人绒毛膜促性腺激素和胰岛素对多囊卵巢综合征卵泡内膜细胞雄激素分泌的影响 被引量：18

1

作者 王蔼明 卢春华 +1 位作者 乔杰 李美芝 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期280-283,I008,共4页

目的检验多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）患者卵巢卵泡内膜细胞（简称内膜细胞）雄激素合成是否异常。方法对来自８例ＰＣＯＳ的卵巢卵泡与１８例正常妇女卵巢卵泡内膜细胞进行单层培养，采用放射免疫法测定两者在基础状态、人绒毛膜促性腺... 目的检验多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）患者卵巢卵泡内膜细胞（简称内膜细胞）雄激素合成是否异常。方法对来自８例ＰＣＯＳ的卵巢卵泡与１８例正常妇女卵巢卵泡内膜细胞进行单层培养，采用放射免疫法测定两者在基础状态、人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）和胰岛素（ＩＮＳ）刺激作用下培养液中１７α羟孕酮（ＯＨＰ）、雄烯二酮（Ａ）、孕酮（Ｐ）。结果在基础状态、ｈＣＧ与ＩＮＳ刺激作用下，ＰＣＯＳ患者的卵巢内膜细胞分泌Ａ、ＯＨＰ和Ｐ的量与正常妇女相比，除在基础状态下Ｐ无明显增加外（Ｐ＞０．０５），其余均显著增加，分别为几倍到十几倍（Ｐ＜００５～０００１）。此外，ｈＣＧ和ＩＮＳ还有协同刺激作用。ＰＣＯＳ患者３种激素分泌的持续时间比正常妇女长。结论ＰＣＯＳ患者的卵巢内膜细胞存在雄激素的合成异常，ＩＮＳ可能起关键作用。 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 雄激素类 人绒毛膜 促性腺激素

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催乳素对促性腺激素诱导的鸡卵泡膜细胞类固醇激素合成的抑制作用 被引量：10

2

作者 李莹辉 汪琳仙 杨传任 《中国兽医学报》 CSCD 1996年第6期597-601,共5页

利用无血清培养的鸡卵泡（Ｆ３）膜细胞模型研究了催乳素（ＰＲＬ）对卵泡膜细胞类固醇激素合成的作用。用不同剂量的ＰＲＬ、黄体生成素（ＬＨ）及促卵泡激素（ＦＳＨ）分别或共同处理在无血清培养液中培养了４８ｈ的鸡卵泡膜细胞，２... 利用无血清培养的鸡卵泡（Ｆ３）膜细胞模型研究了催乳素（ＰＲＬ）对卵泡膜细胞类固醇激素合成的作用。用不同剂量的ＰＲＬ、黄体生成素（ＬＨ）及促卵泡激素（ＦＳＨ）分别或共同处理在无血清培养液中培养了４８ｈ的鸡卵泡膜细胞，２４ｈ后收集培养液，测定培养液中睾酮（Ｔ）和雌二醇（Ｅ２）含量。结果表明，ＬＨ能明显刺激膜细胞合成Ｔ和Ｅ２，并具有剂量依赖关系；ＰＲＬ单独对膜细胞类固醇合成无明显作用，但可抑制ＬＨ诱导的Ｔ和Ｅ２合成，以及ＦＳＨ刺激的Ｅ２合成。本研究证明ＰＲＬ能作用于鸡卵泡膜细胞。 展开更多

关键词 鸡 卵泡膜细胞 催乳素 促性腺激素 细胞培养

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IGF-I对卵泡内膜细胞增殖及其LH受体表达的影响 被引量：10

3

作者 武秀峰 李红真 +1 位作者 范正红 郑淑蓉 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期84-87,106,I003,共6页

目的 :通过研究胰岛素样生长因子 (IGF- I)对猪卵巢卵泡内膜细胞增殖及促黄体生成素受体(LH受体 )表达的影响 ,提出 IGF- I可能在卵泡发育中的作用。方法 :采用细胞免疫组化、Westernblot及 MTT法进行研究。结果 :1 .细胞免疫组化结果显... 目的 :通过研究胰岛素样生长因子 (IGF- I)对猪卵巢卵泡内膜细胞增殖及促黄体生成素受体(LH受体 )表达的影响 ,提出 IGF- I可能在卵泡发育中的作用。方法 :采用细胞免疫组化、Westernblot及 MTT法进行研究。结果 :1 .细胞免疫组化结果显示 LH+IGF- I组及 IGF- I组与 LH组相比 ,LH受体表达明显增强 ,有统计学差异 ,分别为 P<0 .0 1 ,P<0 .0 5 ;而 LH+IGF- I组与 IGF- I组相比无统计学差异。Western blot结果发现 LH、IGF- I及 LH+IGF- I三组之间 LH受体蛋白强度的比较与细胞免疫组化结果相一致 ,此外还发现 LH受体蛋白为三个不同分子量的蛋白 ,它们分别为 6 0 k Da,5 0 k Da,3 5 k Da。 2 .IGF- I使卵泡内膜细胞增殖 ,LH的促增殖作用不明显 ,IGF- I及LH+IGF- I组与 LH组相比差异显著 ,P<0 .0 1 ;LH+IGF- I组与 IGF- I组相比无统计学差异。结论 :本实验发现 IGF- I及它与 LH协同作用 ,可以增强卵泡内膜细胞 LH受体的表达 ,同时又可以促进卵泡内膜细胞增殖 ,为进一步阐明多囊卵巢综合征 (PCOS) 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子(IGF-1) 促黄体生成素受体 卵泡内膜细胞

