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题名用硫氰酸盐洗脱法筛选高亲和力噬菌体抗体
被引量：9
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作者
王刚
王琰
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机构
解放军海军总医院
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期93-95,97,共4页
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基金
国家自然科学基金 (3 9670 679)
解放军总后"九五"重点项目(96Z0 0 4)资助课题
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文摘
目的 :建立一种从抗体库中筛选高亲和力噬菌体抗体的方法。方法 :选择已知亲和力高低不同的噬菌体抗体以不同的比例组成模拟抗体库 ,在常规筛选程序的基础上 ,用不同浓度的硫氰酸盐进行洗脱 ,选择性去除低亲和力抗体 ,保留高亲和力体 ,对最后获得的噬菌体抗体制备质粒DNA进行内切酶谱分析 ,判断其中高亲和力抗体的比例。结果 :实验证明工作浓度硫氰酸盐的孵育不影响噬菌体颗粒的感染活性 ;抗体库筛选过程中用硫氰酸盐进行洗脱 ,发现随着硫氰酸盐浓度的增加 ,洗脱回收的噬菌体抗体中高亲和力克隆的比例逐渐升高。结论 :硫氰酸盐洗脱法用于噬菌体抗体的筛选有助于成功获得期望的高亲和力抗体。
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关键词
硫氰酸盐洗脱法
噬菌体抗体
抗体亲和力
抗体库
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Keywords
thiocyanate elution phage antibody antibody affinity
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分类号
R392.11
[医药卫生—免疫学]
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