紫杉醇诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及对端粒酶活性的影响 被引量：12

1

作者 黄泽亮 周曦 +3 位作者 陈忠东 郑大伟 张少宏 关午 《中国妇产科临床杂志》 2005年第3期196-199,共4页

目的　研究紫杉醇对人宫颈癌Hela细胞的作用。方法　将紫杉醇处理Hela细胞后,用MTT法测定宫颈癌Hela细胞的生长抑制率。光镜下观察细胞凋亡形态的改变。流式细胞仪和原位末端标记技术检测细胞周期及细胞凋亡率,流式细胞仪检测bcl- 2水平... 目的　研究紫杉醇对人宫颈癌Hela细胞的作用。方法　将紫杉醇处理Hela细胞后,用MTT法测定宫颈癌Hela细胞的生长抑制率。光镜下观察细胞凋亡形态的改变。流式细胞仪和原位末端标记技术检测细胞周期及细胞凋亡率,流式细胞仪检测bcl- 2水平,TRAP法测定端粒酶活性的变化。结果　0 0 1～1μmol/L的紫杉醇能引起Hela细胞的凋亡。表现为Gz/M期阻滞,且呈时间依赖性及剂量依赖性。紫杉醇在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调和bcl- 2表达水平下降。结论　紫杉醇诱导宫颈癌Hela细胞凋亡,并抑制端粒酶活性,bcl- 2参与了紫杉醇诱导的宫颈癌细胞凋亡过程中端粒酶活性的调控。这一机制将为临床治疗提供理论依据。 展开更多

关键词 端粒酶活性 紫杉醇诱导 HELA细胞凋亡 人宫颈癌Hela细胞 HELA细胞凋亡 流式细胞仪检测 bcl-2表达 原位末端标记 诱导细胞凋亡 生长抑制率 细胞凋亡率 trap法 mol/L 剂量依赖性 时间依赖性 癌细胞凋亡 MTT法 镜下观察 细胞周期

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TRAP结合液体闪烁计数法半定量检测端粒酶活性 被引量：4

2

作者 吴成秋 陈雯 +1 位作者 张桥 万德森 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 1999年第5期213-216,共4页

本文介绍一种端粒酶检测方法，该方法是将 Ｔ Ｒ Ａ Ｐ法在 Ｐ Ｃ Ｒ 过程中引入３ Ｈｄ Ｃ Ｔ Ｐ，结合液闪计数ｃｐｍ 半定量分析端粒酶活性。应用该方法检测端粒酶阳性的 Ｃ Ｎ Ｅ２ 细胞和部分组织标本及 Ｒ Ｎａｓｅ Ａ 或加... 本文介绍一种端粒酶检测方法，该方法是将 Ｔ Ｒ Ａ Ｐ法在 Ｐ Ｃ Ｒ 过程中引入３ Ｈｄ Ｃ Ｔ Ｐ，结合液闪计数ｃｐｍ 半定量分析端粒酶活性。应用该方法检测端粒酶阳性的 Ｃ Ｎ Ｅ２ 细胞和部分组织标本及 Ｒ Ｎａｓｅ Ａ 或加热预处理后的对照标本，并与 Ｔ Ｒ Ａ Ｐ 法相比较，结果显示 Ｃ Ｎ Ｅ２ 细胞端粒酶阳性，１０ 个 Ｃ Ｎ Ｅ２ 细胞中仍可检到端粒酶，组织样品的端粒酶与文献值基本一致；放射性活性计数（ｃｐｍ） 与 Ｃ Ｎ Ｅ２ 细胞抽提液中端粒酶活性具有良好的线性关系；用 Ｒ Ｎａｓｅ Ａ 或加热处理后标本为阴性，ｃｐｍ 值接近阴性对照；批内和批间变异度分别为１１ ．６８ ％ 和２０９９ ％ 。该方法不需使用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ） 和放射自显影，简便快速，当天可观察结果，并具有灵敏度高、特异性和批内重复性好之特点。 展开更多

