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基于“TLR4/NF-kB”信号通路研究“加味四妙丸”治疗急性痛风性关节炎大鼠的作用机制 被引量：33
1
作者 袁晓 范永升 +2 位作者 谢冠群 朱飞叶 冯晓红 《浙江中医药大学学报》 CAS 2017年第1期17-24,共8页
[目的]观察"加味四妙丸"治疗急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)大鼠的疗效,并基于"TLR4/NF-kB"信号通路探讨"加味四妙丸"作用机制。[方法]108只SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、秋水仙碱... [目的]观察"加味四妙丸"治疗急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)大鼠的疗效,并基于"TLR4/NF-kB"信号通路探讨"加味四妙丸"作用机制。[方法]108只SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、"加味四妙丸"低、中、高剂量组,每组18只。除正常组外,其余大鼠参照Coderre造模方法膝关节腔注射尿酸钠悬浊液制作AGA模型,治疗4d后,计算各时间点受试关节肿胀指数,光学显微镜观察受试关节滑膜组织病理学变化,采用ELISA法检测关节腔冲洗液IL-1β、TNF-α的含量,免疫组化法检测关节滑膜组织TLR4、NF-kB、p-NF-kB蛋白表达,RT-PCR法检测滑膜组织TLR4m RNA表达。[结果]与正常组比较,模型组大鼠膝关节肿胀指数显著升高(P<0.01),关节滑膜组织炎性改变明显,滑膜组织中TLR4、NF-kB、p-NF-kB蛋白表达量和TLR4m RNA表达量显著上调(P<0.01),关节腔冲洗液中IL-1β、TNF-α含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,"加味四妙丸"中、高剂量组大鼠治疗后关节肿胀指数显著下降(P<0.01),关节滑膜组织炎性改变明显减轻,滑膜组织中TLR4、NF-kB、p-NFkB蛋白表达量和TLR4m RNA表达量均显著下调(P<0.01),关节腔冲洗液中IL-1β、TNF-α含量显著下降(P<0.01)。[结论]"加味四妙丸"可能通过抑制"TLR4/NF-kB"信号通路,从而抑制IL-1β、TNF-α的产生,起到治疗AGA的作用,且其疗效与药物剂量有一定相关性。 展开更多
关键词 加味四妙丸 AGA tlr4/nf-kb信号通路 剂量 范永升 名医经验
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TLR4/NF-κB通路对非酒精性脂肪肝的作用机制 被引量：10
2
作者 王晓伟 黄瓅 陈伟 《中华全科医学》 2014年第3期384-385,F0003,共3页
目的探讨TLR4/NF-κB信号通路调控铁调素在非酒精性脂肪肝发病中的作用机制。方法 60只SD大鼠,随机分为正常组、模型组和干预组。模型组予高脂饮食制备NAFLD大鼠模型,以TLR4/NF-κB信号通路抑制剂腹腔注射干预组大鼠。处死各组大鼠,观... 目的探讨TLR4/NF-κB信号通路调控铁调素在非酒精性脂肪肝发病中的作用机制。方法 60只SD大鼠,随机分为正常组、模型组和干预组。模型组予高脂饮食制备NAFLD大鼠模型,以TLR4/NF-κB信号通路抑制剂腹腔注射干预组大鼠。处死各组大鼠,观察各组肝组织病理变化,检测TLR4、NF-κB蛋白的表达及铁调素mRNA水平的表达。结果模型组大鼠肝脏呈现典型脂肪性变,其TLR4、NF-κB蛋白表达及铁调素mRNA水平显著高于正常组(P<0.05)。干预组大鼠肝组织病理改变显著改善,TLR4、NF-κB蛋白表达及铁调素mRNA水平显著下降(P<0.05)。结论 TLR4/NF-κB信号通路的异常激活可能上调铁调素表达,参与了非酒精性脂肪肝的发生。 展开更多
关键词 LR4 nf kb信号通路 铁调素 非酒精性脂肪肝
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黄连解毒汤有效活性成分靶向调控TLR4/NF-κB信号通路的作用机理研究 被引量：4
3
作者 李翀 胡锐 +2 位作者 宋斐 吴思慧 翁书和 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2017年第6期2-6,共5页
