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富营养化湖泊水体中藻蓝蛋白提取方法的对比 被引量:6
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作者 庞晓宇 段洪涛 +1 位作者 张玉超 马荣华 《湖泊科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期799-806,共8页
藻蓝蛋白是蓝藻的指示型色素,目前还没有标准的提取方法,特别是萃取剂的选择品种较多,对测量结果影响较大.分别以室内培养的铜绿微囊藻和巢湖夏季野生蓝藻为提取对象,运用液氮反复冻融法破碎蓝藻细胞,分别以AsolctinCHAPS缓冲液(AC)、... 藻蓝蛋白是蓝藻的指示型色素,目前还没有标准的提取方法,特别是萃取剂的选择品种较多,对测量结果影响较大.分别以室内培养的铜绿微囊藻和巢湖夏季野生蓝藻为提取对象,运用液氮反复冻融法破碎蓝藻细胞,分别以AsolctinCHAPS缓冲液(AC)、磷酸盐缓冲液(PBS)和Tris-HCl缓冲液来提取藻蓝蛋白,通过分光光度法分析提取液的吸收光谱、藻蓝蛋白浓度以及藻蓝蛋白浓度与叶绿素a浓度的相关性,比较3种缓冲液的提取效果.结果显示:3种缓冲液提取的藻蓝蛋白提取液在620 nm处都出现了藻蓝蛋白的特征吸收峰,但AC缓冲液和PBS缓冲液提取效率明显高于Tris-HCl缓冲液.另外,虽然AC缓冲液提取效率最高,但其成本昂贵、配制过程复杂且不易控制、难保存,不适宜大规模地推广应用;而PBS缓冲液的提取效率略低于AC缓冲液,但其配制方便快捷,更适合于大规模湖泊水质监测的要求,因此推荐PBS缓冲液作为常用的藻蓝蛋白提取液. 展开更多
关键词 藻蓝蛋白 Asolctin-CHAPS缓冲液 磷酸盐缓冲液 tris-hcl缓冲液 蓝藻 色素提取 巢湖
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溴甲酚绿与DNA相互作用的分光光度研究 被引量:3
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作者 韩巧菊 迟燕华 庄稼 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期119-121,共3页
用UV-Vis分光光度法研究了溴甲酚绿(BCG)与DNA基本的反应条件,BCG与DNA结合物的最大吸收波长是444nm,反应的最佳酸度为pH5.23;测定了反应时间、温度、离子强度、表面活性物质等因素对体系的影响;求出了BCG与DNA反应生成物的线性范围:(0... 用UV-Vis分光光度法研究了溴甲酚绿(BCG)与DNA基本的反应条件,BCG与DNA结合物的最大吸收波长是444nm,反应的最佳酸度为pH5.23;测定了反应时间、温度、离子强度、表面活性物质等因素对体系的影响;求出了BCG与DNA反应生成物的线性范围:(0.61~7.30)×10-7mol/L,表观摩尔吸光系数:1.29×105L·cm-1·mol-1,结合数:43,离解度:0.16,检出限为7.74×10-8mol/L,建立了DNA的反应体系。 展开更多
关键词 溴甲酚绿 脱氧核糖核酸(DNA) 分光光度法 tris-hcl缓冲液
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血液保养液的细菌内毒素测定时鲎试剂溶媒的改进
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作者 张天栋 于志英 肖健 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期62-63,共2页
目的 :建立血液保养液的细菌内毒素检查法。方法 :用自制 Tris- Hc缓冲液代替细菌内毒素检查用水做鲎试剂溶媒 ,按中国药典 2 0 0 0年版二部收载的细菌内毒素检查法进行实验。结果 :Tris- Hcl缓冲液做鲎试剂溶媒能排除血液保养液对鲎试... 目的 :建立血液保养液的细菌内毒素检查法。方法 :用自制 Tris- Hc缓冲液代替细菌内毒素检查用水做鲎试剂溶媒 ,按中国药典 2 0 0 0年版二部收载的细菌内毒素检查法进行实验。结果 :Tris- Hcl缓冲液做鲎试剂溶媒能排除血液保养液对鲎试剂凝胶反应的干扰。结论 :鲎试剂溶媒改进后 。 展开更多
关键词 鲎试剂 tris-hcl缓冲液 保养 细菌内毒素
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系统性红斑狼疮特异性抗原60KD Ro/SSA的提取和纯化
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作者 贺晨 《浙江实用医学》 2005年第4期230-230,240,共2页
目的建立从猪脾纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法从猪脾提取ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀结合离子交换层析分离ENA蛋白组分,并用对流免疫电泳检测60KDSSA抗原的活性,以得到纯化60KDSSA抗原的具体条件。结果60KDSSA抗原... 目的建立从猪脾纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法从猪脾提取ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀结合离子交换层析分离ENA蛋白组分,并用对流免疫电泳检测60KDSSA抗原的活性,以得到纯化60KDSSA抗原的具体条件。结果60KDSSA抗原在Tris-HCl缓冲液(pH8.3)中的硫酸铵沉淀范围是硫酸铵饱和度50%~60%。60KDSSA抗原在50mMTris-HCl缓冲液(pH8.3)+NaCl中的DE52离子交换层析洗脱范围为电导值35~40ms/cm。结论结合硫酸铵沉淀和DE52离子交换层析两种纯化方法所得的60KDSSA抗原相对于其它ENA有较高的纯度,并能有效分离中SSA中60KD、52KD两个组分。 展开更多
关键词 60KD RO/SSA 蛋白纯化 硫酸铵沉淀 离子交换层析 可提取核抗原 纯化方法 系统性红斑狼疮 特异性抗原 tris-hcl缓冲液
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响应面法优化黑水虻幼虫蛋白质提取工艺 被引量:10
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作者 许彦腾 张建新 +1 位作者 宋真真 孙勇 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期401-410,共10页
【目的】对黑水虻Hermetia illucens幼虫蛋白质进行不同提取方法的比较,选择最优提取方法,并确定其最优工艺参数,为黑水虻幼虫蛋白提取与资源利用提供依据。【方法】以黑水虻幼虫为原料,分别采用碱提法、酶提法、盐提法和Tris-HCl缓冲... 【目的】对黑水虻Hermetia illucens幼虫蛋白质进行不同提取方法的比较,选择最优提取方法,并确定其最优工艺参数,为黑水虻幼虫蛋白提取与资源利用提供依据。【方法】以黑水虻幼虫为原料,分别采用碱提法、酶提法、盐提法和Tris-HCl缓冲液提法对黑水虻幼虫蛋白质进行提取,并比较分析。通过单因素试验分别确定NaOH质量浓度、液料比、提取温度及提取时间4个因素的较优水平。在单因素试验结果基础上,按照Box-Behnken响应面试验设计进行响应面优化试验。【结果】提取黑水虻幼虫蛋白质的4种方法中碱提法的提取率最高,最佳提取条件为:NaOH质量浓度2.44 g/100mL,液料比22 mL/g,提取温度53℃,提取时间2 h。提取率验证试验结果为88.49%,与预测值相对误差为0.28%。【结论】响应面模型拟合度高,优化出的最佳提取工艺可行。 展开更多
关键词 黑水虻 蛋白质提取 碱提法 酶提法 盐提法 trishcl缓冲液提法 响应面 工艺优化
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