关键词 端粒酶 定量分析 trap法 液体闪烁计数 肿瘤

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银染-TRAP法检测端粒酶活性的建立 被引量：4

3

作者 何晓松 俞军 +1 位作者 戴美红 高长明 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期258-259,共2页

目的建立检测端粒酶活性的改良银染ＴＲＡＰ法（端粒重复序列扩增法）。方法用银染ＴＲＡＰ法测定人肿瘤细胞株和经加热处理的阴性对照细胞的端粒酶活性。结果肿瘤细胞株的端粒酶活性阳性率为１００％，１０、１００、５００个Ｈｅ... 目的建立检测端粒酶活性的改良银染ＴＲＡＰ法（端粒重复序列扩增法）。方法用银染ＴＲＡＰ法测定人肿瘤细胞株和经加热处理的阴性对照细胞的端粒酶活性。结果肿瘤细胞株的端粒酶活性阳性率为１００％，１０、１００、５００个Ｈｅｌａ细胞均为阳性，加热处理后的细胞端粒酶活性均为阴性。结论提示与核素ＴＲＡＰ法相比较，银染ＴＲＡＰ法是同样特异、敏感，且更快速的端粒酶活性的检测方法，该方法可成为恶性肿瘤的诊断指标之一。 展开更多

关键词 端粒酶 银染 trap法 肿瘤 诊断

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喉鳞癌端粒酶活性与细胞周期蛋白D_1的表达及其意义 被引量：2

4

作者 于子龙 王薇 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期286-288,共3页

目的 :了解喉鳞癌端粒酶活性的表达情况及其与细胞周期蛋白D1(cyclinD1)过度表达的关系。方法 :分别应用TRAP法和免疫组化法对 38例喉鳞癌组织及相关喉粘膜组织的端粒酶活性和cyclinD1的表达情况进行检测。结果 :喉鳞癌病例中 82 % (31/... 目的 :了解喉鳞癌端粒酶活性的表达情况及其与细胞周期蛋白D1(cyclinD1)过度表达的关系。方法 :分别应用TRAP法和免疫组化法对 38例喉鳞癌组织及相关喉粘膜组织的端粒酶活性和cyclinD1的表达情况进行检测。结果 :喉鳞癌病例中 82 % (31/ 38)有端粒酶活性表达 ,5 0 % (19/ 38)有cyclinD1过度表达 ;两者表达均与患者的年龄、肿瘤部位、T分期、病理学分级无关 (P >0 .0 5 ) ,而端粒酶表达与肿瘤的临床分期有关 (P <0 .0 5 ) ,cyclinD1表达与肿瘤的临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ,喉正常粘膜中两者均无表达 ;喉鳞癌组织中两者均表达 18例 ,两者密切相关 (P <0 .0 5 )。结论 :端粒酶的激活在喉鳞癌组织中普遍存在 ,cyclinD1过度表达可能是喉鳞癌端粒酶激活的重要机制之一。 展开更多

关键词 喉鳞癌 端粒酶 细胞周期蛋白D1 trap法 免疫组化法

原文传递

端粒酶与胃癌相关性研究进展 被引量：4

5

作者 姚伟明 王波 姒健敏 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2007年第1期92-94,共3页

关键词 端粒酶活性 癌相关性 胃癌 肿瘤细胞表达 细胞提取物 trap法 医学研究 高度敏感

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肺癌组织中端粒酶活性研究 被引量：2

6

作者 黄礼年 汪和桥 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2001年第1期13-14,共2页

