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利用抑制消减杂交技术(SSH)研究与Ty21a免疫相关的基因 被引量:2
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作者 王华 高杰英 +1 位作者 周洁 李海民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期521-524,共4页
目的:利用抑制消减杂交技术(SSH)筛选与Ty21a免疫相关的新基因。方法:以Ty21a免疫小鼠的肠细胞为tester,以正常小鼠的肠细胞为diver,提取mRNA,反转录构建cDNA文库,利用SSH技术筛选Ty21a免疫相关的新基因。结果:通过SSH技术和cDNA微矩... 目的:利用抑制消减杂交技术(SSH)筛选与Ty21a免疫相关的新基因。方法:以Ty21a免疫小鼠的肠细胞为tester,以正常小鼠的肠细胞为diver,提取mRNA,反转录构建cDNA文库,利用SSH技术筛选Ty21a免疫相关的新基因。结果:通过SSH技术和cDNA微矩阵技术,发现了7条与GenBank中已公布的表达序列标签(expressed sequence tag,EST)片段没有明显同源性,可能为Ty21a免疫相关的新基因。其中3条正在用RACE-PCR法进行获得全长cDNA的工作。结论:SSH技术是一种高效的差异基因筛选方法,基因表达谱芯片技术是高通量进行基因表达模式研究的方法,Ty21a可诱导多种免疫相关新基因的表达。 展开更多
关键词 抑制消减杂交技术 研究 ty21A 免疫相关 cDNA微矩阵 肠细胞 分子免疫 细胞免疫
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Salmonella Typhi:from a Human Pathogen to a Vaccine Vector 被引量:4
2
作者 Victor Tunje Jeza 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2008年第2期91-97,共7页
Salmonella (S.) typhi is an important intracellular pathogen. Among the more than 2,300 closely-related Salmonella serovars bacteria recognized, S. typhi is the only one that is pathogenic exclusively for humans, in... Salmonella (S.) typhi is an important intracellular pathogen. Among the more than 2,300 closely-related Salmonella serovars bacteria recognized, S. typhi is the only one that is pathogenic exclusively for humans, in whom it causes typhoid or enteric fever. The pathogen has been around for many years and many studies have been done in an effort to combat it. Molecular and biologic features of S. typhi and host factors and immune responses involved in Salmonella invasion have been extensively studies. Vaccines that have been developed most notably are Vi polysaccharide and Ty21a. However, as the results show, there is still a long way to go. It is also shown that multi-drug resistance has occurred to the few available antibiotics. More and more studies have shown that