乳腺癌发生模型MCF10各阶段细胞系中TIMP3基因启动子区甲基化分析 被引量：7

1

作者 杨举伦 David Klinkebiel +2 位作者 Michael J Boland Lin Tang Judith K Christman 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期73-77,共5页

目的探讨抑癌基因TIMP3失活与乳腺癌发生和进展的关系。方法用甲基化特异性PCR技术和亚硫酸盐测序技术检测乳腺癌发生模型MCF10的增生细胞系MCF10A、癌前细胞系MCF10AT、导管内癌细胞系MCF10DCIS.com、浸润癌细胞系MCF10CA1a和转移癌细... 目的探讨抑癌基因TIMP3失活与乳腺癌发生和进展的关系。方法用甲基化特异性PCR技术和亚硫酸盐测序技术检测乳腺癌发生模型MCF10的增生细胞系MCF10A、癌前细胞系MCF10AT、导管内癌细胞系MCF10DCIS.com、浸润癌细胞系MCF10CA1a和转移癌细胞系MCF10CA1d、MCF10CA1h中TIMP3启动子区甲基化状态。结果甲基化特异性PCR分析显示,在上述各细胞系中,TIMP3启动子区均呈高度甲基化状态。亚硫酸盐测序显示,在上述各细胞系中,测序区内的68个CG位点几乎全部发生了甲基化,且甲基化累及了绝大部分等位基因。结论TIMP3基因启动子区甲基化在乳腺癌的发生和进展中起重要作用,可能成为早期诊断乳腺癌和判断乳腺癌预后的分子生物学标记。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 MCF10模型 timp3基因 启动子 甲基化

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过表达TIMP3对肝癌细胞生物功能的影响 被引量：3

2

作者 曹丽 吴菲 +1 位作者 王晓霏 秦棪楠 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2023年第1期44-55,共12页

组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)在肝癌中的具体作用机制尚不明确。该文探讨了TIMP3在肝癌细胞中的表达及其对细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期的影响。通过q RT-PCR和Western blot检测肝癌细胞株(97H、97L和HUH7)和人正常肝细胞(LO2)中TI... 组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)在肝癌中的具体作用机制尚不明确。该文探讨了TIMP3在肝癌细胞中的表达及其对细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期的影响。通过q RT-PCR和Western blot检测肝癌细胞株(97H、97L和HUH7)和人正常肝细胞(LO2)中TIMP3的表达情况。将过表达TIMP3的质粒转染进97H和HUH7细胞,利用q RT-PCR和Western blot检测转染后细胞的TIMP3表达情况。通过MTT实验和活细胞工作站检测过表达TIMP3对肝癌细胞增殖的影响。此外,通过流式细胞术检测过表达TIMP3对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响,通过划痕实验检测表达TIMP3对肝癌细胞迁移的影响。最后,利用GESA软件进行基因富集分析以及Int Act数据库构建相互作用蛋白网络图对TIMP3相关生物学功能进行探索。研究结果表明,97H、97L和HUH7细胞中TIMP3的表达比LO2细胞中低。97H和HUH7细胞转染TIMP3质粒后RNA及蛋白水平明显升高,且过表达TIMP3可以促进细胞增殖,促进G1期向S期转化,抑制细胞凋亡,下调Bax的表达,上调Bcl-2、Bcl-xl的表达。总之,过表达TIMP3表达明显促进肝癌细胞增殖,抑制细胞凋亡,且TIMP3相关信号通路及存在相互作用蛋白密切参与肿瘤的进展,TIMP3可能是肝癌的潜在诊断标志物和治疗靶点。 展开更多

关键词 timp3基因 肝癌 增殖 凋亡 转移 基因富集分析

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胃癌中TIMP3基因的甲基化与表达间的相关性分析 被引量：2