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卵泡分化排卵和黄体发生的分子基础 被引量：4

4

作者 刘以训 《潍坊学院学报》 2002年第6期1-12,共12页

本文综述了近二十年来在雌性生殖研究领域中五个方面的研究进展。 ( 1 )原始卵泡的启动生长和分化 :原始卵泡生长启动可能受卵巢内在因子 ,像生长因子的调控 ,而不是人所想象的FSH ;启动生长的卵泡受生长因子 ,FSH ,激活素 ,孤儿受体和... 本文综述了近二十年来在雌性生殖研究领域中五个方面的研究进展。 ( 1 )原始卵泡的启动生长和分化 :原始卵泡生长启动可能受卵巢内在因子 ,像生长因子的调控 ,而不是人所想象的FSH ;启动生长的卵泡受生长因子 ,FSH ,激活素 ,孤儿受体和其他卵巢旁分泌因子调控 ,并发展成“优势卵泡” ;( 2 )优势卵泡和闭锁卵泡 :FSH ,激活素 抑制素 ,卵泡抑素和雌激素调节卵泡分化的趋向 ,它们的相互作用和平衡决定“优热卵泡”和“闭锁卵泡”的形成 ,其中雌激素在此起关键性作用 ;它一方面促进FSH对LH受体的诱导作用 ,增加GC上的LH受体数目 ;另一方面可促进GC芳香化酶的产生 ,使此卵泡进入良性循环 ,发展为优势卵泡 ;( 3)两种细胞两种促性腺激素学说 :在FSH和LH作用下 ,GC产生的孕酮可被膜细胞利用转化为雄激素 ;因此GC和TC相互作用是卵巢雌激素产生的前提 ;( 4 )排卵 :GC主要产生tPA ,而TC主要表达tPA的抑制因子PAI- 1 ,在激素作用下 ,GC的tPA和TC的PAI- 1相互作用 ,形成一个局部蛋白水解窗口 ,它对卵泡破裂起决定性作用 ;( 5 )黄体形成和萎缩 :uPA和MMP TIMP系统对黄体发生起重要作用 ;而tPA对黄体萎缩起关键作用。 展开更多

关键词 卵泡分化 颗粒细胞 膜细胞 排卵 黄体发生 纤溶酶原激活因子 促性腺激素 生殖研究

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黄体生成素促进鸡小黄卵泡膜细胞增殖的作用机理 被引量：3

5

作者 林小辉 金艳梅 +1 位作者 曾卫东 张才乔 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期212-215,共4页

利用产蛋鸡小黄卵泡膜细胞培养模型研究黄体生成素（LH）对等级前发育的小黄卵泡膜细胞增殖的影响以及LH作用的信号转导途径。单层培养的外层膜细胞用LH（0.1～100μg/L）、蛋白激酶A（PKA）激活剂forskolin（FRSK,0.1～10μmol/L）及... 利用产蛋鸡小黄卵泡膜细胞培养模型研究黄体生成素（LH）对等级前发育的小黄卵泡膜细胞增殖的影响以及LH作用的信号转导途径。单层培养的外层膜细胞用LH（0.1～100μg/L）、蛋白激酶A（PKA）激活剂forskolin（FRSK,0.1～10μmol/L）及抑制剂H89（0.01～1μmol/L）或蛋白激酶C（PKC）激活剂佛波酯（PMA,0.1～10nmol/L）及抑制剂H7（0.01～1μmol/L）单独或共同处理,36 h后测定膜细胞增殖的变化。结果显示,LH和FRSK促进小黄卵泡膜细胞的增殖,且LH的促增殖作用可被H89阻断,而PMA无显著的促进作用,且H7不能阻断LH的促增殖作用。由此推断LH的促小黄卵泡外层膜细胞增殖作用主要是通过PKA途径进行的。 展开更多

关键词 小黄卵泡 膜细胞 黄体生成素 信号转导 鸡

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基于自噬与凋亡机制研究左归丸对化疗损伤颗粒细胞及膜细胞的影响 被引量：2

6

作者 刘涛 孙晓峰 +5 位作者 曾贵荣 黄欣怡 曾文卓 龚力民 阳松威 刘梦琳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1741-1750,共10页

