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实时定量RT-PCR评价小鼠胸腺功能和状态方法的建立 被引量：1
1
作者 张华华 郑克勤 《江西医学院学报》 2008年第4期4-6,18,共4页
目的建立实时定量RT-PCR的分析方法,对胸腺微环境内的相关基因的表达进行准确的定性和定量,以分析胸腺微环境及其中细胞的状态,直接有效地评价胸腺功能和状态。方法提取小鼠胸腺淋巴细胞RNA;逆转录成为cDNA;PCR扩增目的片段;优化PCR体系... 目的建立实时定量RT-PCR的分析方法,对胸腺微环境内的相关基因的表达进行准确的定性和定量,以分析胸腺微环境及其中细胞的状态,直接有效地评价胸腺功能和状态。方法提取小鼠胸腺淋巴细胞RNA;逆转录成为cDNA;PCR扩增目的片段;优化PCR体系;进行实时定量RT-PCR反应,建立扩增曲线;反应结束后,设定阈值,软件输出Ct值;根据比较Ct值法公式,获得不同处理组间相关基因表达比值。结果实时定量RT-PCR的扩增曲线为S型的动力学曲线,熔解曲线为单一峰,证实反应的准确性和特异性;36周小鼠相对于1周小鼠的胸腺相关基因表达变化比值为:LMO2 2.54±0.08、Foxn1 0.68±0.02I、L-7 0.15±0.03。结论36周小鼠发生了胸腺衰老,胸腺的功能和状态均出现退化;本研究成功建立利用实时定量RT-PCR评价小鼠胸腺功能和状态方法。 展开更多
关键词 实时定量RT-PCR 胸腺 胸腺微环境 功能 状态 动物 实验 小鼠
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不同剂量HepG2细胞诱导小鼠胸腺产生差异性免疫应答
2
作者 郝广萍 王淑娟 +2 位作者 程文君 刘展宏 吴惠文 《长治医学院学报》 2017年第6期401-404,共4页
目的:探讨小鼠胸腺对不同剂量HepG2细胞免疫效应的差异。方法:将不同剂量DiI标记的HepG2细胞(2×10~3个/μL、2×10~5个/μL、2×10~7个/μL)注射到小鼠胸腺内,检测不同时间检点(3d,5d,7d,14d,21d,28d)小鼠胸腺出现的免疫... 目的:探讨小鼠胸腺对不同剂量HepG2细胞免疫效应的差异。方法:将不同剂量DiI标记的HepG2细胞(2×10~3个/μL、2×10~5个/μL、2×10~7个/μL)注射到小鼠胸腺内,检测不同时间检点(3d,5d,7d,14d,21d,28d)小鼠胸腺出现的免疫应答变化。结果:低剂量HepG2细胞在小鼠胸腺内没有形成肿瘤组织,7d被清除;中、高剂量HepG2细胞在小鼠胸腺内均形成肿瘤组织,其周围出现不同程度T淋巴细胞聚集,并在不同时间点(中剂量14d,高剂量21d)被完全清除。结论:胸腺可对异种抗原产生免疫应答,其应答程度与抗原剂量有关。 展开更多
关键词 人肝癌细胞HEPG2 胸腺微环境 胸腺内免疫应答
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垂体腺苷酸环化酶激活肽及其衍生物对小鼠胸腺微环境内功能细胞的影响 被引量：1
3
作者 梁阳 郑丹丹 +2 位作者 欧阳军 余榕捷 张华华 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第23期3485-3489,共5页
目的探究垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)及其衍生肽对地塞米松(Dex)诱导的胸腺微环境内功能细胞损伤的保护作用。方法采用胶原酶法获取原代细胞,在共培养的体系中经Dex处理后,实验组加入PACAP-PTD及PACAP,采用新型细胞增殖及细胞毒性测... 目的探究垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)及其衍生肽对地塞米松(Dex)诱导的胸腺微环境内功能细胞损伤的保护作用。方法采用胶原酶法获取原代细胞,在共培养的体系中经Dex处理后,实验组加入PACAP-PTD及PACAP,采用新型细胞增殖及细胞毒性测试剂(CCK8)比色法检测细胞活性;Annexin V-FITC/PI流式双染检测细胞凋亡率;ELISA检测共培养体系中细胞因子的表达量。结果经过48 h处理后细胞的活性明显下降,流式细胞仪结果显示PACAP-PTD及PACAP加药后胸腺微环境内功能细胞的存活率与未加药者比较显著升高(P<0.05),凋亡率显著下降(P<0.05)。ELISA的结果表明加药组中细胞因子的含量也显著提高。结论PACAP-PTD及PACAP对Dex诱导的胸腺微环境内功能细胞凋亡具有抑制作用,且PACAP-PTD的作用比PACAP更为明显。 展开更多