3

作者 杨杨 赵正东 +7 位作者 陈楠楠 李岩 张开立 孔庆友 孙媛 吴茉莉 刘佳 李宏 《临床军医杂志》 CAS 2009年第5期878-881,共4页

目的探讨转移抑制基因TIMP3(金属组织蛋白酶抑制因子-3)在胃癌和胃癌细胞系中启动子甲基化及其蛋白和mRNA表达的特点,并分析两者之间的关联。方法应用MSP法检测TIMP3基因启动子区的甲基化状态;RT-PCR和免疫组织/细胞化学法检测TIMP3基因... 目的探讨转移抑制基因TIMP3(金属组织蛋白酶抑制因子-3)在胃癌和胃癌细胞系中启动子甲基化及其蛋白和mRNA表达的特点,并分析两者之间的关联。方法应用MSP法检测TIMP3基因启动子区的甲基化状态;RT-PCR和免疫组织/细胞化学法检测TIMP3基因mRNA和蛋白的表达;观察DNA去甲基化剂(5-aza-2’-deoxycitydine)对人胃癌细胞系(MGC803和HGC-27)细胞系TIMP3基因表达的影响。结果TIMP3基因于胃癌组织中的甲基化频率为17/33(51.5%);四个胃癌细胞系均存在TIMP3基因的甲基化,而MGC803、BGC823和HGC-27仍有该基因的表达或低水平表达;在去甲基化剂的作用下TIMP3基因的表达水平明显上调。结论TIMP3的异常甲基化是其表达下调或沉默的主要原因并存在部分甲基化的倾向。该指标可作为胃癌的敏感性表观遗传学标记物在胃癌的筛查和诊断中应用。 展开更多

关键词 胃肿瘤 timp3基因 甲基化 基因表达 表观遗传学

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Sorsby眼底营养不良一家系 被引量：1

4

作者 尹小芳 叶祖科 +4 位作者 汤秀容 梁影影 黎彦豪 罗书科 卢彦 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期546-551,共6页

目的观察Sorsby眼底营养不良（SFD）一家系的临床表现与基因突变位点。 方法 一个三代SFD家系4例患者及6名正常家系成员纳入研究。4例患者中，男女性各2例。所有受试者均行最佳矫正视力、非接触眼压计、裂隙灯显微镜、间接检眼镜、眼底... 目的观察Sorsby眼底营养不良（SFD）一家系的临床表现与基因突变位点。 方法 一个三代SFD家系4例患者及6名正常家系成员纳入研究。4例患者中，男女性各2例。所有受试者均行最佳矫正视力、非接触眼压计、裂隙灯显微镜、间接检眼镜、眼底彩色照相及频域光相干断层扫描检查。观察患者的眼底异常表现。采集所有受试者外周静脉血2 ml，提取全基因组DNA。运用二代测序法对先证者进行眼科疾病相关外显子捕获检测。运用Sanger测序法针对发现的致病位点对其他9位受试者进行分离验证。 结果 4例患者均在40-47岁出现明显视力下降。其中，2例男性患者为双眼发病，2例女性为单眼出现症状。4例患者均可见典型的黄斑区脉络膜新生血管（CNV）、后极部斑点状类玻璃膜疣沉积或局部外层视网膜萎缩等表现。基因检测结果显示，先证者的TIMP3基因第5号外显子上存在c.610A＞T碱基杂合突变，导致该基因编码的第204位密码子由丝氨酸变为半胱氨酸（TIMP3：NM000362：Exon5：c.A610T/p.S204C）。Sanger测序法验证结果显示，其他3例患者及第三代中的两名受试者在该位点均检测到与先证者相同的变异。 结论 该SFD家系患者均在40岁以后发病，以中心视力明显下降为主要特征；眼底可见典型的黄斑区CNV、后极部斑点状类玻璃膜疣沉积或局部外层视网膜萎缩等表现。TIMP3基因突变位点c.610A＞T（p.S204C）是该家系的致病基因。 展开更多

关键词 视网膜营养不良 timp3基因 突变 杂合子

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Sorsby眼底营养不良的系统评价

5

作者 古秋梅 陈正举 +2 位作者 肖林 杨智博 刘陇黔 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期925-930,共6页

