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先天性巨结肠患儿切除肠管肠黏膜ENS干细胞的初步鉴定 被引量:5
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作者 张建军 郑百俊 +3 位作者 高亚 张宏伟 刘丰丽 宋睿 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2011年第8期568-572,共5页
目的我们已经证实p75^NTR阳性细胞在HD(Hirschsprung's disease)患儿切除肠管的移形段和扩张段肌间丛及黏膜下丛存在,本研究拟对肠黏膜层进行研究。另外,为了明确Metzger等在肠黏膜活检标本中分离体外培养出的肠黏膜ENS干细胞是胚... 目的我们已经证实p75^NTR阳性细胞在HD(Hirschsprung's disease)患儿切除肠管的移形段和扩张段肌间丛及黏膜下丛存在,本研究拟对肠黏膜层进行研究。另外,为了明确Metzger等在肠黏膜活检标本中分离体外培养出的肠黏膜ENS干细胞是胚胎残留还是其他肠黏膜干细胞在诱导分化过程中转化而来,本研究选用了不同时期肠神经干细胞标记物(早期:SOXIO和Nestin;中晚期:TUJ1;晚期:GFAP),对病理已证实的婴儿组(年龄≤1岁)和幼儿组(年龄〉1岁)HD患儿的切除肠管标本连续切片后进行研究。同时对黏膜层、黏膜下丛及肌间丛的SOX10、Nestin、TUJ1及GFAP强阳性表达率进行综合分析,明确GNCSCs在三层间的存在差异及其与年龄间的关系,以指导临床取材。方法收集临床诊断及病理确诊的HD患儿手术切除标本15例,分为婴儿组(8例)及幼儿组(7例),长段型(2例)及常见型(13例)。沿肠管纵轴各取材一处并将其分为3组:第一组为狭窄段肠管,第二组为移行段肠管,第三组为扩张段肠管。对照组选用切除扩张段肠管的近端肠管,阴性对照应用TBS缓冲液作为一抗。应用S-P法分析四个指标在各标本、各部位的表达情况。结果SOX10、Nestin和TUJ1在移行段和扩张段黏膜层均有强阳性表达,且在黏膜固有层呈散在分布,但主要位于近黏膜肌层,GFAP在移行段和扩张段黏膜层未见阳性表达。肌间丛SOX10、Nestin、TUJ1和GFAP免疫阳性细胞的强阳性表达率高于黏膜下丛,黏膜下丛强阳性表达率高于黏膜层。婴儿组患儿在扩张段肌间丛SOx10和Nestin强阳性表达率较幼儿组高。婴儿组扩张段黏膜层SOX10和Nestin强阳性表达率较幼儿组高。结论在HD患儿有神经节段肠管肠黏膜可能存在ENS干细胞或前体细胞,且在肠黏膜固有层呈散在分布,但主要定位于近黏膜肌层。SOXIO、Nestin、TUJ1� 展开更多
关键词 巨结肠 先天性 ENS干细胞 SOX10 Neatin tuj1
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Pan-retinal ganglion cell markers in mice, rats, and rhesus macaques 被引量:2
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作者 Francisco M.Nadal-Nicolás Caridad Galindo-Romero +4 位作者 Fernando Lucas-Ruiz Nicholas Marsh-Amstrong Wei Li Manuel Vidal-Sanz Marta Agudo-Barriuso 《Zoological Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第1期226-248,共23页
Univocal identification of retinal ganglion cells(RGCs) is an essential prerequisite for studying their degeneration and neuroprotection. Before the advent of phenotypic markers, RGCs were normally identified using re... Univocal identification of retinal ganglion cells(RGCs) is an essential prerequisite for studying their degeneration and neuroprotection. Before the advent of phenotypic markers, RGCs were normally identified using retrograde tracing of retinorecipient areas. This is an invasive technique, and its use is precluded