Salmonella can be used as a vaccine vector carrying antigens of other pathogens. This has been promising in that the immune system can be elicited in response to both the Salmonella bacteria and the antigen of the pathogen in question. This review aims to highlight some of the milestones attained in the fight against the disease from the time S. typhi was seen as a pathogen causing typhoid fever to the use of Salmonella as a vaccine vector. Cellular & Molecular Immunology. 展开更多
关键词 Salmonella typhi vaccine vector tyPHOID Vi polysaccharide ty21A
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伤寒减毒活疫苗Ty21a免疫前后小鼠肠细胞差异表达的基因 被引量:3
3
作者 王华 高杰英 +1 位作者 周洁 李海民 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第1期9-11,15,共4页
以基因表达谱芯片对Ty2 1a免疫前后小鼠肠细胞 (包括肠粘膜上皮细胞和肠上皮间淋巴细胞 )基因表达的差异性进行研究比较。将 490条经抑制消减杂交法筛选出的与小鼠Ty2 1a免疫相关的cDNA制备成表达谱芯片 ;利用免疫前后小鼠肠细胞的mRNA... 以基因表达谱芯片对Ty2 1a免疫前后小鼠肠细胞 (包括肠粘膜上皮细胞和肠上皮间淋巴细胞 )基因表达的差异性进行研究比较。将 490条经抑制消减杂交法筛选出的与小鼠Ty2 1a免疫相关的cDNA制备成表达谱芯片 ;利用免疫前后小鼠肠细胞的mRNA通过逆转录方法 ,将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织的cDNA上 ,制备成cDNA探针 ,并与表达谱芯片进行杂交及扫描 ,单点重复 2次实验 ,通过计算机数据处理判定基因是否在上述两种细胞群中有表达差异。筛选出差异表达基因共 98条 ,其中 92条为表达上调基因 ,6条为表达降低基因。提示 ,基因表达谱芯片技术是高通量进行基因表达模式研究的方法 ,可同时定量研究大量的基因表达水平 ,从而鉴定可能参与免疫的基因。 展开更多
关键词 微矩阵基因芯片 基因表达谱 ty21A 肠细胞 免疫 伤寒减毒活疫苗
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伤寒减毒活疫苗Ty21a免疫后小鼠小肠微皱褶细胞数量变化的观测
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作者 陈洁 高杰英 +2 位作者 彭虹 舒翠莉 王华 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期102-103,106,共3页
本文拟建立一种分离滤泡相关上皮 (FAE )的稳定方法 ,并对微皱褶细胞 (M细胞 )的可诱导性作初步探讨。将BALB/c小鼠随机分为 2组 ,每组 11或 2 2只 ,以小鼠灌胃免疫为模型 ,采用Percoll非连续密度梯度离心法提取小鼠小肠Payer结中的FAE ... 本文拟建立一种分离滤泡相关上皮 (FAE )的稳定方法 ,并对微皱褶细胞 (M细胞 )的可诱导性作初步探讨。将BALB/c小鼠随机分为 2组 ,每组 11或 2 2只 ,以小鼠灌胃免疫为模型 ,采用Percoll非连续密度梯度离心法提取小鼠小肠Payer结中的FAE ,经荧光标记的凝集素 (UEA1 FITC )染色后用流式细胞仪检测 ,SAS统计软件分析。结果表明伤寒沙门菌Ty2 1a免疫组与PBS对照组之间 ,有极显著性差异 (P <0 0 1)。说明伤寒沙门菌Ty2 1a可诱导微皱褶细胞 (M细胞 ) 展开更多
关键词 伤寒减毒活疫苗 ty21A 小肠 微皱褶细胞 数量变化 流式细胞术
