-
题名烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白在大肠杆菌中的表达
被引量：3
- 1
-
-
作者
卢秀萍
陈学军
刘勇
唐启慧
陈禹保
李文正
-
机构
云南省烟草科学研究所
北京标凯科技有限公司
北京中亚国瑞生物经济研究所
-
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期27-30,共4页
-
基金
国家自然科学基金(30560062)
云南省烟草专卖局科技开发计划(06A02)资助项目
-
文摘
目的:克隆烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(glycine-rich RNA-binding protein,GRRBPs)并进行原核表达,为制备抗体和研究烟草抗逆性分子机理打下基础。方法:从总RNA中反转录扩增并克隆烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白NtRGP-1a和NtRGP-3全长cDNA,将cDNA序列克隆到表达载体pGEX4T-1上,构建了重组表达质粒pGEX4T-1/NtRGP-1a、pGEX4T-1/NtRGP-3,转化大肠杆菌rosetta,IPTG诱导表达,GSTrap 4B亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果:重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,蛋白纯度占总蛋白的95%以上。结论:成功克隆和表达了烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白NtRGP-1a和NtRGP-3基因序列,为制备抗体和烟草抗逆性分子机理等进一步的研究奠定了基础。
-
关键词
烟草
富含甘氨酸rna结合蛋白
克隆表达
-
Keywords
tobacco glycine-rich rna-binding protein clone and express
-
分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
-
