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从豆渣中制取可溶性膳食纤维的研究 被引量：78
1
作者 姜竹茂 陈新美 缪静 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期52-55,共4页
分别用三种方法即直接水浸提法、酶解法、生物发酵法对从豆渣中制备可溶性膳食纤维进行了研究。采用正交试验设计确定了直接水浸提法的最佳提取条件为 :提取温度 10 0℃、自然pH、提取时间 10min、加水量 2 5ml.g- 1。选用最佳条件的验... 分别用三种方法即直接水浸提法、酶解法、生物发酵法对从豆渣中制备可溶性膳食纤维进行了研究。采用正交试验设计确定了直接水浸提法的最佳提取条件为 :提取温度 10 0℃、自然pH、提取时间 10min、加水量 2 5ml.g- 1。选用最佳条件的验证试验结果表明 ,可溶性膳食纤维产率由原来的 6 .55%提高到 11.34% ,增加了近一倍。酶解法研究结果表明 ,可溶性膳食纤维产率进一步提高到 16 .59%。而用生物发酵法处理豆渣后 ,可溶性膳食纤维率有所下降 。 展开更多
关键词 豆渣 可溶性膳食纤维 纤维素酶 绿色木霉 大豆 制取
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绿色木霉对西瓜枯萎病苗期的控制作用 被引量：42
2
作者 赵国其 林福呈 +2 位作者 陈卫良 童晓华 陈灵敏 《浙江农业学报》 CSCD 1998年第4期206-209,共4页
西瓜枯萎病是西瓜生产中重要的病害，至今仍缺乏有效的防治方法。绿色木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒ－ｍａｖｉｒｉｄｅ）Ｔａ经ＰＤＡ平皿测定、试管离体夹心培养和盆栽试验，均能有效地抑制西瓜枯萎病菌生长，保护瓜苗。西瓜根围取样分析... 西瓜枯萎病是西瓜生产中重要的病害，至今仍缺乏有效的防治方法。绿色木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒ－ｍａｖｉｒｉｄｅ）Ｔａ经ＰＤＡ平皿测定、试管离体夹心培养和盆栽试验，均能有效地抑制西瓜枯萎病菌生长，保护瓜苗。西瓜根围取样分析表明，Ｔａ能够在根围定殖，并能稳定地达到２．８×１０７ｃｆｕ／ｇ土壤的菌落种群。 展开更多
关键词 西瓜 枯萎病菌 绿色木霉 生物防治 控制作用
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绿色木霉TR-8菌株的生物学特性研究 被引量：35
3
作者 纪明山 李博强 +3 位作者 许远 时越 谷祖敏 陈捷 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期195-199,共5页
绿色木霉菌TR-8是一株具有生防潜力的拮抗菌。研究发现TR-8菌株在PDA培养基、查彼培养基和基本培养基上均能较好生长,在基本培养基上生长最快,3种培养基对孢子产生影响不大。温度对菌丝生长和孢子产生影响显著,30℃时菌丝生长最快,25℃... 绿色木霉菌TR-8是一株具有生防潜力的拮抗菌。研究发现TR-8菌株在PDA培养基、查彼培养基和基本培养基上均能较好生长,在基本培养基上生长最快,3种培养基对孢子产生影响不大。温度对菌丝生长和孢子产生影响显著,30℃时菌丝生长最快,25℃时产孢量最大。TR-8菌株在pH值2～10范围内均可生长,pH值5～6时菌丝生长最快,pH值为7时孢子产生量最大。光照处理对菌丝生长影响不明显,但可明显促进孢子产生。葡萄糖和麦芽糖为菌丝生长和产孢的最佳碳源。天冬酰胺是菌丝生长和孢子产生的最佳氮源。不同维生素对菌丝生长和孢子产生作用不同,烟酸对菌丝生长最有利。微量元素对菌丝生长有一定的促进作用,Mn有利于孢子产生。镰刀菌的菌丝提取物对TR-8的孢子产生具有促进作用。 展开更多
关键词 绿色木霉 TR-8菌株 生物学特性 培养基 菌丝生长 产孢量 生防菌
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绿色木霉TR-8菌株对尖镰孢的拮抗机制 被引量：37
4
作者 纪明山 李博强 +2 位作者 陈捷 谷祖敏 王英姿 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2005年第2期104-108,共5页
