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敲除TRPC6对MPTP诱导小鼠神经炎性损伤的影响
被引量:
2
1
作者
王淑贞
尹红
+2 位作者
钟耀艺
范伟伟
林庚海
《中国比较医学杂志》
北大核心
2017年第12期1-7,共7页
目的在小鼠MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑...
目的在小鼠MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑质区域的小胶质细胞,并通过蛋白质免疫印迹的方法检测TRPC6的表达。在构建CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠后,通过免疫荧光的方法检测MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及多巴胺能神经元的损伤。同时结合蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR的方法,在MPTP模型中检测TRPC6敲除后cryαB蛋白水平和炎症因子表达。结果在MPTP注射的小鼠中,小胶质细胞中TRPC6通道的表达显著上调。另外,在注射MPTP的CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠中,小胶质细胞中的cryαB蛋白水平被上调。同时,MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及炎症因子表达增强被抑制,而多巴胺能神经元的损伤得到缓解。结论小胶质细胞中TRPC6通道表达在MPTP模型中上调,而TRPC6的敲除可增加小胶质细胞中cryαB蛋白水平,并降低炎症因子的表达,从而减少多巴胺能神经元的损伤。
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关键词
小胶质细胞
trpc
6
通道
炎症
MPTP
多巴胺能神经元
帕金森病
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职称材料
小鼠子宫中TRPC6通道在离体子宫收缩中的作用
被引量:
2
2
作者
冯娜
吕伟祯
陈兴娟
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期827-832,共6页
目的研究小鼠子宫中经典瞬时感受器电位通道6(transient receptor potential canonical 6,TRPC6)离子通道在离体子宫收缩中的作用。方法分离野生型(WT)或TRPC6-KO小鼠子宫,使用等张张力测试系统观察TRPC6通道抑制剂Pyr10和Larixyl对离...
目的研究小鼠子宫中经典瞬时感受器电位通道6(transient receptor potential canonical 6,TRPC6)离子通道在离体子宫收缩中的作用。方法分离野生型(WT)或TRPC6-KO小鼠子宫,使用等张张力测试系统观察TRPC6通道抑制剂Pyr10和Larixyl对离体小鼠子宫收缩的影响;分离WT或TRPC6-KO小鼠子宫平滑肌细胞,使用钙成像技术观察催产素引起的细胞内钙离子浓度的变化。结果Pyr10和Larixyl能明显抑制催产素引起的子宫收缩;催产素引起的TRPC6-KO小鼠子宫的收缩持续时间明显较WT的长;催产素引起TRPC6-KO的子宫平滑肌细胞钙离子浓度升高后减退速度较WT缓慢。结论TRPC6通道介导的钙离子内流参与了小鼠子宫的收缩,并且催产素引起的小鼠子宫收缩随时间的衰减可能与TRPC6通道电流的衰减有关。
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关键词
trpc
6
通道
小鼠离体子宫
平滑肌
子宫收缩
催产素
钙离子
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职称材料
鞘氨醇-1-磷酸通过TRPC6通道引发SH-SY5Y细胞和海马神经元的钙信号
3
作者
吴浩天
林冰倩
+3 位作者
李灿军
曾文萍
曲莉丽
仓春蕾
《中国科学技术大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第9期11-20,I0002,共11页
鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)是一种广泛表达的具有生物活性的鞘脂,在细胞分化、迁移、增殖、代谢和凋亡中发挥重要作用。S1P可以激活多种信号通路,其中的一些能够引发细胞质中的Ca信号,但很少有研究关注S1P引发神经元C...
鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)是一种广泛表达的具有生物活性的鞘脂,在细胞分化、迁移、增殖、代谢和凋亡中发挥重要作用。S1P可以激活多种信号通路,其中的一些能够引发细胞质中的Ca信号,但很少有研究关注S1P引发神经元Ca信号的机制。在本研究中,我们发现S1P可以在SH-SY5Y细胞和海马神经元中引发Ca信号。去除细胞外的钙离子在很大程度上消除了S1P诱导的细胞内Ca增加,表明细胞外Ca的内流是这一过程的主要贡献者。此外,我们发现S1P诱导的Ca信号不依赖于G蛋白偶联的S1P受体或者表皮生长因子的反式激活。TRPC6的抑制剂SAR7334抑制了S1P诱导的钙信号,表明TRPC6通道充当S1P的下游效应器。使用膜片钳记录,我们发现S1P可以激活TRPC6电流。两种Src酪氨酸激酶抑制剂Src-I1和PP2可以显著抑制S1P对TRPC6的激活。总之,我们的数据表明S1P以一种Src依赖性方式激活TRPC6通道,进而诱导SH-SY5Y细胞和海马神经元中的Ca信号。
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关键词
鞘氨醇-1-磷酸
钙离子
trpc
6
通道
SRC激酶
SH-SY5Y
神经元
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职称材料
钙离子通道基因TRPC6转染HEK293电生理特性研究
4
作者
姜丽娜
崔红
丁洁
《临床和实验医学杂志》
2018年第17期1793-1797,共5页
目的建立TRPC6基因在HEK293细胞稳定表达的方法,并对TRPC6通道的电生理特性进行研究,以排除其他因素的影响而更加准确地研究该单独的离子通道的特性。方法应用TRPC6基因转染于不表达TRPC6离子通道的HEK293细胞,给予该离子通道特异性激...
目的建立TRPC6基因在HEK293细胞稳定表达的方法,并对TRPC6通道的电生理特性进行研究,以排除其他因素的影响而更加准确地研究该单独的离子通道的特性。方法应用TRPC6基因转染于不表达TRPC6离子通道的HEK293细胞,给予该离子通道特异性激动剂二酰基甘油类似物OAG(1-oleoyl-acetyl-sn-glycerol);应用尼福地平阻断高阈值Ca2+通道,细胞内液成分含Cs+以阻断K+通道;全细胞膜片钳记录TRPC6通道电流在HEK293细胞的表达。钳制电位在-50 mV。采用Ramp刺激方式(斜坡电压):间隔15 s,连续80个刺激,记录20 min。结果 HEK293细胞电流为171.8 pA,给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG,测得HEK293细胞表达的TRPC6通道电流为2 920.98pA,膜电流明显增大,说明TRPC6离子通道已成功地转染到HEK293细胞上。Ramp方式刺激HEK293细胞显示,在灌流液中给予激动剂OAG后,从3 min开始,电流逐渐增大,到5 min左右达最大值,经洗脱后又逐渐下降。在灌流液中给予尼福地平,电流幅度未下降,在227.9~998.8 pA之间。未加激动剂OAG时,从正常HEK293细胞记录到的TRPC6离子通道电流较小,约为171.8 pA。给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG,记录的该通道电流增加,可达2 920.98 pA。HEK293细胞转染TRPC6后给予尼福地平及激动剂OAG,离子通道电流为3 137.16 pA,未能阻断Ca2+电流。结论正常足细胞TRPC6通道的电流较小,给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG,可激活该通道从而增加TRPC6电流。尼福地平不能阻断转染到HEK293细胞上的TRPC6通道电流。
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关键词
trpc
6
离子
通道
HEK293细胞
全细胞膜片钳
尼福地平
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职称材料
题名
敲除TRPC6对MPTP诱导小鼠神经炎性损伤的影响
被引量:
2
1
作者
王淑贞
尹红
钟耀艺
范伟伟
林庚海
机构
漳州卫生职业学院
厦门大学附属东南医院(福建省漳州中国人民解放军第
出处
《中国比较医学杂志》
北大核心
2017年第12期1-7,共7页
基金
国家自然基金(81601223)
文摘