in higher mammals such as monkeys. In the past decade, several RGC markers have been described. Here, we reviewed and analyzed the specificity of nine markers used to identify all or most RGCs, i.e., pan-RGC markers, in rats, mice, and macaques. The best markers in the three species in terms of specificity, proportion of RGCs labeled, and indicators of viability were BRN3A, expressed by vision-forming RGCs, and RBPMS, expressed by vision-and non-vision-forming RGCs. NEUN, often used to identify RGCs, was expressed by non-RGCs in the ganglion cell layer, and therefore was not RGC-specific. γ-SYN, TUJ1, and NF-L labeled the RGC axons, which impaired the detection of their somas in the central retina but would be good for studying RGC morphology. In rats, TUJ1 and NF-L were also expressed by non-RGCs. BM88, ERRβ,and PGP9.5 are rarely used as markers, but they identified most RGCs in the rats and macaques and ERRβ in mice. However, PGP9.5 was also expressed by non-RGCs in rats and macaques and BM88 and ERRβ were not suitable markers of viability. 展开更多
关键词 RGC Optic nerve crush BM88 BRN3A Estrogen-related receptorβ ERRβ NEUN Neurofilament-L PGP9.5 RBPMS γ-SYN βIII-tubulin tuj1
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补肾益脑灸法通过Wnt信号通路影响围绝经期抑郁症大鼠海马神经发生 被引量:10
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作者 邓雪 任路 +2 位作者 冷雪 张囡 王旭 《中国中医基础医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1288-1291,1304,共5页
目的:基于Wnt信号通路观察补肾益脑灸法对围绝经期抑郁症大鼠海马神经干细胞分化标记物表达的影响并探讨其治疗机制。方法:60只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、假手术组、西药组和艾灸组5组,采用去势和慢性不可预见刺激结合制... 目的:基于Wnt信号通路观察补肾益脑灸法对围绝经期抑郁症大鼠海马神经干细胞分化标记物表达的影响并探讨其治疗机制。方法:60只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、假手术组、西药组和艾灸组5组,采用去势和慢性不可预见刺激结合制备围绝经期抑郁症大鼠模型。连续治疗28 d,观察大鼠一般情况变化、动情周期、体质量及糖水消耗实验结果,运用ELISA法检测海马组织中的GFAP、Tuj-1、GSK-3β、β-catenin,RT-PCR法检测海马组织中的GSK-3βmRNA、β-catenin mRNA表达。结果:造模后其他组较空白组表现出抑郁行为,而治疗后抑郁行为好转,西药组、艾灸组及假手术组较模型组海马组织中GFAP、GSK-3β及GSK-3βmRNA的表达量增加,Tuj-1、β-catenin及β-catenin mRNA表达量有所减少。结论:补肾益脑灸法可以通过调节海马Wnt通路GSK-3β、β-catenin的表达调控海马神经干细胞的定向分化,对围绝经期抑郁症起到治疗作用。 展开更多
关键词 补肾益脑灸法 围绝经期抑郁症 GFAP tuj-1 GSK-3β β-catenin
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电针对高脂血症合并脑缺血大鼠室管膜下区神经干细胞分化的影响 被引量:6
