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羊驼酪氨酸酶基因家族在不同毛色个体中的基因表达水平 被引量:35
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作者 高莉 董常生 +5 位作者 赫晓燕 贺俊平 耿建军 范瑞文 朱芷薇 游蓉丽 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期895-899,共5页
黑色素对动物毛色的形成起重要作用,酪氨酸酶基因家族成员参与了黑色素的合成。为了探索羊驼酪氨酸酶基因家族的基因表达与其毛色之间的相关性,本研究利用实时荧光定量PCR技术分析了不同毛色羊驼酪氨酸酶基因家族成员TYR、TRP1和TRP2的... 黑色素对动物毛色的形成起重要作用,酪氨酸酶基因家族成员参与了黑色素的合成。为了探索羊驼酪氨酸酶基因家族的基因表达与其毛色之间的相关性,本研究利用实时荧光定量PCR技术分析了不同毛色羊驼酪氨酸酶基因家族成员TYR、TRP1和TRP2的相对基因表达量。研究结果显示:棕色羊驼中的TYR、TRP1和TRP2的mRNA相对表达量经内参基因校正后分别是白色羊驼中的13.669倍、3.417倍和8.593倍。结论表明棕色羊驼中酪氨酸酶基因家族3种成员的基因表达水平均高于白色羊驼,揭示了羊驼TYR基因家族成员的基因表达量与其毛色表型具有相关性。 展开更多
关键词 羊驼 TYR trp1 trp2 实时荧光定量PCR
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酪氨酸酶相关蛋白-1的基因克隆表达及纯化 被引量:6
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作者 李春英 高天文 刘玉峰 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2001年第6期368-370,共3页
目的 克隆TRP 1编码基因 ,表达并纯化TRP 1蛋白。方法 通过RT PCR方法扩增TRP 1编码基因 ,克隆至 pUC19载体并测序 ,再亚克隆至GST融合表达载体 pGEX 4T 1,转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达TRP 1/GST融合蛋白 ,分析鉴定表达蛋白的可溶性 ,... 目的 克隆TRP 1编码基因 ,表达并纯化TRP 1蛋白。方法 通过RT PCR方法扩增TRP 1编码基因 ,克隆至 pUC19载体并测序 ,再亚克隆至GST融合表达载体 pGEX 4T 1,转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达TRP 1/GST融合蛋白 ,分析鉴定表达蛋白的可溶性 ,并用谷氨酰胺树脂柱纯化表达的蛋白。结果 ①从培养的人黑素细胞中扩增出编码TRP 1的cDNA序列 ,序列测定证实与文献报道的序列一致 ;②成功构建了GST融合表达载体 pGEX 4T 1/TRP 1;③表达了TRP 1/GST融合蛋白 ;④得到纯化的TRP 1/GST融合蛋白。结论 人TRP 1基因的克隆成功及TRP 1/GST融合蛋白的表达与纯化 ,为进一步探索TRP 展开更多
关键词 trp-1 克隆 融合表达 恶性黑素瘤 白癜风
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珍珠水解液的美白作用机理研究 被引量:9
3
作者 邓云云 王笑月 +3 位作者 李才广 孟宏 董銀卯 李丽 《中国现代中药》 CAS 2017年第7期992-994,1006,共4页
目的:通过人的黑色素细胞实验研究珍珠水解液的美白作用机理。方法:NaOH法测定黑色素细胞黑色素含量,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)测定珍珠水解液对影响黑色素合成的相关基因酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TRP1)及影响黑色素转运... 目的:通过人的黑色素细胞实验研究珍珠水解液的美白作用机理。方法:NaOH法测定黑色素细胞黑色素含量,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)测定珍珠水解液对影响黑色素合成的相关基因酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TRP1)及影响黑色素转运的相关基因小眼畸形相关转录因子(MITF)。结果:浓度为0.25%、0.5%、0.75%的珍珠水解液可以抑制黑色素细胞的黑色素合成,3种浓度下的珍珠水解液均可抑制相关基因TRP1mRNA的表达,0.25%浓度下可抑制TYR、TRP1及MITF的mRNA的表达。结论 :珍珠水解液主要通过抑制黑色素合成过程中TRP1 mRNA的表达,从而抑制黑色素合成而发挥美白功效。 展开更多
关键词 珍珠水解液 酪氨酸酶基因 酪氨酸酶相关蛋白1 小眼畸形相关转录因子 黑色素含量 美白机制
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白毛黑眼兔眼部虹膜Trp1、Trp2基因克隆与分析 被引量:4
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作者 朱亮 蔡月琴 +1 位作者 屠珏 陈民利 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第2期43-48,共6页