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伤寒疫苗的发展与现状 被引量:1
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作者 陶晶(编译) 何平(审校) 《国际生物制品学杂志》 CAS 2007年第4期159-162,共4页
伤寒因高度的传染性和沉重的疾病负担,构成较大的全球健康问题。执行适合的食品加工程序和建立安全的供水系统是有效预防伤寒的基石。然而,伤寒疫苗依然是有效预防伤寒的重要工具。现有两种批准的疫苗,具有很好耐受性和效力。其中Vi... 伤寒因高度的传染性和沉重的疾病负担,构成较大的全球健康问题。执行适合的食品加工程序和建立安全的供水系统是有效预防伤寒的基石。然而,伤寒疫苗依然是有效预防伤寒的重要工具。现有两种批准的疫苗,具有很好耐受性和效力。其中Vi多糖亚单位疫苗是肌肉或皮下注射接种,另一种减毒活疫苗则口服接种。本文就各种伤寒疫苗研制方法的优缺点及潜在的候选疫苗加以讨论。 展开更多
关键词 伤寒 疫苗 投药 口服 ty21A VI抗原
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口服Ty21a株伤寒活菌苗
6
作者 陈廷祚 《中国公共卫生学报》 1983年第1期48-55,共8页
一、导言自从上个世纪末英国 Wright、德国pfeiffer 和 Kolle 各自独立地创制伤寒菌苗以来,距今已八十余年(已知 pfefffer和 Kolle 首次试用于人体的时间为1896年,而 Wright 菌苗却无明确的记载,但据称约在1895年至1898年之间)。在此期间,
关键词 ty21A 差向异构酶 尿昔二磷酸 化学型 免疫原性 脑心浸液 突变株 菌细胞 毒力 指数生长期
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致敏的载体对表达幽门螺杆菌脲酶A和B的重组鼠伤寒杆菌Ty21a疫苗株免疫原性的影响
7
作者 MetzgerWG MasouriE +2 位作者 KronawitterM 黄孝天 刘晶星 《国外医学(预防.诊断.治疗用生物制品分册)》 2005年第4期182-183,共2页
幽门螺杆菌是引起世界50%人群慢性感染的病原菌,世界卫生组织将其确定为Ⅰ类致癌因子。迄今,仅少数临床研究在致力于寻找抗幽门螺杆菌的疫苗。口服重组沙门菌疫苗对大规模免疫接种预防各种传染病极有吸引力。因此,了解先存抗沙门菌... 幽门螺杆菌是引起世界50%人群慢性感染的病原菌,世界卫生组织将其确定为Ⅰ类致癌因子。迄今,仅少数临床研究在致力于寻找抗幽门螺杆菌的疫苗。口服重组沙门菌疫苗对大规模免疫接种预防各种传染病极有吸引力。因此,了解先存抗沙门菌免疫力对携带抗原的重组疫苗免疫原性的影响至关重要。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌脲酶 ty21A 鼠伤寒杆菌 重组 疫苗株 载体 致敏 世界卫生组织 抗幽门螺杆菌 疫苗免疫原性 慢性感染 致癌因子 临床研究 接种预防 病原菌 吸引力 传染病 菌疫苗 免疫力 沙门菌
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口服Ty21a株伤寒活菌苗(续四)
8
作者 陈廷祚 《中国公共卫生学报》 1983年第6期51-54,共4页
五、Ty21a 株伤寒杆菌作为其它致病性细菌抗原决定基的载体前已述及口服 Ty21a 株伤寒活菌苗是进行过严谨的科学实验和经受了多次效果考核的一种制品:由实验动物毒力试验和保护力试验、数以百计志愿者的人体实验,直至上万儿童的现场考核... 五、Ty21a 株伤寒杆菌作为其它致病性细菌抗原决定基的载体前已述及口服 Ty21a 株伤寒活菌苗是进行过严谨的科学实验和经受了多次效果考核的一种制品:由实验动物毒力试验和保护力试验、数以百计志愿者的人体实验,直至上万儿童的现场考核,证明这种新菌苗在安全性、稳定性、免疫效果及至促进病原体加速排出体外等等方面是有充分论据的。 展开更多
关键词 宋内氏痢疾杆菌 抗原决定基 ty21A 活菌苗 致病性细菌 效果考核 保护性抗原 脑心浸液培养基 毒力 免疫原性
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口服Ty21a株伤寒活菌苗(续一)
9
作者 陈廷祚 《中国公共卫生学报》 1983年第2期54-56,共3页