目的　探讨端粒酶作为原发性肺癌肿瘤标记物的可能性。方法　采用 TRAP法检测了 81例纤维支气管镜活检组织端粒酶活性 ,包括 50例肺癌组织 ,2 4例慢性粘膜炎组织 ,7例化生、不典型增生组织。结果　 50例原发性肺癌组织中 ,有 41例端粒... 目的　探讨端粒酶作为原发性肺癌肿瘤标记物的可能性。方法　采用 TRAP法检测了 81例纤维支气管镜活检组织端粒酶活性 ,包括 50例肺癌组织 ,2 4例慢性粘膜炎组织 ,7例化生、不典型增生组织。结果　 50例原发性肺癌组织中 ,有 41例端粒酶活性表达阳性 ,其阳性率为 82 % ;7例不典型增生组织中端粒酶活性表达阳性 4例 ,2 4例慢性粘膜炎标本中 ,2例端粒酶表达阳性。结论　端粒酶是一种特异性的恶性肿瘤基因标志物。 展开更多

关键词 肺癌 端粒酶活性 trap法 肺肿瘤 重复序列扩大技术

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Bootstrap法验证有限抽样法多元回归模型 被引量：1

7

作者 丁俊杰 焦正 +2 位作者 李中东 施孝金 钟明康 《中国卫生统计》 CSCD 北大核心 2004年第5期289-292,共4页

目的　建立健康志愿者口服环孢素A(cyclosporinA ,CsA)微乳制剂药时曲线下面积 (AUC0 -12 )与药物不同时间浓度点之间的多元回归模型 ,以自举法 (Bootstrap)对该多元回归模型进行验证。 方法　 2 0名健康志愿者单剂量口服CsA微乳制剂 ,... 目的　建立健康志愿者口服环孢素A(cyclosporinA ,CsA)微乳制剂药时曲线下面积 (AUC0 -12 )与药物不同时间浓度点之间的多元回归模型 ,以自举法 (Bootstrap)对该多元回归模型进行验证。 方法　 2 0名健康志愿者单剂量口服CsA微乳制剂 ,以有限抽样法 (LimitedSamplingStrategy ,LSS)建立回归数学模型 ,以Bootstrap法对多元回归模型进行参数估计、准确度检验及计算 95 %置信区间 (CI)。结果　Bootstrap法估算的回归模型参数分别为M1=2 662、M2 =6 14 7、Intercept =966 62。模型准确度参数分别为Adjr2 =0 9495、rmse =40 5 0 6、AIC =2 42 92、BIC =2 45 92。结论　以Bootstrap法对LSS法建立的多元回归模型进行参数估计、准确度检验准确性好 ,可以作为LSS模型验证的方法之一。 展开更多

关键词 trap法 健康志愿者 LSS 口服 抽样法 制剂 单剂量 有限 参数估计 检验准确性

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鼻咽癌细胞端粒酶的检测 被引量：2

8

作者 唐发清 谌兵来 +1 位作者 范学工 赖金平 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 1998年第4期219-221,共3页

目的：端粒酶是一种逆转录ＲＮＡ酶，与肿瘤的发生、发展和预后有关，本文探讨端粒酶与鼻咽癌的关系。方法：利用ＴＲＡＰ（ｔｅｌｏｍｅｒｉｃｒｅｐｅａｔａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｔｏｃｏｌ）法对端粒酶的检测方法作了探讨... 目的：端粒酶是一种逆转录ＲＮＡ酶，与肿瘤的发生、发展和预后有关，本文探讨端粒酶与鼻咽癌的关系。方法：利用ＴＲＡＰ（ｔｅｌｏｍｅｒｉｃｒｅｐｅａｔａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｔｏｃｏｌ）法对端粒酶的检测方法作了探讨，并检测了鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１、鼻咽癌活检组织和正常鼻咽粘膜组织端粒酶的活性。结果：鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１和鼻咽癌活检组织端粒酶为阳性，正常鼻咽粘膜组织为阴性。结论：端粒酶在鼻咽癌细胞株和活检组织中酶活性高，端粒酶的检测可为鼻咽癌的诊断、治疗、预后提供参考。 展开更多

关键词 端粒酶 鼻咽肿瘤 检测 trap法

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端粒酶活性在人膀胱肿瘤组织中表达的临床意义 被引量：1

9

作者 钟惟德 胡建波 +8 位作者 蔡岳斌 曾广翘 戴奇山 肖聪勤 王良圣 魏鸿蔼 高劲松 刘建康 黄少华 《临床泌尿外科杂志》 2002年第5期231-232,共2页