目的克隆日本大耳白兔白毛黑眼系(白毛黑眼兔)眼部虹膜Trp1、Trp2基因,获取其完整的外显子序列。进一步推测这两个基因编码的蛋白,并分析其特征。方法从白毛黑眼兔的黑色虹膜组织中提取RNA,并反转录成cDNA。利用来自小鼠、大鼠和人的同... 目的克隆日本大耳白兔白毛黑眼系(白毛黑眼兔)眼部虹膜Trp1、Trp2基因,获取其完整的外显子序列。进一步推测这两个基因编码的蛋白,并分析其特征。方法从白毛黑眼兔的黑色虹膜组织中提取RNA,并反转录成cDNA。利用来自小鼠、大鼠和人的同源引物,扩增获得白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子片段。然后对已知片段进行3’RACE和5’RACE,从而获得白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子完整序列。利用相关软件对获得序列进行翻译和分析。结果首次获得了白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子全序列。该实验兔Trp1基因的编码序列全长1604个碱基,其核苷酸序列与人的相似度为87.9%,与小鼠的相似度为82.7%。TRP1成熟蛋白包含513氨基酸,氨基酸序列与人的相似度为89.8%,与小鼠的相似度为86.6%。该实验兔Trp2基因序列全长1554个碱基,其核苷酸序列与人的相似度为83.2%,与小鼠的相似度为81.9%。TRP2成熟蛋白包含494个氨基酸,其序列与人的一致度为84.2%,与小鼠的一致度为84.4%。结论本研究获得的TRP1、TRP2的序列与已知的家兔酪氨酸相关蛋白家族成员TYR的序列进行比对,结果显示这三种蛋白之间有较高的相似度,并且TRP1和TRP2蛋白序列表现出了酪氨酸酶家族结构上的保守性和特有的结构特征。 展开更多
关键词 白毛黑眼兔 酪氨酸相关蛋白1 酪氨酸相关蛋白2
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抗酪氨酸酶相关蛋白-1B细胞表位区多克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
5
作者 李廷慧 高天文 +2 位作者 李春英 侯晓彬 刘玉峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期263-265,共3页
目的 :制备多克隆抗体并初步用于TRP 1抗原表位区的研究 ,为白癜风、恶性黑素瘤的免疫治疗提供实验依据。方法 :在大肠杆菌中表达PRSETA/TRP 1融合蛋白 ,用所获得的蛋白免疫新西兰白兔得到多克隆抗体 ,并用ELISA、Western blot方法进行... 目的 :制备多克隆抗体并初步用于TRP 1抗原表位区的研究 ,为白癜风、恶性黑素瘤的免疫治疗提供实验依据。方法 :在大肠杆菌中表达PRSETA/TRP 1融合蛋白 ,用所获得的蛋白免疫新西兰白兔得到多克隆抗体 ,并用ELISA、Western blot方法进行此抗体的鉴定。结果 :①表达了PRSETA/TRP 1融合蛋白 ;②制备了抗TRP 1B细胞表位区的多克隆抗体 ;③并用多克隆抗体检测了毕赤酵母表达的 6His TRP1蛋白 ,证实此抗体效价高、特异性强。结论 :此抗体可用于TRP 展开更多
关键词 酪氨酸酶相关蛋白—1 B细胞表位区 抗体
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2型糖尿病前期患者CTRP1水平与相关因素分析
6
作者 肖子轩 白桂荣 +3 位作者 强丹 张晓娟 贺艳婷 谢晓敏 《宁夏医学杂志》 CAS 2021年第6期501-503,共3页
目的通过检测患者血清肿瘤坏死因子相关蛋白1(CTRP1)水平,分析其相关影响因素,为糖尿病前期的预测和辅助诊断提供思路。方法选取糖尿病前期患者200例,将其按照血糖水平由低到高分为血糖受损(IFG)-1组和IFG-2组。收集患者一般资料、体格... 目的通过检测患者血清肿瘤坏死因子相关蛋白1(CTRP1)水平,分析其相关影响因素,为糖尿病前期的预测和辅助诊断提供思路。方法选取糖尿病前期患者200例,将其按照血糖水平由低到高分为血糖受损(IFG)-1组和IFG-2组。收集患者一般资料、体格检查、实验室检查和血清CTRP1水平检测等,对CTRP1的影响因素进行多元线性回归分析,并将CTRP1对于IFG-2的诊断效能评价的ROC曲线进行分析。结果IFG-1组的FPG、HbA_(1C)、FINS低于IFG-2组患者,IFG-1组年龄、CTRP1高于IFG-2组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HbA_(1C)与CTRP1呈负相关性,腰围、DBP、HDL-C与CTRP1呈正相关性,差异均有统计学意义(P<0.05)。IFG-2组患者在CTRP1最佳诊断切点(118.93 ng/mL)上的敏感性和特异性分别为92.6%和59.0%,AUC=0.844,P<0.05。结论随着糖尿病前期患者血糖的升高,血清CTRP1表达水平下降,其低表达与HbA_(1C)、腰围、DBP、HDL-C密切相关,对于糖尿病前期的诊断和预防提供了思路。 展开更多
关键词 糖尿病前期 肿瘤坏死因子相关蛋白 影响因素
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黑芝麻提取物促B16黑素瘤细胞黑素合成及其机制的研究 被引量:8
7
作者 姜泽群 徐继敏 +1 位作者 吴琼 何光源 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期2143-2145,共3页
目的研究黑芝麻的水提取物对B16黑素瘤细胞系酪氨酸酶活性、黑素合成及相关基因和蛋白表达的影响,探讨黑芝麻促进黑色素合成的可能机制。方法选择3种浓度(0.5,1,2 mg/ml)的黑芝麻水提物作用于B16黑素瘤细胞72h,观察其对黑素细胞的增殖... 目的研究黑芝麻的水提取物对B16黑素瘤细胞系酪氨酸酶活性、黑素合成及相关基因和蛋白表达的影响,探讨黑芝麻促进黑色素合成的可能机制。方法选择3种浓度(0.5,1,2 mg/ml)的黑芝麻水提物作用于B16黑素瘤细胞72h,观察其对黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性和黑素含量的影响。免疫印迹法和半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测药物作用48 h前后酪氨酸酶(Tyrosinase)、小眼相关转录因子(microphthalmia associated transcription factor,MITF),酪氨酸酶相关蛋白酶1(TRPl)和酪氨酸酶相关蛋白酶2(TRP2)蛋白和mRNA表达水平的变化。结果3种浓度的黑芝麻水提物可轻微促进B16细胞的增殖(P>0.05);试验浓度范围内可明显促进B16细胞黑素合成和酪氨酸酶活性增加(P<0.05),并以浓度依赖方式促进酪氨酸酶和MITF的蛋白和mRNA表达(P<0.05),但对TRP-1、TRP-2的表达几乎没有影响(P>0.05)。结论黑芝麻水提物在体外能直接刺激B16黑素瘤细胞黑色素的合成,上述变化可能通过促进酪氨酸酶和MITF的基因转录和蛋白表达作用来完成。 展开更多