目的:阐明黄连解毒汤有效活性成分对炎症级联反应信号传导通路TLR4/NF-κB的阻断作用。方法:利用脂质体转染试剂Li-pofectin 2000将含有h TLR4(human toll-like receptor 4)基因和NF-κB-Luc报告基因的质粒转染入人胚肾细胞(HEK293细... 目的:阐明黄连解毒汤有效活性成分对炎症级联反应信号传导通路TLR4/NF-κB的阻断作用。方法:利用脂质体转染试剂Li-pofectin 2000将含有h TLR4(human toll-like receptor 4)基因和NF-κB-Luc报告基因的质粒转染入人胚肾细胞(HEK293细胞),加入不同浓度和配伍组成的药物刺激后再检测细胞荧光素酶表达水平,筛选出能够有效阻断TLR4/NF-κB信号传导通路的黄连解毒汤有效组分;进一步选择Caco-2细胞单层模型研究转运蛋白对黄连解毒汤有效活性成分的吸收和转运机理。结果:黄连解毒汤中小檗碱和黄芩苷活性单体能阻断TLR4介导的信号通路的传导,显著抑制NF-κB因子的生成;摄取实验中,黄芩苷和小檗碱配伍组能够显著提高小檗碱活性单体在Caco-2细胞中摄取量[(1.23±0.03)ng/μg],加入多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-as-sociated protein 2,MRP2)抑制剂MK-571之后,小檗碱的摄取量有显著提高[(1.05±0.09)ng/μg],但是在加入P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂维拉帕米后,虽然有黄芩苷存在,小檗碱的摄取量未见提高[(0.53±0.05)ng/μg]。结论:通过TLR4受体介导NF-κB通路抑制剂筛选模型,筛选出黄连解毒汤内小檗碱能够有效阻断TLR4/NF-κB信号通路的传导,在小檗碱的跨膜转运的过程中不存在肠道转运蛋白P-gp的作用,但存在MRP2的外排作用,这可能是因为黄连解毒汤中配伍黄芩苷可抑制MRP2蛋白活性,从而使Caco-2细胞中小檗碱被外排的量减少,增加小檗碱的吸收量。 展开更多
关键词 黄连解毒汤 tlr4/nf-κB信号通路 转运蛋白 抑制剂
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致病性大肠杆菌HPI对TLR4/NF-κB信号通路中关键分子表达的影响 被引量：2
4
作者 刘超英 王微娜 +4 位作者 单春兰 高洪 严玉霖 富国文 赵汝 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1418-1423,共6页
为探讨致病性大肠杆菌HPI对TLR4/NF-κB信号通路中关键分子表达的影响,本研究从猪外周血分离中性粒细胞,分别用HPI阳性株和HPI阴性株的大肠杆菌感染细胞,于大肠杆菌感染后的第2、6、12、24小时收集细胞,应用荧光定量PCR检测细胞内TLR4、... 为探讨致病性大肠杆菌HPI对TLR4/NF-κB信号通路中关键分子表达的影响,本研究从猪外周血分离中性粒细胞,分别用HPI阳性株和HPI阴性株的大肠杆菌感染细胞,于大肠杆菌感染后的第2、6、12、24小时收集细胞,应用荧光定量PCR检测细胞内TLR4、NF-κB、My D88、IκB-αm RNA表达水平,ELISA检测NF-κB、IκB-α及炎性因子TNF-α和IL-1的含量变化。结果显示,与对照组相比,大肠杆菌感染后,TLR4/NF-κB信号通路中各基因的表达及炎性因子TNF-α和IL-1的含量普遍呈上调趋势,均高于对照组,且HPI阳性组基本高于HPI阴性组。由此可知,大肠杆菌HPI对TLR4/NF-κB信号通路具有激活作用,其通过上调TLR4、NF-κB、My D88、IκB-α的表达而促进炎性因子TNF-α和IL-1的释放,诱发炎症反应。 展开更多
关键词 致病性大肠杆菌 强毒力岛 tlr4/nf-κB信号通路
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活血理肝汤通过LPS/TLR-4/NF-kB信号通路治疗NAFLD大鼠的机制探讨
5
作者 刘星 陶竹 +3 位作者 吕呈 张彤彤 张朕 王岩 《实用中医内科杂志》 2023年第9期42-45,I0007,I0008,共6页
目的 探讨活血理肝汤通过LPS/TLR-4/NF-kB信号通路防治NAFLD的机制。方法 30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和活血理肝汤组,每组10只。正常对照组给予普通饲料喂养;模型组和活血理肝汤组给予高脂饲料喂养。8周后经肝脏病理HE染色... 目的 探讨活血理肝汤通过LPS/TLR-4/NF-kB信号通路防治NAFLD的机制。方法 30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和活血理肝汤组,每组10只。正常对照组给予普通饲料喂养;模型组和活血理肝汤组给予高脂饲料喂养。8周后经肝脏病理HE染色确认造模成功,活血理肝汤组按照8.5g/(kg·d)进行灌胃,正常对照组和模型组使用相同体积生理盐水灌胃,持续8周。