对绿色木霉TR 8菌株抑制尖镰孢的拮抗机制进行了研究。平板对峙培养结果表明,绿色木霉生长快于尖镰孢FO G1,接触后FO G1生长停止,TR 8继续生长,覆盖FO G1的菌落并大量产孢,但不形成抑菌圈。观察了TR 8对FO G1的重寄生现象,TR 8菌丝首先... 对绿色木霉TR 8菌株抑制尖镰孢的拮抗机制进行了研究。平板对峙培养结果表明,绿色木霉生长快于尖镰孢FO G1,接触后FO G1生长停止,TR 8继续生长,覆盖FO G1的菌落并大量产孢,但不形成抑菌圈。观察了TR 8对FO G1的重寄生现象,TR 8菌丝首先向FO G1趋性生长,然后紧贴FO G1菌丝平行生长或穿入菌丝生长,最后FO G1菌丝瓦解。在扫描电镜下可以看到FO G1菌丝原生质凝结,菌丝上有孔洞出现。发酵7d,TR 8发酵液中β1,3 葡聚糖酶的活性为20 15U/ml,几丁质酶的活性为11 67U。发酵原液对FO G1菌丝生长和孢子萌发均无抑制作用,但TR 8的挥发性分泌物对病菌孢子萌发具有一定的抑制作用。含有TR 8分泌物的培养基对病菌孢子萌发有很强的抑制作用,抑制率高达75 06%。 展开更多
关键词 绿色木霉 拮抗机制 尖镰孢 菌株 3-葡聚糖酶 抑制作用 孢子萌发 菌丝生长 重寄生现象 对峙培养 扫描电镜 几丁质酶 分泌物 抑菌圈 原生质 β-1 发酵液 挥发性 培养基 抑制率 活性 病菌 趋性
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蔬菜灰霉病生防菌的筛选与防效试验初报 被引量：27
5
作者 赵蕾 杨合同 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期85-88,共4页
针对灰霉病对大棚蔬菜生产造成的严重危害，从不同生态环境条件下筛选到４种对灰霉病菌（由Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ引起）有拮抗作用的生防菌株，并进行了初步鉴定．室内和田间试验表明，４种生防菌株中尤以绿色木霉（Ｔｒｉｃ... 针对灰霉病对大棚蔬菜生产造成的严重危害，从不同生态环境条件下筛选到４种对灰霉病菌（由Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ引起）有拮抗作用的生防菌株，并进行了初步鉴定．室内和田间试验表明，４种生防菌株中尤以绿色木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｖｉｒｉｄｅ）ＬＴＲ２的防治效果为最佳。 展开更多
关键词 灰霉病 拮抗作用 绿色木霉 生物防治
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绿色木霉LTR-2菌株的紫外线诱变改良 被引量：36
6
作者 杨合同 唐文华 +2 位作者 李纪顺 王加宁 肖斌 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2004年第3期182-186,共5页
通过紫外线诱变处理 ,获得了可以在低温下 (1 0℃ )生长的绿色木霉LTR 2的快速生长型突变株LR ,以及对多菌灵具有抗性的突变株LRR。突变株对棉枯萎病菌、棉黄萎病菌、棉立枯病菌的平板拮抗能力一般低于野生型菌株。LR比LTR 2更能适合非... 通过紫外线诱变处理 ,获得了可以在低温下 (1 0℃ )生长的绿色木霉LTR 2的快速生长型突变株LR ,以及对多菌灵具有抗性的突变株LRR。突变株对棉枯萎病菌、棉黄萎病菌、棉立枯病菌的平板拮抗能力一般低于野生型菌株。LR比LTR 2更能适合非根际土壤环境 ,而LRR在健康棉花根际的定殖能力上 ,比LTR 2有明显下降。LR对棉花立枯病基本没有防治效果 ,但对棉花黄萎病和枯萎病的防治效果则高于原始菌株 ;LRR对棉花上述 展开更多
关键词 绿色木霉 诱变 紫外线 棉花病害
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微波诱变结合化学诱变选育纤维素酶高产菌的研究 被引量：39
7
作者 兰时乐 李立恒 +2 位作者 王晶 赵谦 周馥卉 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期22-25,共4页