三、口服 TY21a 株伤寒活菌苗的人体实验在 Germanier 和 Fürer(1975)对 Ty21a 株伤寒杆菌的生物学特性、小白鼠感染模型和Ty21a 株活菌苗的免疫理论基础得到阐明以后不久。
关键词 活菌苗 ty21A 感染模型 人体实验 排菌 脑心浸液 阳转率 生物学特性 分离率 马里兰州
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口服Ty21a株伤寒活菌苗(续三)
10
作者 陈廷祚 《中国公共卫生学报》 1983年第5期54-58,共5页
五伤寒症流行的控制——口服伤寒菌苗发展史的简要回顾在目前,伤寒症在某些国家,尤其在不发达国家,仍然较为盛行,甚至在欧洲,如意大利、葡萄牙、奥地利、南斯拉夫、阿尔巴尼亚等(Dick.1978)至今尚未达到基本控制的程度。另一方面,在北... 五伤寒症流行的控制——口服伤寒菌苗发展史的简要回顾在目前,伤寒症在某些国家,尤其在不发达国家,仍然较为盛行,甚至在欧洲,如意大利、葡萄牙、奥地利、南斯拉夫、阿尔巴尼亚等(Dick.1978)至今尚未达到基本控制的程度。另一方面,在北欧诸国,伤寒症的发病率,历来就很低(不及1/100,000)。英美两国近廿年来。 展开更多
关键词 伤寒菌苗 活菌苗 ty21A 地方流行 血清凝集素 五伤 气雾免疫 血清型 接种法 局部免疫
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口服Ty21a株伤寒活菌苗(续二)
11
作者 陈廷祚 《中国公共卫生学报》 1983年第3期54-58,共5页
四、口服 Ty21a 株伤寒活菌苗效果的现场考核在获得 Ty21a 株伤寒活菌苗的人体实验数据后,Germanier 就着手从事现场效果考核所需用的活菌苗的生产。Germanier 对生产用 TY21a 株伤寒杆菌提出了如下的规定和要求(Wahdan 等,1980):Ty21a
关键词 活菌苗 ty21A 种子批 效果考核 安慰剂 血液培养 脑心浸液 儿童数 人体实验 现场考核
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WHO关于伤寒菌苗的建议
12
作者 龚震宇 杨小平 《疾病监测》 CAS 2008年第7期461-462,共2页
大规模临床试验显示,2种新的伤寒菌苗——活的可口服的Ty21a和可注射的多糖Vi,是安全有效的,适用于年龄〉2岁儿童。单剂量注射Vi菌苗,可提供70%的保护作用,这种保护作用至少可持续3年。减毒活菌苗Ty21a可获得胶囊和悬浮液体,1天... 大规模临床试验显示,2种新的伤寒菌苗——活的可口服的Ty21a和可注射的多糖Vi,是安全有效的,适用于年龄〉2岁儿童。单剂量注射Vi菌苗,可提供70%的保护作用,这种保护作用至少可持续3年。减毒活菌苗Ty21a可获得胶囊和悬浮液体,1天内可口服给药1剂量。液体配方制品可用于年龄〉2岁儿童,胶囊制品可用于5岁儿童。液体Ty21a菌苗的程序,推荐为3-4剂量,可提供抗伤寒防护作用为53%。78%。给胶囊Ty21a菌苗4剂量的程序可达到类似水平的防护作用。Vi多糖和Ty21a菌苗是否需要复种,现未规定, 展开更多
关键词 伤寒菌苗 WHO ty21A 大规模临床试验 Vi菌苗 保护作用 口服给药 防护作用
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人伤寒沙门菌Ty21a菌蜕的制备 被引量:4
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作者 温晶 寇志华 +6 位作者 于虹 吕兴茹 王欣 郭彦 俞建萍 赵光宇 周育森 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期479-483,共5页
目的探讨利用噬菌体PhiX174 E基因制备人伤寒沙门菌Ty21a菌蜕的可行性以及适当制备条件。方法将PhiX174 E基因克隆至温控表达系统,筛选获得裂解效率较高的质粒pMBE,通过优化转化方法将pMBE导入Ty21a,利用温控表达系统进行Ty21a菌蜕制备... 目的探讨利用噬菌体PhiX174 E基因制备人伤寒沙门菌Ty21a菌蜕的可行性以及适当制备条件。方法将PhiX174 E基因克隆至温控表达系统,筛选获得裂解效率较高的质粒pMBE,通过优化转化方法将pMBE导入Ty21a,利用温控表达系统进行Ty21a菌蜕制备。菌落计数计算菌蜕裂解效率,并通过扫描电镜和透射电镜观察其形态结构。结果裂解质粒pMBE介导大肠杆菌DH5α的裂解效率达99.99%;通过电击转化方法获得重组Ty21a(pMBE),利用温控表达系统成功制备Ty21a菌蜕,裂解效率达96.77%。电镜观察菌蜕结构完整并呈空泡状结构,并能看到溶菌孔道。结论 PhiX174 E基因表达可实现人伤寒沙门菌Ty21a裂解形成Ty21a菌蜕,为其作为疫苗和药物递送载体的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 ty21a菌 细菌菌蜕 电击转化 噬菌体PhiX174 E基因