全自动生化分析仪测定各组大鼠血清血脂、肝功水平,HE染色和油红O染色观察各组大鼠肝脏组织形态与脂质沉积情况;酶联免疫吸附法检测各组大鼠肝脏白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平以及血清、肝脏、盲肠内容物的脂多糖(LPS)水平。Western blot法和荧光定量PCR法分别检测各组大鼠肝脏组织NF-κB和TLR4的蛋白和mRNA表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)和天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)水平显著升高,高密度脂蛋白(HDL-C)水平显著降低(P<0.05);肝细胞内可见大量大小不等的脂肪空泡,肝窦狭窄或消失,脂质沉积明显;肝脏IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平以及血清、肝脏、盲肠内容物中LPS水平均显著升高(P<0.05);肝脏TLR4和NF-κB的蛋白和mRNA表达均增高(P<0.05)。与模型组比较,活血理肝汤组大鼠血清TC、TG、LDL-C和AST、ALT水平显著降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05);肝细胞内脂肪空泡明显减少,肝窦狭窄有所缓解,脂质沉积情况有所改善;肝脏IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平和盲肠内容物、血清、肝脏LPS水平均显著降低(P<0.05);肝脏TLR4和NF-κB的蛋白和mRNA的表达均降低(P<0.05)。结论 活血理肝汤能够改善NAFLD大鼠血脂水平、减轻肝脏脂质沉积,降低炎症指标IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的水平,改善肝脏的内环境,并可能是通过LPS/TLR-4/NF-kB信� 展开更多
关键词 活血理肝汤 非酒精性脂肪性肝病 LPS/tlr4/nf-κB通路
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辽东楤木叶总皂苷对荷结肠癌细胞裸鼠移植瘤TLR-4/NF-κB信号通路及炎性因子的影响 被引量：1
6
作者 尹丽颖 肖洪彬 +4 位作者 敖鹏 张妍妍 梁雪 姜广坤 唐丹丽 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第24期152-157,共6页
目的:观察辽东楤木叶总皂苷(ETS)对荷瘤裸鼠人结肠癌HT-29移植瘤Toll样受体-4/核转录因子-κB(TLR-4/NF-κB)信号通路及血清中炎性因子的影响,从而探讨其抑瘤机制。方法:将人结肠癌HT-29细胞株接种于50只裸鼠的右腋部皮下,建立人结肠癌... 目的:观察辽东楤木叶总皂苷(ETS)对荷瘤裸鼠人结肠癌HT-29移植瘤Toll样受体-4/核转录因子-κB(TLR-4/NF-κB)信号通路及血清中炎性因子的影响,从而探讨其抑瘤机制。方法:将人结肠癌HT-29细胞株接种于50只裸鼠的右腋部皮下,建立人结肠癌异位皮下移植瘤的动物模型。将接种后的裸鼠随机分为5组,每组10只,即模型组,ETS低、中、高剂量组(37. 5,75,150 mg·kg-1),5-氟尿嘧啶组(20 mg·kg-1)。分组后2 d进行给药,5-氟尿嘧啶组腹腔注射给药,隔日1次; ETS低、中、高组给药;模型组给灌胃等体积的生理盐水;连续给药8周。眼眶取血,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1(IL-1);实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织中TLR-4,NF-κB mRNA表达水平;光学显微镜和透射电子显微镜下观察ETS对荷瘤裸鼠人结肠癌HT-29移植瘤形态学方面的影响。结果:病理组织学和超微病理学实验显示各给药组肿瘤组织均有不同程度的损伤,与模型组比较,ETS低、中、高剂量组及5-氟脲嘧啶组对荷瘤裸鼠人结肠癌移植瘤均有不同程度的抑制作用(P <0. 05,P <0. 01),4组抑瘤率分别是20. 14%,32. 43%,59. 56%,63. 58%;与模型组比较,ETS各剂量组TLR-4,NF-κB mRNA及TNF-α,IL-1水平表达明显降低(P <0. 05)。结论:ETS可有效抑制结肠癌肿瘤的生长,其机制可能与调控TLR-4/NF-κB信号通路,减少炎性因子表达有关。 展开更多
关键词 辽东楤木叶总皂苷 人结肠癌 荷瘤裸鼠 Toll样受体-4/核转录因子-κB(tlr-4/nf-κB)信号通路
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