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题名三叶因子3对甲状腺乳头状癌细胞周期的影响及机制
被引量：5
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作者
代金
林旭
郭梦姚
张静
张文静
薛刚
吴靖芳
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机构
河北北方学院组织学与胚胎学教研室
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出处
《解剖学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期211-219,共9页
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基金
河北省自然科学基金(H2018405054)
张家口市科技支撑项目(1611055H)
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文摘
目的探讨三叶因子3 (TFF3)基因沉默对人甲状腺乳头状癌TPC-1和BCPAP细胞增殖及细胞周期的影响及相关分子机制。方法包装TFF3 shRNA慢病毒载体,病毒感染获得TPC-1和BCPAP稳转细胞株;生长曲线和集落形成实验检测沉默TFF3后细胞增殖状况;流式细胞术检测TFF3基因对TPC-1和BCPAP细胞周期的影响;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测P27、P21和cyclin D1、周期蛋白依赖性激酶(CDK) 4 mRNA的表达情况;免疫印迹法(Western blotting)、免疫细胞化学染色检测周期相关蛋白P27、P21、cyclin D1、CDK4和蛋白激酶B(Akt)、p Akt的蛋白表达水平。结果成功包装TFF3 shRNA慢病毒载体,病毒液感染获得TPC-1和BCPAP稳转细胞株;生长曲线和集落形成实验结果显示,沉默TFF3后,细胞增殖能力减弱;流式细胞术结果显示,与对照组相比,TFF3基因沉默组G1期的细胞比例明显增高(*P<0. 05),S和G2期的细胞比例明显下降(*P<0. 05); TFF3沉默组TPC-1和BCPAP细胞中的P27、P21 mRNA和蛋白明显上调(*P<0. 05),而cyclin D1,CDK4mRNA和蛋白表达降低(*P<0. 05); 4株细胞Akt蛋白含量无明显差异,但沉默TFF3组磷酸化蛋白激酶B(p Akt)表达减弱;免疫细胞化学染色显示,cyclin D1阳性蛋白位于癌细胞胞核,P27、P21蛋白表达于胞质和胞核,且沉默TFF3后在细胞核中阳性信号增强,细胞质中阳性表达降低。结论沉默TFF3可明显延长甲状腺癌细胞周期,抑制细胞的增殖,可能与抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路相关蛋白的表达有关。
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关键词
三叶因子3
细胞周期
慢病毒转染
磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B
流式细胞术
人
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Keywords
trefoil factorfamily 3
Cell cycle
Lentivirus transfection
Phosphatidylinositol 3-kinase and protein kinase B
Flow cytometry
Human
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分类号
R739
[医药卫生—肿瘤]
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