目的系统评价Sorsby眼底营养不良(SFD)的临床表现、治疗和相关致病基因。方法循证医学研究。以Sorsby眼底营养不良、抗血管内皮生长因子治疗、脉络膜新生血管、黄斑新生血管、TIMP3基因为检索词,在中国知网、万方、美国国立医学图书馆Pu... 目的系统评价Sorsby眼底营养不良(SFD)的临床表现、治疗和相关致病基因。方法循证医学研究。以Sorsby眼底营养不良、抗血管内皮生长因子治疗、脉络膜新生血管、黄斑新生血管、TIMP3基因为检索词,在中国知网、万方、美国国立医学图书馆PubMed和荷兰医学文摘Embase数据库检索相关文献。检索时间为建库至2022年4月。由两位评价员独立筛选文献、提取资料。排除重复、信息不完整或不相关文献以及综述性文献。采用SPSS26.0软件对文献进行分析,95%可信区间(CI)作为效应量的估计值。统计并记录SFD的临床表现、治疗和相关致病基因。结果根据检索策略初步检索出157篇文献,最终纳入16篇文献的35例患者49只眼进行分析。其中,男性17例,女13例,性别不明5例;左眼、右眼分别为16、19只眼,眼别不明14只眼。患者发病年龄(42.33±2.19)(28~59)岁。家族史阳性19例,总阳性率54.3%(19/35,95%CI 36%~72%)。基因变异31例,均为TIMP3基因变异;纳入文献中检测未发现变异、变异未报道位点分别为2、2例,总阳性率93.9%(31/33,95%CI 85%~100%)。基因变异的31例中,英国、德国、瑞士、中国人种分别为22、4、1、4例,检出率均为100%(22/22、4/4、1/1、4/4)。SFD的临床表现主要为眼底黄白色沉积物及黄斑区脉络膜新生血管(CNV),导致患者中心视力下降;随后沉积物向周边扩展、CNV进一步发展及周边视网膜脉络膜萎缩,导致患者视力严重下降。SFD的治疗方式有光动力疗法以及抗血管内皮生长因子药物、糖皮质激素、维生素A等药物治疗,其中抗血管内皮生长因子药物为一线治疗方案,而联合治疗比单一治疗的预后疗效更好。结论TIMP3基因变异导致了SFD;其眼底特征性表现为黄白色沉积物及CNV,由中心向周边发展,导致患者视力进行性下降;抗血管内皮生长因子药物治疗为一线方案,联合治疗比单一治疗的预后疗效更好。 展开更多

关键词 Sorsby眼底营养不良 脉络膜新生血管化 血管生成抑制剂 基因 突变 timp3基因

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Sorsby眼底营养不良一家系2例

6

作者 张琦颖 申璐 +7 位作者 杨文昌 代敏 郑宇祥 曾文一 胡豫 李冬莉 罗艳红 袁玲 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期588-590,共3页

例1患者女,36岁。因双眼视力下降伴视物变形20余年,于2020年8月就诊于昆明医科大学第一附属医院眼科门诊。父母非近亲结婚,母亲有"眼底出血"病史,外祖父和姐姐视力差。否认眼部外伤史、手术史等。眼部检查:右眼裸眼视力0.01,... 例1患者女,36岁。因双眼视力下降伴视物变形20余年,于2020年8月就诊于昆明医科大学第一附属医院眼科门诊。父母非近亲结婚,母亲有"眼底出血"病史,外祖父和姐姐视力差。否认眼部外伤史、手术史等。眼部检查:右眼裸眼视力0.01,矫正不能提高;左眼裸眼视力0.1,最佳矫正视力(BCVA)0.3。双眼眼压均为17 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。 展开更多

关键词 Sorsby眼底营养不良 timp3基因突变 病例报告

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Ad—TIMP-3转染增加宫颈癌细胞对顺铂的敏感性 被引量：2

7

作者 张颖 林晨 +6 位作者 钱海利 郎景和 付明 张雪燕 梁潇 段华 向阳 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期25-29,共5页

目的研究携带TIMP-3基因的重组腺病毒（Ad-TIMP-3）转染宫颈癌细胞后对顺铂（cDDP）敏感性的影响，探讨Ad-TIMP-3基因与cDDP联合在宫颈癌治疗中的作用。方法Ad-TIMP-3体外感染宫颈癌细胞系后，观察细胞凋亡效应、细胞周期及细胞内p53蛋... 目的研究携带TIMP-3基因的重组腺病毒（Ad-TIMP-3）转染宫颈癌细胞后对顺铂（cDDP）敏感性的影响，探讨Ad-TIMP-3基因与cDDP联合在宫颈癌治疗中的作用。方法Ad-TIMP-3体外感染宫颈癌细胞系后，观察细胞凋亡效应、细胞周期及细胞内p53蛋白表达情况。Ad-TIMP-3与cDDP联合应用后，检测细胞克隆形成率；MTT法检测杀伤率及评价协同效应；裸鼠致瘤实验观察瘤体生长曲线。结果Ad-TIMP-3转染可促进细胞凋亡，引起细胞G2／M期阻滞，并诱导宫颈癌细胞内p53蛋白表达。Ad-TIMP-3与cDDP联合应用后，细胞克隆形成率明显减少，杀伤率成倍提高，肿瘤生长显著抑制。结论Ad-TIMP-3可增加宫颈癌对cDDP化疗的敏感性，二者联合应用在宫颈癌治疗中有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 timp-3基因 腺病毒 基因治疗 顺铂 宫颈肿瘤