以纤维素酶产生菌TP1202为出发菌株,通过微波诱变和硫酸二乙酯、氯化锂诱变剂进行诱变,选育到1株纤维素酶高产菌株AS5。在适宜条件下,其产生的羧甲基纤维素酶活力(CMC),滤纸酶活力(FPA)和棉花糖酶活力分别是出发菌株的107%、152.4%和140... 以纤维素酶产生菌TP1202为出发菌株,通过微波诱变和硫酸二乙酯、氯化锂诱变剂进行诱变,选育到1株纤维素酶高产菌株AS5。在适宜条件下,其产生的羧甲基纤维素酶活力(CMC),滤纸酶活力(FPA)和棉花糖酶活力分别是出发菌株的107%、152.4%和140.5%。 展开更多
关键词 微波诱变 化学诱变 纤维素酶 绿色木霉
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绿色木霉LTR12-1对黄瓜枯萎病菌防治作用机制的初步研究 被引量：28
8
作者 蒲金基 曾会才 《热带农业科学》 2002年第4期22-25,共4页
绿色木霉LTR12-1对黄瓜枯萎病菌有很强的拮抗作用,主要作用方式为位点竞争、营养竞争和抗生作用。LTR12-1的主要抗生机制是,产生几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和蛋白质酶消解病原菌细胞壁,从而杀灭病原菌。
关键词 绿色木霉LTR12-1 黄瓜 枯萎病菌 防治 作用机制
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绿色木霉对蔬菜苗期病害的防治和促生作用 被引量：22
9
作者 李卫平 林福呈 《浙江农业学报》 CSCD 2000年第2期106-107,共2页
关键词 绿色木霉 病害防治 促生作用 蔬菜 生物防治
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一株产纤维素酶绿色木霉的筛选及发酵条件优化 被引量：30
10
作者 肖舸 雷芳 +4 位作者 喻东 唐成康 刘克武 国锦琳 曹威 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期422-425,共4页
从土壤中筛选到一株具有较高纤维素酶活性的绿色木霉,对其液态发酵条件进行了优化.以羧甲基纤维素钠为碳源,含量0.75%,(NH4)2SO4为氮源,含量0.4%,250mL三角瓶20%装量,5%接种量,培养基初始pH为4,28℃,180r/min培养96h,优化后发酵液中Cx... 从土壤中筛选到一株具有较高纤维素酶活性的绿色木霉,对其液态发酵条件进行了优化.以羧甲基纤维素钠为碳源,含量0.75%,(NH4)2SO4为氮源,含量0.4%,250mL三角瓶20%装量,5%接种量,培养基初始pH为4,28℃,180r/min培养96h,优化后发酵液中Cx酶活达到277.7U/mL发酵液. 展开更多
关键词 纤维素酶 绿色木霉 发酵 酶学性质
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绿色木霉发酵配方与防治油菜菌核病的研究 被引量：21
11
作者 陈碧云 周乐聪 陆致平 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2001年第2期67-70,共4页
以绿色木霉 Tv36为农抗产生菌 ,比较了多种液体培养基对 Tv36产生抗生代谢物能力差异。根据几种较优配方的组分与用量 ,经正交试验得到产抗生代谢物的最优配方 OTF。Tv36用 OTF发酵并过滤后 ,对抗生代谢物进行了防治油菜菌核病的生物测... 以绿色木霉 Tv36为农抗产生菌 ,比较了多种液体培养基对 Tv36产生抗生代谢物能力差异。根据几种较优配方的组分与用量 ,经正交试验得到产抗生代谢物的最优配方 OTF。Tv36用 OTF发酵并过滤后 ,对抗生代谢物进行了防治油菜菌核病的生物测定和田间试验。结果表明 ,Tv36 - OTF发酵滤液对核盘菌菌丝生长有明显的抑制效果 ;Tv36 - OTF发酵滤液 1 0、2 0、5 0倍 3种不同的稀释倍数在油菜离体叶试验中均有明显的抑制病斑扩展的效果 ;Tv36 - OTF农抗液剂 2 0、5 0倍对油菜菌核病的田间防治效果分别达 80 .5 %、6 8.6 % 。 展开更多
关键词 绿色木霉 生防菌 油菜 菌核病 生物测定 田间试验 抗生代谢物 发酵配方
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绿色木霉固态发酵产纤维素酶活力的研究 被引量：32
12
作者 王仪明 张宗舟 +3 位作者 蔺海明 孙小弟 雷艳芳 王东明 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期123-127,共5页