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伤寒Ty21a-CpG佐剂疫苗诱导的体液免疫应答研究 被引量:2
14
作者 汤贤英 孙万邦 +2 位作者 杜联峰 罗军敏 宋明英 《遵义医学院学报》 2005年第3期219-221,共3页
目的探讨以CpG-ODN作为佐剂,对伤寒Ty21a疫苗诱导的特异性抗体应答及B细胞增殖的影响。方法分别用含CpG-ODN10μg、30μg、50μg的伤寒Ty21a疫苗于第0、14、28天灌胃免疫NLH小鼠,末次免疫后7d,分别采集各组动物血清及脾淋巴细胞。用凝... 目的探讨以CpG-ODN作为佐剂,对伤寒Ty21a疫苗诱导的特异性抗体应答及B细胞增殖的影响。方法分别用含CpG-ODN10μg、30μg、50μg的伤寒Ty21a疫苗于第0、14、28天灌胃免疫NLH小鼠,末次免疫后7d,分别采集各组动物血清及脾淋巴细胞。用凝集反应检测伤寒抗体效价,MTT法检测B淋巴细胞的增殖能力。结果CpG-ODN30μg组伤寒抗体效价及B细胞的增殖活性明显高于另外两个实验组和阳性对照组。结论CpG-ODN可增强伤寒Ty21a疫苗诱导的特异性抗体应答及B细胞增殖。 展开更多
关键词 CpG—ODN 伤寒ty21a 伤寒抗体 体液免疫 B细胞增殖转化
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新基因TIG-310的原核表达、细胞和亚细胞定位及其在Ty21a免疫中的表达变化研究
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作者 易绍琼 王岚 +2 位作者 王华 彭虹 高杰英 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2003年第2期99-102,共4页
目的 :研究Ty2 1a免疫相关新基因 (Ty2 1aimmunization_associatedgene ,TIG_310 )的原核表达、细胞和亚细胞定位及其在Ty2 1a免疫中的变化规律。方法 :采用PCR技术 ,扩增TIG_310可能的编码区 ,将其克隆至pQE30载体 ,在M15菌株中进行诱... 目的 :研究Ty2 1a免疫相关新基因 (Ty2 1aimmunization_associatedgene ,TIG_310 )的原核表达、细胞和亚细胞定位及其在Ty2 1a免疫中的变化规律。方法 :采用PCR技术 ,扩增TIG_310可能的编码区 ,将其克隆至pQE30载体 ,在M15菌株中进行诱导表达 ;采用原位杂交技术对TIG_310基因的表达产物在肠黏膜组织进行细胞定位 ;将其亚克隆至绿色荧光蛋白表达载体pEGFP_N1,通过电击转染导入L细胞 ,确定其亚细胞定位 ;通过RT_PCR研究其在Ty2 1a免疫中的变化规律。结果与结论 :TIG_310的编码区在原核表达系统中获得包涵体表达 ;原位杂交结果显示该基因表达在肠黏膜的上皮细胞中 ;与绿色荧光蛋白融合表达的实验结果表明 ,该蛋白定位于整个细胞内。该基因在正常的BALB/c小鼠的胃肠黏膜高表达 ,在Ty2 1a第一次灌胃免疫后表达量显著增高 ,随着免疫次数的增加 。 展开更多
关键词 黏膜免疫系统 ty21α疫苗 TIG-310基因 基因表达 细胞定位 亚细胞定位
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CpG-ODN对伤寒Ty21a疫苗诱导的细胞免疫应答的作用
16
作者 汤贤英 孙万邦 +2 位作者 罗军敏 宋明英 杜联峰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期162-164,共3页