目的探讨左归丸含药血清对化疗损伤性颗粒细胞和膜细胞的影响及作用机制。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,使用磷酰胺氮芥造模分组后给药。CCK-8法测定颗粒细胞和膜细胞存活率,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及蛋白... 目的探讨左归丸含药血清对化疗损伤性颗粒细胞和膜细胞的影响及作用机制。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,使用磷酰胺氮芥造模分组后给药。CCK-8法测定颗粒细胞和膜细胞存活率,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测卵巢自噬启动因子Beclin-1、微管结合蛋白轻链3(LC3B)、自噬受体蛋白p62、凋亡蛋白Bax、Caspase3在转录水平和翻译水平上的表达。结果10%左归丸含药血清对于细胞存活的挽救率最高。Beclin-1、LC3B、Bax、Caspase3在磷酰胺氮芥作用的颗粒细胞和膜细胞中,相对于空白对照组有高表达(P<0.05),10%左归丸含药血清可下调上述蛋白质在模型组中的表达(P<0.05);然而受体蛋白p62较空白对照组升高(P<0.05),10%左归丸含药血清可上调模型组p62的表达(P<0.05)。此外,在颗粒细胞实验组中,激活或抑制自噬途径后,自噬相关蛋白的表达在发生相应改变的同时,凋亡相关蛋白的表达也会发生相应改变。结论磷酰胺氮芥可通过促进凋亡、激活自噬/溶酶体降解途径的机制损伤颗粒细胞和膜细胞。10%左归丸含药血清能缓解由此带来的损伤,同时影响了颗粒细胞和膜细胞自噬和凋亡过程。在磷酰胺氮芥损伤颗粒细胞的过程和10%左归丸含药血清缓解其损伤过程中均存在自噬与凋亡串流(cross-talk)。 展开更多

关键词 左归丸 化疗 颗粒细胞 膜细胞 自噬 凋亡

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牛优势卵泡颗粒细胞与膜细胞中生殖激素合成相关基因的筛选与分析 被引量：2

7

作者 赵园园 吴震洋 +1 位作者 安清明 孟金柱 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2021年第7期11-19,共9页

[目的]探究牛优势卵泡颗粒细胞(GCs)和膜细胞(TCs)中基因的表达差异,筛选并研究与生殖激素合成相关的基因.[方法]在GEO数据库获得GSE83524芯片数据,通过在线软件GEO2R筛选牛优势卵泡中GCs和TCs之间的差异表达基因.使用DAVID软件对获得... [目的]探究牛优势卵泡颗粒细胞(GCs)和膜细胞(TCs)中基因的表达差异,筛选并研究与生殖激素合成相关的基因.[方法]在GEO数据库获得GSE83524芯片数据,通过在线软件GEO2R筛选牛优势卵泡中GCs和TCs之间的差异表达基因.使用DAVID软件对获得的差异表达基因进行GO功能富集分析;使用KOBAS软件进行KEGG信号通路分析,筛选出GCs和TCs之间参与生殖激素合成相关信号通路;使用String结合Cytoscape软件构建蛋白与蛋白之间的相互作用网络(PPI).以牛的优势卵泡为材料,采用Real-time PCR对筛选出的差异表达基因进行验证.[结果]经在线软件GEO2R分析,共获得247个差异表达基因,其中43个表达上调,204个表达下调;247个差异表达基因的GO功能分析结果共分为3大类41组,其中参与生物学过程(BP)的有22组,参与细胞组分(CC)的有12组,参与分子功能(MF)的有7组;KEGG信号通路分析共发现17条通路,其中腺苷酸环化酶3基因(ADCY3)、细胞色素P45017A1基因(CYP17A1)、腺苷酸环化酶8基因(ADCY8)、鸟嘌呤核苷酸结合蛋白基因(GNAS)、骨形态发生蛋白6基因(BMP6)5个差异表达基因参与了卵巢类固醇生成通路.经PPI网络互作分析,筛选出了前10位的Hub基因;Real-time PCR结果显示,CYP17A1、ADCY8在TCs中的表达量极显著高于GCs(P<0.01);ADCY3、BMP6在TCs中的表达量显著高于GCs(P<0.05),GNAS在GCs中的表达量极显著高于TCs(P<0.01),这5个基因在GCs和TCs中的表达趋势与GEO芯片数据结果一致.[结论]ADCY3、CYP17A1、ADCY8、GNAS、BMP6在GCs与TCs之间表达量存在显著差异,其可能在牛优势卵泡GCs和TCs中对生殖激素的合成及分泌产生了重要作用. 展开更多

关键词 牛 优势卵泡 差异表达基因 颗粒细胞 膜细胞 生殖激素

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鸡卵泡膜细胞中膜联蛋白A2互作细胞蛋白的筛选及其功能分析 被引量：1

8

作者 高洪波 王燕碧 +5 位作者 张福平 赵采芹 唐宏 周磊 韩一帆 段志强 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期210-218,共9页