关键词 黑芝麻水提物 酪氨酸酶(Tyrosinase) 黑素 小眼相关转录因子(MITF) 酪氨酸酶相关蛋白酶1(TR-Pl) 酪氨酸酶相关蛋白酶2(trp2)
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产甘油假丝酵母TRP1基因的克隆与功能分析 被引量:2
8
作者 沈微 王正祥 +5 位作者 李艳丽 王丹 饶志明 方慧英 诸葛斌 诸葛健 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1795-1800,共6页
产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)WL2002—5是我国发酵甘油生产菌种,具有高产甘油和耐高渗透压的优良性能。本文采用遗传互补的方法从产甘油假丝酵母基因文库中克隆了豫尸,基因(Cg豫PJ)。序列分析显示,该基因编码区全长73... 产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)WL2002—5是我国发酵甘油生产菌种,具有高产甘油和耐高渗透压的优良性能。本文采用遗传互补的方法从产甘油假丝酵母基因文库中克隆了豫尸,基因(Cg豫PJ)。序列分析显示,该基因编码区全长735bp,编码的磷酸核糖氨基苯甲酸同分异构酶(CgPRAI)氨基酸序列与其他酵母来源的PRAI蛋白同源性在32.9%~49.2%之间。功能互补实验显示,CgTRP1基因在高拷贝情况下可以互补酿酒酵母trp1基因功能但在低拷贝情况下只能部分互补酿酒酵母trp1基因功能,是一条功能明确、结构完整的酵母新基因。在CgTRP1基因下游发现另一蛋白编码基因,编码的氨基酸序列与酵母无机焦磷酸酶有很高的相似性。 展开更多
关键词 产甘油假丝酵母 磷酸核糖氨基苯甲酸同分异构酶 trp1缺陷
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不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及相关基因表达的影响 被引量:13
9
作者 霍仕霞 彭晓明 +2 位作者 高莉 赵萍萍 闫明 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期244-249,共6页
目的研究不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT法测定细胞增殖,左旋多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解... 目的研究不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT法测定细胞增殖,左旋多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解法测定黑素合成,采用RT-PCR法、Western-blotting法检测A375细胞中TYR、TRP-1、TRP-2mRNA和蛋白表达。结果 90%高良姜素浓度为1.0~10.0μmol/L对A375细胞具有显著的促增殖作用(P<0.01),而在浓度为20.0μmol/L时,无促A375细胞增殖作用(P>0.05),浓度为0.5~20.0μmol/L均能促进酪氨酸酶活性的升高(P<0.05、0.01),浓度为1.0~20μmol/L具有显著促进黑素升高的作用(P<0.05、0.01),且随着浓度的增加呈增强趋势;99%高良姜素浓度在0.5~20.0μmol/L具有显著促进A375细胞增殖和酪氨酸酶活性升高作用(P<0.01),而对黑素合成无促进作用(P>0.05)。90%高良姜素对TYR、TRP-1 mRNA表达基本无影响,1.0μmol/L时上调TRP-2 mRNA表达(P<0.05);99%高良姜素能上调TYR、TRP-1及TRP-2 mRNA表达;二者均促进TYR蛋白表达,但对TRP-1及TRP-2蛋白表达基本无影响。结论 99%高良姜素能够促进A375细胞增殖及酪氨酸酶活性升高,可能是通过上调TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA表达和TYR蛋白表达实现的;而90%高良姜素能够显著促进细胞增殖、酪氨酸酶活性升高及黑素增加,表明90%高良姜素能够促进黑素的合成,但不是通过调节TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA表达,可能是通过促进TYR蛋白表达实现的。 展开更多
关键词 高良姜素 黑素合成 酪氨酸酶 酪氨酸酶相关蛋白-1 酪氨酸酶相关蛋白-2
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Down-regulation of tyrosinase,TRP-1,TRP-2 and MITF expressions by citrus press-cakes in murine B16 F10 melanoma 被引量:8
10
作者 Sang Suk Kim Min-Jin Kim +6 位作者 Young Hun Choi Byung Kuk Kim Kwang Sik Kim Kyung Jin Park Suk Man Park Nam Ho Lee Chang-Gu Hyun 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2013年第8期617-622,共6页