关键词 胸腺微环境 地塞米松 PACAP-PTD 垂体腺苷酸环化酶激活肽
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基于胸腺微环境变化的补肾填精法对先天肾虚仔鼠T细胞发育的影响 被引量：1
4
作者 黄敏 赵敏 +3 位作者 陈龙云 陈会敏 徐安莉 萧闵 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1579-1583,共5页
目的通过构建先天肾虚仔鼠模型并给予左归丸干预来探讨先天肾虚对胸腺微环境和T细胞发育的影响,并论证补肾填精法的作用。方法孕鼠分为正常组、模型组和补肾组。正常组孕鼠不做任何处理;模型组孕鼠采用复合应激法刺激造模;补肾组孕鼠造... 目的通过构建先天肾虚仔鼠模型并给予左归丸干预来探讨先天肾虚对胸腺微环境和T细胞发育的影响,并论证补肾填精法的作用。方法孕鼠分为正常组、模型组和补肾组。正常组孕鼠不做任何处理;模型组孕鼠采用复合应激法刺激造模;补肾组孕鼠造模的同时给予左归丸灌胃处理。正常组孕鼠和模型组孕鼠给予生理盐水灌胃处理。仔鼠出生后,对比分析各组仔鼠的情况并观察胸腺形态和超微结构。进一步检测仔鼠胸腺中Caspase-8、IL-2、IL-7、IL-15及CD3+T细胞和CD4+T细胞的表达情况。结果模型组仔鼠胸腺形态和超微结构发生改变,Caspase-8、IL-2和IL-15的表达增加,IL-7的表达减少,CD3+T细胞和CD4+T细胞数量减少。左归丸干预能够有效逆转上述变化。结论先天肾虚会破坏仔鼠的胸腺微环境,进而影响T细胞的发育,而左归丸通过补肾填精法调节Caspase-8、IL-2、IL-15和IL-7的变化,可以改善其胸腺微环境和促进其T细胞的发育。 展开更多
关键词 先天肾虚 胸腺微环境 T细胞 补肾填精法
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T淋巴母细胞淋巴瘤/急性淋巴细胞白血病微环境研究进展
5
作者 张红玲 白中元 +1 位作者 宋鹤 郗彦凤 《医学综述》 CAS 2021年第19期3826-3832,共7页
T淋巴母细胞淋巴瘤/急性淋巴细胞白血病(T-LBL/ALL)是一种恶性血液系统疾病,侵袭性较高,其发生发展与T细胞祖细胞所处微环境的改变密切相关。随着研究的深入,T-LBL/ALL相关肿瘤微环境的改变与T-LBL/ALL的关系逐渐被揭示。同时,针对肿瘤... T淋巴母细胞淋巴瘤/急性淋巴细胞白血病(T-LBL/ALL)是一种恶性血液系统疾病,侵袭性较高,其发生发展与T细胞祖细胞所处微环境的改变密切相关。随着研究的深入,T-LBL/ALL相关肿瘤微环境的改变与T-LBL/ALL的关系逐渐被揭示。同时,针对肿瘤微环境的相关靶向药物的研发与应用已经取得一定疗效,为T-LBL/ALL患者的治疗带来新的思路。此外,新型靶点对于T-LBL/ALL患者的个体化靶向治疗具有重要的指导意义。因此,T-LBL/ALL相关肿瘤微环境的研究成为近年的热点,为T-LBL/ALL的临床诊断提供了新思路,并有助于寻找新的治疗靶点。 展开更多
关键词 T淋巴母细胞淋巴瘤/急性淋巴细胞白血病 骨髓微环境 胸腺微环境
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蛇胸腺基质细胞发育分化的超微结构研究
6
作者 李丕鹏 陆宇燕 《烟台师范学院学报（自然科学版）》 1999年第1期53-57,共5页
从超微结构方面对虎斑颈槽蛇（Ｒｈａｂｄｏｐｈｉｓｔｉｇｒｉｎａ）胚胎期间胸腺基质细胞的发育进行了观察分析．结果表明，胸腺上皮细胞在胚胎发育１１～１２期呈单一的淡染细胞类型，到１５期出现深染细胞类型，１６期胸腺皮质和髓... 从超微结构方面对虎斑颈槽蛇（Ｒｈａｂｄｏｐｈｉｓｔｉｇｒｉｎａ）胚胎期间胸腺基质细胞的发育进行了观察分析．结果表明，胸腺上皮细胞在胚胎发育１１～１２期呈单一的淡染细胞类型，到１５期出现深染细胞类型，１６期胸腺皮质和髓质基本形成，胸腺上皮细胞也和成体的胸腺一样分化为被膜下上皮细胞、血管周上皮细胞、皮质上皮细胞和髓质上皮细胞．胸腺巨噬细胞和幼肌样细胞分别出现于胚胎发育１４期和１５期，随后细胞逐渐发育成熟，细胞数量增多；到胚胎发育１６期，它们分别分布于胸腺皮质和髓质．另外，在胚胎发育１４期。 展开更多
关键词 胸腺 微环境 发育 分化 基质细胞 蛇 超微结构
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