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杂交诱捕实时荧光PCR检测番茄环斑病毒 被引量:8
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作者 赵文军 陈红运 +1 位作者 朱水芳 谭天伟 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期666-669,共4页
A new virus detection method was developed by combining hybridization capture and real-time PCR technology with the sample of Tomato ringspot nepovirus.High purified DNA or RNA was crucial for the real-time PCR detect... A new virus detection method was developed by combining hybridization capture and real-time PCR technology with the sample of Tomato ringspot nepovirus.High purified DNA or RNA was crucial for the real-time PCR detection as the inhibitors of PCR reaction in template and might cause the false-negative cases.A probe was covalent bound to the surface of PCR tube for the DNA capture followed by real-time PCR detection.The steps of nucleic acids preparation and detection were both done in one the same tube.This method reduced the possibility of contamination as well increased the detection efficiency.It can be applied in plant virus detection especially for the sample with many inhibitors of PCR reaction. 展开更多
关键词 实时荧光PCR检测 番茄环斑病毒 杂交 检疫性有害生物 PCR产物 特异性检测 诱捕 电泳技术
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三种外检植物病毒的灭活处理 被引量:2
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作者 陈京 胡伟贞 陈燕芳 《植物检疫》 北大核心 1997年第2期81-84,共4页
番茄环斑病毒(TmRSV),烟草环斑病毒(TRSV),南芥菜花叶病毒(ArMV)的病汁液和PEG粗提纯液,经适宜温度或甲醛处理,均丧失侵染性而有抗原性。TmRSVPEG粗提纯液经60℃(水浴)处理10分钟或28℃7天... 番茄环斑病毒(TmRSV),烟草环斑病毒(TRSV),南芥菜花叶病毒(ArMV)的病汁液和PEG粗提纯液,经适宜温度或甲醛处理,均丧失侵染性而有抗原性。TmRSVPEG粗提纯液经60℃(水浴)处理10分钟或28℃7天,TRSV粗提纯液置25℃一个月,Ar-MV在40℃7天条件下均可做为阳性对照的灭活处理的最佳方案。可保存抗原性在7~12月以上。为了防止危险性检疫病毒的侵入,对入境种苗进行检疫,需建立快速、准确、标准化检疫程序,而在血清学快速诊断试验中,提供阳性对照,对提高判断准确率是必要的。因此,为了解决在诊断试剂中提供阳性对照但又不能使其检疫性病毒人为扩散这一重要问题,我们在研究三种外检病毒(TmRSV,TRSV,ArMV)的检验技术的同时,又进行了一些灭活试验,用化学和物理方法钝化病毒,使其失去侵染性而保持抗原性,并应用于酶联诊断试剂盒中。 展开更多
关键词 植物检疫 植物病毒性 灭活处理 环斑病毒
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番茄环斑病毒纳米荧光颗粒试纸条的研制 被引量:2
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作者 李鑫 刘卉秋 +2 位作者 胡强 曹冬梅 曹际娟 《生物技术通讯》 CAS 2014年第6期852-854,共3页
目的:研发一种快速、便捷检测番茄环斑病毒(ToRSV)的方法。方法:以荧光纳米颗粒为标记物,采用免疫层析试验方法制备ToRSV荧光纳米颗粒试纸条,在紫外灯下观察试纸条上的荧光信号,作为结果判定依据。结果:用制备的荧光纳米颗粒试纸条检测... 目的:研发一种快速、便捷检测番茄环斑病毒(ToRSV)的方法。方法:以荧光纳米颗粒为标记物,采用免疫层析试验方法制备ToRSV荧光纳米颗粒试纸条,在紫外灯下观察试纸条上的荧光信号,作为结果判定依据。结果:用制备的荧光纳米颗粒试纸条检测包括ToRSV在内的9种病毒,仅ToRSV有阳性反应,其余待测样品均呈阴性,表明该试纸条具有较好的特异性;用该荧光试纸条与传统胶体金试纸条进行灵敏度测试时,其灵敏性高于胶体金试纸条1倍以上,且稳定性试验结果良好。结论:ToRSV荧光纳米颗粒试纸条的研制,为快速检测ToRSV提供了有效手段,该方法可用于现场检验,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 番茄环斑病毒 荧光纳米颗粒试纸条 免疫层析
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番茄环斑病毒5’RNA1保守片段的克隆及病毒检测
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作者 杜中军 翟衡 +2 位作者 黄文胜 朱水芳 赵文军 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2003年第3期361-365,共5页
提取感染番茄环斑病毒TomatoRingspotNepovirus(TomRSV)的番杏 (TetragoniaExpansa)和葡萄品种赤霞珠(Vitis.cv.CabernetSauvignon)嫩叶及其阴性对照的总RNA ,根据NCBI中报道的TomRSV病毒四个分离物RNA15’端保守片段设计引物 ,对提取的... 提取感染番茄环斑病毒TomatoRingspotNepovirus(TomRSV)的番杏 (TetragoniaExpansa)和葡萄品种赤霞珠(Vitis.cv.CabernetSauvignon)嫩叶及其阴性对照的总RNA ,根据NCBI中报道的TomRSV病毒四个分离物RNA15’端保守片段设计引物 ,对提取的总RNA进行RT -PCR扩增 ,获得长 4 5 0bp特异性片段 ,并克隆到PMD18-T载体中构建PT -TomRSV重组载体。以PT -TomRSV载体为阳性对照 ,以无毒赤霞珠叶片为阴性对照 ,对带毒赤霞珠葡萄叶片作番茄环斑病毒巢式PCR检测。 展开更多
关键词 番茄 环斑病毒 5’RNA1保守片段 克隆 病毒检测
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