Objective:To investigate the suitability of citrus-press cakes,by-products of the juice industry as a source for the whitening agents for cosmetic industry.Methods:Ethylacetate extracts of citrus-press cakes(CCE)were ... Objective:To investigate the suitability of citrus-press cakes,by-products of the juice industry as a source for the whitening agents for cosmetic industry.Methods:Ethylacetate extracts of citrus-press cakes(CCE)were examined for their anti-melanogenic potentials in terms of the inhibition of melanin production and mechanisim of melanogenesis by using Western Blot analysis with tyrosinese,tyrosinase-related protein-1(TRP-1),TRP2,and microphthalmia-associated transcription factor(MITF)proteins.To apply the topical agents,citrus-press cakes was investigated the safety in human skin cell line.Finally flavonoid analysis of CCE was also determined by HPLC analysis.Results:Results indicated that CCE were shown to down-regulate melanin content in a dose-dependent pattern.The CCE inhibited tyrosinase,TRP-2,and MITF expressions in a dose-dependent manner.To test the applicability of CCE to human skin,we used MTT assay to assess the cytotoxic effects of CCE on human keratinocyte HaCaT cells.The CCE exhibited low cytotoxicity at 50μg/mL.Characterization of the citrus-press cakes for flavonoid contents using HPLC showed varied quantity of rutin,narirutin,and hesperidin.Conclusions:Considering the anti-melanogenic activity and human safety,CCE is considered as a potential anti-melanogenic agent and may be effective for topical application for treating hyperpigmentation disorders. 展开更多
关键词 Citrus-press CAKES MELANIN MELANOGENESIS TYROSINASE MITF trp-1 trp-2
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内皮素-1(ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖和黑素生成的影响 被引量:7
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作者 耿建军 张杰 +4 位作者 穆晓丽 白瑞 董彦君 白俊明 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期932-938,共7页
旨在研究内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞(Melanocyte,MC)增殖和黑素合成的影响。本研究中,体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,观察不同浓度ET-1(0、0.1、1、10、100nmol.L-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖、黑素含量、内皮素受体B... 旨在研究内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞(Melanocyte,MC)增殖和黑素合成的影响。本研究中,体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,观察不同浓度ET-1(0、0.1、1、10、100nmol.L-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖、黑素含量、内皮素受体B(Endothelin recepter B,EDNRB)基因、酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)基因、酪氨酸相关蛋白-1(Tyrosinase related protein 1,TRP-1)基因和表皮黑皮素-1受体(Melanocortin 1receptor,MC1R)基因表达量的影响。结果表明,ET-1处理羊驼皮肤黑素细胞3d后,羊驼皮肤黑素细胞增多,黑素含量、EDNRB、TRP-1和TYR基因表达量都明显增加(P<0.05),以10nmol.L-1组最为显著。ET-1能诱导羊驼皮肤黑素细胞增殖、树突增长,诱导EDNRB、TYR和TRP-1基因表达量增高,使黑素合成增加;同时诱导MC1R基因表达量增高,从而通过α-MSH信号通路对羊驼黑色素的生成产生影响。 展开更多