以麦秆和麸皮为主要原料,通过正交试验和单因素试验优化绿色木霉Trichderma viride固态发酵产纤维素酶的最佳工艺条件,并研究绿色木霉对小麦秸秆纤维素降解的影响,为绿色木霉降解小麦秸秆纤维素提供最佳条件,进而提高小麦秸秆的利用率... 以麦秆和麸皮为主要原料,通过正交试验和单因素试验优化绿色木霉Trichderma viride固态发酵产纤维素酶的最佳工艺条件,并研究绿色木霉对小麦秸秆纤维素降解的影响,为绿色木霉降解小麦秸秆纤维素提供最佳条件,进而提高小麦秸秆的利用率。结果表明,不同条件下绿色木霉产纤维素酶活力存在显著差异(P<0.05),最佳培养基为:氮源为(NH4)2SO4,pH值5.5,含水量为200%,麦秆∶麸皮质量比为4∶1;最佳发酵条件为:培养时间为96 h、温度35℃、初始pH值6.0、含氮量0.4%、接种量15%,培养方式为半密闭;发酵后小麦秸秆中中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、纤维素含量和半纤维素含量比发酵前分别下降5.22%、6.88%、4.73%和4.16%,木质素含量无明显变化。 展开更多
关键词 绿色木霉 发酶条件 纤维素酶活 小麦秸秆 纤维素
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绿色木霉菌株Tv04-2固体发酵条件研究 被引量：29
13
作者 刘时轮 李勇 +2 位作者 傅俊范 丁万隆 方焕民 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第B10期244-247,共4页
以产孢量为测定指标,通过单因子和正交试验对人参根部病害拮抗绿色木霉菌株Tv04-2固体发酵条件进行了筛选,获得了以玉米粉、麦麸等廉价农产品及其副产物为碳、氮源的最佳固体发酵培养基,其配方为:在250 mL三角瓶中装入20 g固体基质,其... 以产孢量为测定指标,通过单因子和正交试验对人参根部病害拮抗绿色木霉菌株Tv04-2固体发酵条件进行了筛选,获得了以玉米粉、麦麸等廉价农产品及其副产物为碳、氮源的最佳固体发酵培养基,其配方为:在250 mL三角瓶中装入20 g固体基质,其中玉米粉∶麦麸按1∶1比例混合,FeSO4含量0.1 g,水7 mL,接种量4 mL;最佳发酵条件为:25,20和28℃下依次发酵2 d。利用优化培养基及发酵条件进行发酵试验,可以获得高达4×109cfu/g的产孢量,为人参根部病害高拮抗活性木霉菌剂的生产和应用奠定了基础。 展开更多
关键词 绿色木霉 固体发酵 产孢量
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木霉拮抗烟草赤星病菌菌株的筛选及其生防机制 被引量：19
14
作者 王革 周晓罡 +1 位作者 方敦煌 李天飞 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2000年第3期216-218,共3页
利用诱捕法从土壤中分离得到 1 8株木霉 (Trichodermaspp .)菌株 ,采用对峙法从中测定、筛选出一株对烟草赤星病菌 (Alternariaalternata)具有极强拮抗作用的菌株 (Tv - 1 ) ,光学显微镜及透射电镜观察结果表明 ,Tv - 1菌株的生防机制... 利用诱捕法从土壤中分离得到 1 8株木霉 (Trichodermaspp .)菌株 ,采用对峙法从中测定、筛选出一株对烟草赤星病菌 (Alternariaalternata)具有极强拮抗作用的菌株 (Tv - 1 ) ,光学显微镜及透射电镜观察结果表明 ,Tv - 1菌株的生防机制主要为生长竞争、重寄生作用以及产生生物活性类物质使病菌菌丝消解的直接抗菌作用 ,表现为Tv - 1菌株菌丝生长迅速 ;能附着、缠绕于病菌菌丝上 ,并产生吸器侵入菌丝 ;同时还能分泌使病菌菌丝原生质浓缩、断裂。 展开更多
关键词 烟草赤星病 绿色木霉 拮抗菌筛选 生物防治
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三种杀菌剂对木霉菌及食用菌的毒力测定 被引量：23
15
作者 温志强 林太礼 廖朝阳 《福建农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期48-52,共5页