目的探讨CpG-ODN对伤寒Ty2la疫苗诱导的细胞免疫应答的作用。方法分别用含10、30及50μgCpG-ODN的伤寒Ty21a疫苗免疫小鼠,各剂量组分别于第0、14和28d灌胃免疫3次,末次免疫后1周,采集小鼠脾细胞。流式细胞仪检测脾细胞MHC-Ⅱ类分子和CD4... 目的探讨CpG-ODN对伤寒Ty2la疫苗诱导的细胞免疫应答的作用。方法分别用含10、30及50μgCpG-ODN的伤寒Ty21a疫苗免疫小鼠,各剂量组分别于第0、14和28d灌胃免疫3次,末次免疫后1周,采集小鼠脾细胞。流式细胞仪检测脾细胞MHC-Ⅱ类分子和CD40分子的表达;培养脾细胞,用ELISA法检测脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-10的水平。结果不同剂量CpG-ODN的疫苗免疫组脾细胞CD40和MHC-Ⅱ类分子的表达水平均高于阳性对照组,且随着CpG-ODN剂量的增加,表达增强。加入不同剂量CpG-ODN的疫苗免疫组脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-10的水平均升高,且IL-10随着IFN-γ分泌水平的增加而降低。结论CpG-ODN可提高伤寒Ty21a疫苗诱导的Th1型免疫应答水平。 展开更多
关键词 CpG—ODN 佐剂 伤寒ty21a疫苗 细胞免疫应答
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伤寒Ty21a-CpG佐剂减毒活疫苗诱导抗体应答的研究
17
作者 杜联峰 孙万邦 +2 位作者 汤贤英 宋明英 罗军敏 《遵义医学院学报》 2005年第4期319-320,323,共3页
目的探讨人工合成的CpG-ODN作为佐剂对伤寒Ty21a减毒活疫苗诱导小鼠产生抗体的影响。方法将不同剂量的人工合成的含CpG ODN的硫代磷酸寡核苷酸作为佐剂与伤寒Ty21a减毒活疫苗混合,以小鼠作为免疫动物进行免疫接种,采用试管凝集法检测免... 目的探讨人工合成的CpG-ODN作为佐剂对伤寒Ty21a减毒活疫苗诱导小鼠产生抗体的影响。方法将不同剂量的人工合成的含CpG ODN的硫代磷酸寡核苷酸作为佐剂与伤寒Ty21a减毒活疫苗混合,以小鼠作为免疫动物进行免疫接种,采用试管凝集法检测免疫小鼠的血清特异性抗体滴度。结果CpG-ODN30μg佐剂组与不用佐剂的Ty21a减毒活疫苗相比较,应用CpG-ODN组小鼠产生更强的抗体应答,抗体几何均数滴度相比有明显的差异。结论CpG-ODN作为佐剂可促进伤寒Ty21a减毒活疫苗诱导昆明小鼠产生特异性免疫应答。 展开更多
关键词 CPG ODN 伤寒ty21a减毒疫苗 体液免疫应答
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WHO关于伤寒疫苗的意见书
18
作者 王真行(译) 史久华(审校) 《国际生物制品学杂志》 CAS 2009年第4期214-217,共4页
此文介绍目前国际上使用的两种安全有效的伤寒疫苗以及WHO对伤寒疫苗的意见。
关键词 伤寒 伤寒副伤寒菌苗 世界卫生组织 VI多糖疫苗 ty21a疫苗
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减毒沙门氏菌为载体在HepG-2细胞中表达EGFP基因
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作者 刘立明 《中国畜牧兽医文摘》 2013年第10期44-45,共2页
将真核表达质粒PVAX-EGFP,高压电转化入减毒沙门氏菌(Ty21)中,并直接转染HepG-2细胞,胰酶消化收集细胞,SDS-PAGE和western blot可检测到ku左右的蛋白条带。结果表明减毒沙门氏菌Ty21可做为外源基因载体递呈给HepG-2细胞并进行表达。
关键词 减毒沙门氏菌ty21 EGFP HEPG-2细胞
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伤寒活疫苗Ty21a免疫相关新基因的克隆及其组织分布
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作者 易绍琼 高杰英 +1 位作者 王岚 王华 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期295-295,共1页
关键词 伤寒活疫苗 ty21A 免疫相关新基因 克隆 组织分布
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