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作者 任秀君 马惠芳 图娅 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期347-353,共7页
目的:观察电针后高脂血症合并脑缺血模型大鼠缺血侧脑室室管膜下区(SVZ)波形蛋白、β-微管蛋白(Tuj-1)表达的变化,研究针刺对神经干细胞的分化作用。方法:雄性SD大鼠72只,随机分为正常对照组、高脂血症模型组、高脂血症治疗组、脑缺血... 目的:观察电针后高脂血症合并脑缺血模型大鼠缺血侧脑室室管膜下区(SVZ)波形蛋白、β-微管蛋白(Tuj-1)表达的变化,研究针刺对神经干细胞的分化作用。方法:雄性SD大鼠72只,随机分为正常对照组、高脂血症模型组、高脂血症治疗组、脑缺血模型组、脑缺血治疗组、高脂血症合并脑缺血模型组、高脂血症合并脑缺血治疗Ⅰ组、高脂血症合并脑缺血治疗Ⅱ组,每组9只。采用经典高脂饲料喂养及FeCl3化学诱导大脑中动脉血栓闭塞制造高脂血症合并脑缺血模型。高脂血症治疗组电针"三阴交""丰隆"穴;脑缺血治疗组针刺"百会""水沟"穴;合并模型治疗Ⅰ组先电针"三阴交""丰隆",每日1次,治疗10 d后,造成脑缺血模型,再针刺"百会""水沟"穴;合并模型治疗Ⅱ组,脑缺血后针刺"百会""水沟"和电针"三阴交""丰隆"穴,每日1次,治疗7 d。治疗结束后,应用免疫组化方法检测大鼠前脑缺血侧SVZ波形蛋白、Tuj-1的表达变化。结果:波形蛋白、Tuj-1在正常和高脂血症脑组织表达较少,脑缺血后缺血侧SVZ中波形蛋白、Tuj-1的表达增强(P<0.01),脑缺血治疗组波形蛋白、Tuj-1表达增强(P<0.01),合并模型组表达远远弱于脑缺血组(P<0.01),合并模型治疗组表达高于合并模型组(P<0.01),治疗Ⅰ组各部位波形蛋白、Tuj-1的表达比治疗Ⅱ组要强(P<0.01)。结论:高脂血症降低了脑缺血缺血侧SVZ神经干细胞的分化,针刺可促进高脂血症合并脑缺血后缺血侧SVZ神经干细胞的分化。在高脂血症阶段介入治疗,可通过促进脑缺血后缺血侧神经干细胞的分化,从而促进神经元的修复和再生。 展开更多
关键词 电针 高脂血症合并脑缺血 波形蛋白 Β-微管蛋白 室管膜下区
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Y-27632促进人胚胎干细胞向类神经元细胞的分化 被引量:2
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作者 何大艳 杨玉红 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第13期2063-2067,共5页
背景:Y-27632是Rho相关卷曲螺旋形成的蛋白激酶抑制剂,已被证实具有调节干细胞的自我更新、促进克隆形成和存活的作用。另外,其对神经细胞生长和发育也具有调节和保护作用。而如何提高胚胎干细胞向类神经元细胞分化是神经损伤修复和神... 背景:Y-27632是Rho相关卷曲螺旋形成的蛋白激酶抑制剂,已被证实具有调节干细胞的自我更新、促进克隆形成和存活的作用。另外,其对神经细胞生长和发育也具有调节和保护作用。而如何提高胚胎干细胞向类神经元细胞分化是神经损伤修复和神经再生领域热点问题。目的:探讨Y-27632对人胚胎干细胞向类神经元细胞分化效率的作用。方法:取16代人胚胎干细胞复苏后,进行形态观察和染色鉴定,采用悬浮培养法制备类胚体,培养8 d后,进行分组贴壁培养:对照组细胞为常规Sato培养基诱导分化;Y-27632组分别在Sato培养基加入5,10,20,40μmol/L Y-27632。培养10 d后进行染色鉴定;10-18 d后,进行免疫荧光染色检测胚胎干细胞分化效率和类神经元细胞突起生长情况。结果与结论:(1)人胚胎干细胞共表达Oct4和SSEA-3干细胞特异蛋白;(2)悬浮分化培养8 d后,进一步贴壁培养10 d,可观察到具有神经形态,且表达Tuj-1的类神经元细胞;(3)经不同浓度的Y-27632诱导后,免疫荧光染色发现贴壁细胞数和Tuj-1阳性细胞数显著增加,提示胚胎干细胞向类神经元细胞分化速率加快,且在浓度为10μmol/L时最为明显;(4)分化培养18 d后,免疫荧光染色显示,与对照组相比,10μmol/L Y-27632组的Tuj-1阳性细胞数及突起数和突起长度显著增加;(5)结果说明,Y-27632不仅能够促进人胚胎干细胞向类神经元细胞分化,同时促进类神经元细胞突起的生长。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 类胚体 诱导分化 Y-27632 神经突起 tuj-1 细胞培养 细胞分化 免疫荧光染色 神经损伤 神经修复 神经再生 细胞鉴定
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