目的 :探讨不同临床病理类型的膀胱肿瘤及癌旁组织端粒酶活性表达及临床意义。方法 :以改良TRAP法测定 91例膀胱肿瘤组织标本端粒酶活性表达。结果 :83例膀胱移行细胞癌组织中 78例检测到端粒酶活性 ,阳性率为 94%,其对应的癌旁组织也有... 目的 :探讨不同临床病理类型的膀胱肿瘤及癌旁组织端粒酶活性表达及临床意义。方法 :以改良TRAP法测定 91例膀胱肿瘤组织标本端粒酶活性表达。结果 :83例膀胱移行细胞癌组织中 78例检测到端粒酶活性 ,阳性率为 94%,其对应的癌旁组织也有 14%的检出率。 8例膀胱乳头状瘤组织中 4例检测到端粒酶活性 ,阳性率为 5 0 %,其对应的癌旁组织检出率为 12 %。端粒酶活性在不同临床病理类型的膀胱肿瘤及癌旁组织中表达差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :膀胱肿瘤及癌旁组织端粒酶活性的检测对肿瘤的诊断有重要意义。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 端粒酶 聚合酶链反应 trap法 端粒酶活性 诊断 膀胱癌

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端粒重复扩增生物发光分析法定量检测端粒酶活性

10

作者 鲁文红 何敏 +1 位作者 余红平 徐顺清 《实用医学杂志》 CAS 2007年第4期448-451,共4页

目的:建立端粒酶活性定量检测的TRAP-发光分析法。方法:细胞株、组织样品与引物孵浴后,释放的焦磷酸盐由硫酸化酶作用转变为ATP,用荧光素酶生物发光系统检测发光信号;比较TRAP-发光分析法与TRAP-ELISA的结果。结果:TRAP-发光分析法的线... 目的:建立端粒酶活性定量检测的TRAP-发光分析法。方法:细胞株、组织样品与引物孵浴后,释放的焦磷酸盐由硫酸化酶作用转变为ATP,用荧光素酶生物发光系统检测发光信号;比较TRAP-发光分析法与TRAP-ELISA的结果。结果:TRAP-发光分析法的线性范围在2～1000个细胞之间。检测结果与TRAP-SYBR Green染色一致,与TRAP-ELISA法显著相关(r2=0.992,P<0.001)。结论:TRAP-发光分析法是一种稳定、快速、实际可行的端粒酶活性的定量分析方法。 展开更多

关键词 端粒 末端转移酶 trap法 生物发光 焦磷酸盐

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溴化乙锭-TRAP法检测端粒酶活性(英文)

11

作者 SAIDA.Saleh 孙建龙 +3 位作者 谢匡诚 陈昭 张伯生 任大明 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期568-571,共4页

端粒酶是一种核蛋白，在真核生物体内，通过将端粒重复顺序转移到染色体末端而维持染色体的稳定．端粒酶活性存在于生殖细胞和永生癌细胞，但在正常细胞中却极低乃至无法检测．我们使用ＥＢ染色简化了端粒酶活性检测的传统的ＴＲＡＰ（... 端粒酶是一种核蛋白，在真核生物体内，通过将端粒重复顺序转移到染色体末端而维持染色体的稳定．端粒酶活性存在于生殖细胞和永生癌细胞，但在正常细胞中却极低乃至无法检测．我们使用ＥＢ染色简化了端粒酶活性检测的传统的ＴＲＡＰ（Ｔｅｌｏｍ ｅｒｉｃ Ｒｅｐｅａｔ Ａｍ ｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｐｒｏｔｏｃｏｌ）法．结果表明，对粗抽提物而言，ＥＢ染色具有足够的可信度和灵敏度，同时又经济省时。 展开更多

