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大劣按蚊Torso⁃like基因鉴定分子结构及表达特征
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作者 朱凌倩 胡小康 +2 位作者 许静 李石柱 冯欣宇 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期584-590,共7页
目的鉴定大劣按蚊Torso⁃like(tsl)基因及表达特征,为深入研究tsl基因功能提供理论基础。方法根据黑腹果蝇和冈比亚按蚊tsl基因,检索大劣按蚊全基因组并鉴别大劣按蚊tsl基因,设计特异性引物,并采用PCR和逆转录PCR技术扩增目的基因。利用... 目的鉴定大劣按蚊Torso⁃like(tsl)基因及表达特征,为深入研究tsl基因功能提供理论基础。方法根据黑腹果蝇和冈比亚按蚊tsl基因,检索大劣按蚊全基因组并鉴别大劣按蚊tsl基因,设计特异性引物,并采用PCR和逆转录PCR技术扩增目的基因。利用生物信息学软件分析tsl基因编码TSL蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、蛋白质二级结构和三级结构,并进行系统发育进化分析。利用实时荧光定量PCR技术检测该基因在大劣按蚊各组织中的表达水平。结果大劣按蚊tsl基因全长16751 bp,CDS区长1134 bp,编码377个氨基酸。TSL蛋白属于亲水性稳定蛋白。经生物信息学预测,TSL蛋白为位于膜外的分泌蛋白,且包含信号肽;其二级结构含α⁃螺旋(51.72%)、延伸链(12.20%)、β⁃折叠(4.78%)和无规则卷曲(31.30%),且能以5cj9.1.A为模板进行3D同源建模。系统发育进化分析发现大劣按蚊TSL蛋白与法老按蚊TSL蛋白亲缘关系较近。实时荧光定量PCR检测显示,tsl基因在大劣按蚊头、胸、腹、足均有表达,且在头部表达量最高、足部表达量较低。结论本研究从基因组水平鉴定了大劣按蚊tsl基因,分析了其蛋白结构及组织特异性表达特征,为进一步深入研究该基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 大劣按蚊 torsolike基因 鉴定 分子结构 生物信息学
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