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罗非鱼湖病毒逆转录重组酶介导链替换扩增(RT-RAA)快速检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
郑晓聪
陈雨
+3 位作者
朱崧琪
吴山楠
周文川
刘荭
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期1489-1495,共7页
为建立针对罗非鱼湖病毒(TiLV)的逆转录重组酶介导链替换扩增(RT-RAA)快速检测方法,在NCBI建立的核酸序列数据库GenBank中获取TiLV全基因序列,以其假定蛋白基因片段为依据,设计上游引物3个、下游引物3个(交叉构建9组引物组合)和1条探针...
为建立针对罗非鱼湖病毒(TiLV)的逆转录重组酶介导链替换扩增(RT-RAA)快速检测方法,在NCBI建立的核酸序列数据库GenBank中获取TiLV全基因序列,以其假定蛋白基因片段为依据,设计上游引物3个、下游引物3个(交叉构建9组引物组合)和1条探针。构建TiLV的RNA标准品、筛选引物组和优化扩增温度后,分析该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示,在TiLV RNA标准品基础上,确定F1/R3引物组和最佳温度为39℃,于20 min的短时间内,该方法即可检测出TiLV。该方法特异性强、灵敏度高,检测下限达到5.2×100copies/μL。30份临床样品中共检出2份阳性样品,检测结果与荧光定量RT-PCR结果相符。结果表明,本研究建立的RT-RAA检测方法可操作性强,重复性好,适用于TiLV的现场快速检测。
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关键词
罗非鱼
罗非鱼湖病毒
重组酶介导链替换扩增
快速检测
原文传递
题名
罗非鱼湖病毒逆转录重组酶介导链替换扩增(RT-RAA)快速检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
郑晓聪
陈雨
朱崧琪
吴山楠
周文川
刘荭
机构
深圳海关动植物检验检疫技术中心
上海理工大学
海口海关技术中心
深圳市渔业发展研究中心
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期1489-1495,共7页
基金
广东省“生物安全技术”专项重点研发项目(2022B1111030001)
海关总署2019年科技项目(2019HK025)
深圳市可持续发展科技专项(专2022N020)。
文摘
为建立针对罗非鱼湖病毒(TiLV)的逆转录重组酶介导链替换扩增(RT-RAA)快速检测方法,在NCBI建立的核酸序列数据库GenBank中获取TiLV全基因序列,以其假定蛋白基因片段为依据,设计上游引物3个、下游引物3个(交叉构建9组引物组合)和1条探针。构建TiLV的RNA标准品、筛选引物组和优化扩增温度后,分析该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示,在TiLV RNA标准品基础上,确定F1/R3引物组和最佳温度为39℃,于20 min的短时间内,该方法即可检测出TiLV。该方法特异性强、灵敏度高,检测下限达到5.2×100copies/μL。30份临床样品中共检出2份阳性样品,检测结果与荧光定量RT-PCR结果相符。结果表明,本研究建立的RT-RAA检测方法可操作性强,重复性好,适用于TiLV的现场快速检测。
关键词
罗非鱼
罗非鱼湖病毒
重组酶介导链替换扩增
快速检测
Keywords
tilapia
tilapia
lake
virus
(
ti
lv
)
recombinase-aid
amplifica
ti
on(RAA)
rapid
detec
ti
on
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
罗非鱼湖病毒逆转录重组酶介导链替换扩增(RT-RAA)快速检测方法的建立
郑晓聪
陈雨
朱崧琪
吴山楠
周文川
刘荭
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
原文传递
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参考文献
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