关键词 trap法 端粒酶 溴化乙锭 酶活性

原文传递

端粒酶活性检测的几种方法

12

作者 张敏 奚耕思 周艳妮 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期68-71,共4页

端粒酶活性检测方法的不断发展改进为癌症的诊断治疗以及人们对衰老的进一步研究提供了新途径和新思路。近年来端粒酶活性的检测方法有:(1)基本方法。(2)TRAP法。(3)改良的TRAP法。(4)间接检测法等。

关键词 端粒酶 癌症 活性检测 检测方法 trap法 间接检测法

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端粒,端粒酶与肝脏疾病 被引量：1

13

作者 时阳 朴明淑 朴云峰 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2000年第4期195-197,共3页

关键词 肝疾病 端粒 端粒酶 trap法

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TRAP法测定胃癌端粒酶的意义

14

作者 张文平 张瑞 +1 位作者 郭辉 罗静 《山西医科大学学报》 CAS 2002年第6期495-495,502,共2页

目的　观察良恶性胃病端粒酶活性的表达。方法　TRAP法测定端粒酶活性。结果　胃癌组端粒酶阳性率为80 8%(2 1/2 6 ) ,慢性萎缩性胃炎伴中、重度不典型增生端粒酶阳性率为 44 4 %(8/18) ,慢性浅表性胃炎组无端粒酶表达 (0 /13) ,三组... 目的　观察良恶性胃病端粒酶活性的表达。方法　TRAP法测定端粒酶活性。结果　胃癌组端粒酶阳性率为80 8%(2 1/2 6 ) ,慢性萎缩性胃炎伴中、重度不典型增生端粒酶阳性率为 44 4 %(8/18) ,慢性浅表性胃炎组无端粒酶表达 (0 /13) ,三组间差异显著 (P >0 0 5 )。结论　胃癌端粒酶活性高度表达 ,癌前病变组已有表达端粒酶活性 ,而正常组织不表达端粒酶活性 ,提示端粒酶可作为胃肠道肿瘤诊断的有力生物标志 ,对端粒酶活性阳性癌前病变进行监测有助于早期发现胃癌。 展开更多

关键词 trap法 测定 胃肿瘤 癌前状态 端粒酶

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端粒酶在宫颈癌诊断上的应用及常见问题 被引量：1

15

作者 郑庆玲 顾红光 《现代肿瘤医学》 CAS 2004年第3期265-266,共2页

端粒酶在宫颈癌中有高比例的表达 ,因此可能是一个很好的肿瘤分子标记物 ,可用做宫颈癌的辅助诊断。但在临床中用TRAP法检测端粒酶活性时 ,会由于各种原因而导致结果误差 ,如能够注意到这些问题 ,将提高端粒酶检测的正确性。

关键词 宫颈癌 端粒 末端转移酶 trap法 诊断

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前列腺癌穿刺活检组织中端粒酶活性检测及意义

16

作者 邓春华 丘少鹏 +4 位作者 陈炜 胡红星 陈辉熔 陈巧伦 陈小君 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期1-2,5,共3页

目的 :探讨前列腺穿刺活检标本中端粒酶 (TE)活性检测在前列腺癌 (PCA)诊断、鉴别诊断及评估PCA生物学行为中的意义。方法 :应用端粒重复片段扩增法 (TRAP法 )检测疑为前列腺癌患者的前列腺穿刺活检标本的TE活性 ,并比较TE活性水平与PC... 目的 :探讨前列腺穿刺活检标本中端粒酶 (TE)活性检测在前列腺癌 (PCA)诊断、鉴别诊断及评估PCA生物学行为中的意义。方法 :应用端粒重复片段扩增法 (TRAP法 )检测疑为前列腺癌患者的前列腺穿刺活检标本的TE活性 ,并比较TE活性水平与PCA病理分化程度及转移情况的关系。结果 :PCA组织中TE活性明显高于前列腺增生 (BPH)组织。PCA组织中TE活性水平与其病理分化程度及转移情况相关。结论 :PCA患者的前列腺穿刺活检组织中的TE活性显著高于BPH者 ,且与其病理分化程度及转移情况相关。提示TE可能成为PCA早期诊断及鉴别诊断的一项新的分子瘤标 ,并可能与PCA的生物学行为相关。 展开更多