关键词 ET-1 羊驼 皮肤 黑素细胞 EDNRB TYR MC1R trp-1
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逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型TYR及其相关蛋白mRNA表达的影响 被引量:6
12
作者 张宁 刘慧 +4 位作者 张明磊 刘斌 任燕冬 王雪 李建民 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1025-1029,共5页
目的:探讨逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型黑素合成的影响及机理。方法:制备逍遥散AB-8大孔树脂柱层析富集物,将其作用于以1∶2的比例构建的A375细胞与HacaT细胞共培养模型,采用Hunt法检测黑素含量,RT-PCR法测定TYR、TRP-1、... 目的:探讨逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型黑素合成的影响及机理。方法:制备逍遥散AB-8大孔树脂柱层析富集物,将其作用于以1∶2的比例构建的A375细胞与HacaT细胞共培养模型,采用Hunt法检测黑素含量,RT-PCR法测定TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA的表达。结果:逍遥散大孔树脂柱层析40%乙醇洗脱部位对细胞共培养模型作用显著,与阴性对照组比较,逍遥散4、2 g/L组黑素量分别下调82.23%、93.01%;TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA表达量分别下调29.11%、23.78%、20.05%和25.13%、15.02%、11.64%(P<0.01)。结论:逍遥散有效部位提取物可能通过下调TYR、TRP-1和TRP-2 mRNA的表达而降低人黑素瘤细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成量。 展开更多
关键词 逍遥散 黄褐斑 TYR trp-1 trp-2
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TRP-1 B细胞表位区在酵母中的表达纯化及生物学活性研究 被引量:3
13
作者 李廷慧 高天文 +6 位作者 李春英 李毅 张文红 王立峰 李立文 孙东杰 刘玉峰 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2004年第5期263-266,共4页
目的 为进一步探索酪氨酸酶相关蛋白 -1(TRP 1)人源B细胞表位 ,利用甲醇营养型酵母Pichiapas toris表达系统表达TRP 1的B细胞表位区。方法 将本实验室已构建好的质粒 pUC19/TRP 1进行双酶切 ,将目的片段亚克隆至带有 6His标签的 pRSET... 目的 为进一步探索酪氨酸酶相关蛋白 -1(TRP 1)人源B细胞表位 ,利用甲醇营养型酵母Pichiapas toris表达系统表达TRP 1的B细胞表位区。方法 将本实验室已构建好的质粒 pUC19/TRP 1进行双酶切 ,将目的片段亚克隆至带有 6His标签的 pRSETA载体 ,将 6His融合的TRP 1整体PCR扩增出来 ,克隆到酵母表达载体pPIC3 .5K上 ,构建成重组质粒 pPIC3 .5K/6His TRP1。该质粒转化酵母菌GS115 ,经G418筛选得到高拷贝转化子。转化菌体经Mut表型鉴定后 ,用含 0 .5 %甲醇的培养基诱导表达 ,表达产物利用Ni NTAagarose柱通过金属螯合亲和层析进行纯化后 ,测定其生物学活性。结果 通过 4天的诱导 ,该系统成功表达了 6His TRP1蛋白 ,经亲和层析纯化后扫描分析重组蛋白分子量约为 18kD ,纯度可达 96%。Westernblotting及ELISA实验证实 ,表达产物具有良好的抗原性和特异性。生物学活性检测证实其具有结合白癜风病人IgG的能力。 结论 在Pichiapastoris表达系统中 ,获得了具有生物学活性的可溶性重组TRP 1的B细胞表位肽段 ,为深入研究TRP -1人源表位及白癜风的发病机制、免疫治疗及恶性黑素瘤的免疫治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 trp-1 B细胞表位 酵母 纯化 生物学活性 酪氨酸酶相关蛋白-1 白癜风
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小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 周密思 彭圆 +4 位作者 陈军 林连美 刘晶 刘颖 梁倩婷 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期1769-1771,共3页
目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)蛋白表达的影响。方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高浓度分别为0.1、1.0、2.5mg/mL用于实... 目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)蛋白表达的影响。方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高浓度分别为0.1、1.0、2.5mg/mL用于实验,Western Blot法检测B16细胞中TYR、TRP-1、TRP-2蛋白的表达。结果:与对照组比较,随着浓度的增加,小柴胡汤水煎液能够显著下调细胞TYR、TRP-2蛋白的表达(P<0.05,P<0.01);小柴胡汤中、高浓度组较对照组降低TRP-1活性(P<0.01)。结论:小柴胡汤对黑素合成的抑制作用除了通过直接抑制TYR活性外,还可通过下调酪氨酸酶家族其他成员TRP-1、TRP-2的基因表达、蛋白合成三方面实现其抑制黑素生成的作用,提示小柴胡汤对黑素生成的抑制可通过对酶蛋白转录后调节途径来实现。 展开更多
