白相关激酶B(TrkB)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路,探讨耳电针刺激对癫痫大鼠记忆力、癫痫发作的影响及其分子机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为正常4周组、模型4周组、耳电针4周组、正常8周组、模型8周组、耳电针8周组,每组6只。2个模型组和2个耳电针组大鼠均建立锂-匹鲁卡品癫痫模型。癫痫模型建立24 h后,耳电针4周组和耳电针8周组大鼠分别给予耳电针刺激4周和8周,每周连续刺激3 d。每组干预结束后,采用抑制性回避试验测定大鼠空间记忆力,脑电图测定48 h内癫痫大鼠自发癫痫次数,ELISA测定大鼠海马组织中BDNF含量,Western blot法测定大鼠海马组织中TrkB、AMPK、SIRT1蛋白表达情况。结果模型4周组、模型8周组大鼠的黑盒滞留时间均明显长于对应时间的正常组(P均<0.05),48 h内出现多次自发癫痫,海马组织中BDNF含量和p-TrkB、p-AMPK、SIRT1蛋白相对表达量均明显低于对应时间的正常组(P均<0.05);耳电针4周组和耳电针8周组大鼠的黑盒滞留时间均明显短于对应时间的模型组(P均<0.05),48 h内自发癫痫次数均明显少于对应时间的模型组(P均<0.05),海马组织中BDNF含量和p-TrkB、p-AMPK、SIRT1蛋白相对表达量均明显高于对应时间的模型组(P均<0.05),且耳电针8周组上述指标改善情况均明显优于耳电针4周组(P均<0.05)。结论耳电针刺激可呈时间依赖性改善癫痫大鼠的记忆能力,减少癫痫发作,机制可能与调控海马组织中BDNF/TrkB/AMPK/SIRT1信号通路有关。 展开更多
关键词 癫痫 耳电针刺激 记忆力 脑源性神经营养因子 原肌球蛋白相关激酶B 腺苷酸活化蛋白激酶 沉默信息调节因子1
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