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基质金属蛋白酶组织抑制因子-3基因转染血管平滑肌细胞移植对大鼠心肌梗死的治疗作用 被引量：2

8

作者 李光伟 李爽 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1-6,共6页

目的观察基质金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(VSMCs)移植,对大鼠心肌梗死(AMI)的治疗效果,并探讨其可能的机制。方法取Wistar大鼠胸主动脉,采用组织块法培养VSMCs。左冠状动脉远端结扎方法复制AMI模型。随机分... 目的观察基质金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(VSMCs)移植,对大鼠心肌梗死(AMI)的治疗效果,并探讨其可能的机制。方法取Wistar大鼠胸主动脉,采用组织块法培养VSMCs。左冠状动脉远端结扎方法复制AMI模型。随机分三组:冠状动脉结扎后3 d向缺血心室壁内分别注射含有1×106个TIMP-3基因转染的VSMC(sTIMP-3组)、1×106个VSMC(sVSMC组)、不含细胞的DMEM液(DMEM组)各0.5 mL。术后第4周,观察大鼠心脏功能变化,免疫组化染色检测TIMP-3和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达,RT-PCR法检测缺血心肌组织中TIMP-3和MMP-2 mRNA含量。结果 TIMP-3基因成功转入VSMCs中。术后4周,TIMP-3组的LVIDd、LVIDs、EDV和ESV值较正常鼠升高(P<0.05),但小于VSMC(P<0.01)组和DMEM组(P<0.01)。RT-PCR结果显示:各移植组TIMP-3 mRNA含量均较对照组显著升高(P<0.01),TIMP-3组较VSMC组、DMEM组明显增高(P<0.01);TIMP-3组MMP-2 mRNA含量较VSMC组、DMEM组明显降低(P<0.01)。结论将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制MMP-2的表达,进而抑制AMI后早期心肌重塑,改善心功能。 展开更多

关键词 timp-3基因 急性心肌梗死 心肌重塑 基质金属蛋白酶2 基因治疗

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TIMP-3基因转染血管平滑肌细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心功能的影响 被引量：1

9

作者 李光伟 苗宏志 贾智博 《医学研究杂志》 2009年第6期24-27,136,F0003,共6页

目的研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor-3 of matrix metalloproteinases,TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后早期心脏功能... 目的研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor-3 of matrix metalloproteinases,TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后早期心脏功能变化的影响,并探讨其可能的机制。方法取Wistar大鼠胸主动脉,采用组织块贴壁法培养VSMCs。采用左冠状动脉远端结扎的AMI动物模型,随机分3组。于冠状动脉结扎后立即向缺血部心室壁内注射含有1×106个TIMP-3基因转染的VSMCs(A组)、1×106个VSMCs(B组)或不含细胞的DMEM液(C组),各0.5ml。术后3天,进行心脏功能学检测观察大鼠心脏功能变化,免疫组化染色验证TIMP-3基因转染VSMCs在缺血心肌中的存活情况,RT-PCR法测定缺血心肌TIMP-3和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9,MMP-9)mRNA含量。结果分离、培养的VSMCs纯度达98%,TIMP-3基因成功转入VSMCs中。术后3天,A组的LVIDd、LVIDs、EDV和ESV值较正常鼠升高(P<0.05),但小于B(P<0.01)组和C组(P<0.01)。A组的FS和EF值较正常组有所下降(P<0.01),但大于B和C组(P<0.01)。免疫组化染色见TIMP-3基因转染VSMCs被成功种植缺血心肌并在其中存活。RT-PCR结果显示:各移植组TIMP-3mRNA含量均较对照组显著升高(P<0.01),A组较B组、C组明显增高(P<0.01);A组MMP-9mRNA含量较B组、C组明显降低(P<0.01)。结论将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制MMP-9的表达,进而抑制AMI后早期心肌重塑,改善心功能。 展开更多

关键词 timp-3基因 急性心肌梗死 心肌重塑 基因治疗

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TIMP-3基因转染血管平滑肌细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心脏结构的影响

