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贵州木霉NJAU4742生物有机肥对番茄种植的影响 被引量:24
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作者 李瑞霞 陈巍 +3 位作者 蔡枫 赵政 高仁维 隆小华 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期464-472,共9页
[目的]本文旨在研究贵州木霉生物有机肥对番茄种植的促生作用及其对土壤养分、土壤酶活性及微生物数量的影响。[方法]试验于江苏盐城大丰设施盐土大棚内进行,以‘合作903’番茄和贵州木霉NJAU4742为试验材料,共设5个处理:不施肥处理(CK... [目的]本文旨在研究贵州木霉生物有机肥对番茄种植的促生作用及其对土壤养分、土壤酶活性及微生物数量的影响。[方法]试验于江苏盐城大丰设施盐土大棚内进行,以‘合作903’番茄和贵州木霉NJAU4742为试验材料,共设5个处理:不施肥处理(CK)、农户习惯施肥处理(CF)、75%的农户习惯施肥量配施木霉NJAU4742生物有机肥处理(BF)、75%的农户习惯施肥量配施普通有机肥处理(OF)、75%的农户习惯施肥量配施木霉孢子悬液处理(SS)。[结果]相对于CF处理,BF处理番茄增产15%以上,且番茄果实中蛋白质、维生素C和可溶性糖含量显著提高,硝酸盐含量降低。接种木霉的BF和SS处理,根际土壤中木霉的数量显著提高,土壤中的微生物群落发生改变。BF和OF处理显著提高土壤脲酶、磷酸酶和过氧化氢酶活性。此外,土壤中速效养分含量也显著增加。[结论]减施25%的化肥同时配施功能木霉菌NJAU4742制成的生物有机肥可以通过调控土壤养分有效性、土壤酶活性和土壤微生物区系来改善盐土的可耕种性,从而提高番茄的产量和品质。 展开更多
关键词 贵州木霉 生物有机肥 促生作用 番茄
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新型木霉氨基酸有机肥研制及其对番茄的促生效果 被引量:13
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作者 刘秋梅 陈兴 +4 位作者 孟晓慧 叶奇 李托 刘东阳 沈其荣 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期3314-3322,共9页
为提高贵州木霉NJAU4742固体发酵产孢能力,本研究拟用稻草秸秆和氨基酸水解液为原料进行固体发酵获得高分生孢子含量的固体菌种,将该固体菌种添加到含有不同比例氨基酸水解液的有机肥中进行二次发酵研制新型生物有机肥,并利用盆栽试验... 为提高贵州木霉NJAU4742固体发酵产孢能力,本研究拟用稻草秸秆和氨基酸水解液为原料进行固体发酵获得高分生孢子含量的固体菌种,将该固体菌种添加到含有不同比例氨基酸水解液的有机肥中进行二次发酵研制新型生物有机肥,并利用盆栽试验研究该生物有机肥对番茄的促生作用.结果表明:在利用稀释30倍的氨基酸水解液浸泡秸秆过夜后调节秸秆为初始p H 3.5、75%含水量、30%玉米粉添加量的条件下,贵州木霉NJAU4742所产分生孢子数量高达2.40×10^(10)CFU·g^(-1).接种2%固体木霉菌种于含有20%氨基酸水解液的腐熟有机肥后,该处理中木霉活菌数和吲哚乙酸(IAA)含量均达到最高,分别为6.40×10~9CFU·g^(-1)和38.66 mg·kg^(-1),与对照相比分别增加了1142.30和1.42倍.盆栽试验表明,木霉氨基酸生物有机肥(AT)与氨基酸有机肥(AA)处理跟对照(CK)相比株高分别增加了98.8%和23.8%,茎粗分别增加了58.9%和10.3%,叶绿素、叶长、叶宽等指标也显著增加.利用稻草秸秆和氨基酸水解液进行浅盘固体发酵生产木霉分生孢子,克服了工厂化生产固体木霉菌种的瓶颈,以此制备的新型木霉氨基酸有机肥(AT)与等养分的氨基酸有机肥(AA)和对照(CK)处理相比,对番茄的促生效果显著,在集约化农业生产中具有良好的应用前景. 展开更多