关键词 小柴胡汤 黑素合成 酪氨酸酶 酪氨酸酶相关蛋白-1 酪氨酸酶相关蛋白-2
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TRP-1在黑素细胞中作用的初步研究 被引量:1
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作者 李春英 高天文 +3 位作者 孙林潮 齐显龙 李强 刘玉峰 《中国美容医学》 CAS 2004年第3期275-276,共2页
目的构建TRP-1反义核酸、转染黑素细胞并观察细胞生长和黑素代谢功能的改变,探讨TRP-1在黑素细胞中的作用。方法将TRP-1反义核酸真核表达载体转染黑素细胞,以测定的MTT结果绘制细胞生长曲线;测定TRP-1反义核酸转染黑素细胞后细胞内黑素... 目的构建TRP-1反义核酸、转染黑素细胞并观察细胞生长和黑素代谢功能的改变,探讨TRP-1在黑素细胞中的作用。方法将TRP-1反义核酸真核表达载体转染黑素细胞,以测定的MTT结果绘制细胞生长曲线;测定TRP-1反义核酸转染黑素细胞后细胞内黑素含量的变化。结果从生长曲线可以看出,TRP-1反义核酸转染的黑素细胞增殖速度明显低于对照细胞;黑素含量明显降低。结论TRP-1反义核酸能显著抑制黑素细胞生长并降低黑素含量,表明TRP-1在维持黑素细胞正常的生长和黑素代谢中发挥重要作用。 展开更多
关键词 trp-1 黑素细胞 反义核酸 细胞生长曲线
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Testa of Rhynchosia nulubilis down-regulates melanin synthesis in UVB-induced guinea pigs epidermal skin tissue
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作者 HyunJeongLEE DonghunLEE +6 位作者 Jung-binSONG YoungSikKIM Hai-lingGUO SeunggyeongLEE JuyeonPARK SunYoeuKIM HocheolKIM 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第S1期101-102,共2页
OBJECTIVE Synthetic compounds that are used in the clinic to regulate skin hyperpigmentation,such as arbutin,and kojic acid,are only moderately effective.But their use is limited by side effects.As part of an effort t... OBJECTIVE Synthetic compounds that are used in the clinic to regulate skin hyperpigmentation,such as arbutin,and kojic acid,are only moderately effective.But their use is limited by side effects.As part of an effort to overcome the limitations,there is a pressing need for developing effective natural product for whitening.Each of black soybean has been reported to produce anti-melanogenic effects.Especially,antioxidant and anti-aging compounds are richer in testa than the rest part of black soybean.Therefore,we hypothesized that testa of Rhynchosia nulubilis(TR)would show more anti-melanogenic effects than whole black soybean.METHODS Anti-melanogenic effect of TR was done by using mouse B16F10 melanoma.The depigmenting efficacy was then observed following topical application of the TR to UVB-stimulated hyperpigmented dorsal skin of guinea pigs.RESULTS Treatment with TR extract resulted a 27.67% decrease in melanogenesis while whole black soybean showed 5.3% decrease at mouse melanoma cell line.Colorimetric analysis showed a significantly lower depigmenting value by day 14 following treatment with TR in UVB-irradiated guinea pigs the dorsal skin,indicating that TR produced a depigmentation effect.By staining with Hematoxylin-Eosin staing