目的在小鼠MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑质区域的小胶质细胞,并通过蛋白质免疫印迹的方法检测TRPC6的表达。在构建CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠后,通过免疫荧光的方法检测MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及多巴胺能神经元的损伤。同时结合蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR的方法,在MPTP模型中检测TRPC6敲除后cryαB蛋白水平和炎症因子表达。结果在MPTP注射的小鼠中,小胶质细胞中TRPC6通道的表达显著上调。另外,在注射MPTP的CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠中,小胶质细胞中的cryαB蛋白水平被上调。同时,MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及炎症因子表达增强被抑制,而多巴胺能神经元的损伤得到缓解。结论小胶质细胞中TRPC6通道表达在MPTP模型中上调,而TRPC6的敲除可增加小胶质细胞中cryαB蛋白水平,并降低炎症因子的表达,从而减少多巴胺能神经元的损伤。
关键词
小胶质细胞
trpc
6
通道
炎症
MPTP
多巴胺能神经元
帕金森病
Keywords
Microglia
trpc
6
Inflammation
MPTP
Dopaminergic neuron
Parkinson’s disease
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
小鼠子宫中TRPC6通道在离体子宫收缩中的作用
被引量:
2
2
作者
冯娜
吕伟祯
陈兴娟
机构
天津市东丽区东丽医院药剂科
西北工业大学医学研究院
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期827-832,共6页
基金
西北工业大学新进教师科研启动基金(No 31020190QD001)。
文摘
目的研究小鼠子宫中经典瞬时感受器电位通道6(transient receptor potential canonical 6,TRPC6)离子通道在离体子宫收缩中的作用。方法分离野生型(WT)或TRPC6-KO小鼠子宫,使用等张张力测试系统观察TRPC6通道抑制剂Pyr10和Larixyl对离体小鼠子宫收缩的影响;分离WT或TRPC6-KO小鼠子宫平滑肌细胞,使用钙成像技术观察催产素引起的细胞内钙离子浓度的变化。结果Pyr10和Larixyl能明显抑制催产素引起的子宫收缩;催产素引起的TRPC6-KO小鼠子宫的收缩持续时间明显较WT的长;催产素引起TRPC6-KO的子宫平滑肌细胞钙离子浓度升高后减退速度较WT缓慢。结论TRPC6通道介导的钙离子内流参与了小鼠子宫的收缩,并且催产素引起的小鼠子宫收缩随时间的衰减可能与TRPC6通道电流的衰减有关。
关键词
trpc
6
通道
小鼠离体子宫
平滑肌
子宫收缩
催产素
钙离子
Keywords
trpc
6
channel
mouse uterus
smooth muscle
uterine contraction
oxytocin
calcium
分类号
R-332 [医药卫生]
R322.65
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职称材料
题名
鞘氨醇-1-磷酸通过TRPC6通道引发SH-SY5Y细胞和海马神经元的钙信号
3
作者
吴浩天
林冰倩
李灿军
曾文萍
曲莉丽
仓春蕾
机构
中国科学技术大学生命科学与医学部基础医学院
中国科学技术大学附属第一医院脑衰老与脑疾病研究中心
出处
《中国科学技术大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第9期11-20,I0002,共11页
基金
the National Natural Science Foundation of China(31770896)。
文摘
鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)是一种广泛表达的具有生物活性的鞘脂,在细胞分化、迁移、增殖、代谢和凋亡中发挥重要作用。S1P可以激活多种信号通路,其中的一些能够引发细胞质中的Ca信号,但很少有研究关注S1P引发神经元Ca信号的机制。在本研究中,我们发现S1P可以在SH-SY5Y细胞和海马神经元中引发Ca信号。去除细胞外的钙离子在很大程度上消除了S1P诱导的细胞内Ca增加,表明细胞外Ca的内流是这一过程的主要贡献者。此外,我们发现S1P诱导的Ca信号不依赖于G蛋白偶联的S1P受体或者表皮生长因子的反式激活。TRPC6的抑制剂SAR7334抑制了S1P诱导的钙信号,表明TRPC6通道充当S1P的下游效应器。使用膜片钳记录,我们发现S1P可以激活TRPC6电流。两种Src酪氨酸激酶抑制剂Src-I1和PP2可以显著抑制S1P对TRPC6的激活。总之,我们的数据表明S1P以一种Src依赖性方式激活TRPC6通道,进而诱导SH-SY5Y细胞和海马神经元中的Ca信号。