关键词 贵州木霉 氨基酸 固体发酵 盆栽试验 促生
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基于响应曲面法优化贵州木霉NJAU4742产胞外木聚糖酶的研究 被引量:4
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作者 郜普源 孟晓慧 +4 位作者 李托 朱瀚 黄启为 刘东阳 沈其荣 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期98-107,共10页
[目的]本研究旨在通过响应曲面法优化生物肥功能菌贵州木霉NJAU4742液体发酵过程中产胞外木聚糖酶的参数,为生产木霉固体菌种及其生物有机肥提供理论依据。[方法]采用单因子试验,获得不同单因子对菌株产胞外木聚糖的影响;利用Minitab 1... [目的]本研究旨在通过响应曲面法优化生物肥功能菌贵州木霉NJAU4742液体发酵过程中产胞外木聚糖酶的参数,为生产木霉固体菌种及其生物有机肥提供理论依据。[方法]采用单因子试验,获得不同单因子对菌株产胞外木聚糖的影响;利用Minitab 15.0软件设计Plackett-Burman试验并对试验结果进行分析,选出核心因子;再利用响应曲面法(response surface methodology)设计Box-Behnken试验完成核心因子的优化,并结合Design Expert 10.0软件分析试验数据,最终得出菌株产木聚糖酶的最佳条件;在最佳条件下,利用凝胶电泳分析胞外蛋白条带差异并测定蛋白含量。[结果]单因子试验结果表明:尿素与氯化钙含量、培养基初始pH值、温度、培养时间对菌株产木聚糖酶影响比较大,尿素和氯化钙最佳含量分别为0.25 g·L-1、0.40 g·L-1,最佳初始pH值3.0、培养温度28℃、培养时间7 d。响应曲面优化试验确定尿素添加量、氯化钙添加量、初始pH值和磷酸二氢钾添加量为影响菌株产胞外木聚糖酶的核心因子,并确定液体发酵主要参数:尿素0.29 g·L-1、氯化钙0.35 g·L-1、磷酸二氢钾2.12 g·L-1、初始pH值3.16、培养温度28℃、培养时间7 d、孢子接种量1.0×105CFU·mL-1。凝胶电泳结果表明,发酵条件优化后部分区域蛋白含量明显增加。[结论]发酵过程参数优化后贵州木霉NJAU4742产胞外木聚糖酶活性达到19.86 U·mL-1,比没有优化前提高1.25倍,菌株胞外蛋白含量比原始培养条件培养提高1.50倍。 展开更多
关键词 贵州木霉 木质纤维素 木聚糖酶 优化 响应曲面
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贵州木霉NJAU4742几丁质酶基因chi 8的克隆、表达和酶学特性研究 被引量:3
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作者 王小松 马磊 +4 位作者 刘志颖 李托 朱瀚 刘东阳 沈其荣 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期111-118,共8页
[目的]本研究旨在从贵州木霉(Trichoderma guizhouense NJAU4742)菌株中克隆、表达几丁质酶基因chi 8并深入研究其酶学特性,分析Chi8水解胶体几丁质的产物,为其在农业生产中的实际应用提供理论依据。[方法]基于序列比对获取chi 8与其他... [目的]本研究旨在从贵州木霉(Trichoderma guizhouense NJAU4742)菌株中克隆、表达几丁质酶基因chi 8并深入研究其酶学特性,分析Chi8水解胶体几丁质的产物,为其在农业生产中的实际应用提供理论依据。[方法]基于序列比对获取chi 8与其他几丁质酶基因的同源关系,并设计引物扩增得到完整的chi 8序列,利用pET-29a质粒和大肠杆菌BL21进行异源表达;经镍柱纯化后并研究Chi8酶学特性;利用MALDI-TOF/MS检测Chi8水解胶体几丁质的最终产物;基于同源建模法构建Chi8的三维模型并与几丁六糖进行对接获取其催化相关位点信息。