10

作者 李光伟 崔红霞 +1 位作者 苗宏志 贾智博 《齐齐哈尔医学院学报》 2009年第12期1409-1412,共4页

目的研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor-3 of matrix metalloprotein-ases,TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后早期心脏结构... 目的研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor-3 of matrix metalloprotein-ases,TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后早期心脏结构变化的影响,并探讨其可能的机制。方法取Wistar大鼠胸主动脉采用组织块贴壁法培养VSMCs。另取54只Wistar雌性大鼠建立左冠状动脉远端结扎的AMI动物模型,随机分三组。冠状动脉结扎后立即向缺血部心室壁内注射含有1×106个TIMP-3基因转染VSMCs(A组),1×106个VSMCs(B组)或不含细胞的DMEM液(C组),各0.5ml。术后3天,进行心脏形态学检测观察大鼠心脏结构变化,免疫组化染色验证TIMP-3基因转染VSMCs在缺血心肌中的存活情况,RT-PCR法测定大鼠缺血心肌TIMP-3和基质金属蛋白酶9(matrixmet-alloproteinase9,MMP-9)mRNA含量。结果成功分离、培养VSMCs,纯度达98%,TIMP-3基因成功转入VSMCs中。术后3天,A组的左心室容积较正常鼠升高(P<0.01),但小于B(P<0.01)组和C组(P<0.01),B组小于C组(P<0.01)。A组的左心室容积指数较正常组有所上升(P<0.01),但小于B和C组(P<0.01)。免疫组化染色见TIMP-3基因转染VSMCs被成功植入缺血心肌并在其中存活。RT-PCR结果显示:各移植组TIMP-3mRNA含量均较对照组显著升高(P<0.01),A组较B组、C组明显增高(P<0.01),B组较C组增高(P<0.01);A组MMP-9mRNA含量较B组、C组明显降低(P<0.01),B组较C组降低(P<0.01)。结论将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制MMP-9的表达,进而抑制AMI后早期心肌重塑,改善心功能。 展开更多

关键词 timp-3基因 急性心肌梗死 心肌重塑 基因治疗

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在TIMP3基因中新的突变导致的Sorsby眼底营养不良

11

作者 SamuelG.Jacobson ArturV.Cideciyan 《美国医学会眼科杂志（中文版）》 2002年第4期239-239,共1页

关键词 基因突变 timp3基因 Sorsby眼底营养不良

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胃癌组织中TIMP-3基因甲基化水平及临床意义研究 被引量：2

12

作者 余江流 凌志强 +5 位作者 韩静 吕萍 余齐鸣 郑智国 赵挺 王建军 《浙江医学》 CAS 2013年第2期88-91,98,共5页

目的探讨胃癌患者癌组织中组织金属蛋白酶抑制因子-3（TIMP-3）基因启动子CpG岛甲基化与胃癌侵袭转移能力及预后的相关性。方法运用甲基化特异性实时荧光定量聚合酶链反应（qMSP）技术检测92例胃癌患者癌组织、癌旁组织和40例正常人胃... 目的探讨胃癌患者癌组织中组织金属蛋白酶抑制因子-3（TIMP-3）基因启动子CpG岛甲基化与胃癌侵袭转移能力及预后的相关性。方法运用甲基化特异性实时荧光定量聚合酶链反应（qMSP）技术检测92例胃癌患者癌组织、癌旁组织和40例正常人胃组织、48例胃炎患者胃组织中TIMP-3基因启动子CpG岛甲基化状态，分析TIMP-3基因异常甲基化与胃癌患者临床病理特征及预后之间的关系，．结果92例胃癌患者癌组织中，58例（63．0％）检测到TIMP-3基因甲基化，配对的癌旁组织中只有4例（414％）存在TIMP-3基因甲基化，正常人胃组织和胃炎组织中均没有TIMP-3基因甲基化。TIMP-3基因甲基化与肿瘤大小、生长类型、分化程度、静脉侵犯、浸润深度、淋巴结转移和临床分期问均存在相关性（均P〈005），而与患者性别、年龄、Hp感染状况以及肿瘤着生部位等无关（均P〉0．05）。生存分析表明TIMP-3基因非甲基化胃癌患者具有独立的生存优势（P〈0．01）。结论胃癌患者TIMP-3基因甲基化增强肿瘤的侵袭能力，甲基化水平和肿瘤恶性程度正相关，TIMP-3基因高甲基化提示胃癌患者不良预后。 展开更多

关键词 胃肿瘤timp-3基因 甲基化临床意义

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中华病理学杂志1997～2001年已知刊登论文课题获奖列题

13

《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期219-219,共1页

关键词 中华病理学杂志 刊登论文 课题获奖列题 timp-3基因 肺癌细胞系侵袭 转移

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