测定了 3种杀菌剂对木霉菌和食用菌的抑制作用 .结果表明 ,施保克、施保功对木霉菌的孢子萌发和菌丝生长均有极强烈的抑制作用 ,其 EC50 分别是施保克为 0 .74和 0 .6 8mg· L-1;施保功为 0 .6 9和 0 .89mg·L-1;多菌灵仅对木... 测定了 3种杀菌剂对木霉菌和食用菌的抑制作用 .结果表明 ,施保克、施保功对木霉菌的孢子萌发和菌丝生长均有极强烈的抑制作用 ,其 EC50 分别是施保克为 0 .74和 0 .6 8mg· L-1;施保功为 0 .6 9和 0 .89mg·L-1;多菌灵仅对木霉菌丝有抑制作用 ,EC50 为 114.77mg· L-1,对木霉孢子萌发无抑制作用 .施保克、施保功、多菌灵对香菇菌丝的 EC50 分别为 13.4 0、13.78和 32 4 .0 mg· L-1,对茶薪菇的 EC50 分别为 14.93、10 .71和2 2 9.50 mg· L-1. 展开更多
关键词 杀菌剂 木霉菌 食用菌病害 毒力测定 孢子萌发抑制率
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发酵制取柠檬皮膳食纤维及其脱色工艺研究 被引量：25
16
作者 张雪梅 蒲彪 +1 位作者 欧阳玲花 李季 《中国酿造》 CAS 北大核心 2006年第1期26-29,共4页
采用正交试验优化绿色木霉发酵制取柠檬皮膳食纤维的最佳工艺,以发酵温度、pH值、发酵时间为主要因素,按L(933)正交组合设计试验,结果表明:提取膳食纤维的最佳组合为发酵温度28℃、发酵时间72h、pH值6.3。同时还进行膳食纤维的脱色处理... 采用正交试验优化绿色木霉发酵制取柠檬皮膳食纤维的最佳工艺,以发酵温度、pH值、发酵时间为主要因素,按L(933)正交组合设计试验,结果表明:提取膳食纤维的最佳组合为发酵温度28℃、发酵时间72h、pH值6.3。同时还进行膳食纤维的脱色处理试验,以过氧化氢(H2O2)为脱色剂,探讨了H2O2的用量、反应时间、反应温度及其pH对柠檬皮膳食纤维脱色效果的影响,并通过正交试验确定了柠檬皮膳食纤维脱色的最佳工艺条件,即:H2O2用量5%,pH10,温度45℃,时间3h。 展开更多
关键词 柠檬皮 膳食纤维 绿色木霉 提取 漂白工艺
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绿色木霉Tr9701对多种病原菌的抑制作用及其抑病机理 被引量：28
17
作者 王勇 王万立 +3 位作者 刘春艳 郝永娟 杨秀荣 刘水芳 《中国农学通报》 CSCD 2008年第1期371-374,共4页
对筛选获得的绿色木霉菌株Tr9701(Trichoderma viride)进行抑菌活性测定。结果表明,Tr9701对立枯病菌和灰霉病菌等多种病原菌具有较强抑菌活性。小区试验表明,Tr9701菌剂对黄瓜立枯病的防治效果在66.27%～73.46%间,对番茄灰霉病的防病... 对筛选获得的绿色木霉菌株Tr9701(Trichoderma viride)进行抑菌活性测定。结果表明,Tr9701对立枯病菌和灰霉病菌等多种病原菌具有较强抑菌活性。小区试验表明,Tr9701菌剂对黄瓜立枯病的防治效果在66.27%～73.46%间,对番茄灰霉病的防病效果在70.85%～80.06%间。并通过产几丁质酶活性等对其抗病机理进行了初探,结果表明绿色木霉菌Tr9701产生几丁质酶,且经诱导处理酶产量明显提高,其酶粗提液对立枯病菌、灰霉病菌有显著抑制作用。显微观察显示绿色木霉菌对立枯病菌具有较强的寄生能力。 展开更多
关键词 绿色木霉 抑菌活性 抑病机理
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绿色木霉配施高碳基肥料对烤烟生长及经济效益的影响 被引量：26
18
作者 张子颖 许家来 +5 位作者 李现道 孟庆宏 管恩森 殷全玉 刘国顺 郭凯 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期79-86,共8页
为了研究绿色木霉和生物炭的农业应用效果,以NC55为供试烤烟品种,采用单因素随机区组试验设计,在山东省潍坊市烟草试验站进行了绿色木霉配施高碳基肥料的试验。共设4个处理:不施绿色木霉和高碳基肥料;施用绿色木霉;施用高碳基肥料;绿色... 为了研究绿色木霉和生物炭的农业应用效果,以NC55为供试烤烟品种,采用单因素随机区组试验设计,在山东省潍坊市烟草试验站进行了绿色木霉配施高碳基肥料的试验。共设4个处理:不施绿色木霉和高碳基肥料;施用绿色木霉;施用高碳基肥料;绿色木霉和高碳基肥料配施。结果表明:(1)绿色木霉配施高碳基肥料显著增大烤烟株高、茎围和单株叶面积;(2)绿色木霉配施高碳基肥料的烟草气候斑点病和烟草花叶病的发病率与对照相比均显著降低。(3)绿色木霉配施高碳基肥料显著提高烤烟的经济效益。综合分析,绿色木霉配施高碳基肥料对促进烤烟生长发育,防治烟田病害,提升烤烟生产的经济效益。 展开更多