【目的】从鸡卵泡膜细胞蛋白中筛选和鉴定与膜联蛋白A2(ANXA2)相互作用的细胞蛋白并进行功能分析,为深入研究ANXA2调控鸡卵泡发育的作用机制提供理论依据。【方法】制备开产后30周龄贵州黄鸡的卵泡膜细胞,提取卵泡膜总蛋白后利用His Pul... 【目的】从鸡卵泡膜细胞蛋白中筛选和鉴定与膜联蛋白A2(ANXA2)相互作用的细胞蛋白并进行功能分析,为深入研究ANXA2调控鸡卵泡发育的作用机制提供理论依据。【方法】制备开产后30周龄贵州黄鸡的卵泡膜细胞,提取卵泡膜总蛋白后利用His Pull-Down联合质谱技术(LC-MS/MS)从卵泡膜细胞中筛选出与鸡ANXA2互作的细胞蛋白,然后通过GO数据库和KEEG数据库分别进行GO功能富集分析及KEEG信号通路注释分析,并利用STRING Version 11.0绘制蛋白互作网络图。【结果】通过His Pull-Down联合LC-MS/MS共鉴定获得41个鸡ANXA2互作细胞蛋白,GO功能富集分析发现这些互作细胞蛋白在分子功能、生物学进程和细胞组成均发挥作用。其中,在分子功能方面主要涉及蛋白结合(占58.06%)、催化活性(占19.35%)、核糖体结构(占16.13%)及细胞骨架结构组成(占6.45%),在生物学进程方面主要参与细胞骨架(占19.35%)、刺激反应(占19.35%)、翻译(占16.13%)、代谢过程(占12.90%)、细胞迁移(占12.90%)、蛋白折叠(占9.68%)和蛋白运输(占9.68%),而细胞组分显示以定位于细胞膜的蛋白为主(占32.26%)。鸡ANXA2蛋白互作细胞蛋白参与的KEEG信号通路主要有应激反应、代谢、翻译、信号转导、免疫系统和蛋白定位等。鸡ANXA2互作细胞蛋白互作网络可分为3条,即CNN2-FN1-MYH9-MYH10-ACTN1-CSRP1、ANXA1-ANXA2-ENO1-PRDX4-GPI-ATP5B-PRDX3-HSPA8-TUBB2A和CCT7-CCT4-GNB2L1-ATP5A1-RPS3-RPS3A-RPL23A-RPL22-RPS7;互作细胞蛋白间存在复杂的互作关系,其中又以膜联蛋白A1(ANXA1)与烯醇化酶-1(ENO1)及ANXA2的互作关系最明显。【结论】鸡ANXA2互作细胞蛋白主要参与细胞骨架形成、应对刺激和翻译等生物学过程,涉及应激反应、代谢、翻译、信号转导、免疫及蛋白定位等信号通路。其中,PRDX3、PRDX4、MYH9和TCSC可能通过与ANXA2蛋白相互作用而参与鸡卵巢相关疾病的发生,而ANXA1与ANXA2相互作用可能� 展开更多

关键词 鸡 卵泡膜细胞 膜联蛋白A2(ANXA2) 互作细胞蛋白 卵泡发育

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不同浓度葡萄糖对蛋鸡卵泡膜细胞增殖、雌二醇水平及类固醇合成相关基因表达的影响 被引量：1

9

作者 季浩然 卢建 +2 位作者 张欣 杨海明 王志跃 《中国家禽》 北大核心 2022年第10期56-61,共6页

为研究不同浓度葡萄糖对蛋鸡卵泡膜细胞增殖、雌二醇水平及类固醇合成相关基因表达的影响,试验采集35周龄产蛋高峰期苏禽绿壳蛋鸡的小黄卵泡,通过分离、消化和过滤等得到原代卵泡膜细胞,待细胞长至培养皿70%~80%时,将含10%胎牛血清(FBS... 为研究不同浓度葡萄糖对蛋鸡卵泡膜细胞增殖、雌二醇水平及类固醇合成相关基因表达的影响,试验采集35周龄产蛋高峰期苏禽绿壳蛋鸡的小黄卵泡,通过分离、消化和过滤等得到原代卵泡膜细胞,待细胞长至培养皿70%~80%时,将含10%胎牛血清(FBS)培养基更换为含0.5%FBS培养基培养24 h后,随机分成6组,每组3个重复,对照组不添加葡萄糖,试验组分别添加0.5、1.5、3.0、4.5、9.0 mg/mL葡萄糖,继续培养48 h。结果显示:3.0 mg/mL葡萄糖处理组细胞活力显著高于对照组、0.5、4.5和9.0 mg/mL处理组(P<0.05),雌二醇含量显著高于对照组、0.5和9.0 mg/mL葡萄糖处理组(P<0.05),细胞类固醇合成急性调节蛋白(StAR)和细胞色素P450单加氧酶11A1(CYP11A1)的mRNA相对表达量显著低于对照组和9.0 mg/mL葡萄糖处理组(P<0.05);0.5 mg/mL葡萄糖处理组细胞StAR mRNA相对表达量显著低于对照组(P<0.05),CYP11A1相对表达量显著低于对照组、1.5和9.0 mg/mL组(P<0.05)。研究提示:3.0 mg/mL葡萄糖培养蛋鸡卵泡膜细胞效果最优,可提高细胞活力,增加培养液中雌二醇含量。 展开更多

关键词 葡萄糖 浓度 蛋鸡 膜细胞 增殖 雌二醇

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不同浓度ox-LDL对大鼠原代卵泡膜细胞增殖及激素合成相关基因LXR-α和StAR表达的影响 被引量：2

