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穿膜肽Tat以脂筏介导的巨胞饮方式进入骨髓间充质干细胞 被引量:1
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作者 乔永萍 任磊 +2 位作者 王林 王祖勇 张其清 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期235-239,共5页
艾滋病病毒的一个富含精氨酸的Tat多肽具有穿膜转导蛋白功能并能介导多种外源性物质进入细胞甚至细胞核.本研究的目的是探讨Tat多肽进入骨髓间充质干细胞的机制.将FITC标记的Tat分别和Alexa Fluor 546-标记的转铁蛋白(笼形蛋白介导的受... 艾滋病病毒的一个富含精氨酸的Tat多肽具有穿膜转导蛋白功能并能介导多种外源性物质进入细胞甚至细胞核.本研究的目的是探讨Tat多肽进入骨髓间充质干细胞的机制.将FITC标记的Tat分别和Alexa Fluor 546-标记的转铁蛋白(笼形蛋白介导的受体内吞方式入胞)、Alexa Fluor 594-标记的霍乱毒素B(脂筏介导的巨胞饮内化方式入胞)同兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)共孵育.用激光共聚焦扫描显微镜可观察到在BMSCs中穿膜肽Tat和霍乱毒素B呈点状叠加而与转铁蛋白几乎无叠加,同时在细胞核部位观察到有绿色荧光的Tat,初步表明穿膜肽Tat以脂筏介导的内化方式进入BMSCs而非受体介导的内吞方式.另外,低温(4℃)、破坏ATP、β-环式糊精和诺考达唑内吞抑制剂的使用均可观察到BMSCs内吞Tat的量降低,也间接验证Tat以脂筏介导的内化方式进入BMSCs. 展开更多
关键词 tat多肽 骨髓间充质干细胞 穿膜机制
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水/油/水双乳化技术制备高效性神经生长因子
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作者 谷海刚 李晓滨 龙大宏 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第21期3929-3932,共4页
背景:神经生长因子是大分子蛋白类物质,很难透过血脑屏障,基因治疗可以有效地将神经营养因子投递到脑内。目的:探索制备高效性神经生长因子基因纳米粒子的方法。方法:利用水/油/水(W/O/W)双乳化技术制备神经生长因子基因纳米粒子,用壳... 背景:神经生长因子是大分子蛋白类物质,很难透过血脑屏障,基因治疗可以有效地将神经营养因子投递到脑内。目的:探索制备高效性神经生长因子基因纳米粒子的方法。方法:利用水/油/水(W/O/W)双乳化技术制备神经生长因子基因纳米粒子,用壳聚糖对其进行表面修饰,同时偶联Tat多肽。切断穹隆-海马伞诱使基底前脑胆碱能神经元溃变。16只SD雄性大鼠随机数字表均分成损伤组和基底前脑显微注射神经生长因子基因的纳米粒子组。结果与结论:制备的纳米粒子粒径分布为110~150nm。壳聚糖可明显提高其表面正电荷和包封率,但对其粒径大小影响不大。偶联Tat多肽则明显提高其转染效率。说明利用水/油/水技术可以成功制备神经生长因子基因纳米粒子。该粒子移植后对基底前脑有明显的保护作用。 展开更多
关键词 神经生长因子基因纳米粒子 聚乳酸-聚乳二醇酸 壳聚糖 tat多肽 转染效率
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穿膜肽TAT-PTD的固相合成及其与DNA相互作用的研究 被引量:1
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作者 管玉霞 罗泓 王锡平 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期94-98,共5页
通过N-芴甲氧羰基(N-fluorenylmethoxycarbonyl,Fmoc)作为α-氨基的保护基,以逐个延伸的固相合成法合成TAT-PTD多肽,运用高效液相色谱和质谱鉴定合成多肽的纯度和相对分子质量。通过紫外吸收光谱和琼脂糖凝胶电泳阻滞实验研究合成的TAT-... 通过N-芴甲氧羰基(N-fluorenylmethoxycarbonyl,Fmoc)作为α-氨基的保护基,以逐个延伸的固相合成法合成TAT-PTD多肽,运用高效液相色谱和质谱鉴定合成多肽的纯度和相对分子质量。通过紫外吸收光谱和琼脂糖凝胶电泳阻滞实验研究合成的TAT-PTD多肽与质粒DNA相互作用,实验表明TAT-PTD多肽与质粒DNA可以通过静电作用相互吸引、靠近并结合,于是为下一步小单孢菌基因工程的细胞转导提供了依据。 展开更多
关键词 小单孢菌 tat-PTD多肽 质粒DNA 琼脂糖凝胶阻滞电泳 紫外吸收光谱
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