关键词
鞘氨醇-1-磷酸
钙离子
trpc
6
通道
SRC激酶
SH-SY5Y
神经元
Keywords
sphingosine-1-phosphate
calcium
trpc
6
channel
Src kinase
SH-SY5Y
neuron
分类号
Q189 [生物学—神经生物学]
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职称材料
题名
钙离子通道基因TRPC6转染HEK293电生理特性研究
4
作者
姜丽娜
崔红
丁洁
机构
首都医科大学附属北京友谊医院儿科
北京大学第一医院儿科
出处
《临床和实验医学杂志》
2018年第17期1793-1797,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:81400718)
文摘
目的建立TRPC6基因在HEK293细胞稳定表达的方法,并对TRPC6通道的电生理特性进行研究,以排除其他因素的影响而更加准确地研究该单独的离子通道的特性。方法应用TRPC6基因转染于不表达TRPC6离子通道的HEK293细胞,给予该离子通道特异性激动剂二酰基甘油类似物OAG(1-oleoyl-acetyl-sn-glycerol);应用尼福地平阻断高阈值Ca2+通道,细胞内液成分含Cs+以阻断K+通道;全细胞膜片钳记录TRPC6通道电流在HEK293细胞的表达。钳制电位在-50 mV。采用Ramp刺激方式(斜坡电压):间隔15 s,连续80个刺激,记录20 min。结果 HEK293细胞电流为171.8 pA,给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG,测得HEK293细胞表达的TRPC6通道电流为2 920.98pA,膜电流明显增大,说明TRPC6离子通道已成功地转染到HEK293细胞上。Ramp方式刺激HEK293细胞显示,在灌流液中给予激动剂OAG后,从3 min开始,电流逐渐增大,到5 min左右达最大值,经洗脱后又逐渐下降。在灌流液中给予尼福地平,电流幅度未下降,在227.9~998.8 pA之间。未加激动剂OAG时,从正常HEK293细胞记录到的TRPC6离子通道电流较小,约为171.8 pA。给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG,记录的该通道电流增加,可达2 920.98 pA。HEK293细胞转染TRPC6后给予尼福地平及激动剂OAG,离子通道电流为3 137.16 pA,未能阻断Ca2+电流。结论正常足细胞TRPC6通道的电流较小,给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG,可激活该通道从而增加TRPC6电流。尼福地平不能阻断转染到HEK293细胞上的TRPC6通道电流。
关键词
trpc
6
离子
通道
HEK293细胞
全细胞膜片钳
尼福地平
Keywords
trpc
6
ion channel
HEK293 cells
Whole - cell patch clamp
Nifedipine
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
敲除TRPC6对MPTP诱导小鼠神经炎性损伤的影响
王淑贞
尹红
钟耀艺
范伟伟
林庚海
《中国比较医学杂志》
北大核心
2017
2
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职称材料
2
小鼠子宫中TRPC6通道在离体子宫收缩中的作用
冯娜
吕伟祯
陈兴娟
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
下载PDF
职称材料
3
鞘氨醇-1-磷酸通过TRPC6通道引发SH-SY5Y细胞和海马神经元的钙信号
吴浩天
林冰倩
李灿军
曾文萍
曲莉丽
仓春蕾
《中国科学技术大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
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职称材料
4
钙离子通道基因TRPC6转染HEK293电生理特性研究
姜丽娜
崔红
丁洁
《临床和实验医学杂志》
2018
0
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职称材料
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