and Fontana-Masson stain,we found that the TR-treated group had more effect histopathologically in epidermal melanin production than resveratrol or rice alone-treated group.TR was associated with reduction in the levels of microphthalmia-associated transcription factor(MITF),and downregulation of tyrosinase and tyrosinase-related protein(TRP-1)expression,leading to inhibit epidermal melanin production by Western blotting analysis.CONCLUSION This study suggests that the testa of R.nulubilis may be a promising candidate in regulating skin pigmentation with UVB exposure. 展开更多
关键词 Rhynchosia nulubilis WHITENING trp-1 UVB MELANOMA
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厚朴麻黄汤对哮喘小鼠气道炎症及TRPA1,TRPV1 mRNA与蛋白表达的影响 被引量:18
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作者 胡方媛 范玉浩 +2 位作者 范欣生 岳勤霏 刘娟 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期37-42,共6页
目的:探讨厚朴麻黄汤对哮喘小鼠气道炎症的效应及对瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1),TRPV1 mRNA与蛋白表达的影响。方法:将60只雌性Balb/c小鼠随机分为6组,分别为空白组、模型组、厚朴麻黄汤低、中、高(7,14,28 g·kg^-1)剂量组和地... 目的:探讨厚朴麻黄汤对哮喘小鼠气道炎症的效应及对瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1),TRPV1 mRNA与蛋白表达的影响。方法:将60只雌性Balb/c小鼠随机分为6组,分别为空白组、模型组、厚朴麻黄汤低、中、高(7,14,28 g·kg^-1)剂量组和地塞米松组(0.0024 g·kg^-1),每组10只。复制卵蛋白(OVA)致敏及激发小鼠哮喘模型。检测各组小鼠气道反应性,以不同浓度氯化乙酰胆碱(ACh)雾化吸入激发后增强呼气间歇(Penh)值表示,观察各组小鼠肺组织病理学改变,外周血嗜酸性粒细胞数(EOS),支气管肺泡灌洗液(BALF)中EOS百分比的变化。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素(IL)-4,IL-13,前列腺素D2(PGD2),P物质(SP),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织TRPA1,TRPV1 mRNA与蛋白表达。结果:与正常组比较,给予质量浓度为12.5,25,50 g·L-1ACh雾化吸入后,模型组小鼠Penh明显上升(P<0.05,P<0.01);肺病理显示支气管及管壁周围有大量炎症细胞浸润,支气管黏膜水肿、增厚,黏液分泌增多;外周血中EOS数量及BALF中EOS百分比明显升高(P<0.01)。BALF中IL-4,IL-13,PGD2和SP水平以及肺组织中TRPA1,TRPV1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各给药组Penh明显降低(P<0.05,P<0.01),肺组织病理损伤改善,外周血中EOS数量及BALF中EOS百分比显著降低(P<0.01);BALF中IL-4,IL-13,PGD2和SP水平以及肺组织中TRPA1,TRPV1 mRNA与蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:厚朴麻黄汤可以改善哮喘小鼠气道炎症、降低气道反应性,其机制除降低Th2相关的细胞因子水平外,可能也与调控TRPA1,TRPV1mRNA与蛋白表达及降低相关神经因子水平有关。 展开更多
关键词 厚朴麻黄汤 哮喘 气道炎症 瞬时受体电位通道A1 瞬时受体电位通道V1
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类黄酮和维生素的抗突变研究 被引量:13
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作者 范远景 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期18-22,共5页
目的 : 比较类黄酮、维生素和咖啡碱等对不同致突变物的抗突变活性特征、作用及影响。方法 : 用改进型的 Ames试验方法、鼠伤寒沙门氏菌 (Salmonella tyhimurim)的变异种 TA系列菌株、直接致突变物的 1 -硝基芘 (1 -NP)和间接致突变... 目的 : 比较类黄酮、维生素和咖啡碱等对不同致突变物的抗突变活性特征、作用及影响。方法 : 用改进型的 Ames试验方法、鼠伤寒沙门氏菌 (Salmonella tyhimurim)的变异种 TA系列菌株、直接致突变物的 1 -硝基芘 (1 -NP)和间接致突变物的色氨酸热解产物 (Trp-P-1 )对测试物进行抗突变效果的比较。结果 : 植物性食物中富含的黄烷醇 (儿茶素 )类、黄酮醇类、酚酸类对Trp-P-1比 1 -NP的抗突变活性高 ;维生素 C、B族和 A对 1 -NP的抗突变性高于类黄酮物质 ,而对Trp-P-1的抗突变性则较低 ,但均有抗突变的剂量效应关系 ;咖啡碱与儿茶素合并使用时对 Trp-P-1的致突变有拮抗现象作用。结论 : 类黄酮对抗突变有较好的作用 ;维生素有辅助和互补作用 ; 展开更多
