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敲除TRPC6对MPTP诱导小鼠神经炎性损伤的影响 被引量:2
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作者 王淑贞 尹红 +2 位作者 钟耀艺 范伟伟 林庚海 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第12期1-7,共7页
目的在小鼠MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑... 目的在小鼠MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑质区域的小胶质细胞,并通过蛋白质免疫印迹的方法检测TRPC6的表达。在构建CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠后,通过免疫荧光的方法检测MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及多巴胺能神经元的损伤。同时结合蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR的方法,在MPTP模型中检测TRPC6敲除后cryαB蛋白水平和炎症因子表达。结果在MPTP注射的小鼠中,小胶质细胞中TRPC6通道的表达显著上调。另外,在注射MPTP的CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠中,小胶质细胞中的cryαB蛋白水平被上调。同时,MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及炎症因子表达增强被抑制,而多巴胺能神经元的损伤得到缓解。结论小胶质细胞中TRPC6通道表达在MPTP模型中上调,而TRPC6的敲除可增加小胶质细胞中cryαB蛋白水平,并降低炎症因子的表达,从而减少多巴胺能神经元的损伤。 展开更多
关键词 小胶质细胞 trpc6通道 炎症 MPTP 多巴胺能神经元 帕金森病
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小鼠子宫中TRPC6通道在离体子宫收缩中的作用 被引量:2
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作者 冯娜 吕伟祯 陈兴娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期827-832,共6页
目的研究小鼠子宫中经典瞬时感受器电位通道6(transient receptor potential canonical 6,TRPC6)离子通道在离体子宫收缩中的作用。方法分离野生型(WT)或TRPC6-KO小鼠子宫,使用等张张力测试系统观察TRPC6通道抑制剂Pyr10和Larixyl对离... 目的研究小鼠子宫中经典瞬时感受器电位通道6(transient receptor potential canonical 6,TRPC6)离子通道在离体子宫收缩中的作用。方法分离野生型(WT)或TRPC6-KO小鼠子宫,使用等张张力测试系统观察TRPC6通道抑制剂Pyr10和Larixyl对离体小鼠子宫收缩的影响;分离WT或TRPC6-KO小鼠子宫平滑肌细胞,使用钙成像技术观察催产素引起的细胞内钙离子浓度的变化。结果Pyr10和Larixyl能明显抑制催产素引起的子宫收缩;催产素引起的TRPC6-KO小鼠子宫的收缩持续时间明显较WT的长;催产素引起TRPC6-KO的子宫平滑肌细胞钙离子浓度升高后减退速度较WT缓慢。结论TRPC6通道介导的钙离子内流参与了小鼠子宫的收缩,并且催产素引起的小鼠子宫收缩随时间的衰减可能与TRPC6通道电流的衰减有关。 展开更多
关键词 trpc6通道 小鼠离体子宫 平滑肌 子宫收缩 催产素 钙离子
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鞘氨醇-1-磷酸通过TRPC6通道引发SH-SY5Y细胞和海马神经元的钙信号
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作者 吴浩天 林冰倩 +3 位作者 李灿军 曾文萍 曲莉丽 仓春蕾 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期11-20,I0002,共11页
鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)是一种广泛表达的具有生物活性的鞘脂,在细胞分化、迁移、增殖、代谢和凋亡中发挥重要作用。S1P可以激活多种信号通路,其中的一些能够引发细胞质中的Ca信号,但很少有研究关注S1P引发神经元C... 鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)是一种广泛表达的具有生物活性的鞘脂,在细胞分化、迁移、增殖、代谢和凋亡中发挥重要作用。S1P可以激活多种信号通路,其中的一些能够引发细胞质中的Ca信号,但很少有研究关注S1P引发神经元Ca信号的机制。在本研究中,我们发现S1P可以在SH-SY5Y细胞和海马神经元中引发Ca信号。去除细胞外的钙离子在很大程度上消除了S1P诱导的细胞内Ca增加,表明细胞外Ca的内流是这一过程的主要贡献者。此外,我们发现S1P诱导的Ca信号不依赖于G蛋白偶联的S1P受体或者表皮生长因子的反式激活。TRPC6的抑制剂SAR7334抑制了S1P诱导的钙信号,表明TRPC6通道充当S1P的下游效应器。使用膜片钳记录,我们发现S1P可以激活TRPC6电流。两种Src酪氨酸激酶抑制剂Src-I1和PP2可以显著抑制S1P对TRPC6的激活。总之,我们的数据表明S1P以一种Src依赖性方式激活TRPC6通道,进而诱导SH-SY5Y细胞和海马神经元中的Ca信号。 展开更多
关键词 鞘氨醇-1-磷酸 钙离子 trpc6通道 SRC激酶 SH-SY5Y 神经元
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钙离子通道基因TRPC6转染HEK293电生理特性研究
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作者 姜丽娜 崔红 丁洁 《临床和实验医学杂志》 2018年第17期1793-1797,共5页
目的建立TRPC6基因在HEK293细胞稳定表达的方法,并对TRPC6通道的电生理特性进行研究,以排除其他因素的影响而更加准确地研究该单独的离子通道的特性。方法应用TRPC6基因转染于不表达TRPC6离子通道的HEK293细胞,给予该离子通道特异性激... 目的建立TRPC6基因在HEK293细胞稳定表达的方法,并对TRPC6通道的电生理特性进行研究,以排除其他因素的影响而更加准确地研究该单独的离子通道的特性。方法应用TRPC6基因转染于不表达TRPC6离子通道的HEK293细胞,给予该离子通道特异性激动剂二酰基甘油类似物OAG(1-oleoyl-acetyl-sn-glycerol);应用尼福地平阻断高阈值Ca2+通道,细胞内液成分含Cs+以阻断K+通道;全细胞膜片钳记录TRPC6通道电流在HEK293细胞的表达。钳制电位在-50 mV。采用Ramp刺激方式(斜坡电压):间隔15 s,连续80个刺激,记录20 min。结果 HEK293细胞电流为171.8 pA,给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG,测得HEK293细胞表达的TRPC6通道电流为2 920.98pA,膜电流明显增大,说明TRPC6离子通道已成功地转染到HEK293细胞上。Ramp方式刺激HEK293细胞显示,在灌流液中给予激动剂OAG后,从3 min开始,电流逐渐增大,到5 min左右达最大值,经洗脱后又逐渐下降。在灌流液中给予尼福地平,电流幅度未下降,在227.9~998.8 pA之间。未加激动剂OAG时,从正常HEK293细胞记录到的TRPC6离子通道电流较小,约为171.8 pA。给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG,记录的该通道电流增加,可达2 920.98 pA。HEK293细胞转染TRPC6后给予尼福地平及激动剂OAG,离子通道电流为3 137.16 pA,未能阻断Ca2+电流。结论正常足细胞TRPC6通道的电流较小,给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG,可激活该通道从而增加TRPC6电流。尼福地平不能阻断转染到HEK293细胞上的TRPC6通道电流。 展开更多
关键词 trpc6离子通道 HEK293细胞 全细胞膜片钳 尼福地平
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