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Cdc42在舌鳞状细胞癌中的表达及其对细胞增殖、迁移、侵袭的影响
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作者 慕家宁 袁文清 +4 位作者 陆洲 赵阳 王奇民 童磊 陈正岗 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2023年第3期209-217,共9页
目的:观察细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在舌鳞癌中的表达及与临床病理特征和预后的关系,探讨体外沉默Cdc42基因对舌鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响及作用机制。方法:通过免疫组织化学法检测Cdc42基因在舌鳞癌及癌旁... 目的:观察细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在舌鳞癌中的表达及与临床病理特征和预后的关系,探讨体外沉默Cdc42基因对舌鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响及作用机制。方法:通过免疫组织化学法检测Cdc42基因在舌鳞癌及癌旁组织中的表达,分析Cdc42表达与舌鳞癌临床病理学参数的相关性及对预后的影响。将人舌鳞状细胞癌CAL27和SCC-4细胞随机分为3组,分别为Cdc42-siRNA组、阴性对照组和空白对照组。设计并构建针对人Cdc42基因序列的3条小干扰RNA(siRNA),应用脂质体介导转染方法分别将Cdc42-siRNA和NCsiRNA转染至Cdc42-siRNA组和阴性对照组,空白对照组仅加入转染试剂。通过实时荧光定量反转录PCR(qRTPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞Cdc42的mRNA及蛋白表达,将沉默效率最高的Cdc42-siRNA转染组作为后续实验组。Western blot检测EMT及MAPK JNK/p38通路相关蛋白的表达,CCK-8、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测各组细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:Cdc42在44例舌鳞癌患者中的阳性表达率为70.5%(31/44),在癌旁组织中的阳性率为38.6%(17/44),差异具有统计学意义(P<0.05)。Cdc42表达与不同颈淋巴结转移、临床分期、浸润深度相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Cdc42阳性表达的舌鳞癌患者预后与阴性表达患者无显著差异(P>0.05)。体外实验中,Cdc42-siRNA组细胞Cdc42 mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05),EMT相关蛋白间叶标志物N-cadherin、Vimentin表达显著降低(P<0.05),MMP-9表达显著降低(P<0.05),而上皮标记物E-cadherin相对表达量显著增加(P<0.05);MAPK JNK/p38通路相关蛋白p38-MAPK和JNK蛋白相对表达量差异无统计学意义(P>0.05),而p-p38-MAPK、p-JNK蛋白表达水平显著下降(P<0.05),Cdc42-siRNA组细胞增殖、侵袭和迁移能力显著下降(P<0.05)。结论:舌鳞癌患 展开更多
关键词 CDC42 舌鳞癌 增殖 侵袭 迁移 上皮-间质转化
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