[结果]本试验克隆、表达得到的Chi8与哈茨木霉几丁质酶(ACM47359)的序列相似度为93.38%;Chi8在30~40℃酶活性较高且能保持较好的热稳定性,在pH6.0时酶活性为0.50 U·μmol^-1·h^-1;Ca^2+可以显著提高Chi8的酶活性,可达到原酶活性的110.62%,而Co^2+、Cu^2+、Fe^3+均有抑制作用,与酶作用后Chi8酶活性下降至原酶活性的89.70%、60.17%和5.93%;在酸性条件下,Chi8水解胶体几丁质的最终产物主要为几丁二糖[(GlcNAc)2]。Chi8同源建模结果表明,其含有18个螺旋和15个β-折叠,末端的IMD残基可形成1个咪唑环;底物对接结果表明,Chi8中Asn197、Trp110、Tyr218、Arg274、Arg31可以与几丁六糖形成氢键,可能为该蛋白的活性中心。[结论]本试验克隆、表达得到的几丁质酶Chi8具有良好的生化特性,能够高效水解胶体几丁质并生成壳寡糖,产物主要为几丁二糖。 展开更多
关键词 贵州木霉 几丁质酶 异源表达 酶学特性 壳寡糖 蛋白同源建模
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外包木霉内含芽孢杆菌颗粒生物有机肥研制及其促生效应 被引量:2
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作者 张思奇 刘红军 +2 位作者 沈宗专 李荣 沈其荣 《土壤通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期465-471,共7页
【目的】利用造粒喷涂技术,研制了外包木霉菌内含芽孢杆菌(SQR9)的颗粒复合菌生物有机肥,以辣椒为供试作物,利用盆栽试验,研究了新型生物有机肥对辣椒植株株高、茎粗、叶绿素等农艺性状的影响。【方法】首先利用圆盘造粒机将有机肥、芽... 【目的】利用造粒喷涂技术,研制了外包木霉菌内含芽孢杆菌(SQR9)的颗粒复合菌生物有机肥,以辣椒为供试作物,利用盆栽试验,研究了新型生物有机肥对辣椒植株株高、茎粗、叶绿素等农艺性状的影响。【方法】首先利用圆盘造粒机将有机肥、芽孢杆菌和适量粘合剂制成颗粒芽孢杆菌生物有机肥,随后,再将真菌木霉孢子喷涂颗粒表面,利用第一次添加的粘结剂形成外包真菌孢子膜的新型颗粒复合菌生物有机肥。【结果】货架期试验结果表明,颗粒肥料中木霉菌比粉状肥料存活能力更强,在储存60天后,新型颗粒复合菌生物有机肥中木霉菌含量大于2×10^(7) cfu g^(−1),芽孢杆菌数量大于1.2×10^(8) cfu g^(−1)。盆栽试验结果表明,在种植47天后,施用新型颗粒复合菌生物有机肥的辣椒植株在株高、茎粗、叶绿素、鲜重和干重方面均高于其他处理(含SQR9颗粒生物有机肥、含SQR9和木霉菌的粉状生物有机肥、含木霉菌颗粒生物有机肥和含SQR9和木霉菌的颗粒生物有机肥处理),表明了该新型颗粒复合菌生物有机肥对辣椒具有明显的促生效果。【结论】相比于单菌和其他工艺研制的复合菌生物有机肥,外包木霉真菌内含芽孢杆菌新型颗粒复合菌生物有机肥能够充分发挥木霉真菌和芽孢杆菌的促生功能,有效增强复合菌生物有机肥的促生效果。 展开更多
关键词 贵州木霉 解淀粉芽孢杆菌 生物有机肥 促生作用 辣椒
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木聚糖酶TgXyn2的酶学特性研究 被引量:1
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作者 葛雨杭 陈美汐 +2 位作者 孙博 吴松娜 万群 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第4期138-144,共7页