10

作者 陈莹 张益 李聪 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期318-324,共7页

目的·初步探讨ox-LDL对大鼠卵泡膜细胞增殖和雄激素合成相关基因LXR-α和St AR表达的影响。方法·免疫组化检测大鼠卵巢组织中LXR-α的表达。体外分离培养原代大鼠卵泡膜细胞,分别用25、50、100、150、200、300和400 mg/L的ox-... 目的·初步探讨ox-LDL对大鼠卵泡膜细胞增殖和雄激素合成相关基因LXR-α和St AR表达的影响。方法·免疫组化检测大鼠卵巢组织中LXR-α的表达。体外分离培养原代大鼠卵泡膜细胞,分别用25、50、100、150、200、300和400 mg/L的ox-LDL处理,用real-time PCR检测LXR-αm RNA的变化,用MTT检测细胞活力,用Western blotting检测LXR-α和St AR蛋白的表达。结果·ox-LDL对大鼠卵泡膜细胞增殖的影响和对LXR-α和St AR表达的调控呈现浓度依赖性变化。ox-LDL刺激24 h后,低浓度的ox-LDL(25~150 mg/L)可诱导卵泡膜细胞增殖,以100 mg/L的ox-LDL对卵泡膜细胞增殖的促进作用显著。而当ox-LDL浓度继续上升,细胞存活率下降,以400 mg/L的ox-LDL对卵泡膜细胞增殖的抑制作用显著。低浓度ox-LDL(25~150 mg/L)刺激,导致LXR-αm RNA的表达升高,其中150 mg/L ox-LDL对LXR-αm RNA的表达量影响显著。高浓度ox-LDL抑制LXR-αm RNA的表达,其中400 mg/L的ox-LDL对LXR-αm RNA的表达量影响显著。150 mg/L ox-LDL促进大鼠卵泡膜细胞LXR-α和St AR蛋白的表达上升,但150 mg/L ox-LDL对St AR蛋白表达的促进作用,与对照组相比,差异没有统计学意义;而400 mg/L ox-LDL能显著抑制大鼠卵泡膜细胞LXR-α和St AR蛋白的表达。结论·低浓度的ox-LDL可诱导卵泡膜细胞增殖,促进LXR-α和St AR的表达,而高浓度oxLDL降低细胞活力,抑制LXR-α和St AR的表达。 展开更多

关键词 卵泡膜细胞 氧化型低密度脂蛋白 增殖 肝X受体 类固醇激素合成急性调节蛋白

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花生四烯酸对小鼠卵泡衰老的影响 被引量：2

11

作者 张怡 李晓曦 +3 位作者 林艳 毕欣耘 于鹏丽 赵子建 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1202-1205,共4页

目的:研究花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对小鼠卵泡发育的影响,探讨AA与卵巢早衰的关系。方法:10%AA饲料喂食4周龄ICR雌鼠,4个月后观察小鼠子宫卵巢重量、卵巢组织脂肪酸分析、卵巢组织学改变。结果:10%AA组与对照组相比子宫卵巢体... 目的:研究花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对小鼠卵泡发育的影响,探讨AA与卵巢早衰的关系。方法:10%AA饲料喂食4周龄ICR雌鼠,4个月后观察小鼠子宫卵巢重量、卵巢组织脂肪酸分析、卵巢组织学改变。结果:10%AA组与对照组相比子宫卵巢体重下降;脂肪酸分析结果显示10%AA组卵巢n-6/n-3不饱和脂肪酸比值增大;光镜下,10%AA组可见卵巢退行性黄体增多、间质纤维化、卵巢闭锁卵泡所占比例增加。结论:喂食10%AA饲料可引起小鼠卵巢衰老。 展开更多

关键词 多不饱和脂肪酸 卵巢早衰 颗粒细胞 卵泡膜细胞

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膜细胞对化疗损伤性颗粒细胞的影响及左归丸含药血清干预作用

12

作者 孙晓峰 黄欣怡 +4 位作者 曾贵荣 龚力民 乔江 阳松威 周琳 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第2期16-21,共6页

目的探讨膜细胞对化疗损伤性颗粒细胞的影响以及左归丸含药血清的干预作用。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,分8组,分别是(1)空白对照组;(2)共培养组;(3)ZGW血清组;(4)ZGW血清+共培养组;(5)模型组;(6)模型+共培养... 目的探讨膜细胞对化疗损伤性颗粒细胞的影响以及左归丸含药血清的干预作用。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,分8组,分别是(1)空白对照组;(2)共培养组;(3)ZGW血清组;(4)ZGW血清+共培养组;(5)模型组;(6)模型+共培养组;(7)模型+ZGW血清组;(8)模型+ZGW血清+共培养组。实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测Bax、Caspase-3、Beclin-1、p62、LC3B在转录水平和翻译水平上的表达。结果模型组的Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase-3基因在转录水平及翻译水平上均有高表达,加入10%左归丸含药血清处理或与膜细胞共培养可下调上述基因的表达;p62基因的表达较对照组降低,加入10%左归丸含药血清处理或与膜细胞共培养可上调模型组p62基因表达。当实验组与膜细胞共培养时加入10%左归丸含药血清后,5种基因表达的变化程度更明显。结论膜细胞能缓解体外颗粒细胞的化疗性损伤,且与左归丸含药血清有协同作用,与抑制颗粒细胞自噬和减少其凋亡有关。 展开更多

关键词 左归丸 化疗损伤 颗粒细胞 膜细胞 自噬 凋亡

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牛优势卵泡膜细胞黄体化相关基因的筛选

13

作者 孟金柱 伍春亚 +3 位作者 潘春威 安清明 吴震洋 赵园园 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2022年第3期1-9,共9页