关键词 儿茶素 黄酮醇 酚酸 维生素 咖啡碱 抗突变
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TRP-1编码基因反义核酸对黑素细胞增殖及功能的影响 被引量:7
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作者 李春英 高天文 +4 位作者 李廷慧 孙东杰 李强 高鸽 刘玉峰 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期68-70,共3页
目的构建酪氨酸相关蛋白-1(TRP-1)反义真核表达载体并转染TRP-1高表达的黑素细胞及恶性黑素瘤细胞,进一步研究其对黑素细胞及恶性黑素瘤细胞增殖及功能的影响。方法将TRP-1基因反向亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1,转染黑素细胞及恶性黑... 目的构建酪氨酸相关蛋白-1(TRP-1)反义真核表达载体并转染TRP-1高表达的黑素细胞及恶性黑素瘤细胞,进一步研究其对黑素细胞及恶性黑素瘤细胞增殖及功能的影响。方法将TRP-1基因反向亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1,转染黑素细胞及恶性黑素瘤细胞。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TRP-1mRNA水平的变化,免疫印迹法检测TRP-1蛋白水平的改变。通过流式细胞仪检测细胞周期的变化,并用L-多巴测定酪氨酸酶活性的改变。结果成功构建重组反义表达载体pcDNA3.1/TRP-1(-),转染细胞稳定表达TRP-1反义核酸。RT-PCR提示TRP-1mRNA水平显著下降,免疫印迹提示其TRP-1蛋白表达水平降低。流式细胞检测表明反义TRP-1转染细胞发生细胞周期G1期阻滞。转染组黑素细胞及黑素瘤细胞酪氨酸酶活性抑制率分别达46%和54%。结论TRP-1在黑素细胞及黑素瘤细胞的增殖及功能方面发挥重要作用,TRP-1反义核酸转染细胞细胞周期受到阻滞,酪氨酸酶活性明显降低。 展开更多
关键词 trp-1编码基因 反义核酸 细胞增殖 细胞功能 黑色素瘤 黑素细胞
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N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXCL8-CXCR1/2及TRPV1神经元敏感性的影响 被引量:3
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作者 王萍 农开旭 邢春蕊 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期2176-2181,共6页
目的探究N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXC趋化因子配体(CXCL)8-CXC趋化因子受体(CXCR)1/2及瞬时受体电位通道蛋白(TRP)V1神经元敏感性的影响。方法选取80只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(NO)组、模型(MO)组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组... 目的探究N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXC趋化因子配体(CXCL)8-CXC趋化因子受体(CXCR)1/2及瞬时受体电位通道蛋白(TRP)V1神经元敏感性的影响。方法选取80只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(NO)组、模型(MO)组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组、急支糖浆(ES)组,每组20只,对MO组、NAC组、ES组进行支气管哮喘建模,建模成功后,NAC组、ES组每天分别于腹腔内注射2 ml N-乙酰半胱氨酸注射液、急支糖浆灌胃10 g/kg剂量,NO组、MO组同期灌胃同体积生理盐水,通过苏木素-伊红(HE)染色法检测肺组织病理形态、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹检测血清及肺组织中CXCL8、CXCR1、CXCR2、TRPV1含量、mRNA及蛋白表达,并分析N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXCL8-CXCR1/2及TRPV1神经元敏感性。结果与NO组相比,MO组咳嗽次数明显增加(P<0.05),而NAC组、ES组与MO组相比,其咳嗽次数明显降低(P<0.05),且NAC组比ES组降低明显(P<0.05);与NO组相比,MO组细支气管管腔、肺泡腔内可见渗出液、脱落的上皮细胞等,远端肺泡可见局部肺不张及周围肺大泡,且肺间质明显增厚,炎性细胞浸润明显,而与MO组比较,ES组、NAC组症状明显减少,部分肺间质的组织结构趋向正常,部分肺泡轻度扩张,且NAC组比ES组明显降低(P<0.05);与NO组对比,MO组CXCL8、CXCR1、CXCR2、TRPV1含量、mRNA及蛋白表达均明显升高(P<0.05),NAC组、ES组与MO组相比均显著降低(P<0.05),且NAC组比ES组明显降低(P<0.05)。结论N-乙酰半胱氨酸可以显著降低咳嗽次数,减少支气管哮喘症状,可使CXCL8-CXCR1/2及TRPV1神经元敏感性显著降低。 展开更多
关键词 N-乙酰半胱氨酸 支气管哮喘 CXC趋化因子配体(CXCL)8 CXC趋化因子受体(CXCR)1 CXCR2 瞬时受体电位通道蛋白(trp)V1
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