目的:本研究旨在发掘和研究一种新的低温酸性内切-1,4-β-木聚糖酶TgXyn2并研究其酶学特性,为其在食品等轻工业生产中的实际应用提供理论依据。方法:利用pCold-TF表达质粒在大肠杆菌中异源表达,纯化后检测其酶学特性,并通过同源建模分... 目的:本研究旨在发掘和研究一种新的低温酸性内切-1,4-β-木聚糖酶TgXyn2并研究其酶学特性,为其在食品等轻工业生产中的实际应用提供理论依据。方法:利用pCold-TF表达质粒在大肠杆菌中异源表达,纯化后检测其酶学特性,并通过同源建模分析其三维结构。结果:该酶的最适温度为35℃,最适pH为5.0,K_(m)为1.287μmol L^(−1),V_(max)为2.083μmol min^(−1)mg^(−1);同源建模结果表明,TgXyn2由2个反向平行的β-折叠和1个α-螺旋构成,是典型的糖苷水解酶GH11家族木聚糖酶。结论:本文研究的TgXyn2具有良好的酶学特性,在食品等行业具有较好的应用潜力。 展开更多
关键词 贵州木霉 木聚糖酶 酶学特性 第11 家族 食品行业
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基于RNA-seq的木霉长链非编码RNA的生物信息学预测及其重寄生相关性分析 被引量:2
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作者 刘金定 王权 +1 位作者 黄水清 沈其荣 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期877-886,共10页
[目的]本研究旨在全基因组范围内识别木霉(Trichoderma guizhouense)NJAU4742(NJAU4742)的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA),探究lncRNA在重寄生过程中可能参与的调控作用。[方法]用链特异性RNA-seq技术,对重寄生过程中与病原... [目的]本研究旨在全基因组范围内识别木霉(Trichoderma guizhouense)NJAU4742(NJAU4742)的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA),探究lncRNA在重寄生过程中可能参与的调控作用。[方法]用链特异性RNA-seq技术,对重寄生过程中与病原菌互作接触前、后以及独立培养的木霉菌进行转录组测序;构建生物信息学流程,识别lncRNA并用RSEM和DESeq2软件分析lncRNA在重寄生过程中的表达情况;对lncRNA的靶标预测和表达情况进行分析,探索lncRNA在重寄生过程中可能参与的调控作用。[结果]在木霉NJAU4742中识别了1676个lncRNA,其中包含1049个基因间型lncRNA,590个反义型lncRNA,32个正义型lncRNA以及5个内含子型lncRNA。与编码基因相比,lncRNA的外显子数量偏少,序列长度偏短,表达量偏低,在基因组上的跨度偏短。靶标预测结果显示:1496个lncRNA能够靶向2269个蛋白编码基因,其中1492个lncRNA以顺式作用形式靶向2262个编码基因,4个lncRNA以反式作用形式靶向7个编码基因。GO功能分类结果显示:代谢过程(metabolic process)、催化活性(catalytic activity)和细胞过程(cellular process)是lncRNA靶标分布数量较多的3个类别。KEGG通路分析结果显示:信号转导(signal transduction)、转运与分解代谢(transport and catabolism)和碳水化合物代谢(carbohydrate metabolism)是lncRNA靶标分布数量较多的3类通路。进一步分析发现:147个lncRNA靶向编码碳水化合物活性酶和蛋白酶的基因以及次生代谢物合成相关的基因,其中30个lncRNA在重寄生过程中表达水平发生显著变化,有10个lncRNA的表达和靶标基因显著相关。[结论]木霉在NJAU4742中存在长链非编码RNA,部分成员参与对病原菌重寄生过程的调控。 展开更多
关键词 木霉 生物信息学 长链非编码RNA 重寄生 链特异性RNA-seq
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