【目的】探究牛卵巢小黄体细胞(SLCs)和膜细胞(TCs)中的差异表达基因,进而筛选与TCs黄体化密切相关的基因,为深入研究SLCs、TCs特异性及TCs向SLCs分化的机制提供参考。【方法】利用R软件limma包中的DESeq2,筛选GEO芯片数据库GSE83524数... 【目的】探究牛卵巢小黄体细胞(SLCs)和膜细胞(TCs)中的差异表达基因,进而筛选与TCs黄体化密切相关的基因,为深入研究SLCs、TCs特异性及TCs向SLCs分化的机制提供参考。【方法】利用R软件limma包中的DESeq2,筛选GEO芯片数据库GSE83524数据集TCs和SLCs中的差异表达基因,再用goseq软件对筛选出的差异表达基因进行GO功能富集分析,用kobas软件进行KEGG信号通路分析,使用String结合Cytoscape软件进行PPI网络互作分析。采集思南黄牛颗粒细胞(GCs)和TCs,以RPLP0作为内参基因,用荧光定量PCR法对筛选出的与TCs增殖及黄体化相关的基因进行验证。【结果】共筛选获得237个差异表达基因,其中表达上调的基因115个,表达下调的基因122个。GO功能分析结果显示,参与生物学过程的有147个基因,占差异表达基因总数的53.6%,分别富集于30个组;参与细胞组分的有125个基因,占差异表达基因总数的21.4%,分别富集于12个组;参与分子功能的有98个基因,占差异表达基因总数的25.0%,分别富集于14个组。KEGG分析共发现17条通路,其中可能与卵泡内膜细胞黄体化相关的通路为FSHR、PLA2G4A、CYP19A1、CYP17A1等4个基因参与的卵巢类固醇生成通路。经过PPI网络互作分析,筛选出了前10位的hub基因。荧光定量PCR分析结果显示,FSHR、PLA2G4A、CYP19A1、CYP17A1、BUB1B和KIF20A在SLCs和TCs中的转录水平与GEO芯片数据结果一致,表现为FSHR、CYP19A1和CYP17A1在TCs中的表达量极显著高于其在SLCs中的表达量(P<0.01),PLA2G4A、BUB1B和KIF20A在TCs中的表达量亦显著高于其在SLCs中的表达量(P<0.05)。【结论】差异表达基因FSHR、PLA2G4A、CYP19A1、CYP17A1、BUB1B和KIF20A在牛优势卵泡TCs增殖分化形成黄体的过程中发挥关键作用。 展开更多

关键词 牛 差异表达基因 膜细胞 小黄体细胞 黄体化

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低氧对水牛卵泡内膜细胞雄激素合成能力的影响

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作者 张俊 陈梦佳 +5 位作者 闫茜 陈莫斯楠 李政达 卢嘉卡 石德顺 陆凤花 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期349-354,共6页

本研究采用低氧(5%O_(2))条件培养水牛内膜细胞,探讨低氧对水牛内膜细胞雄激素合成的影响。结果显示,低氧能显著提高水牛内膜细胞雄激素合成相关基因(CYP11A1、CYP17A1和3β-HSD)表达和睾酮分泌水平(P<0.05);低氧能显著增强水牛内膜... 本研究采用低氧(5%O_(2))条件培养水牛内膜细胞,探讨低氧对水牛内膜细胞雄激素合成的影响。结果显示,低氧能显著提高水牛内膜细胞雄激素合成相关基因(CYP11A1、CYP17A1和3β-HSD)表达和睾酮分泌水平(P<0.05);低氧能显著增强水牛内膜细胞对促黄体素(LH)的敏感性(P<0.05)。结果表明,低氧(5%O_(2))通过增强水牛内膜细胞对LH的敏感性进而提高水牛内膜细胞雄激素的合成能力。本研究为进一步探讨水牛卵泡发育类固醇激素分泌机制提供一定理论依据。 展开更多

关键词 低氧 水牛 内膜细胞 雄激素合成

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TNF-α对卵泡内膜细胞睾酮分泌及细胞增殖的影响 被引量：1

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作者 吴海明 《吉林医学》 CAS 2015年第4期605-606,共2页

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对于卵泡内膜细胞睾酮分泌以及细胞增殖的影响情况。方法:体外培养一定量猪卵泡内膜细胞,与其培养液内加入一定剂量TNF-α,包括三个层次,采用流式细胞仪及CFDA SE细胞增殖检测试剂盒检验TNF-α对于猪... 目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对于卵泡内膜细胞睾酮分泌以及细胞增殖的影响情况。方法:体外培养一定量猪卵泡内膜细胞,与其培养液内加入一定剂量TNF-α,包括三个层次,采用流式细胞仪及CFDA SE细胞增殖检测试剂盒检验TNF-α对于猪卵泡内膜细胞的影响,并采用RIA放射免疫法测定其对睾酮浓度的影响。结果:于培养液中加入TNF-α后,分别就不同时间进行检测,且与对照组对比,两组睾酮水平未见显著差异,然而试验组卵泡内膜细胞平均荧光强度显著低于对照组,差异有统计意义(P<0.05)。结论:TNF-α可明显促进猪卵泡内膜细胞增殖,但对睾酮分泌不具有明显促进作用。 展开更多