关键词 前列腺癌 前列腺良性增生 端粒酶 trap法 诊断

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油松端粒酶活性的测定方法

17

作者 任兰芳 慕莹 +5 位作者 荀志丽 胡旭东 要笑云 陆海 李凤兰 刘頔 《中国农学通报》 CSCD 2014年第13期10-14,共5页

端粒酶具有修复延伸端粒的功能,对于维持真核生物染色体的完整性至关重要,因此对其活性的测定有着重要意义。通过大量的摸索实验,将常用于动物细胞端粒酶活性检测的端粒末端重复序列扩增法(TRAP法)运用到对植物材料的检测中来,对北方常... 端粒酶具有修复延伸端粒的功能,对于维持真核生物染色体的完整性至关重要,因此对其活性的测定有着重要意义。通过大量的摸索实验,将常用于动物细胞端粒酶活性检测的端粒末端重复序列扩增法(TRAP法)运用到对植物材料的检测中来,对北方常见木本植物油松进行了端粒酶活性测定。基于TRAP法的原理,对体外延伸、引物选择、退火温度、电泳检测等实验条件进行优化。结果表明,油松端粒酶活性测定的最佳体外延伸条件为30℃延伸1 h,最适前导链引物和反向引物分别为TS21和ACX,PCR退火温度为61.8℃,电泳检测使用Gene Finder核酸染料染色效果更好,建立了一种有效测定木本植物油松松针叶端粒酶活性的测定方法。 展开更多

关键词 油松 端粒酶 trap法 优化

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以改良TRAP法检测人膀胱肿瘤组织中端粒酶活性表达的临床意义

18

作者 钟惟德 曾广翘 +5 位作者 戴奇山 蔡岳斌 王良圣 魏鸿蔼 高劲松 刘建康 《广州医学院学报》 2002年第1期15-17,共3页

目的:探讨膀胱肿瘤及癌旁组织端粒酶活性表达及临床意义。方法:以改良ＴＲＡＰ法测定９１例膀胱癌组织标本端粒酶活性表达。结果:８３例 膀胱移行细胞癌组织中 ７８例检出端粒酶活性,阳性率为 ９４%,其对应的癌旁组织也有１４%的检出率... 目的:探讨膀胱肿瘤及癌旁组织端粒酶活性表达及临床意义。方法:以改良ＴＲＡＰ法测定９１例膀胱癌组织标本端粒酶活性表达。结果:８３例 膀胱移行细胞癌组织中 ７８例检出端粒酶活性,阳性率为 ９４%,其对应的癌旁组织也有１４%的检出率。８例膀胱乳头状瘤组织中４例检出端粒酶活性,阳性率为 ５０%,其对应的癌旁组织检出率为１２%,端粒酶活性在不同临床病理类型的膀胱肿瘤及癌旁组织中表达无显著差异(Ｐ＞０．０５)。结论:应用非放射性的银染方法对端粒酶的活性进行检测,图像清晰、简便、安全,易于临床推广。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 端粒酶 trap法

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端粒与端粒酶和口腔颌面部肿瘤

19

作者 付光新 梁尚争 《泸州医学院学报》 2006年第2期160-162,共3页

关键词 端粒酶活性 检测 口腔颌面部肿瘤 恶性肿瘤 trap法 肿瘤标志物 高度敏感 研究发现 发生发展 抗癌靶点 肿瘤发生 端粒

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端粒酶活性的定量分析方法

20

作者 何敏 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 2000年第6期321-324,共4页

端粒酶是目前已知最为广谱的肿瘤分子标记物,并可能成为今后肿瘤诊断和预后判断的新指标以及肿瘤治疗的新靶点。对端粒酶活性的测定.在TRAP法的基础上发展建立了各种定量和半定量方法。

关键词 端粒酶 定量分析 肿瘤 trap法

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