关键词 烤烟 绿色木霉 高碳基肥料 生长 经济效益
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绿色木霉对土传病原真菌的体外拮抗作用 被引量：22
19
作者 宋漳 陈辉 《福建林学院学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期219-222,共4页
体外拮抗作用测定表明 ,绿色木霉 [Trichoderma viride Per. ex Fr. ( T0 2 ) ]对土传病原真菌齐整小核菌 [Sclerotium rolfsii Sacc. ( S0 1) ]和半裸镰孢 [Fusarium semitectum Berk.&Rav.( F0 4) ]有明显的拮抗作用 ,在对峙培养... 体外拮抗作用测定表明 ,绿色木霉 [Trichoderma viride Per. ex Fr. ( T0 2 ) ]对土传病原真菌齐整小核菌 [Sclerotium rolfsii Sacc. ( S0 1) ]和半裸镰孢 [Fusarium semitectum Berk.&Rav.( F0 4) ]有明显的拮抗作用 ,在对峙培养中拮抗系数分别为 2～ 3和 2 .在光学显微镜下观察到绿色木霉对半裸镰孢菌丝的缠绕、使细胞质变稀薄、菌丝消解、菌丝断裂或侵入等现象 .绿色木霉对齐整小核菌形成明显的拮抗圈 ,界面处病菌菌丝的细胞质变稀薄、消解或菌丝断裂 ,病菌菌丝停止生长 .绿色木霉还对齐整小核菌菌核形成包围 ,并抑制菌核的萌发 . 展开更多
关键词 体外拮抗作用 绿色木霉 土传病原真菌 生物防治
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绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅲ基因的克隆与表达 被引量：19
20
作者 刘北东 杨谦 +3 位作者 周麒 宋金柱 陈佃福 刘恒 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期127-132,共6页
为研究构建可降解纤维类固体废弃物的工程菌 ,采用RT PCR方法克隆到绿色木霉 (Trichodermaviride)AS3 371 1的葡聚糖内切酶Ⅲ (EGⅢ )的cDNA基因 ,测序后构建到酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)诱导型表达载体pYES2上 ,用正交实验对... 为研究构建可降解纤维类固体废弃物的工程菌 ,采用RT PCR方法克隆到绿色木霉 (Trichodermaviride)AS3 371 1的葡聚糖内切酶Ⅲ (EGⅢ )的cDNA基因 ,测序后构建到酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)诱导型表达载体pYES2上 ,用正交实验对超声波辅助酵母转化系统进行了优化 .转化获得的EGⅢ转化子用 2 %的 β D 半乳糖诱导 ,用Northern杂交、刚果红染色法和CMC糖化力法分别对目的基因的转录和表达产物的葡聚糖内切酶活性进行检测 .结果表明 ,EGⅢ的cDNA基因开放阅读框长度为 1 2 5 4bp ,编码 4 1 8个氨基酸 ,推测蛋白质分子量为 4 4 1× 1 0 3 .正交实验中较优组合为第 5组 (超声波处理 6 0s,温育 4 0min ,单链DNA 1 5 0 μg ,热激 5min) ;刚果红染色显示 ,转化子可产生明显的水解圈 ;CMC酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的EGⅢ并分泌到胞外 ,发酵液中的酶活在培养 6 0h达到最高 0 0 4 1U/mL ;最适酶解温度为 5 0℃ ;最适 pH值为 5 8. 展开更多
关键词 绿色木霉 葡聚糖内切酶Ⅲ 酿酒酵母 表达
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