关键词 卵泡内膜细胞 肿瘤坏死因子 多囊卵巢综合症

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柠檬酸对小鼠卵泡组织形态的影响

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作者 邓雯 吕琼霞 +2 位作者 刘玉梅 陈晓光 马彦博 《家畜生态学报》 北大核心 2018年第2期39-44,共6页

通过观察小鼠卵泡形态结构的变化,研究柠檬酸对雌性小鼠卵泡发育的影响。将60只20~22g昆明小鼠随机分为生理盐水对照组和柠檬酸低、中、高剂量处理组,各组小鼠每天每只依次分别腹腔注射0.2mL的0.9%生理盐水、7.5mg/mL、15mg/mL及30mg/m... 通过观察小鼠卵泡形态结构的变化,研究柠檬酸对雌性小鼠卵泡发育的影响。将60只20~22g昆明小鼠随机分为生理盐水对照组和柠檬酸低、中、高剂量处理组,各组小鼠每天每只依次分别腹腔注射0.2mL的0.9%生理盐水、7.5mg/mL、15mg/mL及30mg/mL的柠檬酸。第21天在乙醚麻醉条件下,每组随机取10只小鼠断颈处死,摘取卵巢浸泡于4%的甲醛溶液中固定24h,制作常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜进行组织切片观察。结果表明:对照组小鼠各级卵泡的形态正常,7.5mg/mL、15mg/mL柠檬酸处理组可观察到正常形态的原始卵泡、初级卵泡,30 mg/mL柠檬酸处理组因原始卵泡、初级卵泡退化,使原始卵泡、初级卵泡的数量显著减少;15mg/mL柠檬酸处理组主要使次级卵泡发育受阻,某些小的有腔卵泡部分颗粒细胞凋亡,卵泡膜细胞分化障碍,大的有腔卵泡的卵母细胞和卵泡内膜细胞退化,以及卵泡膜层血管数量减少或消失;30mg/mL柠檬酸处理组卵母细胞发育周期阻滞或退化、消失,导致原始卵泡和初级卵泡数量显著减少,以及次级卵泡、有腔卵泡的闭锁。结果提示:低、中剂量的柠檬酸对原始卵泡、初级卵泡的发育无影响;中剂量柠檬酸使次级卵泡发育受阻,有腔卵泡退化;高剂量柠檬酸对各级卵泡的发育均有显著影响,造成卵泡的闭锁。 展开更多

关键词 柠檬酸 小鼠 卵泡 颗粒细胞 卵泡膜

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晚期氧化蛋白产物在SD大鼠不同发育阶段卵泡中的表达

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作者 宋亚丽 刘婧 +7 位作者 陈东红 罗琛 华芮 邱卓琳 杨晓萍 李丽娜 全松 曹维 《妇产与遗传（电子版）》 2015年第4期30-33,共4页

目的探索晚期氧化蛋白产物Advanced oxidation protein products(AOPPs)在Sprague-Dawley(SD)大鼠不同发育阶段卵泡中的表达情况。方法选取8周左右重约200 g的SD雌性大鼠,剪取双侧卵巢,以小鼠抗AOPPs单抗(克隆号:3F2)及二抗进行免疫组... 目的探索晚期氧化蛋白产物Advanced oxidation protein products(AOPPs)在Sprague-Dawley(SD)大鼠不同发育阶段卵泡中的表达情况。方法选取8周左右重约200 g的SD雌性大鼠,剪取双侧卵巢,以小鼠抗AOPPs单抗(克隆号:3F2)及二抗进行免疫组化染色,显微镜下观察各个发育阶段的卵泡中的AOPPs表达情况。结果 AOPPs在SD大鼠不同发育阶段的卵泡中均有表达,其表达部位主要在卵泡的颗粒细胞和膜细胞胞浆;排卵后的黄体中AOPPs呈阳性表达,尤其在膜黄体细胞胞浆中呈颗粒状强阳性表达;闭锁卵泡中AOPPs在紊乱的颗粒细胞层及固缩的卵母细胞中均呈阳性表达。结论 SD大鼠不同发育阶段的卵泡中均有AOPPs表达,一定水平的AOPPs可能与卵巢颗粒细胞功能及卵母细胞发育密切相关。 展开更多

关键词 晚期氧化蛋白产物 卵泡 颗粒细胞 膜细胞 卵母细胞

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M1型巨噬细胞源外泌体增强卵泡膜细胞的活力

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作者 高琳芝 谢云 +7 位作者 周怡 魏莉娜 张弛 吕林艳 姚嘉慧 梁晓燕 刘贵华 杨星 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期906-912,共7页

目的:探讨M1型巨噬细胞源外泌体对卵泡膜细胞活力的影响及其作用机制。方法:采用脂多糖(LPS)处理Raw264.7小鼠巨噬细胞,构建M1型巨噬细胞模型及巨噬细胞-卵泡膜细胞共培养体系。超速离心法分离巨噬细胞分泌的外泌体;通过电镜、Western b... 目的:探讨M1型巨噬细胞源外泌体对卵泡膜细胞活力的影响及其作用机制。方法:采用脂多糖(LPS)处理Raw264.7小鼠巨噬细胞,构建M1型巨噬细胞模型及巨噬细胞-卵泡膜细胞共培养体系。超速离心法分离巨噬细胞分泌的外泌体;通过电镜、Western blot和纳米流式检测仪鉴定外泌体。体外分离培养小鼠卵泡膜细胞,与PKH67荧光标记的外泌体共孵育,观察卵泡膜细胞摄取外泌体的情况。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术分析细胞周期分布,q PCR及Western blot检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1B(CDKN1B)的表达。结果:在巨噬细胞-卵泡膜细胞共培养体系中,LPS诱导的M1型巨噬细胞通过外泌体增强卵泡膜细胞活力。电镜、Western blot及纳米流式检测结果显示,巨噬细胞源外泌体被成功分离。PKH67标记的外泌体与卵泡膜细胞共孵育实验证实卵泡膜细胞能摄取大量巨噬细胞源外泌体。这些外泌体可增强卵泡膜细胞的活力,使卵泡膜细胞G0/G1期比例下降,S期比例升高,且卵泡膜细胞CDKN1B的m RNA及蛋白相对表达量均明显低于对照组。结论:卵泡膜细胞能摄取巨噬细胞分泌的外泌体。M1型巨噬细胞源外泌体通过抑制CDKN1B的表达而增强卵泡膜细胞的活力。 展开更多

关键词 巨噬细胞 外泌体 卵泡膜细胞 细胞活力 多囊卵巢综合征

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催乳素调节鸡卵泡膜细胞功能的机理 被引量：15

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作者 李莹辉 汪琳仙 杨传任 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期77-80,共4页

在明确催乳素（ＰＲＬ）对鸡卵泡膜细胞功能调节作用的基础上，探讨了酪氨酸激酶活性，ｃＡＭＰ系统和钙离子在ＰＲＬ调节膜细胞功能中的作用。结果表明，酪氨酸激酶抑制剂Ｇｅｎｉｅｓｔｉｎ能部分阻断ＰＲＬ对ＦＳＨ促膜细胞雌二醇（... 在明确催乳素（ＰＲＬ）对鸡卵泡膜细胞功能调节作用的基础上，探讨了酪氨酸激酶活性，ｃＡＭＰ系统和钙离子在ＰＲＬ调节膜细胞功能中的作用。结果表明，酪氨酸激酶抑制剂Ｇｅｎｉｅｓｔｉｎ能部分阻断ＰＲＬ对ＦＳＨ促膜细胞雌二醇（Ｅ２）合成的抑制作用，磷酸二酯酶抑制剂ＭＩＸ亦能部分消除ＰＲＬ对ＦＳＨ促Ｅ２合成的抑制作用，而细胞外钙离子浓度和电压依赖式钙通道在ＰＲＬ调节的膜细胞功能中无明显作用。 展开更多

关键词 鸡 卵泡膜细胞 催乳素 酪氨酸激酶 磷酸二酯酶

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猪卵巢周期中卵泡刺激素和黄体生成素受体mRNA的定位及表达 被引量：11

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作者 刘嘉茵 Aron.,BJ 《生殖医学杂志》 CAS 1998年第2期92-97,共6页

以周期化的猪卵巢为标本，进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ和原位杂交，观察周期第０、４、７、１２和１６天猪卵泡刺激素（ＦＳＨ）和黄体生成素（ＬＨ）受体ｍＲＮＡ的分布和表达。结果：ＦＳＨ受体ｍＲＮＡ的转录模式在周期第０、４、７、１２... 以周期化的猪卵巢为标本，进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ和原位杂交，观察周期第０、４、７、１２和１６天猪卵泡刺激素（ＦＳＨ）和黄体生成素（ＬＨ）受体ｍＲＮＡ的分布和表达。结果：ＦＳＨ受体ｍＲＮＡ的转录模式在周期第０、４、７、１２和１６天中均为３个片段（４．２、３．５和２．４ｋｂ）；ＬＨ受体ｍＲＮＡ表达多个共同片段（１０．０、６．８、５．９、４．７、３．８、２．５和１．５ｋｂ）。ＦＳＨ受体ｍＲＮＡ的表达在未成熟和成熟卵泡仅定位于卵巢颗粒细胞和卵丘细胞；促性腺激素峰值期，在未成熟卵泡颗粒细胞中的表达强于成熟卵泡；在卵泡退化过程中，闭锁卵泡中呈不同程度的减少而在黄体细胞则无表达。ＬＨ受体ｍＲＮＡ在成熟卵泡的颗粒细胞和卵泡膜细胞中均有表达，不成熟卵泡仅在卵泡膜细胞中表达，退化的卵泡表达逐渐减少；在峰值后的第４和第７天的少许黄体细胞中可见，在第１２天达高峰，继而逐渐消失。表明在猪动情周期的不同阶段，ＦＳＨ和ＬＨ受体ｍＲＮＡ在卵泡细胞中的表达呈多样性和细胞特异性。成熟黄体细胞仅表达ＬＨ受体ｍＲＮＡ而不表达ＦＳＨ受体ｍＲＮＡ。 展开更多

关键词 粒层细胞 卵泡膜细胞 卵泡 黄体 FSH LH mRNA

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